藥物分析維生素類藥物的分析

關(guān)于藥物分析維生素類藥物的分析第1頁(yè)，共36頁(yè)，2022年，5月20日，4點(diǎn)3分，星期六§9.1

維生素A的分析一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)VA含有共軛多烯醇側(cè)鏈的環(huán)已稀(有多種異構(gòu)體)R=HVA醇VA1R=—COCH3VA醋酸酯R=—COC15H31VA棕櫚酸酯VA為油狀物,存在于魚(yú)肝臟中,稱魚(yú)肝油,不溶于水.有人工合成的.第2頁(yè)，共36頁(yè)，2022年，5月20日，4點(diǎn)3分，星期六國(guó)際單位IU=0.344微克維生素Ａ醋酸酯；IU＝0.300微克維生素Ａ醇換算：1g維生素Ａ醋酸酯相當(dāng)于：1g維生素Ａ醇相當(dāng)于：第3頁(yè)，共36頁(yè)，2022年，5月20日，4點(diǎn)3分，星期六VA1:VA2:(去氫VA)VA3:(去水VA)第4頁(yè)，共36頁(yè)，2022年，5月20日，4點(diǎn)3分，星期六二、鑒別試驗(yàn)1、三氯化銻反應(yīng)

VA在飽和無(wú)水三氯化銻的無(wú)醇三氯甲烷溶液中顯藍(lán)色，漸變成紫紅色。（P245）注意:在水中三氯化銻水解,必須在絕對(duì)無(wú)水中進(jìn)行!2、紫外吸收光譜VA的無(wú)水乙醇溶液在326nm有最大吸收。VA(5個(gè)共軛雙鍵)在鹽酸中加熱,生成6個(gè)共軛雙鍵的去水VAVA在326nm有一個(gè)吸收峰去水VA在350-390nm有三個(gè)吸收峰（P247）第5頁(yè)，共36頁(yè)，2022年，5月20日，4點(diǎn)3分，星期六3、TLC：

確認(rèn)醇或酯，是醋酸酯或其他酸酯，例：VA和其標(biāo)準(zhǔn)品用環(huán)己烷溶解展開(kāi)劑：環(huán)己烷—乙醚（80：20）板：硅膠G顯色：磷鉬酸為顯色劑Rf：VA醇0.１VA醋酸酯0.4５VA棕櫚酸酯0.7第6頁(yè)，共36頁(yè)，2022年，5月20日，4點(diǎn)3分，星期六三．含量測(cè)定維生素Ａ中含有稀釋用油和其它雜質(zhì)，所測(cè)得的吸光度不是維生素Ａ獨(dú)有的吸收．對(duì)測(cè)定有影響。即在三個(gè)波長(zhǎng)處測(cè)得吸光度，進(jìn)行校正后再計(jì)算。稱為三點(diǎn)校正法原理：吸光度是維生素A和雜質(zhì)吸收之和，測(cè)得A值需校正。（最大吸收為328nm)１．紫外分光光度法－三點(diǎn)校正法第7頁(yè)，共36頁(yè)，2022年，5月20日，4點(diǎn)3分，星期六測(cè)定波長(zhǎng)吸光度吸光度比值吸光度比值差計(jì)算值規(guī)定值300

0.555

316

0.907

(326)

328

1.000

(329)

340

0.811

360

0.299

第8頁(yè)，共36頁(yè)，2022年，5月20日，4點(diǎn)3分，星期六方法:(1)分別測(cè)300、316、328、340、360nm吸光度，求出各波長(zhǎng)吸光度與328nm吸光度比值，各比值與P249表中數(shù)據(jù)對(duì)比；(2)若比值不超過(guò)±0.02可直接用測(cè)得A值；(3)若比值超出±0.02則A需校正：A（校正）=3.52(2A328-A316-A340)(4)計(jì)算：A:吸光度;C:濃度(g/mL);L:溶液厚度(cm);第9頁(yè)，共36頁(yè)，2022年，5月20日，4點(diǎn)3分，星期六求效價(jià)：每g供試呂中所含維生素A的國(guó)際單位求百分含量：A：吸光度（校正后的吸光度）D：稀釋倍數(shù)；1900：以環(huán)已烷為溶劑時(shí)的換算因子；L：比色池厚度；W：取樣量；第10頁(yè)，共36頁(yè)，2022年，5月20日，4點(diǎn)3分，星期六§9.2維生素B1的分析一、化學(xué)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)維生素B1:氨基嘧啶環(huán)和噻唑環(huán)通過(guò)亞甲基連接成的季銨類化合物.白色結(jié)晶,溶于水,顯酸性.學(xué)名:氯化4-甲基-3-[（2-甲基-4-氨基-5-嘧啶基）甲基]-5-（2-羥乙基）噻唑的鹽酸鹽俗名:鹽酸硫胺第11頁(yè)，共36頁(yè)，2022年，5月20日，4點(diǎn)3分，星期六二.鑒別試驗(yàn)1.硫色素?zé)晒夥磻?yīng)：維生素B1在堿性溶液中，與鐵氰化鉀氧化成硫色素，在正丁醇中顯藍(lán)色熒光VB1專屬反應(yīng)，用于鑒別和含量測(cè)定。第12頁(yè)，共36頁(yè)，2022年，5月20日，4點(diǎn)3分，星期六

