組織胚胎學緒論人衛(wèi)演示文稿

組織胚胎學緒論人衛(wèi)演示文稿第一頁，共二十九頁。（優(yōu)選）組織胚胎學緒論人衛(wèi)第二頁，共二十九頁。細胞：是機體形態(tài)結構與功能的基本單位。組織：由細胞和細胞間質(又稱細胞外基質)

組成的群體結構，是構成機體器官的基本成分。器官：具有一定的形態(tài)結構，并執(zhí)行特定的生理功能。系統(tǒng)：由一些結構連續(xù)、功能相關的器官組合而成，完成連續(xù)的生理活動。細胞-組織-器官-系統(tǒng)第三頁，共二十九頁。人體器官分類－組織學特征實質性器官中空性中央：大空腔表面：被模如：消化腺、淋巴器官、內分泌腺、腎臟等。如：心血管、消化管、呼吸道等內部：實質－行使功能管壁：分3?4層第四頁，共二十九頁。組織學結構觀察組織學結構光鏡結構－用光學顯微鏡觀察的結構（LM）(lightmicroscope,LM簡稱光鏡)電鏡結構－電子顯微鏡下觀察的結構（EM）(electronmicroscope,EM簡稱電鏡）又稱超微結構(ultrastructure)

第五頁，共二十九頁。二、組織學的研究方法和常用技術

(一)光學顯微鏡技術

1、常用組織切片標本制備技術

石蠟切片術①取材和固定;②脫水和包埋;③切片和染色;④封片。其他；火棉膠包埋,冰凍切片,

涂片,鋪片,磨片等

第六頁，共二十九頁。

蘇木精

伊紅

堿性染料酸性染料

染成紅色

（嗜酸性）細胞核中的染色質、細胞質中的核糖體

細胞質細胞間質成份

染成藍色（嗜堿性）常用染色方法：HE染色（Hematoxylin）（Eosin）HE染色第七頁，共二十九頁。嗜堿性：可使細胞核內的染色質及細胞質內的核糖體等結構染成藍紫色。嗜酸性：可使多數(shù)細胞的細胞質染成粉紅色。中性：與兩種染液親合力都不強。組織結構的嗜色性嗜堿性嗜酸性第八頁，共二十九頁。

A嗜銀性B嗜鉻性C異染性其它染色方法第九頁，共二十九頁。普通光學顯微鏡是觀察組織細胞微細結構最常用的工具，分為光學部分機械部分起放大作用光鏡的分辨率約為0.2μm可放大1500倍左右（lightmicroscope，LM）第十頁，共二十九頁。幾種特殊顯微鏡術

（1）相差顯微鏡

(phasecontrastmicroscope)用于觀察生活細胞和末經(jīng)染色細胞的形態(tài)結構。

神經(jīng)干細胞培養(yǎng)第十一頁，共二十九頁。(2)

熒光顯微鏡(fluorescencemicrscope)

是用以觀察細胞、組織內熒光物質的分布。

神經(jīng)球第十二頁，共二十九頁。

(二)

共焦激光掃描顯微鏡

共焦激光掃描顯微鏡(confocallaserscanningmicroscope，CLSM)

由激光光源、共焦成像掃描系統(tǒng)、電子光學系統(tǒng)和微機圖象分析系統(tǒng)四部份構成?？蓪悠愤M行斷層掃描重建三維圖像，進行體視學分析；測定細胞內pH、鈣濃度等；更精確地檢測、識別，組織細胞的微細結構及其變化。CLSM又稱細胞CT。CLSM第十三頁，共二十九頁。CLSM圖像HumanneuronalprecursorcellsCLSM海馬MR、GR共存第十四頁，共二十九頁。

(三)電子顯微鏡技術

（electronmicroscope,EM）

透射電鏡(transmissionelectronmicroscope,TEM)

觀察細胞內部結構分辨率為0.1-0.2nm,可放大幾萬－幾十萬倍掃描電鏡（scanningelectronmicroscope,SEM)

觀察組織或細胞表面的立體結構冰凍蝕刻（freezeetchingmethod）觀察細胞斷裂表面形態(tài)結構分析電鏡X–射線顯微分析術（X–raymicroanalysis）研究細胞、組織內元素種類分布和含量第十五頁，共二十九頁。透射電鏡與照片TEM淋巴細胞第十六頁，共二十九頁。掃描電鏡與照片SEMSEM1.纖毛2.微絨毛第十七頁，共二十九頁。冰凍蝕刻細胞

冷凍斷裂腎小球右下線粒體

冰凍蝕刻照片第十八頁，共二十九頁。分析電鏡－X線微區(qū)分析圖片分析電鏡X線微區(qū)分析第十九頁，共二十九頁。糖類顯示法－PAS反應：過碘酸—希夫反應(periodicacidSchiffreaction，PAS)：檢測組織或細胞中有無多糖存在。

原理：多糖PA氧化醛Schiff試劑紫紅色沉淀(四)組織化學和細胞化學技術

PAS反應陽性部位即表示多糖和蛋白多糖的存在

PAS陽性小腸上皮第二十頁，共二十九頁。組織細胞化學染色圖片酶細胞化學神經(jīng)元ACP酶陽性

脂類顯示法

蘇丹Ⅲ

脂類顯示法

蘇丹Ⅲ

鋨酸

髓鞘染色

核酸顯示法第二十一頁，共二十九頁。

利用抗原（antigen,Ag），抗體（antibody）特異結合的原理，用已知抗體檢測未知抗原的一種方法。免疫細胞化學原理第二十二頁，共二十九頁。免疫細胞化學標記物第二十三頁，共二十九頁。免疫細胞化學－PAP法第二十四頁，共二十九頁。免疫細胞化學－ABC法第二十五頁，共二十九頁。(五)免疫組織化學與細胞化學技術免疫組織化學術(immunohistochemistry)是將免疫學原理與組織化學技術相結合建立的新技術，根據(jù)抗原與抗體特異性結合的特點，檢測組織細胞內某種多肽、蛋白質等大分子物質的存在與分布。

人鼻粘膜上皮棘細胞細胞間橋TM陽性第二十六頁，共二十九頁。(六)原位雜交術原位雜交(insituhybridization)是一種敏感性高、特異性強的，能在組織細胞原位進行的核酸分子雜交技術。常用的標記物有兩種：1、放射性同位素，如3H、14C、

32P、35S、125I，2、為非放射性物質，如地高辛等。

非放射性原位雜交海馬GAP－43mRNA第二十七頁，共二十九頁。(七)放射自顯影術放射自顯影術(autoradiograph)旨在追蹤某些物質在體內、組織或細胞中的分布與代謝徑路