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實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)xxx公司實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)文件編號(hào):文件日期:修訂次數(shù):第1.0次更改批準(zhǔn)審核制定方案設(shè)計(jì),管理制度實(shí)驗(yàn)室生物安全規(guī)范
目錄TOC\o"1-4"\h\z\u實(shí)驗(yàn)室生物安全規(guī)范 1目錄 2第一部分基本規(guī)范 3進(jìn)入規(guī)定 3人員防護(hù) 3實(shí)驗(yàn)室工作區(qū) 4生物安全管理 4第二部分實(shí)驗(yàn)室技術(shù) 5移液管和移液輔助器的使用 5生物安全柜的使用 5血清的分離 5離心機(jī)的使用 5冰箱與冰柜的維護(hù)和使用 6裝有凍干物質(zhì)安瓿的開啟 6第三部分消毒和滅菌 7一、定義 7二、化學(xué)殺菌劑 7氯(次氯酸鈉) 7二氯異氰尿酸鈉 8氯胺 8甲醛 8戊二醛 8酚類化合物 9季銨鹽類化合物 9乙醇 9碘和碘伏 10過氧化氫和過氧乙酸 10三、清除局部環(huán)境的污染 10四、洗手/清除手部污染 10五、高壓滅菌 10高壓滅菌參數(shù) 11高壓滅菌器的裝載 11高壓滅菌器使用注意事項(xiàng) 11附錄1 12設(shè)備的安全性 12表A1-1可能產(chǎn)生危害的儀器設(shè)備及其操作 12表A1-2儀器設(shè)備相關(guān)事故的原因 13表A1-3生物安全設(shè)備 14表A1-4個(gè)體防護(hù)裝備 15附錄2 16實(shí)驗(yàn)室有毒、有害物品標(biāo)準(zhǔn)管理規(guī)程 16第一部分基本規(guī)范根據(jù)感染性微生物的相對(duì)危害程度(危險(xiǎn)度2級(jí),病原體能夠?qū)θ酥虏。珜?duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員或環(huán)境不易導(dǎo)致嚴(yán)重危害),本實(shí)驗(yàn)室為基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室,屬于二級(jí)生物安全水平。進(jìn)入規(guī)定1、在實(shí)驗(yàn)室門上應(yīng)標(biāo)有國(guó)際通用的生物危害警告標(biāo)志(圖1)。2、只有經(jīng)批準(zhǔn)的人員方可進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域。3、實(shí)驗(yàn)室的門應(yīng)保持關(guān)閉。4、兒童不應(yīng)被批準(zhǔn)或允許進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域。5、進(jìn)入動(dòng)物房應(yīng)當(dāng)經(jīng)過特別批準(zhǔn)。6、與實(shí)驗(yàn)室工作無(wú)關(guān)的動(dòng)物不得帶入實(shí)驗(yàn)室。圖1張貼于實(shí)驗(yàn)室門上的生物危害警告標(biāo)志人員防護(hù)1、在實(shí)驗(yàn)室工作時(shí),任何時(shí)候都必須穿著工作服。2、在進(jìn)行可能直接或意外接觸到血液、體液以及其他具有潛在感染性的材料或感染性動(dòng)物的操作時(shí),應(yīng)戴上合適的手套。手套用完后,應(yīng)先消毒再摘除,隨后必須洗手。3、在處理完感染性實(shí)驗(yàn)材料和動(dòng)物后,以及在離開實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域前,都必須洗手。4、為了防止眼睛或面部受到潑濺物、碰撞物或人工紫外線輻射的傷害,必須戴安全眼鏡、面罩(面具)或其他防護(hù)設(shè)備。5、嚴(yán)禁穿著實(shí)驗(yàn)室工作服離開實(shí)驗(yàn)室,(如去餐廳、咖啡廳、辦公室、圖書館、員工休息室和衛(wèi)生間)。6、不得在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)穿露腳趾的鞋子。7、禁止在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域進(jìn)食、飲水、吸煙、化妝和處理隱形眼鏡。8、禁止在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域儲(chǔ)存食品和飲料。9、在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)用過的工作服不得和日常服裝放在同一柜子內(nèi)。