最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件

抗生素知識(shí)培訓(xùn)抗生素知識(shí)培訓(xùn)1提綱

一、抗生素定義及分類二、微生物試驗(yàn)相關(guān)知識(shí)三、抗生素微生物檢定法提綱一、抗生素定義及分類2最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件3最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件4最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件5最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件6最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件7最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件8五、酰胺醇類包括甲砜霉素、氟苯尼考等。五、酰胺醇類9六、林可胺類主要有鹽酸林可霉素、鹽酸吡利霉素等。六、林可胺類10七、多肽類包括硫酸黏菌素、桿菌肽鋅、亞甲基水楊酸桿菌肽、恩拉霉素、維吉尼霉素、那西肽等。七、多肽類11八、多糖類包括阿維拉霉素、黃霉素等。八、多糖類12九、其他：

包括延胡索酸泰妙菌素、泰妙菌素、鹽酸沃尼妙林、賽地卡霉素等九、其他：13抗寄生蟲(chóng)藥：一、抗蠕蟲(chóng)藥（抗線蟲(chóng)藥）

包括伊維菌素、阿維菌素、乙酰氨基阿維菌素、多拉菌素、越霉素A、潮霉素B等。二、抗原蟲(chóng)藥（抗球蟲(chóng)藥）包括莫能菌素、莫能菌素鈉、鹽霉素鈉、拉沙洛西鈉、甲基鹽霉素、馬杜米星銨、海南霉素鈉、賽杜霉素鈉等?？辜纳x(chóng)藥：14第二部分：微生物試驗(yàn)相關(guān)知識(shí)一、名稱解釋1.消毒（disinfection）：殺死物體上或者環(huán)境中病原微生物并不一定殺死細(xì)菌芽胞或非病原微生物的方法。2.滅菌（sterilization）：殺死物體上所有微生物的方法（病原微生物，非病原微生物）。第二部分：微生物試驗(yàn)相關(guān)知識(shí)一、名稱解釋153.抑菌（bacteriostasis）：抑制人體內(nèi)部或外部細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的。4.防腐（antisepsis）：體外防止或抑制細(xì)菌繁殖的方法。5.無(wú)菌（asepsis）：不存在任何活菌。最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件166.無(wú)菌操作：防止細(xì)菌進(jìn)入人體或其他物品的操作技術(shù)。7.清潔：能減少微生物附著在無(wú)機(jī)物體表面的數(shù)量的方法。8.凈化：能顯著減少或破壞一定空間中微生物數(shù)量和生物活性的方法。6.無(wú)菌操作：防止細(xì)菌進(jìn)入人體或其他物品的操作技術(shù)。17二、消毒滅菌方法：

1.物理消毒滅菌法

2.化學(xué)消毒滅菌法

3.生物學(xué)消毒滅菌法二、消毒滅菌方法：181.物理消毒滅菌法

1）熱力滅菌法①干熱滅菌法②濕熱滅菌法焚燒巴氏消毒法燒灼煮沸法干烤高壓蒸氣滅菌法紅外線1.物理消毒滅菌法19濕熱滅菌效果好于干熱滅菌，原因如下：

①濕熱情況下菌體蛋白容易凝固;②濕熱穿透力比干熱大；③濕熱的蒸汽具有潛熱。濕熱滅菌效果好于干熱滅菌，原因如下：202）紫外線原理：作用于DNA，使一條DNA鏈上相鄰的兩個(gè)T共價(jià)結(jié)合形成二聚體，干擾DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄，導(dǎo)致細(xì)菌的變異和死亡。特點(diǎn)：①穿透力比較差。普通玻璃、紙張、塵埃等均可阻擋紫外線，因此它只適用于空氣消毒或物體表面的消毒。②紫外線可損傷皮膚、眼睛，使用時(shí)應(yīng)注意防護(hù)。2）紫外線213）濾過(guò)除菌法4）超聲波殺菌法5）干燥與低溫抑菌法最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件222.化學(xué)消毒滅菌法

