實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)骨髓細(xì)胞學(xué)檢測(cè)

骨髓細(xì)胞學(xué)檢測(cè)溫州醫(yī)科大學(xué)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)院溫州醫(yī)科大學(xué)附屬一醫(yī)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心

林曉梅第1頁，共58頁。上課內(nèi)容（P266-279）骨髓細(xì)胞學(xué)檢測(cè)的臨床應(yīng)用骨髓細(xì)胞學(xué)檢測(cè)血細(xì)胞的生成、發(fā)育規(guī)律及形態(tài)特點(diǎn)血細(xì)胞化學(xué)染色細(xì)胞免疫分型細(xì)胞遺傳學(xué)分析第2頁，共58頁。一、骨髓細(xì)胞學(xué)檢測(cè)的臨床應(yīng)用

臨床作用適應(yīng)癥禁忌癥第3頁，共58頁。1、骨檢的臨床作用

疾病診斷肯定性診斷符合性診斷懷疑性診斷排除性診斷形態(tài)學(xué)描述稀釋骨髓象觀察療效緩解改善退步復(fù)發(fā)第4頁，共58頁。2、骨檢的適應(yīng)證不明原因外周血細(xì)胞計(jì)數(shù)或和分類異常不明原因的發(fā)燒、肝、脾、淋巴結(jié)腫大黃疸、骨痛、骨質(zhì)破壞、蛋白尿、腎功能異常、血沉明顯增加等第5頁，共58頁。2、骨檢的適應(yīng)證血液病的定期復(fù)查和療效觀察了解骨髓造血功能其它檢查：骨髓活檢細(xì)胞免疫學(xué)分型染色體核型檢查分析病原學(xué)檢查造血祖細(xì)胞培養(yǎng)

第6頁，共58頁。3、骨檢的禁忌證

嚴(yán)重出血的疾病禁用晚期妊娠的孕婦慎用

第7頁，共58頁。骨髓片的選擇低倍鏡檢查油鏡檢查骨髓象的分析與報(bào)告二、骨髓細(xì)胞學(xué)檢測(cè)的方法和內(nèi)容第8頁，共58頁。1）涂片（肉眼觀察）1、骨髓片的選擇厚薄均勻頭體尾分明兩邊留有空隙尾呈鋸齒狀頭部要留有約2cm的空間第9頁，共58頁。第10頁，共58頁。第11頁，共58頁。第12頁，共58頁。2）取材抽吸骨髓液時(shí)有特殊的疼痛感抽出的骨髓液中有黃色小粒（骨髓小粒）顯微鏡下有骨髓特有的細(xì)胞：幼紅、幼粒、巨核細(xì)胞、漿細(xì)胞等骨髓桿/分葉、有核細(xì)胞數(shù)大于外周血1、骨髓片的選擇第13頁，共58頁。3）染色細(xì)胞核、質(zhì)顏色分明，顆粒清楚，沒有染料沉渣1、骨髓片的選擇第14頁，共58頁。1）確定取材、涂片和染色是否滿意2）估計(jì)骨髓有核細(xì)胞增生程度3）巨核細(xì)胞計(jì)數(shù)4）觀察有無異常細(xì)胞2、低倍鏡下檢查第15頁，共58頁。骨髓有核細(xì)胞增生程度增生程度成熟紅細(xì)胞：有核細(xì)胞有核細(xì)胞均數(shù)/高倍鏡視野常見病例增生極度活躍1：1>100各類型白血病增生明顯活躍10：150～100各類型白血病、增生性貧血、ITP增生活躍20：120～50正常骨髓象、增生性貧血增生減低50：15～10再障、粒缺或粒細(xì)胞減少癥增生極度減低200：1<5再障第16頁，共58頁。增生極度活躍第17頁，共58頁。增生明顯活躍第18頁，共58頁。增生活躍第19頁，共58頁。增生減低第20頁，共58頁。增生極度減低第21頁，共58頁。有核細(xì)胞分類計(jì)數(shù)：200～500個(gè)細(xì)胞，按細(xì)胞的不同系列和不同發(fā)育階段分別計(jì)數(shù)，計(jì)算各階段細(xì)胞所占百分比。觀察細(xì)胞形態(tài)：分類計(jì)數(shù)同時(shí)觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常，有無異常細(xì)胞、寄生蟲等。3、油鏡檢查第22頁，共58頁。1）病人的基本信息2）骨髓的取材、涂片、染色情況3）骨髓增生程度、粒紅比值和骨髓各期細(xì)胞結(jié)果4）骨髓象特征的描述5）血象特征6）細(xì)胞化學(xué)染色特征4、骨髓象的分析和報(bào)告第23頁，共58頁。第24頁，共58頁。