實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)1、實(shí)驗(yàn)室應(yīng)保持清潔整齊,嚴(yán)禁擺放和實(shí)驗(yàn)無(wú)關(guān)的物品。2、發(fā)生具有潛在危害性的材料溢出以及在每天工作結(jié)束之后,都必須清除工作臺(tái)面的污染。3、所有受到污染的材料、標(biāo)本和培養(yǎng)物在廢棄或清潔再利用之前,必須清除污染。4、在進(jìn)行包裝和運(yùn)輸時(shí)必須遵循國(guó)家和∕或國(guó)際的相關(guān)規(guī)定。5、如果窗戶可以打開,則應(yīng)安裝防止節(jié)肢動(dòng)物進(jìn)入的紗窗。生物安全管理1、實(shí)驗(yàn)室主任(對(duì)實(shí)驗(yàn)室直接負(fù)責(zé)的人員)負(fù)責(zé)制訂和采用生物安全管理計(jì)劃以及安全或操作手冊(cè)。2、實(shí)驗(yàn)室主管(向?qū)嶒?yàn)室主任匯報(bào))應(yīng)當(dāng)保證提供常規(guī)的實(shí)驗(yàn)室安全培訓(xùn)。3、要將生物安全實(shí)驗(yàn)室的特殊危害告知實(shí)驗(yàn)室人員,同時(shí)要求他們閱讀生物安全或操作手冊(cè),并遵循標(biāo)準(zhǔn)的操作和規(guī)程。實(shí)驗(yàn)室主管應(yīng)當(dāng)確保所有實(shí)驗(yàn)室人員都了解這些要求。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)備有可供取閱的安全或操作手冊(cè)。4、應(yīng)當(dāng)制訂節(jié)肢動(dòng)物和嚙齒動(dòng)物的控制方案。5、如有必要,應(yīng)為所有實(shí)驗(yàn)室人員提供適宜的醫(yī)學(xué)評(píng)估、監(jiān)測(cè)和治療,并應(yīng)妥善保存相應(yīng)的醫(yī)學(xué)記錄。
第二部分實(shí)驗(yàn)室技術(shù)實(shí)驗(yàn)室傷害以及與工作有關(guān)的感染主要是由于人為失誤﹑不良實(shí)驗(yàn)技術(shù)以及儀器使用不當(dāng)造成的。本部分概要介紹了避免或盡量減少這類常見問題的技術(shù)和方法。移液管和移液輔助器的使用1、應(yīng)用移液輔助器,嚴(yán)禁用口吸取。2、所有移液管應(yīng)帶有棉塞以減少移液器具的污染。3、不能向含有感染性物質(zhì)的溶液中吹入氣體。4、感染性物質(zhì)不能使用移液管反復(fù)吹吸混合。5、不能將液體從移液管內(nèi)用力吹出。6、污染的移液管應(yīng)完全浸入適當(dāng)?shù)南疽褐校⒃谙疽褐薪葸m當(dāng)時(shí)間后再進(jìn)行處理。7、盛放廢棄移液管的容器應(yīng)當(dāng)放在生物安全柜內(nèi)。8、為了避免感染性物質(zhì)從移液管中滴出而擴(kuò)散,在工作臺(tái)面應(yīng)當(dāng)放置一塊吸有消毒液的紙,使用后將其按感染性廢棄物處理。生物安全柜的使用1、生物安全柜運(yùn)行正常時(shí)才能使用。2、生物安全柜在使用中不能打開玻璃觀察擋板。3、安全柜內(nèi)應(yīng)盡量少放置器材或標(biāo)本,不能影響后部壓力排風(fēng)系統(tǒng)的氣流循環(huán)。4、所有工作必須在工作臺(tái)面的中后部進(jìn)行,并能夠通過玻璃觀察擋板看到。5、盡量減少操作者身后的人員活動(dòng)。6、操作者不應(yīng)反復(fù)移出和伸進(jìn)手臂以免干擾氣流。7、不要使實(shí)驗(yàn)記錄本﹑移液管以及其他物品阻擋空氣格柵,因?yàn)檫@將干擾氣體流動(dòng),引起物品的潛在污染和操作者的暴露。8、工作完成后以及每天下班前,應(yīng)使用70%的酒精對(duì)生物安全柜的臺(tái)面進(jìn)行擦拭,但切忌用酒精擦拭玻璃擋板。9、在安全柜內(nèi)的工作開始前和結(jié)束后,安全柜的風(fēng)機(jī)應(yīng)至少運(yùn)行5min。10、在生物安全柜內(nèi)操作時(shí),不能進(jìn)行文字工作。血清的分離1、只有經(jīng)過嚴(yán)格培訓(xùn)的人員才能進(jìn)行這項(xiàng)工作。2、操作時(shí)應(yīng)戴手套以及眼睛和黏膜的保護(hù)裝置。3、血液和血清應(yīng)當(dāng)小心吸取,而不能傾倒。嚴(yán)禁用口吸液。4、移液管使用后應(yīng)完全浸入適當(dāng)?shù)南疽褐?,并在消毒液中浸泡適當(dāng)?shù)臅r(shí)間,然后再丟棄或滅菌清洗后重復(fù)使用。5、帶有血凝塊等的廢棄標(biāo)本管,在加蓋后應(yīng)當(dāng)放在適當(dāng)?shù)姆缆┤萜鲀?nèi)高壓滅菌。離心機(jī)的使用1、應(yīng)按照操作手冊(cè)來(lái)操作離心機(jī)。2、離心管在使用前應(yīng)檢查是否破損。