化學(xué)消毒劑：迅速殺滅病原微生物的化學(xué)藥物。如：二氧化氯、戊二醛等。防腐劑：抑制病原微生物生長(zhǎng)繁殖的化學(xué)藥物。如：苯甲酸鈉、山梨酸鉀、脫氫乙酸鈉等?；瘜W(xué)治療劑：用于治療傳染病的化學(xué)藥物，可選擇性地作用于細(xì)菌代謝不同環(huán)節(jié)，殺滅或抑制病原菌，對(duì)宿主無(wú)毒或很低，如異煙肼、無(wú)環(huán)鳥(niǎo)苷等。2.化學(xué)消毒滅菌法233.生物學(xué)消毒滅菌法1）抗生素臨床治療2）細(xì)菌素為微生物代謝產(chǎn)物，破壞同源性細(xì)菌。3）噬菌體感染細(xì)菌、真菌、放線菌、螺旋體等微生物的病毒。4）中草藥3.生物學(xué)消毒滅菌法24三、影響消毒滅菌效果的因素

1.消毒劑的性質(zhì)、濃度與作用時(shí)間

2.微生物的種類與數(shù)量

3.溫度

4.酸堿度

5.有機(jī)物有機(jī)物可消耗消毒劑，降低消毒劑濃度三、影響消毒滅菌效果的因素25第三部分：抗生素微生物檢定法一、概述：抗生素微生物檢定法是利用抗生素在低微濃度下有選擇地抑制或殺死微生物的特點(diǎn)，以抗生素的抗菌活性為指標(biāo)，來(lái)衡量抗生素中的有效成分效力的方法。該方法是與臨床要求相符，更能確定抗生素的臨床醫(yī)療價(jià)值。第三部分：抗生素微生物檢定法一、概述：26

抗生素微生物檢定法分為稀釋法、濁度法和瓊脂擴(kuò)散法（管碟法），每種方法的試驗(yàn)操作差別較大，但相同之處都是將標(biāo)準(zhǔn)和供試品兩者的抗菌效力比較。稀釋法：通過(guò)觀察不同濃度的抗生素抑制試驗(yàn)菌的生長(zhǎng)情況，從而測(cè)定抗生素最低抑菌濃度。常用于新藥研制及臨床藥敏試驗(yàn)。抗生素微生物檢定法分為稀釋法、濁度法和瓊脂27

濁度法：采用分光光度法測(cè)定不同濃度的抗生素抑制試驗(yàn)菌的生長(zhǎng)情況（混濁程度），從而測(cè)定抗生素抑菌效力的方法。該方法國(guó)外使用較為普遍，而且快速（3-4小時(shí)），《中國(guó)獸藥典》（2010年版）收載了方法，如慶大霉素、鏈霉素、紅霉素、大觀霉素、安普霉素、泰樂(lè)菌素。

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瓊脂擴(kuò)散法(管碟法）：

是使用固體培養(yǎng)基，在培養(yǎng)基凝固前，將試驗(yàn)菌混進(jìn)去，采用一定的方法，將含有抗生素的物質(zhì)與含菌的培養(yǎng)基表面接觸。目前，國(guó)際上采用將抗生素加入到特定的小鋼管中，使小鋼管中的抗生素與培養(yǎng)基表面接觸，此方法稱為“管碟法”。經(jīng)過(guò)培養(yǎng)后，由于抗生素不斷向培養(yǎng)基中擴(kuò)散，凡抑菌濃度能到達(dá)之處，試驗(yàn)菌不能生長(zhǎng)，從而形成透明的抑菌范圍，此范圍一般都呈圓形，稱為“抑菌圈”。瓊脂擴(kuò)散法(管碟法）：29最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件30二、管碟法材料、儀器及試劑的準(zhǔn)備及基本要求

