新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法

新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院藥理系樓雅卿新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第1頁(yè)!新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究

藥理學(xué)(Pharmacology)

藥效學(xué)(Pharmacodynamics)(藥理作用、作用機(jī)制和毒、副作用)藥代動(dòng)力學(xué)(Pharmacokinetics)(藥物吸收、分布、代謝和排泄,ADME).新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第2頁(yè)!新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究

非血管途徑給藥---吸收過程

|

血管給藥----進(jìn)入血液循環(huán)--分布和消除

|(代謝,排泄)

進(jìn)入藥物作用部位及其他組織|

臨床藥理效應(yīng)或毒性反應(yīng)

新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第3頁(yè)!新藥研究、開發(fā)及上市的藥代動(dòng)力學(xué)研究1.非臨床(動(dòng)物)的藥代研究:*先導(dǎo)化合物藥代研究.(篩選)*入選化合物的藥代研究.2.臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究*I期臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究.(以正常受試者為試驗(yàn)對(duì)象)*II、III及IV臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究(包括特殊人群、病人為試驗(yàn)對(duì)象)新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第4頁(yè)!新藥早期(先導(dǎo)化物)研究:

1.有效性：選擇作用。2.安全性:*肝毒性。*三致試驗(yàn)。*Q-Tc不利影響-心臟毒性。3.藥代研究:*吸收試驗(yàn)-Coca-2細(xì)胞通透性試驗(yàn)或整體動(dòng)物試驗(yàn)。*P-糖蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)-藥物吸收、分布和排泄相關(guān)。*藥物代謝:新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第5頁(yè)!

臨床前（動(dòng)物）藥代動(dòng)力學(xué)研究

目的：

探討新藥在動(dòng)物體內(nèi)的規(guī)律和特點(diǎn)。2為新藥研制和開發(fā)前景提供信息。3為臨床試驗(yàn)設(shè)計(jì)提供依據(jù)。新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第6頁(yè)!建立分析方法。血藥濃度經(jīng)時(shí)變化:*單劑量給藥試驗(yàn)。*多劑量給藥試驗(yàn)等。藥物吸收。蛋白結(jié)合率:求結(jié)合型/非結(jié)合型藥物比值。組織分布。排泄試驗(yàn):藥物從尿、糞便和膽汁排泄。

研究?jī)?nèi)容:新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第7頁(yè)!藥品注冊(cè)中臨床前藥代研究的技術(shù)要求:

常用的藥物含量分析方法1.色譜法:1)高壓液相色譜法(HPLC)HPLC-UVHPLC-FHPLC-ECDHPLC-MSn(LC-MSn)2)氣相色譜法(GC)GC-FIDGC-NPDGC-ECDGC-MS

新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第8頁(yè)!

分析方法學(xué)研究的考察1.特異性:證明測(cè)定的物質(zhì)為原形藥物或其活性代謝,能排除內(nèi)源性及其他外源性物質(zhì)的干擾。

2.靈敏度:用最低檢測(cè)濃度(LLOQ)表示。通常為標(biāo)準(zhǔn)曲線的最小濃度,要求能測(cè)出3-5個(gè)消除t1/2或Cmax的1/10或1/20的血藥濃度。

3.標(biāo)準(zhǔn)曲線制備:至少包括5個(gè)藥物濃度點(diǎn),應(yīng)能覆蓋生物樣品的濃度范圍,不得外推。提供標(biāo)準(zhǔn)曲線性方程式和相關(guān)系數(shù)(r>0.99)。測(cè)定不同生物樣品時(shí)應(yīng)提供不同生物樣品的藥物標(biāo)淮曲線。新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第9頁(yè)!試驗(yàn)藥品1.藥品的正式名稱.2.藥品的純度、批號(hào)和來(lái)源.3.保存條件.4.試驗(yàn)用藥品的配制方法,應(yīng)和藥效學(xué)及毒理學(xué)試驗(yàn)一致.新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第10頁(yè)!