3、用于離心的離心管應(yīng)當(dāng)始終牢固蓋緊。4、離心桶的裝載、平衡、密封和打開必須在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。5、離心桶和十字軸應(yīng)按重量配對(duì),并在裝載離心管后正確平衡。6、操作指南中應(yīng)給出液面距離心管管口需要留出的空間大小。7、空離心桶應(yīng)當(dāng)用蒸餾水來(lái)平衡。8、每次使用后,要清除離心桶、轉(zhuǎn)子和離心機(jī)腔的污染。9、使用后應(yīng)當(dāng)將離心桶倒置存放使平衡液流干。10、應(yīng)當(dāng)每天檢查離心機(jī)內(nèi)轉(zhuǎn)子部位的腔壁是否被污染或弄臟,如污染明顯,應(yīng)重新評(píng)估離心操作規(guī)范。冰箱與冰柜的維護(hù)和使用1、冰箱、低溫冰箱和干冰柜應(yīng)當(dāng)定期除霜和清潔,應(yīng)清理出所有在儲(chǔ)存過程中破碎的安瓿和試管等物品。清理時(shí)應(yīng)戴厚橡膠手套并進(jìn)行面部防護(hù),清理后要對(duì)內(nèi)表面進(jìn)行消毒。2、儲(chǔ)存在冰箱內(nèi)的所有容器應(yīng)當(dāng)清楚地標(biāo)明內(nèi)裝物品的科學(xué)名稱、儲(chǔ)存日期和儲(chǔ)存者的姓名。未標(biāo)明的或廢舊物品應(yīng)當(dāng)高壓滅菌并丟棄。3、應(yīng)當(dāng)保存一份凍存物品的清單。4、除非有防爆措施,否則冰箱內(nèi)不能放置易燃溶液。冰箱門上應(yīng)注明這一點(diǎn)。裝有凍干物質(zhì)安瓿的開啟1、首先清除安瓿外表面的污染。2、如果管內(nèi)有棉花或纖維塞,可以在管上靠近棉花或纖維塞的中部銼一痕跡。3、用一團(tuán)酒精浸泡的棉花將安瓿包起來(lái)以保護(hù)雙手,然后手持安瓿從標(biāo)記的銼痕處打開。4、將頂部小心移去并按污染材料處理。5、如果塞子仍然在安瓿上,用消毒鑷子除去。6、緩慢向安瓿中加入液體來(lái)重懸凍干物,避免出現(xiàn)泡沫。
第三部分消毒和滅菌一、定義關(guān)于消毒和滅菌有許多不同的術(shù)語(yǔ),下面是生物安全中較常用的:抗菌劑(antimicrobial)能夠殺死微生物或抑制它們生長(zhǎng)和繁殖的制劑。防腐劑(antiseptic)能夠抑制微生物生長(zhǎng)和繁殖但不足將其殺滅的物質(zhì)。防腐劑經(jīng)常應(yīng)用于體表。生物殺滅劑(biocide)所有能夠殺死生物體的制劑的統(tǒng)稱。化學(xué)殺菌劑(chemicalgermcide)用于殺死微生物的化學(xué)品或化學(xué)混合物。清除污染(decontamination)去除和/或殺死微生物的任何過程。該詞也用于去除或中和有危害的化學(xué)品和放射性物質(zhì)。消毒劑(disinfectant)用于殺死微生物的化學(xué)品或化學(xué)混合物,但不一定殺死其孢子。消毒劑常用于非生命物體或其表面。消毒(disinfection)殺死微生物的物理或化學(xué)手段,但不一定殺死其孢子。滅菌劑(microbicide)能夠殺死微生物的化學(xué)品或化學(xué)混合物。該詞常??梢源妗吧餁鐒?、“化學(xué)殺菌劑”或“抗菌劑”。殺孢子劑(sporocide)用于殺死微生物和孢子的化學(xué)品或化學(xué)混合物。滅菌(sterilization)殺死和/或去除所有微生物及其孢子的過程。二、化學(xué)殺菌劑許多殺菌劑對(duì)人或環(huán)境有害,應(yīng)當(dāng)按生產(chǎn)商的說明小心地進(jìn)行選擇、貯存、操作、使用和廢棄。為了個(gè)人的安全,建議在稀釋化學(xué)殺菌劑時(shí)應(yīng)戴手套、圍裙和保護(hù)眼睛的器具。下面介紹一些常規(guī)使用的化學(xué)殺菌劑,并列出它們的一般用途和安全特征。除非另外標(biāo)注,殺菌劑的濃度用重量/體積(w/v)來(lái)表示。表3-1匯總了含氯消毒劑的推薦使用濃度。表1含氯消毒劑的推薦使用濃度“清潔”情況下a“污染”情況下b所需的有效氯濃度%(1g/L)%(5g/L)次氯酸鈉溶液(含有5%的有效氯)20mL/L100mL/L次氯酸鈣(含有70%的有效氯)1.4g/L7.0g/L二氯異氰尿酸鈉粉劑(含60%的有效氯)1.7g/L8.5g/L二氯異氰尿酸鈉片劑(每片含1.5g有效氯)每升1片每升4片氯胺(含有25%的有效氯)c20g/L20g/La去除大部分污染材料后b溢流情況(如血液)或大量污染材料沒有除去時(shí)c參見正文氯(次氯酸鈉)1、氯屬于快速作用的氧化劑,是一種可廣泛應(yīng)用的廣譜化學(xué)殺菌劑。它一般以次氯酸鈉(NaOCl)溶液來(lái)作為漂白劑銷售。但氯的許多副產(chǎn)物可能對(duì)人體及環(huán)境有害,應(yīng)該避免濫用含氯消毒劑,特別是漂白劑。2、常規(guī)實(shí)驗(yàn)室消毒劑的有效氯濃度為1g/L。