微生物實(shí)驗(yàn)二課件

實(shí)驗(yàn)二

糞便標(biāo)本中腸道致病菌的分離培養(yǎng)與鑒定實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私饽c道中致病菌分離培養(yǎng)與鑒定的方法認(rèn)識(shí)腸道桿菌的主要生化反應(yīng)特點(diǎn)

材料糞便標(biāo)本1標(biāo)本來(lái)源與特征：病人持續(xù)高熱>39℃,肝脾腫大，皮膚有玫瑰疹，外周白細(xì)胞減少沙門(mén)氏菌腸炎沙門(mén)氏菌引起多數(shù)起病急驟畏寒發(fā)熱體溫一般38～39℃伴有惡心嘔吐腹痛腹瀉大便每日3～5次至數(shù)十次不等大便常為水樣量多很少或沒(méi)有糞質(zhì)可有少量粘液有惡臭偶可呈粘液膿血便本型病程一般2～4天偶有長(zhǎng)達(dá)1～2周。類傷寒型。敗血癥型。局部化膿感染型等。

痢疾志賀菌(1)急性菌痢局部癥狀有膿血便,腹痛,里急后重，急性中毒性菌痢,以小兒多見(jiàn),無(wú)明顯的消化道癥狀,主要表現(xiàn)全身嚴(yán)重的中毒癥狀.各型志賀菌都有可能引起.臨床主要有高熱,神志障礙,休克,病死率較高.(2)慢性菌痢病程>2月,遷延不愈,局部癥狀為主.由查詢資料及標(biāo)本特征，可初步判斷為大腸埃希菌、志賀菌和傷寒沙門(mén)菌

實(shí)驗(yàn)方法1、標(biāo)本采集2、分離培養(yǎng)與鑒定

增菌培養(yǎng)（必要時(shí)）糞便標(biāo)本選擇鑒別培養(yǎng)基可疑菌落克氏雙糖鐵培養(yǎng)基（伊紅美蘭或SS瓊脂平板等）生化鑒定和動(dòng)力檢查血清鑒定革蘭染色鏡檢（必要時(shí)）

葡萄糖試驗(yàn)甘露醇試驗(yàn)乳糖試驗(yàn)吲哚試驗(yàn)甲基紅試驗(yàn)VP試驗(yàn)硫化氫試驗(yàn)枸櫞酸鹽利用尿素試驗(yàn)半固體培養(yǎng)基腸道桿菌的生化反應(yīng)和動(dòng)力葡萄糖甘露醇乳糖吲哚甲基紅VP枸櫞酸鹽利用H2S尿酸分解動(dòng)力大腸埃希菌⊕⊕⊕++————+傷寒沙門(mén)菌++——+——/+—/+—+痢疾桿菌++——/++—————主要沙門(mén)菌抗原結(jié)構(gòu)表群菌名O抗原H抗原第一相第二相A甲型副傷寒1.2.12a1.2B乙型副傷寒1.4.5.12b1.2鼠傷寒桿菌1.4.5.12i1.2C丙型副傷寒6.7.Vic1.5豬霍亂桿菌6.7c1.5D傷寒桿菌9.12.Vid-------腸炎桿菌1.9.12g.m-------E鴨沙門(mén)氏菌3.10e.h1.6

結(jié)果預(yù)測(cè)1、生化反應(yīng)結(jié)果顯示，疑為傷寒沙門(mén)菌，再用A-F群沙門(mén)氏菌多價(jià)O血清作玻片凝集試驗(yàn)，呈陽(yáng)性者為傷寒沙門(mén)氏菌。2、生化反應(yīng)結(jié)果顯示，疑為志賀菌，則取菌苔與志賀菌多價(jià)診斷血清做玻片凝集試驗(yàn)，呈陽(yáng)性者為志賀菌。3、生化反應(yīng)結(jié)果顯示，疑為