血藥濃度經(jīng)時(shí)變化試驗(yàn)?zāi)康暮蛢?nèi)容

目的:探討藥物吸收,分布和消除的動(dòng)力學(xué)規(guī)律和特點(diǎn)。

試驗(yàn)內(nèi)容:*單劑量給藥。*多劑量給藥。*口服藥物的絕對(duì)生物利用度。*進(jìn)食對(duì)口服藥物吸收的影響。*性別因素的影響。

新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第11頁(yè)!1.采樣點(diǎn)應(yīng)能反映藥物吸收、平衡/分布和消除三個(gè)時(shí)相的動(dòng)力學(xué)規(guī)律。2.吸收相至少2個(gè)采血點(diǎn).3.平衡相至少3個(gè)點(diǎn).4.消除相為4-6個(gè)點(diǎn).應(yīng)能反映3～5個(gè)消除半衰期或1/10或1/20的Cmax。5.求得一條完整的藥–時(shí)曲線。

新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第12頁(yè)!藥代參數(shù)的估算

*國(guó)內(nèi)多選用3P97軟件或其他公認(rèn)的藥代動(dòng)力學(xué)程序軟件來(lái)估算藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。*可采用房室模型或非房室模型程序。*主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)有：

血管給藥:提供

t1/2,Vd,CL和AUC等參數(shù)。

血管外給藥:除上述參數(shù)外,尚應(yīng)提供MRT,Cmax,Tmax,和F值。

新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第13頁(yè)!提供資料1.各組(各個(gè))的藥-時(shí)數(shù)據(jù)和曲線圖及其平均值.2.各組(各個(gè))的藥代參數(shù)及其平均值.3.試驗(yàn)結(jié)果分析和討論:*吸收的規(guī)律和特點(diǎn).*血藥濃度和劑量相關(guān)性.*藥物消除動(dòng)力學(xué)的特點(diǎn).*藥物體內(nèi)分布特點(diǎn).新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第14頁(yè)!單劑量和多劑量口服加替沙星的藥代參數(shù)藥代參數(shù)單劑量多劑量(10d)________________________________________Cmax(mg.L-1)3.39±0.563.51±0.93Cmin(mg.L-1)0.23±0.100.29±0.16Tmax(h)0.9±0.291.15±0.41AUC(mg.h.L-1)20.26±4.24*26.16±4.53t1/2(h)7.25±1.507.69±0.81Vd(L)102.27±32.1297.24±19.23CL(L.h-1)19.14±4.24*16.72±2.93_________________________________________新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第15頁(yè)!藥物的組織分布

目的：探討藥物在組織分布規(guī)律,親和力及與藥效和毒性的相關(guān)性。

通常選用大鼠或小鼠。一種有效劑量。>13種組織,根據(jù)藥品特點(diǎn)相應(yīng)增加。(肺,脾,肝,心,腎,腦,肌,平滑肌,脂肪,生殖器,骨髓等)至少三個(gè)采樣時(shí)間點(diǎn),反映其動(dòng)力學(xué)規(guī)律。

新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第16頁(yè)!藥物的血漿蛋白結(jié)合率試驗(yàn)

采用透析法,超濾法等。高,中,低三種藥物濃度,應(yīng)接近體內(nèi)濃度。兩種動(dòng)物和人血漿。

A1998的蛋白結(jié)合率濃度(ug/ml)大鼠

人666.04±9.897.54±1.78875.83±2.893.15±8.321077.94±3.7397.93±1.94新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第17頁(yè)!藥物生物轉(zhuǎn)化(代謝)如原形藥在體內(nèi)生成大量具有藥理活性代謝物,并其排泄總量<50%時(shí),則應(yīng)進(jìn)行初步藥物代謝試驗(yàn)代謝部位。代謝途徑和藥物代謝酶。主要代謝物M1,M2,M3…..等。如為前藥,要確定主要代謝物的化學(xué)結(jié)構(gòu),代謝物合成,藥理活性和PK試驗(yàn)。