1、操作間：要求凈化級(jí)別達(dá)到萬(wàn)級(jí)，安裝紫外線殺菌燈，安裝空調(diào)設(shè)備，能控制室溫在20-25度之間。二、管碟法材料、儀器及試劑的準(zhǔn)備及基本要求312、雙碟為硬質(zhì)玻璃或塑料培養(yǎng)平皿，內(nèi)徑約90mm，高16-17mm，碟底厚度均勻一致。使用前應(yīng)清洗干凈后置150℃-160℃干熱滅菌2小時(shí)或者121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘。2、雙碟323、陶瓦蓋內(nèi)徑約103mm，外徑108mm，平坦，吸水性強(qiáng)，應(yīng)定期清洗、干燥。3、陶瓦蓋334、鋼管（牛津杯）每次使用后應(yīng)置1：1000新潔爾滅溶液內(nèi)浸泡2個(gè)小時(shí)以上，進(jìn)行滅菌后再進(jìn)行洗滌，在150℃-160℃干熱滅菌2小時(shí)備用。使用同一批次的鋼管。鋼管內(nèi)外壁要求清潔光滑，兩端面應(yīng)平坦光潔，管壁應(yīng)厚薄一致，重量差異不超過(guò)0.05g最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件34最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件355、鋼管放置器：有全自動(dòng)和半自動(dòng)之分，一般為四孔，要求鋼管下落時(shí)應(yīng)垂直平穩(wěn)、位置正確。應(yīng)定期用75%酒精擦拭。如果沒(méi)有鋼管放置器，也可用干熱滅菌過(guò)的鑷子放置鋼管。5、鋼管放置器：36最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件37最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件38最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件396、恒溫培養(yǎng)箱：有隔水式、電熱式。要求溫度控制在35℃-37℃，隔板要求水平，用于細(xì)菌培養(yǎng)。最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件40最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件41最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件427、抑菌圈測(cè)定儀：

用于測(cè)定細(xì)菌所致抑菌圈直徑，也可以用游標(biāo)卡尺進(jìn)行測(cè)量直徑。7、抑菌圈測(cè)定儀：

用于測(cè)定細(xì)菌所致抑菌圈直徑，也可以用游標(biāo)43最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件44最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件45最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件468、超凈工作臺(tái)：用于菌種的接種、傳代和菌懸液的制備。超凈臺(tái)應(yīng)放在潔凈工作間或半無(wú)菌室內(nèi)。8、超凈工作臺(tái)：47最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件489、磷酸鹽緩沖液：根據(jù)獸藥典附錄或者品種項(xiàng)下要求的配方進(jìn)行配制、分裝、滅菌后備用。常用的緩沖液pH值有6.0、7.0、7.8等。緩沖液的pH值對(duì)樣品液的穩(wěn)定性、細(xì)菌生長(zhǎng)速度和抑菌圈邊緣清晰等有影響。

最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件4910、培養(yǎng)基：盡量購(gòu)置質(zhì)量穩(wěn)定的干粉培養(yǎng)基（如中國(guó)獸藥藥品監(jiān)察所、中國(guó)藥品生物制品監(jiān)察所等生產(chǎn)的培養(yǎng)基）。常用的培養(yǎng)基有Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ號(hào)等培養(yǎng)基，用前應(yīng)按使用說(shuō)明書(shū)進(jìn)行配制，注意調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH值。10、培養(yǎng)基：5011、菌種：菌種應(yīng)由中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所和中國(guó)藥品生物制品檢定所等國(guó)家法定的菌種保藏中心提供。常用的菌種包括：枯草芽孢桿菌（CMCC63501)、短小芽孢桿菌（CMCC63202）、藤黃微球菌（CMCC28001)、金黃色葡萄球菌（CMCC26003）等。

11、菌種：5112、標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)品是指用于生物檢定、抗生素或生化藥品中含量或者效價(jià)測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，一般以效價(jià)單位標(biāo)示，標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)由國(guó)家法定的單位制備、標(biāo)定和供應(yīng)，一般常用的標(biāo)準(zhǔn)品來(lái)源于中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所和中國(guó)藥品生物制品檢定所。12、標(biāo)準(zhǔn)品52三、管碟法操作步驟