處理生物危害性物質(zhì)的溢出以及含有大量有機(jī)物的情況時(shí)用含有5g/L有效氯的更強(qiáng)作用的溶液。家用漂白劑的次氯酸鈉溶液含有50g/L的有效氯,工業(yè)用漂白劑的次氯酸鈉溶液含有近120g/L的有效氯,因此必須進(jìn)行相應(yīng)的稀釋來(lái)達(dá)到工作濃度。3、次氯酸鈣[Ca(ClO)]的顆粒或片劑一般含有70%的有效氯。用顆粒或片劑配制濃度1.4g/L或7.0g/L的溶液,其有效氯濃度分別為1g/L和5g4、不建議將漂白劑當(dāng)作防腐劑使用,但可以用作普通目的的消毒劑以及用于浸泡非金屬類的污染材料。在緊急情況下也可以用終濃度含1~2mg/L有效氯的漂白劑來(lái)消毒飲用水。5、氯氣具有強(qiáng)毒性。因此漂白劑只能在通風(fēng)良好的地方儲(chǔ)存和使用。6、漂白劑不能與酸混合以避免氯氣快速釋放。二氯異氰尿酸鈉1、血液或其他生物危害性液體溢出時(shí),可以使用固體NaDCC,并使其作用至少10min后再除去,然后對(duì)污染區(qū)進(jìn)行進(jìn)一步的清理。2、二氯異氰尿酸鈉(NaDCC)的粉劑含有60%的有效氯。用NaDCC粉劑配制的濃度為1.7g/L和8.5g/L的溶液將分別含有1g/L和5g/L的有效氯。3、NaDCC片劑一般每片含有1.5g的有效氯,將1片或4片溶于1升水將分別獲得濃度約為1g/L和5g/L4、粉劑或片劑的NaDCC儲(chǔ)存既方便又安全。氯胺1、因氯胺釋放氯的速度比次氯酸慢,且有機(jī)物對(duì)氯胺溶液的影響沒有次氯酸溶液那么大,在“清潔”和“污染”情況下都推薦使用20g/L的濃度。2、氯胺溶液實(shí)際上無(wú)臭味,但是,浸泡在氯胺中的物品必須要徹底清洗,以除去加入到氯胺-T粉劑中的填充劑的殘留物。甲醛1、市場(chǎng)上出售的產(chǎn)品為多聚甲醛——一種固體多聚體,呈薄片狀或小塊狀,或?yàn)楦栺R林——一種濃度約為370g/L(37%)的氣體水溶液,其中含甲醇(100mL/L)作為穩(wěn)定劑。兩種形式加熱都可以產(chǎn)生氣體,用于封閉空間(如生物安全柜和房間)的清除污染和消毒。2、甲醛(5%福爾馬林水溶液)可以作為液體消毒劑。3、在溫度高于20℃時(shí),甲醛(HCHO4、甲醛起效相對(duì)較慢,并需要相對(duì)濕度達(dá)70%左右。5、甲醛被懷疑是一種致癌劑。它具有刺鼻的氣味,其氣體能夠刺激眼睛和黏膜,因此必須在通風(fēng)櫥或通風(fēng)良好的地方儲(chǔ)存和使用。必須遵守國(guó)家化學(xué)品安全規(guī)定。戊二醛1、戊二醛[OHC(CH)CHO]對(duì)繁殖的細(xì)菌、孢子、真菌和含脂或不含脂的病毒具有活性。它不具有腐蝕性,比甲醛作用迅速,但也需要幾個(gè)小時(shí)才能殺死細(xì)菌孢子。2、通常供應(yīng)的戊二醛是濃度約20g/L(2%)的溶液,絕大部分產(chǎn)品使用前需要加入與產(chǎn)品一同提供的碳酸氫鹽混合物進(jìn)行“活化”(變成堿性)?;罨娜芤焊鶕?jù)其配方設(shè)計(jì)、應(yīng)用類型和使用頻率等情況可以重復(fù)使用1~4周。如果戊二醛溶液變混濁,就應(yīng)當(dāng)將其廢棄。3、戊二醛具有毒性,并對(duì)皮膚和黏膜具有刺激性,應(yīng)當(dāng)避免與其接觸。必須在通風(fēng)櫥或通風(fēng)良好的地方使用。不建議采用其噴霧劑或溶液來(lái)清除環(huán)境表面的污染。必須遵守化學(xué)品安全的國(guó)家規(guī)定。酚類化合物1、許多酚類產(chǎn)品可用于清除環(huán)境表面的污染,有些(如三氯生和氯二甲酚)是最常用的抗菌劑。2、酚類化合物是一大類最早使用的殺菌劑。但是,最近出于安全考慮而限制了它的使用。3、它們對(duì)繁殖細(xì)菌和含脂病毒具有活性,適當(dāng)配制后,對(duì)分枝桿菌也有活性。它們對(duì)孢子沒有活性,而對(duì)于非含脂病毒的活性則不確定。4、三氯生常作為洗手用品。它主要對(duì)繁殖的細(xì)菌有活性,并且對(duì)皮膚和黏膜是安全的。5、有些酚類化合物對(duì)水的硬度敏感,并可能導(dǎo)致失活,因此必須使用蒸餾水或去離子水來(lái)進(jìn)行稀釋。6、不建議在食物接觸的表面和幼兒活動(dòng)場(chǎng)所使用酚類化合物。它們可能被橡膠吸收,也可能滲透皮膚。必須遵守國(guó)家化學(xué)品安全規(guī)定。季銨鹽類化合物1、季銨鹽類化合物對(duì)繁殖的細(xì)菌和含脂類病毒具有良好活性,但有些具有潛在危害性的細(xì)菌仍能夠在季銨鹽化合物溶液中生長(zhǎng)。某些類型(如苯扎氯銨)也用作防腐劑。2、這些化合物由于其生物降解能力較低,可能在環(huán)境中蓄積。3、季銨鹽類化合物大多混合使用,也經(jīng)常與醇類等其他殺菌劑聯(lián)合使用。4、有些季銨鹽類化合物的殺菌作用會(huì)受有機(jī)質(zhì)、水的硬度以及陰離子去污劑的顯著影響,因此當(dāng)使用季銨鹽化合物進(jìn)行消毒時(shí),要認(rèn)真選擇預(yù)清潔所用的品種。