分析方法驗證方案

分析方法驗證方案分析方法驗證方案分析方法驗證方案xxx公司分析方法驗證方案文件編號：文件日期：修訂次數(shù)：第1.0次更改批準審核制定方案設(shè)計，管理制度異煙肼含量測定分析方法驗證方案驗證原因：驗證類型：新項目驗證再驗證其它√預(yù)驗證回顧性驗證轉(zhuǎn)移驗證√方法描述：本分析方法為中國藥典2010版二部方法。為確保其檢測結(jié)果準確，對該分析方法的專屬性、精密度（系統(tǒng)精密度、方法精密度、中間精密度）、線性和范圍、準確度、耐用性進行評價。驗證依據(jù)：中國藥典2010年版分析方法（295頁）驗證時間：2010驗證項目組成員及職責(zé)：部門成員職責(zé)QC儀器設(shè)備的確認QC分析方法編寫QC分析測試QC數(shù)據(jù)評估質(zhì)量部審核批準

驗證內(nèi)容:-序列號確認測試項目可接受標準01101.2儀器設(shè)備的確認高效液相色譜儀的確認天平的確認符合儀器設(shè)備的確認要求符合儀器設(shè)備的確認要求02具體測試內(nèi)容系統(tǒng)精密度配置1份異煙肼工作標準溶液，連續(xù)進針6次，記錄異煙肼峰面積、保留時間。異煙肼峰面積RSD≤%,保留時間RSD≤%。異煙肼理論塔板數(shù)大于4000，拖尾因子在～之間。方法精密度平行配制同一批樣品的6份樣品溶液，每份溶液進樣2針，計算樣品含量及其相對標準偏差。樣品含量的RSD≤%。線性和范圍以異煙肼工作標準品溶液的濃度為100%，配制20%、60%、100%、140%、180%濃度的工作標準品溶液，每個濃度的標準品溶液進樣1次，計算出回歸方程和相關(guān)系數(shù)R。R≥準確度以異煙肼工作標準品溶液的濃度為100%，取同一批樣品，配制濃度為80%、100%和120%的樣品溶液各3份，每份進樣2針。計算其回收率。該定量方法的回收率應(yīng)為%～%。耐用性配制異煙酸和異煙肼混合溶液，按下列條件改變方法，穩(wěn)定后按順序進樣，計算異煙肼的理論塔板數(shù)，混合溶液中異煙酸和異煙肼的相對保留時間RRT。改變流速為min和min。改變柱溫為23℃和27改變流動相緩沖液與甲醇配比為83:17和87:13。同一填料不同色譜柱。理論塔板數(shù)大于4000，拖尾因子在～之間,分離度R＞，相對保留時間RRT偏差絕對值不大于20％。03程序及文件液相色譜儀校正規(guī)程液相色譜儀操作規(guī)程分析天平校正規(guī)程分析天平操作規(guī)程符合要求符合要求符合要求符合要求

驗證前準備：人員培訓(xùn)：培訓(xùn)人姓名培訓(xùn)時間培訓(xùn)內(nèi)容儀器設(shè)備、標準品和試劑：儀器設(shè)備儀器名稱型號編號校驗有效期高效液相色譜儀MODEL200標準品和試劑名稱級別廠家批號樣品名稱廠家批號