1、稱量：標(biāo)準(zhǔn)品從冰箱內(nèi)取出后，應(yīng)放置至室溫后稱取。標(biāo)準(zhǔn)品的稱取量往往少于100mg，需選用十萬(wàn)分之一的分析天平精密稱量，稱取量應(yīng)大于10mg，并且為了減少實(shí)驗(yàn)誤差，應(yīng)使用小燒杯或特制的稱量壺作為稱量容器。

三、管碟法操作步驟53供試品稱取量若少于100mg，稱取方法同標(biāo)準(zhǔn)品；供試品取量若多于100mg，可直接使用稱量紙?jiān)谌f(wàn)分之一的分析天平上精密稱量。稱量過(guò)程中，不能裸手接觸稱量紙或稱量容器。液體制劑量取供試品體積的方法，粘稠的液體不便量取時(shí)，可采取稱重，然后測(cè)定相對(duì)密度，折算稱體積。供試品稱取量若少于100mg，稱取方法同標(biāo)準(zhǔn)品；供試品取量542.稀釋

稀釋標(biāo)準(zhǔn)品和供試品所用的緩沖液應(yīng)用同一瓶?jī)?nèi)或同一次制備和緩沖液幾瓶混勻后使用。為避免抗生素被玻璃吸附，在量取溶液時(shí)，要用被量取的溶液流洗3次。2.稀釋553.制備底層

用滅菌的吸管吸取已融化的培養(yǎng)20ml注入培養(yǎng)皿中，稍后蓋上陶瓦蓋吸收水蒸汽，以免培養(yǎng)基溫度過(guò)高，加蓋陶瓦蓋后冷凝水影響菌層的表面平整性（由于冷凝水的局部冷卻和稀釋作用，可使菌層培養(yǎng)基凝固后表面不平）。3.制備底層564.制備菌層取出試驗(yàn)菌懸液，吸取已試驗(yàn)妥的菌量加入已融化并保溫在水浴中（一般細(xì)菌48℃，芽孢60℃），搖勻作為菌層培養(yǎng)基。然后吸取菌層培養(yǎng)基5ml，使其均勻攤在底層培養(yǎng)基上，置水平臺(tái)上，用陶瓦蓋覆蓋，放置20-30分鐘，備用。

4.制備菌層575.滴加抗生素溶液至小鋼管

采用膠頭滴管或者定量加液器向鋼管中加溶液。由于滴加先后順序及時(shí)間的不同，抗生素在培養(yǎng)基內(nèi)擴(kuò)散有差異。在滴加抗生素溶液時(shí)采用S2→T2→S1→T1（標(biāo)準(zhǔn)品高濃度、樣品高濃度、標(biāo)準(zhǔn)品低濃度、樣品低濃度）的順序滴加，以減少試驗(yàn)誤差。

5.滴加抗生素溶液至小鋼管586.培養(yǎng)加液完畢后，用陶瓦蓋覆蓋，平穩(wěn)地移入培養(yǎng)箱中，至35-37℃培養(yǎng)至所需的時(shí)間。雙碟在培養(yǎng)時(shí)，不易使雙碟靠近培養(yǎng)箱熱源較近處，以免造成培養(yǎng)溫度不均勻，使同一雙碟上細(xì)菌生長(zhǎng)速度不一致，造成抑菌圈變小或抑菌圈不圓。

6.培養(yǎng)597、抑菌圈測(cè)量

從培養(yǎng)箱中取出培養(yǎng)皿，將鋼管倒入盛有1：1000新潔爾滅或其他消毒液內(nèi)，蓋上玻璃蓋。用抑菌圈測(cè)量?jī)x或者游標(biāo)卡尺測(cè)量，然后按生物統(tǒng)計(jì)法測(cè)定其效價(jià)。最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件60相關(guān)知識(shí)一、抗生素含量表示方法