新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第18頁(yè)!CYP典型底物KmIC50Ki1A2非那西丁541000519.22A6雙香豆素0.341000253.72C9甲苯磺丁脲120532290.22C19S-美芬妥英36.11000419.32D6異喹胍57.5*53.3*39.9*2E1氯唑沙宗30.414655.23A4紅霉素55.8*56.5*39.1*藥酶誘導(dǎo)作用和抑制作用新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第19頁(yè)!新藥、新制劑的生物利用度/生物等效性試驗(yàn)研究

*生物利用度(Bioavailability,BA)是以藥物濃度-時(shí)間曲線下面積(AUC)為基礎(chǔ),反映藥物在體內(nèi)的吸收程度和速度.

絕對(duì)生物利用度:F=AUCpo/AUCiv×100%相對(duì)生物利用度:F=AUC(試驗(yàn)制劑)/AUC(參比制劑)×100%

*生物等效性(Bioequivalancy,BE)是指一種藥物的不同制劑在相同的實(shí)驗(yàn)條件下,其體內(nèi)吸收程度和速度無(wú)顯著性差異.

新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第20頁(yè)!生物利用度試驗(yàn)--

臨床前(動(dòng)物)生物利用度試(生物藥劑學(xué))

血藥濃度檢測(cè)方法同前。受試對(duì)象:動(dòng)物-Beagle犬(>6只),大鼠等。3.藥物制劑:受試制劑-研究的制劑。4.參比制劑-巳批準(zhǔn)上市的主導(dǎo)藥物劑型。5.試驗(yàn)設(shè)計(jì):通常采用兩制劑雙周期交叉試驗(yàn)(二種制劑)或3×3拉丁方試驗(yàn)設(shè)計(jì)(三種制劑)。新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第21頁(yè)!

藥代參數(shù)估算單劑量試驗(yàn)主要藥代參數(shù):用房室模型或非房室模型求藥代參數(shù),但其中a)AUCo-t

以梯形法計(jì)算。b)AUCo-∞

按下式計(jì)算:AUCo-∞=AUCo-t+Ct/λz2.t為最后一次采血時(shí)間;Ct為末次的藥物濃度,λz為藥-時(shí)曲線末端部份求得的消除速率常數(shù).3.Cmax和Tmax

以實(shí)測(cè)值表示。4.生物利用度:F%=AUCT/AUCR×100%新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第22頁(yè)!生物等效性評(píng)價(jià)

1.主要對(duì)Cmax,Tmax及AUC三個(gè)參數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,評(píng)價(jià)生物等效性.

2.Cmax和AUC對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換,以校正其對(duì)稱性.3.用多因素方差分析(ANOVA)進(jìn)行顯著性檢驗(yàn).4.用雙單側(cè)t檢驗(yàn)和計(jì)算90%可信區(qū)間.5.試驗(yàn)制劑Cmax的90%可信限在70-143%范圍內(nèi).

AUC的90%可信限在80-125%范圍內(nèi).Tmax經(jīng)非參數(shù)法檢驗(yàn).

新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第23頁(yè)!對(duì)存在內(nèi)源性物質(zhì)干擾的藥物,如鈣劑、鐵劑、激素維生素等,應(yīng)重點(diǎn)解決分析方法問題.有些藥物需同時(shí)進(jìn)行藥效學(xué)BA/BE試驗(yàn),如口服或局部用藥的胰島素劑型研究。復(fù)方制劑BE研究,原則上應(yīng)證實(shí)每個(gè)主要有效成份.新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第24頁(yè)!根據(jù)注冊(cè)分類:1類:1-5品種進(jìn)行系統(tǒng)藥代試驗(yàn).