血細(xì)胞的生成血細(xì)胞的發(fā)育規(guī)律各系血細(xì)胞的形態(tài)特點(diǎn)

三、血細(xì)胞的生成、發(fā)育規(guī)律

及形態(tài)特點(diǎn)第25頁，共58頁。

造血干細(xì)胞祖細(xì)胞原始細(xì)胞幼稚細(xì)胞成熟細(xì)胞

1.血細(xì)胞的生成

早幼C中幼C晚幼C骨髓：是人體最大器官之一，主要生理是進(jìn)行造血活動(dòng)，骨髓細(xì)胞主要是發(fā)育過程中的血細(xì)胞。第26頁，共58頁。血細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育圖

第27頁，共58頁。胞體大小大小胞核大小大小核仁有無染色質(zhì)細(xì)致粗核膜不明顯明顯核形圓形橢圓形腎形桿狀分葉2.血細(xì)胞的發(fā)育規(guī)律

第28頁，共58頁。胞漿量少多嗜堿性強(qiáng)弱、消失顆粒無有

(非特異性特異性)核漿比例

大小

2.血細(xì)胞的發(fā)育規(guī)律

第29頁，共58頁。第30頁，共58頁。粒細(xì)胞系列

原粒早幼粒中幼粒晚幼粒桿狀核粒分葉核粒第31頁，共58頁。原始細(xì)胞形態(tài)學(xué)共同特點(diǎn)胞漿嗜堿性胞漿常無顆粒核染色質(zhì)細(xì)致核仁有、清楚高核漿比第32頁，共58頁。

紅細(xì)胞系列粒細(xì)胞系列淋巴細(xì)胞系列漿細(xì)胞系列單核細(xì)胞系列巨核細(xì)胞系列3.血細(xì)胞的正常形態(tài)學(xué)特征第33頁，共58頁。正常細(xì)胞形態(tài)觀察內(nèi)容：1.大小、形態(tài)。3.核：位置、大小、形態(tài)、染色質(zhì)。2.胞漿：量、著色、包含物。4.核仁：大小、多少、清晰度。第34頁，共58頁。正常細(xì)胞形態(tài)觀察內(nèi)容：1.大小、形態(tài)。3.核：位置、大小、形態(tài)、染色質(zhì)。2.胞漿：量、著色、包含物。4.核仁：大小、多少、清晰度。第35頁，共58頁。紅細(xì)胞系列

胞體、胞核圓形胞漿有明顯的變化規(guī)律胞漿中無顆粒第36頁，共58頁。粒細(xì)胞系列

胞體圓形顆粒和胞核有明顯的變化規(guī)律第37頁，共58頁。淋巴細(xì)胞系列

胞體、胞核小胞漿量少第38頁，共58頁。

漿細(xì)胞系列

胞核圓形、偏位胞漿豐富、深蘭色、核旁淡染區(qū)、泡沫漿第39頁，共58頁。單核細(xì)胞系列胞體、胞核較大且不規(guī)則胞漿較豐富、灰蘭色胞核染色質(zhì)疏松第40頁，共58頁。巨核細(xì)胞系列胞體、胞核巨大且不規(guī)則胞漿量、顆粒極豐富第41頁，共58頁。

