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文檔簡介
關(guān)于自身抗體的檢測及其臨床意義第1頁,共20頁,2022年,5月20日,3點(diǎn)12分,星期六自身抗體是診斷自身免疫性疾病的重要依據(jù)
自身免疫泛指機(jī)體免疫系統(tǒng)受某些內(nèi)因、外因或遺傳等因素作用產(chǎn)生針對自身正?;蜃冃缘慕M織、器官、細(xì)胞、蛋白質(zhì)或酶類等自身抗原發(fā)生的免疫應(yīng)答反應(yīng),出現(xiàn)自身抗體或自身致敏淋巴細(xì)胞的現(xiàn)象。
因自身免疫招致組織器官損傷或功能障礙所致疾病稱自身免疫性疾病。自身免疫性疾病患者血循環(huán)中針對自身組織器官、細(xì)胞及細(xì)胞內(nèi)成分的抗體,稱自身抗體。自身抗體是自身免疫性疾病的重要標(biāo)志。第2頁,共20頁,2022年,5月20日,3點(diǎn)12分,星期六自身免疫性疾病的共同特征1.可以有誘因,也可以無誘因,但多數(shù)病因不清。無誘因者多稱為“自發(fā)”性或“特發(fā)”性。2.患者以女性居多,并隨年齡增加發(fā)病率有所增加。3.有遺傳趨向。4.血清中有自身抗體或體內(nèi)有針對自身組織細(xì)胞的致敏淋巴細(xì)胞。自身抗體在不同的自身免疫病中有交叉和重疊現(xiàn)象。即在不同的自身免疫病患者中查到相同的自身抗體;在同一自身免疫病患者體內(nèi)可查到多種自身免疫抗體。5.疾病的重疊現(xiàn)象,即一個病人可同時患一種以上自身免疫病。6.自身免疫病一般病程較長,病情發(fā)展和緩解呈反復(fù)交替現(xiàn)象,易成為終生痼疾。免疫抑制劑治療可取得一定療效。第3頁,共20頁,2022年,5月20日,3點(diǎn)12分,星期六
自身免疫性疾病患者大多數(shù)體內(nèi)均可查出較高滴度的自身抗體,因此自身抗體的檢測可幫助臨床診斷,評價療效,估計預(yù)后。自身免疫性疾病以血清中出現(xiàn)大量自身抗體為特征,其中與某種疾病密切相關(guān)的自身抗體稱為該疾病的標(biāo)志抗體,標(biāo)志抗體的檢出有助于臨床醫(yī)生確診疾病,具有重要的價值。通過大量的研究及臨床資料統(tǒng)計,目前比較公認(rèn)的部分標(biāo)志抗體:第4頁,共20頁,2022年,5月20日,3點(diǎn)12分,星期六標(biāo)志抗體相關(guān)疾病抗Sm抗體系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)抗dsDNA抗體系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)高滴度抗RNP抗體混合性結(jié)締組織?。∕CTD)抗SSB抗體干燥綜合征(SS)抗著絲點(diǎn)抗體進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥局限型抗Scl-70抗體進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥彌漫型抗Jo-1抗體多發(fā)性肌炎/皮肌炎(PM/DM)抗腎小球基底膜抗體(GBM)肺出血腎炎綜合征(Goodpasture)抗平滑肌抗體(ASMA)Ⅰ型自身免疫性肝病抗肝腎微粒體抗體(LKM-1)Ⅱ型自身免疫性肝病抗可溶性肝抗原抗體(SLA)Ⅲ型自身免疫性肝病抗線粒體抗體2型(AMA-2)原發(fā)性膽汁性肝硬化(PBC)抗角蛋白抗體(AKA)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)第5頁,共20頁,2022年,5月20日,3點(diǎn)12分,星期六
歐蒙印跡法試劑盒用于體外定性檢測血清或血漿中的人抗nRNP、Sm、SS-A(天然SS-A和Ro-52)、SS-B、Scl-70、Jo-1、CENPB、dsDNA、核小體、組蛋白和核糖體P蛋白等14種不同抗原lgG類抗體。第6頁,共20頁,2022年,5月20日,3點(diǎn)12分,星期六免疫印跡技術(shù)(IBT)
免疫印跡技術(shù)屬于膜載體酶免疫技術(shù),其固相載體為吸附有抗原的硝酸纖維膜。
基本原理是將從小牛或兔胸腔提取的抗原,經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳,按分子量大小分離成區(qū)帶,經(jīng)參照對應(yīng)分子量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)確定每一抗原區(qū)帶的分子量。然后將各抗原區(qū)帶轉(zhuǎn)印至硝酸纖維膜上制成抗原吸附載體膜。第7頁,共20頁,2022年,5月20日,3點(diǎn)12分,星期六
將待測血清加在已切成細(xì)條的硝酸纖維膜上,待測血清中存在的抗體分別與硝酸纖維膜上的相應(yīng)抗原區(qū)帶結(jié)合,當(dāng)再加入酶標(biāo)記抗人IgG抗體后形成抗原-抗體-酶標(biāo)記抗體復(fù)合物,再加入酶的底物,出現(xiàn)顯色反應(yīng)。凡有抗體與膜上抗原結(jié)合的位置,均會因酶促反應(yīng)而顯色。