1、重量單位：以抗生素中所含特定的抗菌活性部分的重量作為效價(jià)單位，一般以1mg相當(dāng)于1000單位計(jì)算，但由于抗生素多以鹽的成分存在。紅霉素標(biāo)準(zhǔn)品的理論效價(jià)為1000單位/mg，但實(shí)際生產(chǎn)中紅霉素（p97）效價(jià)不低于920紅霉素單位/mg、硫氰酸紅霉素（p288）效價(jià)不低于750紅霉素單位/mg。相關(guān)知識(shí)一、抗生素含量表示方法612、特定單位如粘菌素理論值為每1mg相當(dāng)于30000粘菌素單位（2003版p191）。桿菌肽鋅原料效價(jià)要求每1mg不少于40桿菌肽單位。2、特定單位623、半合成青霉素類：如氨芐西林、阿莫西林等都是以百分含量計(jì)算。以阿莫西林（p115）為例，原料要求以無(wú)水物計(jì)算，含C16H19N3O5S不得少于95.0%.3、半合成青霉素類：634、重量折算單位:

以青霉素鈉（P121)為例，原料要求，以無(wú)水物計(jì)算，含C16H17N2NaON4S不少于96.0%。注射用青霉素鈉標(biāo)示量卻以單位計(jì)，每1mg青霉素鈉相當(dāng)于1670青霉素單位。4、重量折算單位:64二、抗生素制劑投料的問(wèn)題：

1、考慮制劑的標(biāo)示量的方式。

2、考慮水分、雜質(zhì)等占的比例。

3、考慮原料的實(shí)際含量（效價(jià)）二、抗生素制劑投料的問(wèn)題：65

結(jié)束語(yǔ)謝謝大家聆聽(tīng)?。?！66

結(jié)束語(yǔ)謝謝大家聆聽(tīng)！??！66抗生素知識(shí)培訓(xùn)抗生素知識(shí)培訓(xùn)67提綱

一、抗生素定義及分類二、微生物試驗(yàn)相關(guān)知識(shí)三、抗生素微生物檢定法提綱一、抗生素定義及分類68最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件69最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件70最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件71最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件72最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件73最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件74五、酰胺醇類包括甲砜霉素、氟苯尼考等。五、酰胺醇類75六、林可胺類主要有鹽酸林可霉素、鹽酸吡利霉素等。六、林可胺類76七、多肽類包括硫酸黏菌素、桿菌肽鋅、亞甲基水楊酸桿菌肽、恩拉霉素、維吉尼霉素、那西肽等。七、多肽類77八、多糖類包括阿維拉霉素、黃霉素等。八、多糖類78九、其他：

包括延胡索酸泰妙菌素、泰妙菌素、鹽酸沃尼妙林、賽地卡霉素等九、其他：79抗寄生蟲(chóng)藥：一、抗蠕蟲(chóng)藥（抗線蟲(chóng)藥）

包括伊維菌素、阿維菌素、乙酰氨基阿維菌素、多拉菌素、越霉素A、潮霉素B等。二、抗原蟲(chóng)藥（抗球蟲(chóng)藥）包括莫能菌素、莫能菌素鈉、鹽霉素鈉、拉沙洛西鈉、甲基鹽霉素、馬杜米星銨、海南霉素鈉、賽杜霉素鈉等?？辜纳x(chóng)藥：80第二部分：微生物試驗(yàn)相關(guān)知識(shí)一、名稱解釋1.消毒（disinfection）：殺死物體上或者環(huán)境中病原微生物并不一定殺死細(xì)菌芽胞或非病原微生物的方法。2.滅菌（sterilization）：殺死物體上所有微生物的方法（病原微生物，非病原微生物）。第二部分：微生物試驗(yàn)相關(guān)知識(shí)一、名稱解釋813.抑菌（bacteriostasis）：抑制人體內(nèi)部或外部細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的。4.防腐（antisepsis）：體外防止或抑制細(xì)菌繁殖的方法。5.無(wú)菌（asepsis）：不存在任何活菌。最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件826.無(wú)菌操作：防止細(xì)菌進(jìn)入人體或其他物品的操作技術(shù)。7.清潔：能減少微生物附著在無(wú)機(jī)物體表面的數(shù)量的方法。8.凈化：能顯著減少或破壞一定空間中微生物數(shù)量和生物活性的方法。6.無(wú)菌操作：防止細(xì)菌進(jìn)入人體或其他物品的操作技術(shù)。83二、消毒滅菌方法：

