月季組織培養(yǎng)課件

生物技術(shù)二班于濤月季的植物組織培養(yǎng)月季的植物組織培養(yǎng)

生物技術(shù)二班于濤實(shí)驗(yàn)設(shè)備：燒杯、移液器、玻璃棒、500ml容量瓶、100ml錐形瓶三個(gè)、微波爐、解剖刀、鑷子、超凈工作臺(tái)、酒精燈、酒精棉等。實(shí)驗(yàn)設(shè)備實(shí)驗(yàn)材料：75%酒精、0.15%升汞、6--BA、MgSO47H2O、FeSO47H2O、NH4NO3、Na2EDTA2H2O、CaCl22H2O、生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、KNO3、KH2PO4、NAA、KI、肌醇、H3BO3、煙酸、MnSO44H2O、鹽酸硫胺素、ZnSO47H2O、鹽酸吡哆醇、Na2MoO42H2O、甘氨酸、CuSO45H2O。一.植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程二、影響植物組織培養(yǎng)的因素：1、外植體的選取不同植物的組織培養(yǎng)難度不同同一種植物的不同組織培養(yǎng)難度不同2、培養(yǎng)基的配制(MS培養(yǎng)基)

大量元素：C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S

微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co

有機(jī)物：甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等植物激素：生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素、赤霉素等不同植物激素使用順序和使用量使用順序?qū)嶒?yàn)結(jié)果先生長(zhǎng)素，后細(xì)胞分裂素有利于分裂但不分化先細(xì)胞分裂素，后生長(zhǎng)素細(xì)胞既分裂也分化同時(shí)使用分化頻率提高生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素比值結(jié)果比值高時(shí)促根分化，抑芽形成比值低時(shí)促芽分化，抑根形成比值適中促進(jìn)愈傷組織生長(zhǎng)不同植物激素使用順序和使用量生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素比值結(jié)果比值高時(shí)促根分化，抑芽形成比值低時(shí)促芽分化，抑根形成比值適中促進(jìn)愈傷組織生長(zhǎng)制備MS固體培養(yǎng)基外植體消毒

接種

培養(yǎng)栽培實(shí)驗(yàn)操作

移栽沖洗—酒精—無(wú)菌水沖洗—氯化汞—無(wú)菌水沖洗至少三次之上2植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑影響月季組織培養(yǎng)的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑主要有細(xì)胞分裂素（如BA、ZT、ZR、2iP、ipA和TDZ等）、生長(zhǎng)素（如NAA、IAA和IBA）和赤霉素（GA3）3種。細(xì)胞分裂素參與克服頂端優(yōu)勢(shì)的過(guò)程，因而能促進(jìn)側(cè)枝的萌發(fā)和生長(zhǎng)，試管中嫩芽的繁殖主要是細(xì)胞分裂素影響的結(jié)果。在莖增殖階段，細(xì)胞分裂素濃度過(guò)高對(duì)下一步的生根培養(yǎng)有影響，增殖用的BA含量愈高，對(duì)生根的抑制愈嚴(yán)重。在生根階段，細(xì)胞分裂素對(duì)生根和移栽有抑制效應(yīng)，使用0.3mg/L或更高濃度的2iP培養(yǎng)基進(jìn)行月季組織培養(yǎng)，組培苗一般無(wú)法生根，即使2iP濃度較低時(shí)能形成一些根,在移栽時(shí)也會(huì)失敗。因此，一般在月季生根培養(yǎng)基中都盡可能降低細(xì)胞分裂素的濃度，而使用一定量的生長(zhǎng)素。但生長(zhǎng)素濃度過(guò)高也同樣會(huì)抑制月季根的形成，只有選擇適宜的生長(zhǎng)素濃度才能有效地促進(jìn)根的生長(zhǎng)。用IAA誘導(dǎo)生根，濃度只能在1mg/L以下，IAA濃度過(guò)高根的誘導(dǎo)有下降趨勢(shì)。對(duì)NAA而言，濃度為0.5mg/L時(shí)對(duì)月季的誘導(dǎo)生根和提高移栽成活率有良好效果。在切花月季薩曼莎的組織培養(yǎng)試驗(yàn)中，為保證生根率，IAA、IB