2、沉淀反應(yīng)：碘化汞鉀-------淡黃色沉淀碘--------紅色沉淀VB1硅鎢酸--------白色沉淀苦味酸--------扇形白色結(jié)晶

第13頁(yè)，共36頁(yè)，2022年，5月20日，4點(diǎn)3分，星期六三.含量測(cè)定1、非水溶液滴定法：（Ch.P收錄）VB1分子中含有已成鹽的伯胺和季銨基團(tuán)，在非水溶液中，在醋酸汞存在下，均可被高氯酸滴定。溶劑：冰醋酸/醋酸汞指示劑：喹哪定紅-亞甲藍(lán)混合指示液滴定劑：高氯酸（0.1mol/L)終點(diǎn)：天藍(lán)色摩爾比：VB1：高氯酸=1：2VB1摩爾質(zhì)量=337.27滴定度T=0.1×(1/2)×337.27=16.86mg/ml第14頁(yè)，共36頁(yè)，2022年，5月20日，4點(diǎn)3分，星期六2、紫外UV（中國(guó)藥典）VB1片：方法與片劑含量測(cè)定相同(246nm)VB1注射液：與液劑相同。（246nm)第15頁(yè)，共36頁(yè)，2022年，5月20日，4點(diǎn)3分，星期六§9.3

維生素C的分析一、化學(xué)結(jié)構(gòu)

1、具有內(nèi)酯結(jié)構(gòu)。堿性下可水解。2、

具有烯二醇基。還原性，能夠被氧化成去氫抗壞血酸。3、結(jié)構(gòu)與糖類相似，具有糖性質(zhì)。溶于水，酸性，旋光性。第16頁(yè)，共36頁(yè)，2022年，5月20日，4點(diǎn)3分，星期六D(-)-異抗壞血酸L(+)-異抗壞血酸L(+)-抗壞血酸D(-)-抗壞血酸4、具有4種光學(xué)異構(gòu)體。其中生理活性最強(qiáng)的是L（+）-抗壞血酸第17頁(yè)，共36頁(yè)，2022年，5月20日，4點(diǎn)3分，星期六

二、鑒別試驗(yàn)

1、硝酸銀反應(yīng)（中國(guó)藥典）烯二醇基具有還原性，可被硝酸銀氧化成去氫抗血酸，同時(shí)生成黑色的銀。2、與2，6-二氯靛酚（染料）反應(yīng)VC被還原為無(wú)色的酚亞胺第18頁(yè)，共36頁(yè)，2022年，5月20日，4點(diǎn)3分，星期六3.糖的性質(zhì)VC的結(jié)構(gòu)很象糖結(jié)構(gòu)，具有糖的性質(zhì)VC+三氯化醋酸或鹽酸----水解----脫羧------戊糖----失水----糠醛-----（加吡咯，加熱）----藍(lán)色4、紫外分光光度法（英國(guó)藥典）VC在鹽酸溶液中，243nm最大吸收。第19頁(yè)，共36頁(yè)，2022年，5月20日，4點(diǎn)3分，星期六三．含量測(cè)定

1.

碘量法（Ch.P收錄）VC在醋酸條件下，被碘定量氧化。

加入淀粉指示劑，藍(lán)色不褪為碘過(guò)量（30S內(nèi)）。由消耗碘量計(jì)算含量。第20頁(yè)，共36頁(yè)，2022年，5月20日，4點(diǎn)3分，星期六

操作：（P265）

終點(diǎn)顏色：無(wú)色→藍(lán)色1ml0.1mol/L碘液，1ml8.806mgC6H8O6加入新沸放冷的水為了減少水中溶解氧的影響。酸性：使VC在空氣中氧化速度減慢。VC注射液中常加有亞硫酸鹽如NaHSO3作為抗氧劑.第21頁(yè)，共36頁(yè)，2022年，5月20日，4點(diǎn)3分，星期六終點(diǎn)的顏色是溶液由無(wú)色變?yōu)榧t色。氧化型（紅色）還原型（無(wú)色）++2、2,6-二氯靛酚滴定法酸性下直接用2,6-二氯靛酚滴定，用滴定劑自身的顏色變化指示終點(diǎn)，不需要另外的指示劑。第22頁(yè)，共36頁(yè)，2022年，5月20日，4點(diǎn)3分，星期六3、高效液相色譜法HPLC