4-5品種尚需進(jìn)行復(fù)方和單藥比較.2類:與原藥進(jìn)行藥代比較(BA)后決定.3類:進(jìn)行一種劑量藥代,參考文獻(xiàn).4類:進(jìn)行與原藥比較藥代試驗(yàn)(BA).5類:BA/BE試驗(yàn).6類:(±).新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第25頁(yè)!新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究1.化學(xué)藥物臨床前藥代動(dòng)力學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則(試行).2.速釋、緩釋、控釋制劑臨床前藥代動(dòng)力學(xué)研究指導(dǎo)原則(試行).3.新生物制品臨床前藥代動(dòng)力學(xué)技術(shù)指導(dǎo)原則(試行).4.化學(xué)藥物臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則(試行).5.化學(xué)藥物制劑人體生物利用度和生物等效性研究技術(shù)指導(dǎo)原則(試行).6.新生物制品臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究指導(dǎo)原則(試行).新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第26頁(yè)!新藥早期藥代研究1.采用肝微粒體、肝細(xì)胞或肝灌流法研究藥物代謝途徑和藥酶.2.P450酶系統(tǒng)及及亞型分析.3.整體動(dòng)物試驗(yàn).4.計(jì)算機(jī)模擬代謝物分析.新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第27頁(yè)!進(jìn)行臨床前藥代動(dòng)力學(xué)的基本要求1.試驗(yàn)?zāi)康拿鞔_.2.分析方法可靠.3.試驗(yàn)設(shè)計(jì)合理.4.試驗(yàn)數(shù)據(jù)科學(xué)、全面、能滿足新藥評(píng)價(jià)要求.5.實(shí)事求是總結(jié)分析試驗(yàn)結(jié)果,作出客觀的評(píng)價(jià).新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第28頁(yè)!7.藥物生物轉(zhuǎn)化（代謝）:*代謝部位。

*代謝方式(途徑)。

*藥物代謝酶。*代謝產(chǎn)物。8.細(xì)胞色素P450酶(CYP)抑制和誘導(dǎo)作用。9.可能發(fā)生的藥物相互作用。

研究?jī)?nèi)容:新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第29頁(yè)!2.免疫法:放射免疫法(RIA)

酶免疫法(EMIT,ELISA等)螢光免疫法(FIA)

螢光偏振免疫法(FPIA)3.生物測(cè)定法:*微生物測(cè)定法*靶酶或靶細(xì)胞測(cè)定法4.放射性同位素示蹤法:3H-,14C-,125I-,131I-5.穩(wěn)定同位素示蹤法:2H-,13C-,15N-,18O-等。

常用的藥物含量分析方法新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第30頁(yè)!4.精確度:方法回收率表示。選擇高、中、低三個(gè)濃度。回收率在80-120%范圍內(nèi)。

5.精密度:用相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)誤差(RSD)表示。選擇高、中、低三個(gè)濃度,求日內(nèi)和日間精密度,應(yīng)<10-20%。

6.樣品穩(wěn)定性。7.質(zhì)控。

對(duì)分析方法學(xué)研究考察新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第31頁(yè)!試驗(yàn)動(dòng)物選擇*兩種動(dòng)物:小鼠、大鼠或兔,beagle犬或猴等。*口服藥物試驗(yàn)不選用家兔。*選用動(dòng)物應(yīng)與藥效及毒理試驗(yàn)一致。*最好選用一種能多次采取血樣,制成藥-時(shí)曲線的動(dòng)物.*試驗(yàn)動(dòng)物數(shù),每個(gè)時(shí)間點(diǎn)不少于5個(gè)數(shù)據(jù),雌雄各半.*生物制品試驗(yàn)應(yīng)選能產(chǎn)生相應(yīng)活性動(dòng)物或與人源蛋白同源性高的動(dòng)物,如猴,相應(yīng)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物等。

新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第32頁(yè)!劑量的確定和給藥途徑1.高、中、低三種劑量:*主要參考動(dòng)物藥效學(xué)和毒理試驗(yàn)劑量(ED50,TD50,LD50,慢毒劑量