乙醇1、乙醇(CHOH)對(duì)于繁殖的細(xì)菌、真菌和含脂病毒具有活性,但不能滅活孢子,而對(duì)非含脂病毒的作用則不確定。2、其水溶液最有效的使用濃度約為70%(v/v);更高或更低的濃度均不適宜殺菌。3、醇類溶液的主要優(yōu)點(diǎn)是處理后物品不會(huì)留下任何殘留物。4、將乙醇與其他試劑混合使用比單獨(dú)使用更有效,如70%(v/v)乙醇和100g/L的甲醛混合使用,以及使用含有2g/L有效氯的乙醇。5、70%(v/v)乙醇溶液可以用于消毒皮膚、實(shí)驗(yàn)臺(tái)和生物安全柜的工作臺(tái)面,以及浸泡小的外科手術(shù)器械。6、由于乙醇可以使皮膚干燥,所以經(jīng)常與潤(rùn)滑劑混合使用。7、在不便于或不可能進(jìn)行徹底洗手的情況下,推薦使用含乙醇的擦手液對(duì)輕度污染的手進(jìn)行消毒。但是必須記住,乙醇對(duì)孢子無(wú)效,而且不能殺死所有類型的非含脂類病毒。8、乙醇是易揮發(fā)和易燃的,不能在明火附近使用。9、其工作液應(yīng)儲(chǔ)存在適當(dāng)?shù)娜萜鲀?nèi)以避免醇類揮發(fā)。10、乙醇可以硬化橡膠并溶解某些膠質(zhì)。11、為了避免乙醇用于其他非滅菌目的,在實(shí)驗(yàn)室里對(duì)乙醇進(jìn)行專門的清點(diǎn)和儲(chǔ)存是非常重要的。12、含有乙醇溶液的瓶子必須清楚標(biāo)記以避免被意外高壓滅菌。碘和碘伏1、這類消毒劑的作用與氯類似,只是有機(jī)質(zhì)對(duì)它們的抑制作用略弱。2、碘可以使纖維和環(huán)境表面著色,一般不適合作為消毒劑。但是,碘伏和碘酊是很好的抗菌劑。3、多聚碘(polyvidoneiodine)是一種安全可靠的外科手術(shù)擦手劑和手術(shù)前皮膚抗菌劑。4、碘類抗菌劑一般不適于醫(yī)療/牙醫(yī)器械的消毒。5、碘不能在鋁或銅上使用。6、碘有毒性。含有有機(jī)碘的產(chǎn)品必須于4~10℃過氧化氫和過氧乙酸1、過氧化氫(HO)和過氧乙酸(CHCOOOH)是強(qiáng)氧化劑,是一種廣譜殺菌劑。對(duì)人和環(huán)境它們較氯安全。2、過氧化氫能夠用于清除實(shí)驗(yàn)臺(tái)和生物安全柜工作臺(tái)面的污染。3、通常供應(yīng)的過氧化氫是可以立即使用的3%的溶液,或是用無(wú)菌水稀釋5~10倍體積后使用的30%的水溶液。但是,那種單獨(dú)含有3~6%過氧化氫的溶液殺菌作用緩慢而有限。現(xiàn)有產(chǎn)品中含有其他成分來(lái)穩(wěn)定過氧化氫,加速其殺菌作用并降低其腐蝕性。4、過氧化氫和過氧乙酸能腐蝕鋁、銅、黃銅和鋅等金屬,也能使纖維、頭發(fā)、皮膚及黏膜褪色。5、經(jīng)它們處理的物品必須經(jīng)過徹底的漂洗后才能接觸眼睛和黏膜。6、它們應(yīng)當(dāng)儲(chǔ)存在避熱和避光的地方。三、清除局部環(huán)境的污染1、清除表面污染時(shí)使用次氯酸鈉(NaOCl)溶液;含有1%有效氯的溶液適于普通的環(huán)境衛(wèi)生設(shè)備,但是當(dāng)處理高危環(huán)境時(shí),建議使用高濃度(5g/L)溶液。用于清除環(huán)境污染時(shí),含有3%過氧化氫的溶液也可以作為漂白劑的代用品。2、通過加熱多聚甲醛或煮沸福爾馬林所產(chǎn)生的甲醛蒸氣熏蒸來(lái)清除房間和儀器的污染。產(chǎn)生甲醛蒸氣前,房間的所有開口(如門窗等)都應(yīng)用密封帶或類似物加以密封。熏蒸應(yīng)當(dāng)在室溫不低于21℃且相對(duì)濕度70%的條件下進(jìn)行。清除污染時(shí)氣體需要與物體表面至少接觸8h。熏蒸后,該區(qū)域必須徹底通風(fēng)后才能允許人員進(jìn)入。在通風(fēng)之前需要進(jìn)入房間時(shí),必須戴適當(dāng)?shù)姆蓝久婢摺?梢圆捎脷鈶B(tài)的碳酸氫銨來(lái)中和甲醛。四、洗手/清除手部污染1、實(shí)驗(yàn)室人員需要經(jīng)常地、徹底地洗手。2、處理完生物危害性材料和動(dòng)物后以及離開實(shí)驗(yàn)室前均必須洗手。3、大多數(shù)情況下,用普通的肥皂和水徹底沖洗對(duì)于清除手部污染就足夠了。但在高度危險(xiǎn)的情況下,建議使用殺菌肥皂。手要完全抹上肥皂,搓洗至少10秒鐘,用干凈水沖洗后再用干凈的紙巾或毛巾擦干。4、應(yīng)使用紙巾或毛巾來(lái)關(guān)上水龍頭,以防止再度污染洗凈的手。5、如果沒有條件徹底洗手或洗手不方便,應(yīng)該用酒精擦手來(lái)清除雙手的輕度污染。五、高壓滅菌高壓滅菌的濕熱法是最常用、最為有效的清除病原體污染的物理手段。滅菌后的物品必須小心操作并保存,以保證在使用之前不再被污染。高壓滅菌參數(shù)對(duì)于大多數(shù)目的,下列組合可以確保正確裝載的高壓滅菌器的滅菌效果:1、134℃、2、126℃、10min3、121℃、15min4、115℃、25min高壓滅菌器的裝載為了利于蒸汽的滲透和空氣排出,高壓滅菌物品應(yīng)松散包裝放置在滅菌器內(nèi)。