1.物理消毒滅菌法

2.化學(xué)消毒滅菌法

3.生物學(xué)消毒滅菌法二、消毒滅菌方法：841.物理消毒滅菌法

1）熱力滅菌法①干熱滅菌法②濕熱滅菌法焚燒巴氏消毒法燒灼煮沸法干烤高壓蒸氣滅菌法紅外線1.物理消毒滅菌法85濕熱滅菌效果好于干熱滅菌，原因如下：

①濕熱情況下菌體蛋白容易凝固;②濕熱穿透力比干熱大；③濕熱的蒸汽具有潛熱。濕熱滅菌效果好于干熱滅菌，原因如下：862）紫外線原理：作用于DNA，使一條DNA鏈上相鄰的兩個(gè)T共價(jià)結(jié)合形成二聚體，干擾DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄，導(dǎo)致細(xì)菌的變異和死亡。特點(diǎn)：①穿透力比較差。普通玻璃、紙張、塵埃等均可阻擋紫外線，因此它只適用于空氣消毒或物體表面的消毒。②紫外線可損傷皮膚、眼睛，使用時(shí)應(yīng)注意防護(hù)。2）紫外線873）濾過(guò)除菌法4）超聲波殺菌法5）干燥與低溫抑菌法最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件882.化學(xué)消毒滅菌法

化學(xué)消毒劑：迅速殺滅病原微生物的化學(xué)藥物。如：二氧化氯、戊二醛等。防腐劑：抑制病原微生物生長(zhǎng)繁殖的化學(xué)藥物。如：苯甲酸鈉、山梨酸鉀、脫氫乙酸鈉等?；瘜W(xué)治療劑：用于治療傳染病的化學(xué)藥物，可選擇性地作用于細(xì)菌代謝不同環(huán)節(jié)，殺滅或抑制病原菌，對(duì)宿主無(wú)毒或很低，如異煙肼、無(wú)環(huán)鳥(niǎo)苷等。2.化學(xué)消毒滅菌法893.生物學(xué)消毒滅菌法1）抗生素臨床治療2）細(xì)菌素為微生物代謝產(chǎn)物，破壞同源性細(xì)菌。3）噬菌體感染細(xì)菌、真菌、放線菌、螺旋體等微生物的病毒。4）中草藥3.生物學(xué)消毒滅菌法90三、影響消毒滅菌效果的因素

1.消毒劑的性質(zhì)、濃度與作用時(shí)間

2.微生物的種類與數(shù)量

3.溫度

4.酸堿度

5.有機(jī)物有機(jī)物可消耗消毒劑，降低消毒劑濃度三、影響消毒滅菌效果的因素91第三部分：抗生素微生物檢定法一、概述：抗生素微生物檢定法是利用抗生素在低微濃度下有選擇地抑制或殺死微生物的特點(diǎn)，以抗生素的抗菌活性為指標(biāo)，來(lái)衡量抗生素中的有效成分效力的方法。該方法是與臨床要求相符，更能確定抗生素的臨床醫(yī)療價(jià)值。第三部分：抗生素微生物檢定法一、概述：92

抗生素微生物檢定法分為稀釋法、濁度法和瓊脂擴(kuò)散法（管碟法），每種方法的試驗(yàn)操作差別較大，但相同之處都是將標(biāo)準(zhǔn)和供試品兩者的抗菌效力比較。稀釋法：通過(guò)觀察不同濃度的抗生素抑制試驗(yàn)菌的生長(zhǎng)情況，從而測(cè)定抗生素最低抑菌濃度。常用于新藥研制及臨床藥敏試驗(yàn)?？股匚⑸餀z定法分為稀釋法、濁度法和瓊脂93