),*選擇其有效劑量范圍內(nèi),高、中、低三個(gè)劑量,高劑量不能>最大耐受量(MTD)。

2.給藥途徑應(yīng)與藥效學(xué)、毒理學(xué)及以后臨床給藥途徑一致。

新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第33頁(yè)!圖1.大耳白家兔單次靜脈注射三種劑量（10mg·kg-1，20mg·kg-1，30mg·kg-1）A1998脂肪乳后平均藥-時(shí)曲線比較。新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第34頁(yè)!家兔靜注三種劑量A1998后的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)(n=5)參數(shù)

102030(mg)

T1/2(h)0.36±0.062.67±0.582.36±2.87V(c)(L/kg)4.40±0.576.11±1.365.39±2.40AUC(ug·ml/h)1.13±0.244.46±0.966.14±1.19CL(mg·ml.h-1)11.0±2.565.17±0.825.58±2.79新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第35頁(yè)!多次給藥試驗(yàn)藥品在臨床需長(zhǎng)期給藥及呈蓄積傾向時(shí),應(yīng)進(jìn)行多次給藥試驗(yàn).1.選用一種有效劑量.2.確定給藥間隔時(shí)間和給藥次數(shù).3.測(cè)定3次Cmin,求穩(wěn)態(tài)藥-時(shí)數(shù)據(jù)和曲線.4.求算t1/2,AUCss,Cmin,Cav和DF值等.5.比較單、多次給藥試驗(yàn)結(jié)果:藥代規(guī)律的差別和蓄積性.新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第36頁(yè)!血管外給藥的藥物吸收試驗(yàn)1.體外Coca-2細(xì)胞模型試驗(yàn).2.在體腸道試驗(yàn).3.整體生物利用度試驗(yàn):*絕對(duì)生物利用度試驗(yàn).*相對(duì)生物利用度試驗(yàn).新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第37頁(yè)!組織分布5.除提供試驗(yàn)數(shù)據(jù)外,應(yīng)分析組織/血中藥物濃度的比值。6.特別注意藥物濃度高、蓄積時(shí)間長(zhǎng)及在靶器官的組織分布.7.采用同位素示蹤法時(shí),盡可能提供給藥后不同時(shí)相的整體放射自顯影圖像.新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第38頁(yè)!藥物排泄試驗(yàn)

目的：探討藥物排泄途徑,排泄總量,排泄高峰,排泄終點(diǎn)的規(guī)律和特點(diǎn)。

大鼠,一種有效劑量?jī)?nèi)容:糞便,尿和膽汁排泄試驗(yàn)主要排泄途徑、排泄速率和排泄量(至藥物排泄結(jié)束為止)。注意原形藥排泄累積總量占劑量的百分比,物料平衡問題。是否存在肝腸循環(huán),胃腸循環(huán)等現(xiàn)象。

新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第39頁(yè)!藥酶誘導(dǎo)和抑制作用

測(cè)定藥物對(duì)肝微粒中P450總量的影響.

肝微粒體酶促動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)(應(yīng)用巳知被CYP1A2,2C9,2C19,2D6和3A4等藥酶催化的藥物進(jìn)行試驗(yàn))或藥酶抗體反應(yīng)試驗(yàn),研究:*藥物代謝酶。*藥酶誘導(dǎo)作用。*藥物抑制作用。

新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第40頁(yè)!

討論和結(jié)論

除試驗(yàn)結(jié)果小結(jié)外,應(yīng)結(jié)合藥效學(xué)和毒理進(jìn)行分析討論.如:

吸收規(guī)律,BA。消除動(dòng)力學(xué)規(guī)律。性別,進(jìn)食及用藥持續(xù)時(shí)間對(duì)藥代的影響。藥物蛋白結(jié)合率、組織分布親和力和藥效,毒性的相關(guān)性。排泄和吸收的平衡,蓄積性。代謝特點(diǎn),和藥效,毒性相關(guān)性,相互作用等。

新藥藥代動(dòng)力學(xué)研究方法共47頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第41頁(yè)!BA和BE的意義和應(yīng)用確定新藥的給藥途徑.確定新藥