要使蒸汽能夠作用到其內(nèi)容物。高壓滅菌器使用注意事項(xiàng)1、應(yīng)由受過良好培訓(xùn)的人員負(fù)責(zé)高壓滅菌器的操作和日常維護(hù)。2、由有資質(zhì)人員定期檢查滅菌器柜腔、門的密封性以及所有的儀表和控制器。3、應(yīng)使用飽和蒸汽,并且其中不含腐蝕性抑制劑或其他化學(xué)品,這些物質(zhì)可能污染正在滅菌的物品。4、所有要高壓滅菌的物品都應(yīng)放在空氣能夠排出并具有良好熱滲透性的容器中;滅菌器柜腔裝載要松散,以便蒸汽可以均勻作用于裝載物。5、當(dāng)滅菌器內(nèi)部加壓時(shí),互鎖安全裝置可以防止門被打開,而沒有互鎖裝置的高壓滅菌器,應(yīng)當(dāng)關(guān)閉主蒸汽閥并待溫度下降到80℃6、當(dāng)高壓滅菌液體時(shí),由于取出液體時(shí)可能因過熱而沸騰,故應(yīng)采用慢排式設(shè)置。7、即使溫度下降到80℃以下,操作者打開門時(shí)也應(yīng)當(dāng)戴適當(dāng)?shù)氖痔缀兔嬲謥?lái)進(jìn)行防護(hù)。8、在進(jìn)行高壓滅菌效果的常規(guī)監(jiān)測(cè)中,生物指示劑或熱電偶計(jì)應(yīng)置于每件高壓滅菌物品的中心。最好在“最大”裝載時(shí)用熱偶計(jì)和記錄儀進(jìn)行定時(shí)監(jiān)測(cè),以確定滅菌程序是否恰當(dāng)。9、應(yīng)當(dāng)注意保證高壓滅菌器的安全閥沒有被高壓滅菌物品中的紙等堵塞。
附錄1設(shè)備的安全性儀器設(shè)備在使用時(shí),有些操作可能造成微生物學(xué)危害,而另外一些操作或處理則是專門設(shè)計(jì)用來(lái)避免或減少生物學(xué)危害的。表A1-1可能產(chǎn)生危害的儀器設(shè)備及其操作儀器危害如何消除或減少危害皮下注射針頭意外接種、產(chǎn)生氣溶膠或有害物質(zhì)溢出·不要重新給針頭戴護(hù)套或截?cái)噌橆^?!な褂冕橆^鎖定型注射器以避免針頭和注射器的分離,或使用針頭和注射器為一體的一次性注射器。·采用規(guī)范的實(shí)驗(yàn)室技術(shù),例如:——注射器抽液時(shí)要小心,盡可能減少形成氣泡和接種物泡沫。——避免用注射器來(lái)混合感染性液體;否則,要確保針頭的尖端伸入到容器中液面之下,并避免用力過大?!獜挠邢鹌と钠孔又腥∠箩橆^之前,應(yīng)用經(jīng)適當(dāng)消毒劑浸濕的脫脂棉來(lái)包裹針頭和塞子。——豎直向上將注射器中過量的液體和氣泡排到經(jīng)適當(dāng)消毒劑浸濕的脫脂棉或裝有棉花的小瓶中?!げ僮鞲腥拘晕镔|(zhì)時(shí)均應(yīng)在生物安全柜中進(jìn)行?!ぴ趯?duì)動(dòng)物進(jìn)行接種時(shí)要進(jìn)行固定。在進(jìn)行鼻腔或口腔接種時(shí)要使用鈍的針頭或插管。操作應(yīng)在生物安全柜中進(jìn)行?!な褂煤笠M(jìn)行高壓滅菌并確保進(jìn)行了妥善處理。如果使用的是一次性針頭和注射器,只有在高壓滅菌后才能拆卸。離心機(jī)產(chǎn)生氣溶膠、噴濺及離心管破裂·使用可封閉性的容器(安全杯)或密封轉(zhuǎn)子。在氣溶膠沉降后(30min)再打開容器或轉(zhuǎn)子,或在生物安全柜中操作。超速離心機(jī)產(chǎn)生氣溶膠、噴濺及離心管破裂·在離心機(jī)和真空泵之間安裝HEPA過濾器?!っ總€(gè)轉(zhuǎn)子均有運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)間的記錄,并應(yīng)制訂預(yù)防性維修保養(yǎng)措施以減少發(fā)生機(jī)械故障的風(fēng)險(xiǎn)?!ぴ谏锇踩裰醒b、卸容器或轉(zhuǎn)子。厭氧罐爆炸、感染性物質(zhì)擴(kuò)散·確保催化劑周圍電線盒的完整性。干燥器內(nèi)爆、玻璃碎片和感染性物質(zhì)擴(kuò)散·置于堅(jiān)固的金屬絲籠中。勻漿器、組織研磨機(jī)產(chǎn)生氣溶膠、泄漏和容器破裂·在生物安全柜中操作并打開儀器。·使用專門設(shè)計(jì)可以避免在轉(zhuǎn)子軸承和O形墊圈處泄漏的儀器型號(hào),或使用消化器?!ぴ诖蜷_勻漿器以前先等候30min以使氣溶膠沉積。冷卻以使氣溶膠凝聚。·如果使用手動(dòng)組織研磨器,管外用可吸收材料包裹。超聲處理器、超聲波清洗儀產(chǎn)生氣溶膠、聽力損傷、皮膚炎·在生物安全柜或密封單元中操作并打開儀器?!ご_保隔離以免受分頻諧波的傷害?!ご魃鲜痔滓员Wo(hù)清潔劑對(duì)皮膚造成的化學(xué)危害。培養(yǎng)攪拌器、振蕩器、攪拌器產(chǎn)生氣溶膠、噴濺和泄漏·在生物安全柜或?qū)iT設(shè)計(jì)的一級(jí)屏障內(nèi)操作?!な褂媒Y(jié)實(shí)的帶螺口蓋的培養(yǎng)瓶,必要時(shí)安裝有過濾器保護(hù)的出口,并嚴(yán)格固定。