P276第23頁(yè)，共36頁(yè)，2022年，5月20日，4點(diǎn)3分，星期六§9.4維生素DVD是一類抗佝僂病維生素的總稱,有片劑,注射劑,膠囊等.一、結(jié)構(gòu)（P268）開(kāi)環(huán)麥角甾烯醇，又稱麥角骨化酸。VD2，VD3無(wú)色針狀結(jié)晶，旋光性，不溶于水。第24頁(yè)，共36頁(yè)，2022年，5月20日，4點(diǎn)3分，星期六二、鑒別試驗(yàn)1、顯色反應(yīng)

VD2醋酐+濃硫酸黃--紅--紫--綠VD3醋酐+濃硫酸黃--紅—紫/藍(lán)綠—綠VD2或VD3三氯化銻橙紅色---粉紅色2、維生素D2和D3的區(qū)分VD2乙醇+硫酸紅色VD3乙醇+硫酸黃色第25頁(yè)，共36頁(yè)，2022年，5月20日，4點(diǎn)3分，星期六三、含量測(cè)定高效液相色譜法，藥典收錄。第26頁(yè)，共36頁(yè)，2022年，5月20日，4點(diǎn)3分，星期六名稱：消旋α-生育酚醋酸酯（α-異構(gòu)體生理活性最強(qiáng)）母核：苯駢二氫吡喃衍生物，苯環(huán)上有一乙?；姆恿u基側(cè)鏈：脂肪烷烴性質(zhì)：不溶于水，油狀，微黃色液體?！?.5維生素E（稱為生育酚）一、結(jié)構(gòu)：苯并二氫吡喃醇衍生物，第27頁(yè)，共36頁(yè)，2022年，5月20日，4點(diǎn)3分，星期六二、鑒別試驗(yàn)1、硝酸反應(yīng)：（藥典收錄）VE在硝酸條件下,水解生成生育酚.生育酚被硝酸氧化為鄰醌結(jié)構(gòu)的生育紅.VE+HNO3----水解生成生育酚-----生育紅（橙紅色）2、水解后氧化反應(yīng)：

VE在堿性條件下水解，得α—生育酚，在聯(lián)吡啶和三氯化鐵試液的作用下，反應(yīng)產(chǎn)生血紅色配離子。VE+KOH–α生育酚（加入三氯化鐵）--生育醌+鐵配合物（血紅色）第28頁(yè)，共36頁(yè)，2022年，5月20日，4點(diǎn)3分，星期六3、UV吸收：VE的0.01%無(wú)水乙醇液：λmax=284nmλmin=254nm4、紅外光譜（中國(guó)藥典）三、雜質(zhì)檢查檢查游離生育酚:ChP2005鈰量法：用Ce(SO4)2(0.01mol/L)滴定，指示劑：二苯胺終點(diǎn)：亮黃→灰紫消耗Ce(SO4)2液不得超過(guò)1.0ml。第29頁(yè)，共36頁(yè)，2022年，5月20日，4點(diǎn)3分，星期六

1、鈰量法（中國(guó)藥典）原理：VE用硫酸加熱回流，水解成生育酚，用硫酸鈰定量地氧化為對(duì)一生育醌，過(guò)量的硫酸鈰氧化二苯胺指示劑而指示滴定終點(diǎn)。終點(diǎn)：亮黃→灰紫，需作空白試驗(yàn)。四、含量測(cè)定2、氣相色譜法：Chp20053、高效液相色譜法日本藥局方（JP13）第30頁(yè)，共36頁(yè)，2022年，5月20日，4點(diǎn)3分，星期六練習(xí)題：維生素AD膠丸中維生素A的含量測(cè)定已知：平均膠丸重為0.0815g維生素A的標(biāo)示量為10000IU/丸取樣：測(cè)定數(shù)據(jù)如下表，求：維生素A的標(biāo)示百分含量。波長(zhǎng)吸收度比值規(guī)定值比值差3000.3740.5740.5550.0193160.5840.8960.907-0.013280.6521103400.5340.8190.8110.0083600.2110.3390.2990.04第31頁(yè)，共36頁(yè)，2022年，5月20日，4點(diǎn)3分，星期六首先要求樣品的。第32頁(yè)，共36頁(yè)，2022年，5月20日，4點(diǎn)3分，星期六計(jì)算吸收度比值和吸收度比值差。（填于上表）由此可知，應(yīng)該用測(cè)得的328nm處的吸收度計(jì)算。然后計(jì)算校正吸收度與未校正吸收度相差的百分?jǐn)?shù)由結(jié)果知，需計(jì)算校正吸收度。第33頁(yè)，共36頁(yè)，2022年，5月20日，4點(diǎn)3分，星期六維生素A的標(biāo)示含量第34頁(yè)，共36頁(yè)，2022年，5月20日，4點(diǎn)3分，星期六維生素A醋酸酯膠丸含量測(cè)定:取內(nèi)容物39.1mg,加環(huán)己烷溶解并稀釋成100ml，在下列五個(gè)波長(zhǎng)處測(cè)得吸收度A值如