是一種以細(xì)胞形態(tài)學(xué)為基礎(chǔ)，結(jié)合運(yùn)用化學(xué)反應(yīng)的原理，對(duì)血細(xì)胞內(nèi)的各種化學(xué)物質(zhì)，作定性、定位、半定量分析的方法四、血細(xì)胞化學(xué)染色血細(xì)胞化學(xué)染色的定義

第42頁，共58頁。

輔助疾病的診斷和細(xì)胞系列的判斷不同細(xì)胞系列，其所含的化學(xué)物質(zhì)各有不同血細(xì)胞在病理情況下，其化學(xué)物質(zhì)成分及含量會(huì)發(fā)生改變血細(xì)胞化學(xué)染色的作用

四、血細(xì)胞化學(xué)染色第43頁，共58頁。過氧化物酶染色（POX）中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色（NAP）酯酶染色鐵染色四、血細(xì)胞化學(xué)染色血細(xì)胞化學(xué)染色的方法

第44頁，共58頁。

粒細(xì)胞及部分的單核細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的顆粒含有過氧化酶，此染色用于急性白血病類型的鑒別診斷(急粒和急淋)急?！獜?qiáng)陽性急單——陰性、弱陽性急淋——陰性1.過氧化物酶（POX）染色第45頁，共58頁。

第46頁，共58頁。

NAP主要存在于成熟階段的中性粒細(xì)胞報(bào)告形式為陽性率及積分增加：細(xì)菌性感染、類白血病反應(yīng)、再障、急淋、淋巴瘤減少：慢粒、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿、急粒、惡組2.中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶(NAP)染色第47頁，共58頁。

第48頁，共58頁。

輔助鑒別急性白血病細(xì)胞類型（急粒和急單）氯化醋酸AS-D萘酚酯酶（AS-DNCE）:特異性酯酶（SE）急粒呈陽性（M3—強(qiáng)陽性）α-醋酸萘酚酯酶（α-NAE）：非特異性酯酶(NSE)急單呈陽性或強(qiáng)陽性，加NaF抑制急粒呈陰性或弱陽性，加NaF不抑制急淋呈陰性3.酯酶染色第49頁，共58頁。第50頁，共58頁。M5

第51頁，共58頁。

骨髓鐵分為細(xì)胞外鐵、內(nèi)鐵減少：缺鐵性貧血增加：鐵粒幼紅細(xì)胞性貧血

4.鐵染色

第52頁，共58頁。骨髓外鐵染色第53頁，共58頁。骨髓內(nèi)鐵染色第54頁，共58頁。急性白血病常見細(xì)胞化學(xué)染色

急淋急粒急單POX-+++-~+NAP↑↑↓↓?~↓SE-++~+++-~+NSE--~++++~+++NSE+NaF--~+++第55頁，共58頁。總結(jié)掌握：血細(xì)胞的生成發(fā)育規(guī)律、常用血細(xì)胞化學(xué)染色在不同血液系統(tǒng)疾病中的鑒別診斷意義熟悉：骨髓穿刺的適應(yīng)證和禁忌證、骨髓增生程度、骨髓象的分析與報(bào)告了解：骨髓細(xì)胞學(xué)檢測(cè)的臨床應(yīng)用、血細(xì)胞的生成和形態(tài)學(xué)特征第56頁，共58頁。ThankYouforYourAttention第57頁，共58頁。內(nèi)容梗概骨髓細(xì)胞學(xué)檢測(cè)。上課內(nèi)容（P266-279）。退步復(fù)發(fā)。其它檢查：骨髓活檢。1）涂片（肉眼觀察）。抽出的骨髓液中有黃色小粒（骨髓小粒）。細(xì)胞核、質(zhì)顏色分明，顆粒清楚，沒有染料沉渣。1：1。增生減低。增生極度減低。3）骨髓增生程度、粒紅比值和骨髓各期細(xì)胞結(jié)果。1.血細(xì)胞的生成。骨髓：是人體最大器官之一，主要生理是進(jìn)行造血活動(dòng)，骨髓細(xì)胞主要是發(fā)育過程中的血細(xì)胞。(非特異性特異性)。四、血細(xì)胞化學(xué)染色。粒細(xì)胞及部分的單核細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的顆粒含有過