冷凍干燥機(jī)(凍干機(jī))產(chǎn)生氣溶膠和直接接觸污染材料·使用O形連接器來(lái)密封整個(gè)機(jī)器?!な褂每諝膺^濾器來(lái)保護(hù)真空管?!な褂糜行У那宄廴镜姆椒ǎ缁瘜W(xué)法。·配備全金屬脫水器和蒸汽冷凝器。·仔細(xì)檢查所有玻璃真空管表面是否有擦痕。僅限使用專門設(shè)計(jì)用于真空作業(yè)的玻璃器具。水浴器微生物生長(zhǎng)。疊氮化鈉與有些金屬形成爆炸性混合物?!ご_保定期清潔和消毒?!げ挥茂B氮化鈉作抑菌劑。表A1-2儀器設(shè)備相關(guān)事故的原因事故事故原因減少或消除危害設(shè)計(jì)或建造有缺陷培養(yǎng)箱有電火花電擊沒有溫度過高斷路裝置沒有提供可靠的接地·符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)不適當(dāng)使用離心事故轉(zhuǎn)軸上的離心桶吊籃沒有平衡·培訓(xùn)和監(jiān)督工作人員厭氧培養(yǎng)箱爆炸不正確使用氣體·培訓(xùn)和監(jiān)督工作人員不正確配用家用保溫瓶爆炸液氮運(yùn)輸不當(dāng)·使用專門設(shè)計(jì)的儀器設(shè)備家用型冰箱爆炸危險(xiǎn)性化學(xué)品沒有儲(chǔ)存在防火∕防爆容器中,如用滲漏的螺旋瓶蓋儲(chǔ)存乙醚?!さ烷W點(diǎn)溶劑和提取物僅貯存在具有火花∕爆炸保護(hù)裝置的冰箱或安全柜中。缺乏正確的維護(hù)火焰光度計(jì)產(chǎn)生的火焰維護(hù)過程中各組件的重新組裝不正確。·培訓(xùn)和監(jiān)督工作人員表A1-3生物安全設(shè)備設(shè)備避免的危害安全性特征生物安全柜——Ⅰ級(jí)氣溶膠和噴濺·盡量減小工作入口處向內(nèi)的氣流(正面氣流速度);排風(fēng)經(jīng)充分過濾·不能保護(hù)操作對(duì)象——Ⅱ級(jí)氣溶膠和噴濺·盡量減小工作窗口處向內(nèi)的氣流(正面氣流速度);排風(fēng)經(jīng)充分過濾·可以保護(hù)操作對(duì)象——Ⅲ級(jí)氣溶膠和噴濺·最高防護(hù)·如果內(nèi)部為層流氣流,則可以保護(hù)操作對(duì)象負(fù)壓柔性薄膜隔離裝置氣溶膠和噴濺·最高水平防護(hù)噴濺罩化學(xué)品噴濺·在操作人員和工作區(qū)之間形成屏障移液輔助器由于口吸產(chǎn)生的危害,例如病原體的食入、吸入用口抽吸吸管時(shí)所生成的氣溶膠、從吸管中吹出或滴出液體、吸管吸入端的污染等·便于使用·控制吸管吸入端的污染,保護(hù)移液輔助器、操作者和真空管道·可以滅菌·控制吸管尖端的泄漏微型接種環(huán)加熱器、一次性接種環(huán)移動(dòng)接種環(huán)時(shí)造成的噴濺·遮護(hù)玻璃管或陶瓷管的開口端,采用氣體或電加熱·一次性的,不需加熱設(shè)施內(nèi)用于收集并運(yùn)送感染性物質(zhì)進(jìn)行滅菌的防漏容器產(chǎn)生氣溶膠、溢出和泄漏·有罩或蓋子的防漏結(jié)構(gòu)·耐用·耐高壓滅菌盛放銳器的一次性容器意外刺傷·耐高壓滅菌·堅(jiān)固,不易刺破實(shí)驗(yàn)室和單位間運(yùn)送物品的容器微生物泄漏·堅(jiān)固·能盛放溢出物的防水性一級(jí)和二級(jí)容器·用于吸收溢出物的材料手動(dòng)或自動(dòng)的高壓滅菌器感染性物質(zhì)(以保證丟棄或重復(fù)使用時(shí)的安全)·經(jīng)批準(zhǔn)的設(shè)計(jì)·有效的加熱滅菌螺口蓋的瓶子產(chǎn)生氣溶膠和泄漏·有效的防護(hù)真空管道保護(hù)裝置氣溶膠和溢出液體對(duì)實(shí)驗(yàn)室真空系統(tǒng)的污染·可以阻止氣溶膠通過的濾筒式過濾器(顆粒大小μm)·裝有適當(dāng)消毒劑的防溢燒瓶。在貯存瓶盛滿時(shí)橡皮球閥可自動(dòng)關(guān)閉真空系統(tǒng)·整個(gè)系統(tǒng)耐高壓滅菌表A1-4個(gè)體防護(hù)裝備裝備避免的危害安全性特征實(shí)驗(yàn)服、隔離衣、連體衣污染衣服·背面開口·罩在日常服裝外塑料圍裙污染衣服·防水鞋襪碰撞和噴濺·不露腳趾護(hù)目鏡碰撞和噴濺·防碰撞鏡片(必須有視力校正或外戴視力校正眼鏡)·側(cè)面有護(hù)罩安全眼鏡碰撞·防碰撞鏡片(必須有視力校正)·側(cè)面有護(hù)罩面罩碰撞和噴濺·罩住整個(gè)面部·發(fā)生意外時(shí)易于取下防毒面具吸入氣溶膠·在設(shè)計(jì)上包括一次性使用的、整個(gè)面部或一半面部空氣凈化的、整個(gè)面部或加罩的動(dòng)力空氣凈化(poweredairpurifying,PAPR)的以及供氣的防毒面具手套直接接觸微生物劃破·得到微生物學(xué)認(rèn)可的一次性乳膠、乙烯樹脂或聚腈類材料·保護(hù)手·網(wǎng)孔結(jié)構(gòu)
