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細(xì)菌數(shù)量測(cè)定---標(biāo)準(zhǔn)平板計(jì)數(shù)法

一、實(shí)訓(xùn)目的1、掌握菌液稀釋的方法和步驟。2、掌握澆混接種的操作步驟。3、掌握菌落計(jì)數(shù)的原理與方法

平板菌落計(jì)數(shù)法是將待測(cè)樣品經(jīng)適當(dāng)稀釋后，其中的微生物充分分散為單個(gè)細(xì)胞，取一定量的稀釋液接種到平板上，經(jīng)過培養(yǎng)，由每個(gè)單細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖而形成的肉眼可見的菌落，即代表原樣品中的一個(gè)單細(xì)胞。二、實(shí)訓(xùn)原理三、實(shí)訓(xùn)儀器和材料1、儀器：恒溫培養(yǎng)箱。高壓蒸汽滅菌鍋，電熱套、托盤天平吸量管、燒杯、三角瓶、培養(yǎng)皿、試管、試管架、酒精燈

2試劑：大腸桿菌懸液、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基），生理鹽水、鹽酸、氫氧化鈉、蒸餾水

四、實(shí)訓(xùn)步驟（一）培養(yǎng)基配制與滅菌1.生理鹽水：180mL/2組

→分16支

（9mL/支）→加塞包扎滅菌2.營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基：330mL/2組

→加熱煮沸→溶解→調(diào)pH=7.2±0.2

→分4個(gè)→加塞包扎滅菌(二)儀器包扎（每組用量）

培養(yǎng)皿7套1mL吸量管7支，包扎滅菌（三）菌液稀釋1、編號(hào)

（1）無菌平皿7套，分別標(biāo)記為10-4、10-5、10-6各2套，留一平皿做空白對(duì)照。2、標(biāo)記

(2）6支盛9mL生理鹽水的滅菌試管一次標(biāo)記為10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6檢驗(yàn)結(jié)果活菌落數(shù)/mL=同一稀釋度2個(gè)平皿上的菌落平均數(shù)×稀釋倍數(shù)×5稀釋度10-410-51

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