驗證過程：色譜條件色譜條件色譜柱：agilentODS-2長度：250cm，內(nèi)徑：，填料C18，填料粒度：5μm檢測波長：262nm，帶寬30柱溫：25進樣量：20μl流速：min流動相A：l磷酸氫二鈉溶液（用磷酸調(diào)pH至），流動相B：甲醇A:B=85:15停止時間：12min系統(tǒng)精密度溶液配制系統(tǒng)精密度溶液：取異煙肼10mg，置100ml容量瓶中，精密稱量，用水溶解并稀釋至刻度。驗證過程及結(jié)果系統(tǒng)精密度溶液連續(xù)進樣6次，記錄其異煙肼峰面積、保留時間?？山邮軜藴剩寒悷熾路迕娣eRSD≤%,保留時間RSD≤%。序號保留時間(min)峰面積123456RSD%結(jié)論：重現(xiàn)性試驗（方法精密度）溶液配制對照溶液：取異煙肼工作標準品10mg，精密稱量，置100ml容量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度。方法精密度溶液：取異煙肼樣品10mg置100ml容量瓶中，精密稱定，用水溶解并稀釋至刻度。用此方法配置同一批號的樣品溶液6份。驗證程序及結(jié)果工作標準品溶液進2針，樣品溶液各進2針。記錄異煙肼峰面積，計算樣品含量。可接受標準：異煙肼含量的RSD≤%。樣品批號：稱樣量（mg）峰面積含量％RSD％12平均值結(jié)論：線性和范圍溶液配制a供試品溶液：取異煙肼50mg，置100ml容量瓶中，精密稱量，用水溶解并稀釋至刻度，混勻，即得。線性點溶液：精密移取a供試品溶液5ml、2ml、1ml、分別置10ml容量瓶中，用水稀釋至刻度，得到濃度約為50ug/ml（d供試品溶液）、100ug/ml（c供試品溶液）、250ug/ml（b供試品溶液）、500ug/ml（a供試品溶液）的線性點溶液，再精密移取1mlb供試品溶液1ml置100ml容量瓶中，用水稀釋至刻度，得到濃度約為ml（e供試品溶液）。驗證程序及結(jié)果按色譜條件分別對線性點溶液進行分析，每個溶液進樣1次。以濃度為X軸，主峰峰面積平均值為Y軸，畫出線性圖，求出回歸方程，計算線性相關(guān)系數(shù)R。可接受標準：R≥項目（X1）（X2）（X3）X4）（X5）線性點溶液濃度(ug/ml)異煙肼峰面積線性范圍（ug/ml）線性回歸方程相關(guān)系數(shù)R結(jié)論：準確度溶液配制對照溶液：取異煙肼10mg，置100ml容量瓶中，精密稱量，用水溶解并稀釋至刻度，混勻，即得。準確度溶液：以對照溶液濃度為100%，配置80%、100%和120%濃度的準確度溶液。即分別取同一批異煙肼樣品8mg、10mg、12mg至100ml容量瓶中，精密稱量，用水溶解并稀釋至刻度。每個濃度的準確度溶液配制3份。驗證程序及結(jié)果按照色譜條件分別對對照溶液和準確度溶液進行分析，每個溶液各進2針，按外標法計算準確度溶液中異煙肼含量，計算其回收率?？山邮軜藴剩涸摱糠椒ǖ幕厥章蕬?yīng)為%～%?；厥章蔙SD≤%。樣品批號相應(yīng)含量稱樣量（mg）峰面積實測量（mg）回收率％12平均值80％100％120％結(jié)論：耐用性溶液配制混合溶液：精密稱取10mg異煙酸和10mg異煙肼樣品置100ml容量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度，混勻，即得。驗證過程及結(jié)果按下列條件改變方法，原條件溶液和改變色譜條件的順序進樣，計算異煙肼的理論塔板數(shù),拖尾因子。計算相對保留時間RRT偏差絕對值。改變柱溫為23℃和改變流速為min和min。改變l磷酸氫二鈉溶液(磷酸調(diào)pH至與甲醇配比為87:13和83:17。選用同一填料的兩個不同色譜柱比較可接受標準：理論塔板數(shù)大于4000，拖尾因子在～之間。分離度R＞，相對保留時間RRT偏差絕對值不大于20％。條件異煙肼理論塔板數(shù)異煙肼拖尾因子原條件aminminb227c87:1383:17d色譜柱1色譜柱2條件異煙酸RRT偏差絕對值％原條件a2327bminminc87:1383:17d色譜柱1色譜柱2結(jié)論：驗證結(jié)論：驗證結(jié)果見表驗證項目可接受標準驗證結(jié)果判定系統(tǒng)精密度異煙肼的峰面積及保留時間的RSD％均不大于％。異煙肼理論塔板數(shù)大于4000。方法精密度RSD％不大于