濁度法：采用分光光度法測(cè)定不同濃度的抗生素抑制試驗(yàn)菌的生長(zhǎng)情況（混濁程度），從而測(cè)定抗生素抑菌效力的方法。該方法國(guó)外使用較為普遍，而且快速（3-4小時(shí)），《中國(guó)獸藥典》（2010年版）收載了方法，如慶大霉素、鏈霉素、紅霉素、大觀霉素、安普霉素、泰樂(lè)菌素。

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瓊脂擴(kuò)散法(管碟法）：

是使用固體培養(yǎng)基，在培養(yǎng)基凝固前，將試驗(yàn)菌混進(jìn)去，采用一定的方法，將含有抗生素的物質(zhì)與含菌的培養(yǎng)基表面接觸。目前，國(guó)際上采用將抗生素加入到特定的小鋼管中，使小鋼管中的抗生素與培養(yǎng)基表面接觸，此方法稱為“管碟法”。經(jīng)過(guò)培養(yǎng)后，由于抗生素不斷向培養(yǎng)基中擴(kuò)散，凡抑菌濃度能到達(dá)之處，試驗(yàn)菌不能生長(zhǎng)，從而形成透明的抑菌范圍，此范圍一般都呈圓形，稱為“抑菌圈”。瓊脂擴(kuò)散法(管碟法）：95最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件96二、管碟法材料、儀器及試劑的準(zhǔn)備及基本要求

1、操作間：要求凈化級(jí)別達(dá)到萬(wàn)級(jí)，安裝紫外線殺菌燈，安裝空調(diào)設(shè)備，能控制室溫在20-25度之間。二、管碟法材料、儀器及試劑的準(zhǔn)備及基本要求972、雙碟為硬質(zhì)玻璃或塑料培養(yǎng)平皿，內(nèi)徑約90mm，高16-17mm，碟底厚度均勻一致。使用前應(yīng)清洗干凈后置150℃-160℃干熱滅菌2小時(shí)或者121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘。2、雙碟983、陶瓦蓋內(nèi)徑約103mm，外徑108mm，平坦，吸水性強(qiáng)，應(yīng)定期清洗、干燥。3、陶瓦蓋994、鋼管（牛津杯）每次使用后應(yīng)置1：1000新潔爾滅溶液內(nèi)浸泡2個(gè)小時(shí)以上，進(jìn)行滅菌后再進(jìn)行洗滌，在150℃-160℃干熱滅菌2小時(shí)備用。使用同一批次的鋼管。鋼管內(nèi)外壁要求清潔光滑，兩端面應(yīng)平坦光潔，管壁應(yīng)厚薄一致，重量差異不超過(guò)0.05g最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件100最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件1015、鋼管放置器：有全自動(dòng)和半自動(dòng)之分，一般為四孔，要求鋼管下落時(shí)應(yīng)垂直平穩(wěn)、位置正確。應(yīng)定期用75%酒精擦拭。如果沒(méi)有鋼管放置器，也可用干熱滅菌過(guò)的鑷子放置鋼管。5、鋼管放置器：102最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件103最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件104最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件1056、恒溫培養(yǎng)箱：有隔水式、電熱式。要求溫度控制在35℃-37℃，隔板要求水平，用于細(xì)菌培養(yǎng)。最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件106最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件107最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件1087、抑菌圈測(cè)定儀：