附錄2實(shí)驗(yàn)室有毒、有害物品標(biāo)準(zhǔn)管理規(guī)程目的:建立實(shí)驗(yàn)室有毒、有害物品的安全管理規(guī)程,防止試劑或藥品的丟失以及人員中毒,保障人員安全。范圍:下列物品屬危險(xiǎn)物品管理的范圍,僅供參考。1、致癌物質(zhì)黃曲霉素B1、亞硝胺、3—4苯并芘等(以上為強(qiáng)致癌物質(zhì));2-乙酰氨基芴、4-氨基聯(lián)苯、聯(lián)苯胺及其鹽類、3,3-二氯聯(lián)苯胺、4-二甲基氨基偶氮苯、1-萘腔、2-萘胺、4-硝基聯(lián)苯、N-亞硝基二甲胺、β-丙內(nèi)酯、4,4-甲叉(雙)-2-氯苯胺、乙撐亞胺、氯甲甲醚、二硝基萘、羧基鎳、氯乙烯、同苯二酚、二氯甲醚、溴化乙錠(EB)、DEPC(焦碳酸二乙酯)、放線菌素D、放射性物質(zhì)(同位素標(biāo)記時(shí))等。2、劇毒六氯苯、羧基鐵、氰化鈉、氫氟酸、氫氰酸、氯化氰、氯化汞、砷酸汞、汞蒸氣、砷化氫、光氣、氟光氣、磷化氫、三氧化二砷、有機(jī)砷化物、有機(jī)磷化物、有機(jī)氟化物、有機(jī)硼化物、鈹及其化合物、丙烯腈、乙腈等。(本實(shí)驗(yàn)室無(wú)上述劇毒化學(xué)品)3、高毒氟化鈉、對(duì)二氯苯、甲基丙烯腈、丙酮氰醇、二氯乙烷、三氯乙烷、偶氮二異丁腈、黃磷、三氯氧磷、五氯化磷、三氯化磷、五氧化二磷、三氯甲烷、溴甲烷、二乙烯酮、氧化亞氮、鉈化合物、四乙基鉛、四乙基錫、三氯化銻、溴水、氯氣、五氧化二釩、二氧化錳、二氯硅烷、三氯甲硅烷、苯胺、硫化氫、硼烷、氯化氫、氟乙酸、丙烯醛、乙烯酮、氟乙酰胺、碘乙酸乙酯、溴乙酸、乙酯、氯乙酸乙酯、有機(jī)氰化物、芳香胺、迭氮黃砷化鈉、疊氮鈉等。(本實(shí)驗(yàn)室無(wú)上述高毒化學(xué)品)4、中毒苯、四氯化碳、三氯硝基甲烷、乙烯吡啶、三硝基甲苯、五氯酚鈉、硫酸、砷化鎵、丙烯酰胺、環(huán)氧乙烷、環(huán)氧氯丙烷、烯丙醇、二氯丙醇、糖醛、三氟化硼、四氯化硅、硫酸鎘、氯化鎘、硝酸、甲醛、甲醇、胼(聯(lián)氨)、二硫化碳、甲苯、二甲苯、一氧化碳、一氧化氮、氯仿、吉姆薩(Giemsa)染料、十二烷基硫酸鈉(SDS)、Trizol等。5、低毒三氯化鋁、鉬酸胺、間苯二胺、正丁醇、叔丁醇、乙二醇、丙烯酸、甲基丙烯酸、順丁烯二酸酐、二甲基甲酰胺、已內(nèi)酰胺、亞鐵氰化鉀、鐵氰化鉀、氨及氫化胺、四氯化錫、氯化鍺、對(duì)氯苯氨、硝基苯、三硝基甲苯、對(duì)硝基氯苯、二苯甲烷、苯乙烯、二乙烯苯、鄰苯二甲酸、四氫呋喃、吡啶、三苯基磷、烷基鋁、苯酚、三硝基酚、對(duì)苯二酚、丁二烯、異戊二烯、氫氧化鉀、鹽酸、氯磺甲、乙醚、丙酮、乙酸(濃的)、過硫酸銨等。6、爆炸物品迭氮化鈉、硝酸銨、過氧酸、過氧化氫(雙氧水)等。7、自燃物品黃磷、硝化纖維、膠片等8.易燃物品紅磷、鎂粉、謎、醇、汽油等內(nèi)容:1.有毒、有害物品的購(gòu)買依據(jù)實(shí)際使用情況,由實(shí)驗(yàn)人員填寫計(jì)劃單,報(bào)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)。經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)后,送交采供部購(gòu)買。采購(gòu)此類藥品需向所在地省、自治區(qū)、直轄市食品藥品監(jiān)督管理部門或行政部門提出申請(qǐng),經(jīng)批準(zhǔn)后從經(jīng)營(yíng)單位購(gòu)買。采供部門二人持“毒品購(gòu)買證”或麻醉、精神藥品購(gòu)買證件到指定單位購(gòu)買,運(yùn)送途中需實(shí)行有效的防范措施,安全交至倉(cāng)庫(kù)管理部門。有限購(gòu)買證件嚴(yán)禁轉(zhuǎn)借他人。2.有毒、有害物品的接收此類藥品保管員應(yīng)由二人擔(dān)任,負(fù)責(zé)有毒、有害物品的管理工作。此類藥品保管員須具備較高的素質(zhì)和品質(zhì),工作認(rèn)真負(fù)責(zé),有一定的專業(yè)知識(shí)和安全知識(shí)。保管員驗(yàn)收2.3.1二位保管員先后核對(duì)實(shí)物與購(gòu)買計(jì)劃單是否一致。2.3.2檢查有毒、有害物品包裝完好,封口嚴(yán)密,標(biāo)簽清晰,文字完整,易于辨認(rèn),無(wú)污染、無(wú)滲漏、無(wú)破損、無(wú)混雜、無(wú)啟封痕跡。2.3.3精密稱定(未開口狀態(tài))重量,四人(兩位保管員,兩位采購(gòu)員)核對(duì)確認(rèn)。以上有一項(xiàng)驗(yàn)收不合格,保管員拒絕接收,報(bào)主管領(lǐng)導(dǎo)進(jìn)行調(diào)查,直至符合規(guī)定。2.3.4驗(yàn)收合格,填寫接收記錄,四人簽名。2.3.5瓶外貼上標(biāo)簽。內(nèi)容包括:編號(hào)、購(gòu)進(jìn)日期、重量、有毒標(biāo)志。3.有毒、有害物品的貯
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