參照此時抗原區(qū)帶的分子量及各區(qū)帶的相應(yīng)位置,可辨讀出各特異性抗體.第8頁,共20頁,2022年,5月20日,3點(diǎn)12分,星期六抗dsDNA抗體是SLE患者的特征性標(biāo)志抗該抗體陽性為SLE的重要診斷標(biāo)準(zhǔn)之一??筪sDNA抗體在SLE的發(fā)病機(jī)制中起重要作用,SLE并發(fā)的狼瘡性腎炎是由該抗體介導(dǎo)的免疫復(fù)合物病,抗dsDNA抗體可形成多種冷沉淀而致血管炎,SLE腎炎及典型的蝶形紅斑均與該抗體有關(guān)??筪sDNA抗體診斷SLE的特異性可達(dá)95%~100%,但其敏感性僅為30%~50%,因此抗dsDNA抗體陰性不能排除SLE的診斷。第9頁,共20頁,2022年,5月20日,3點(diǎn)12分,星期六抗RNP抗體高滴度是混合性結(jié)締組織病(MCTD,夏普綜合征)的特異性標(biāo)志(陽性率為95-100%),抗體滴度與疾病活動性相關(guān);低滴度可見于SLE(15-40%,常伴Sm抗體陽性)??筍m抗體
SLE的標(biāo)志性抗體(5-30%),與dsDNA一起是SLE的診斷指標(biāo),與疾病活動性無關(guān),一般伴有U1-RNP抗體陽性??购诵◇w抗體
SLE標(biāo)志性抗體(85%),可用于SLE的早期診斷,與狼瘡腎炎相關(guān)第10頁,共20頁,2022年,5月20日,3點(diǎn)12分,星期六抗SS-A抗體與各類自身免疫性疾病相關(guān),最常見于干燥綜合征(40-80%)。SLE(20-60%);新生兒紅斑狼瘡(100%),可引起先天性新生兒心臟傳導(dǎo)阻滯。與狼瘡腎病的發(fā)生相關(guān)??固烊籗S-A(60kDa)抗體對SS和SLE的特異性高。該抗體的產(chǎn)生與HLA有關(guān)。抗Ro-52抗體 不具有疾病特異性,而且還可與抗Jo-1和RNP抗體發(fā)生交叉反應(yīng)。抗SS-B抗體 干燥綜合征(40-95%);SLE(10-20%);亞急性皮膚狼瘡(25-35%)。第11頁,共20頁,2022年,5月20日,3點(diǎn)12分,星期六抗Scl-70抗體進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥(25-75%),與皮膚硬化、肺部受累及腫瘤有關(guān);抗體滴度與疾病活動性無關(guān)??筆M-Scl抗體 多肌炎/皮肌炎(8%),彌散性硬皮病(3%);50%PM-Scl抗體陽性見于皮肌炎與硬化癥的重疊綜合征。抗Jo-1抗體 多肌炎特異性抗體(25-35%),伴肺間質(zhì)纖維化時可高達(dá)75%。高度提示抗合成酶綜合征。第12頁,共20頁,2022年,5月20日,3點(diǎn)12分,星期六抗PCNA
是增殖性細(xì)胞核抗原,是SLE的標(biāo)志性抗體(2-10%),與SLE彌散性腎小球腎炎相關(guān),對激素治療敏感??菇M蛋白抗體 多種結(jié)締組織病中均可出現(xiàn),在藥物誘導(dǎo)的SLE中較常見(陽性率為95%)不具有疾病特異性。僅有此抗體陽性,而不伴有其他ANA,則強(qiáng)烈支持DIL的診斷。與SLE活動性及狼瘡腎病相關(guān)。第13頁,共20頁,2022年,5月20日,3點(diǎn)12分,星期六抗著絲點(diǎn)抗體 局限型彌散性硬皮?。?0%);CREST綜合征(50-80%);原發(fā)性雷諾現(xiàn)象(25%);原發(fā)性膽汁性肝硬化(10-20%)。抗M2抗體 原發(fā)性膽汁性肝硬化特異性抗體(96%);其它慢性肝?。?0%);進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥(7-25%)??购颂求wP蛋白 是SLE的特異性抗體(5-20%)。第14頁,共20頁,2022年,5月20日,3點(diǎn)12分,星期六系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)靶抗原 陽性率(%)dsDNA標(biāo)志性抗體 30-90Sm標(biāo)志性抗體 5-30核糖體P蛋白標(biāo)志性抗體 5-15核小體標(biāo)志性抗體 50-95PCNA標(biāo)志性抗體 3組蛋白 40-80RNP 15-40SS-A 20-60SS-B 10-20第15頁,共20頁,2022年,5月20日,3點(diǎn)12分,星期六新生兒紅斑狼瘡(NEL)靶抗原 陽性率(%)SS-A
100藥物誘導(dǎo)的紅斑狼瘡(DIL)靶抗原 陽性率(%)組蛋白
95第16頁,共20頁,2022年,5月20日,3點(diǎn)12分,星期六原發(fā)性干燥綜合征(SS)靶抗原 陽性率(%)SS-A
40-95SS-B 40-95混合性結(jié)締組織病(MCDT)靶抗原 陽性率(%)RNP
95-100第17頁,共20頁,2022年,5月20日,3點(diǎn)12分,星期六彌漫型進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥靶抗原 陽性率(%)PM-Scl
3Scl-70標(biāo)志性抗體 25-75局限型進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥靶抗原 陽性率(%)著絲點(diǎn)
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