瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)課件

瓊脂糖凝膠電泳甘肅中醫(yī)藥大學(xué)瓊脂糖凝膠電泳甘肅中醫(yī)藥大學(xué)2電泳技術(shù)帶電顆粒在電場(chǎng)作用下，向著與其電性相反的電極移動(dòng)，稱為電泳(electrophoresis,EP)。利用帶電粒子在電場(chǎng)中移動(dòng)速度不同而達(dá)到分離的技術(shù)稱為電泳技術(shù)。1809年俄國(guó)物理學(xué)家Peнce首先發(fā)現(xiàn)了電泳現(xiàn)象，但直到1937年瑞典學(xué)者A.W.K.蒂塞利烏斯設(shè)計(jì)制造了移動(dòng)界面電泳儀，分離了馬血清白蛋白的3種球蛋白，創(chuàng)建了電泳技術(shù)。2電泳技術(shù)帶電顆粒在電場(chǎng)作用下，向著與其電性相反的電極移動(dòng)，一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.掌握電泳的基本原理;2.熟悉瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)；

3.了解凝膠成像電泳圖譜。一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.掌握電泳的基本原理;二、實(shí)驗(yàn)原理

瓊脂糖是一種天然聚合長(zhǎng)鏈狀分子，可以形成具有剛性的濾孔，凝膠孔徑的大小決定于瓊脂糖的濃度。DNA分子在堿性緩沖液中帶負(fù)電荷，在外加電場(chǎng)作用下向正極泳動(dòng)。DNA分子在瓊脂糖凝膠中泳動(dòng)時(shí)，有電荷效應(yīng)與分子篩效應(yīng)。不同DNA的分子量大小及構(gòu)型不同，電泳時(shí)的泳動(dòng)率就不同，從而分出不同的區(qū)帶。二、實(shí)驗(yàn)原理

瓊脂糖是一種天然聚合長(zhǎng)鏈狀分子，可以形成具有剛M1234PCR產(chǎn)物的瓊脂糖凝膠電泳M12核酸電泳儀，電泳槽，電子天平，移液器，槍頭，微波爐，紫外透射檢測(cè)儀等。瓊脂糖，溴化乙錠（EB），6×加樣緩沖液三、實(shí)驗(yàn)材料、器具及藥品核酸三、實(shí)驗(yàn)材料、器具及藥品四、實(shí)驗(yàn)步驟1

制膠：

60ml(0.5×TBE)+0.72g瓊脂糖三角瓶(1/3)煮膠溶解，冷卻至60℃(不燙手)，加EB，倒板(4-6mm)，室溫下充分凝固，豎直拔下梳子

四、實(shí)驗(yàn)步驟1制膠：瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)課件2

點(diǎn)樣：3電泳：電壓3-5V/cm，約80-90V，注意電極方向4觀察：紫外透射分析儀下觀察，時(shí)間不要太久2點(diǎn)樣：瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)課件

圖1基因組DNA1%瓊脂凝膠電泳圖

圖2

PCR產(chǎn)物瓊脂凝膠電泳圖

(1、2、3、4為PCR產(chǎn)物，M為DL2000Marker)圖2PCR產(chǎn)物瓊脂凝膠電泳圖Thankyou！Thankyou！人有了知識(shí)，就會(huì)具備各種分析能力，明辨是非的能力。所以我們要勤懇讀書，廣泛閱讀，古人說“書中自有黃金屋?！蓖ㄟ^閱讀科技書籍，我們能豐富知識(shí)，培養(yǎng)邏輯思維能力；通過閱讀文學(xué)作品，我們能提高文學(xué)鑒賞水平，培養(yǎng)文學(xué)情趣；通過閱讀報(bào)刊，我們能增長(zhǎng)見識(shí)，擴(kuò)大自己的知識(shí)面。有許多書籍還能培養(yǎng)我們的道德情操，給我們巨大的精神力量，鼓舞我們前進(jìn)。人有了知識(shí)，就會(huì)具備各種分析能力，瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)課件瓊脂糖凝膠電泳甘肅中醫(yī)藥大學(xué)瓊脂糖凝膠電泳甘肅中醫(yī)藥大學(xué)17電泳技術(shù)帶電顆粒在電場(chǎng)作用下，向著與其電性相反的電極移動(dòng)，稱為電泳(electrophoresis,EP)。利用帶電粒子在電場(chǎng)中移動(dòng)速度不同而達(dá)到分離的技術(shù)稱為電泳技術(shù)。1809年俄國(guó)物理學(xué)家Peнce首先發(fā)現(xiàn)了電泳現(xiàn)象，但直到1937年瑞典學(xué)者A.W.K.蒂塞利烏斯設(shè)計(jì)制造了移動(dòng)界面電泳儀，分離了馬血清白蛋白的3種球蛋白，創(chuàng)建了電泳技術(shù)。2電泳技術(shù)帶電顆粒在電場(chǎng)作用下，向著與其電性相反的電極移動(dòng)，一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.掌握電泳的基本原理;2.熟悉瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)；

3.了解凝膠成像電泳圖譜。一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.掌握電泳的基本原理;二、實(shí)驗(yàn)原理

瓊脂糖是一種天然聚合長(zhǎng)鏈狀分子，可以形成具有剛性的濾孔，凝膠孔徑的大小決定于瓊脂糖的濃度。DNA分子在堿性緩沖液中帶負(fù)電荷，在外加電場(chǎng)作用下向正極泳動(dòng)。DNA分子在瓊脂糖凝膠中泳動(dòng)時(shí)，有電荷效應(yīng)與分子篩效應(yīng)。不同DNA的分子量大小及構(gòu)型不同，電泳時(shí)的泳動(dòng)率就不同，從而分出不同的區(qū)帶。二、實(shí)驗(yàn)原理

瓊脂糖是一種天然聚合長(zhǎng)鏈狀分子，可以形成具有剛M1234PCR產(chǎn)物的瓊脂糖凝膠電泳M12核酸電泳儀，電泳槽，電子天平，移液器，槍頭，微波爐，紫外透射檢測(cè)儀等。瓊脂糖，溴化乙錠（EB），6×加樣緩沖液三、實(shí)驗(yàn)材料、器具及藥品核酸三、實(shí)驗(yàn)材料、器具及藥品四、實(shí)驗(yàn)步驟1

制膠：

60ml(0.5×TBE)+0.72g瓊脂糖三角瓶(1/3)煮膠溶解，冷卻至60℃(不燙手)，加EB，倒板(4-6mm)，室溫下充分凝固，豎直拔下梳子

四、實(shí)驗(yàn)步驟1制膠：瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)課件2

點(diǎn)樣：3電泳：電壓3-5V/cm，約80-90V，注意電極方向4觀察：紫外透射分析儀下觀察，時(shí)間不要太久2點(diǎn)樣：瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)課件

圖1基因組DNA1%瓊脂凝膠電泳圖

圖2

PCR產(chǎn)物瓊脂凝膠電泳圖

(1、2、3、4為PCR產(chǎn)物，M為DL2000Marker)圖2PCR產(chǎn)物瓊脂凝膠電泳圖Thankyou！Thankyou！人有了知識(shí)，就會(huì)具備各種分析能力，明辨是非的能力。所以我們要勤懇讀書，廣泛閱讀，古人說“書中自有黃金屋。”通過閱讀科技書籍，我們能豐富知