用于測(cè)定細(xì)菌所致抑菌圈直徑，也可以用游標(biāo)卡尺進(jìn)行測(cè)量直徑。7、抑菌圈測(cè)定儀：

用于測(cè)定細(xì)菌所致抑菌圈直徑，也可以用游標(biāo)109最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件110最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件111最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件1128、超凈工作臺(tái)：用于菌種的接種、傳代和菌懸液的制備。超凈臺(tái)應(yīng)放在潔凈工作間或半無(wú)菌室內(nèi)。8、超凈工作臺(tái)：113最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件1149、磷酸鹽緩沖液：根據(jù)獸藥典附錄或者品種項(xiàng)下要求的配方進(jìn)行配制、分裝、滅菌后備用。常用的緩沖液pH值有6.0、7.0、7.8等。緩沖液的pH值對(duì)樣品液的穩(wěn)定性、細(xì)菌生長(zhǎng)速度和抑菌圈邊緣清晰等有影響。

最新抗生素知識(shí)培訓(xùn)課件11510、培養(yǎng)基：盡量購(gòu)置質(zhì)量穩(wěn)定的干粉培養(yǎng)基（如中國(guó)獸藥藥品監(jiān)察所、中國(guó)藥品生物制品監(jiān)察所等生產(chǎn)的培養(yǎng)基）。常用的培養(yǎng)基有Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ號(hào)等培養(yǎng)基，用前應(yīng)按使用說(shuō)明書(shū)進(jìn)行配制，注意調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH值。10、培養(yǎng)基：11611、菌種：菌種應(yīng)由中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所和中國(guó)藥品生物制品檢定所等國(guó)家法定的菌種保藏中心提供。常用的菌種包括：枯草芽孢桿菌（CMCC63501)、短小芽孢桿菌（CMCC63202）、藤黃微球菌（CMCC28001)、金黃色葡萄球菌（CMCC26003）等。

11、菌種：11712、標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)品是指用于生物檢定、抗生素或生化藥品中含量或者效價(jià)測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，一般以效價(jià)單位標(biāo)示，標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)由國(guó)家法定的單位制備、標(biāo)定和供應(yīng)，一般常用的標(biāo)準(zhǔn)品來(lái)源于中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所和中國(guó)藥品生物制品檢定所。12、標(biāo)準(zhǔn)品118三、管碟法操作步驟

1、稱量：標(biāo)準(zhǔn)品從冰箱內(nèi)取出后，應(yīng)放置至室溫后稱取。標(biāo)準(zhǔn)品的稱取量往往少于100mg，需選用十萬(wàn)分之一的分析天平精密稱量，稱取量應(yīng)大于10mg，并且為了減少實(shí)驗(yàn)誤差，應(yīng)使用小燒杯或特制的稱量壺作為稱量容器。

三、管碟法操作步驟119供試品稱取量若少于100mg，稱取方法同標(biāo)準(zhǔn)品；供試品取量若多于100mg，可直接使用稱量紙?jiān)谌f(wàn)分之一的分析天平上精密稱量。稱量過(guò)程中，不能裸手接觸稱量紙或稱量容器。液體制劑量取供試品體積的方法，粘稠的液體不便量取時(shí)，可采取稱重，然后測(cè)定相對(duì)密度，折算稱體積。供試品稱取量若少于100mg，稱取方法同標(biāo)準(zhǔn)品；供試品取量1202.稀釋

稀釋標(biāo)準(zhǔn)品和供試品所用的緩沖液應(yīng)用同一瓶?jī)?nèi)或同一次制備和緩沖液幾瓶混勻后使用。為避免抗生素被玻璃吸附，在量取溶液時(shí)，要用被量取的溶液流洗3次。2.稀釋1213.制備底層

用滅菌的吸管吸取已融化的培養(yǎng)20ml注入培養(yǎng)皿中，稍后蓋上陶瓦蓋吸收水蒸汽，以免培養(yǎng)基溫度過(guò)高，加蓋陶瓦蓋后冷凝水影響菌層的表面平整性（由于冷凝水的局部冷卻和稀釋作用，可使菌層培養(yǎng)基凝固后表面不平）。3.制備底層1224.制備菌層取出試驗(yàn)菌懸液，吸取已試驗(yàn)妥的菌量加入已融化并保溫在水浴中（一般細(xì)菌48℃，芽孢60℃），搖勻作為菌層培養(yǎng)基。然后吸取菌層培養(yǎng)