ANCA檢測與應(yīng)用課件

抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（ANCA）的檢測與應(yīng)用

李云紅

血管炎

簡介

病癥特征

病理病因

病理分類

臨床表現(xiàn)

治療流程

飲食保健

注意事項簡介

血管炎是血管壁及血管周圍有炎癥細(xì)胞浸潤，并伴有血管損傷，包括纖維素沉積、膠原纖維變性、內(nèi)皮細(xì)胞及肌細(xì)胞壞死的炎癥，又稱脈管炎。致病因素直接作用于血管壁引起者為原發(fā)性血管炎，在血管炎癥基礎(chǔ)上產(chǎn)生一定的臨床癥狀和體征者為血管炎疾病;由鄰近組織炎癥病變波及血管壁引起者為繼發(fā)性血管炎，只是多種組織的病理改變之一，與血管炎疾病不同。病理病因

血清病藥物變態(tài)反應(yīng)及感染乙型肝炎病毒中華巨細(xì)胞病毒單純皰疹病毒成人T細(xì)胞白血病病毒病理分類

變應(yīng)性白細(xì)胞破碎性(壞死性)血管炎：結(jié)節(jié)性多動脈炎：血栓形成性血管炎：肉芽腫性血管炎淋巴細(xì)胞性血管炎：結(jié)節(jié)性血管炎血液成分異常性血管炎：臨床表現(xiàn)

1、主要表現(xiàn)有：①多系統(tǒng)損害；②活動性腎小球腎炎；③缺血性或瘀血性癥狀和體征，特別見于年輕人；④隆起性癜及其他結(jié)節(jié)性壞死性皮疹；⑤多發(fā)性單神經(jīng)炎及不明原因的發(fā)熱。組織活檢對本病有診斷意義，其他檢查有血管造影檢查、自身抗體檢查等。2、皮膚型變應(yīng)性血管炎；紅斑、結(jié)節(jié)、紫癜、風(fēng)團、血皰、丘疹、壞死、潰瘍、膿皰3、系統(tǒng)型變應(yīng)性血管炎；多臟器受累頭痛、發(fā)熱、乏力、關(guān)節(jié)及肌肉疼痛粘膜:鼻衄、咯血、便血、腎：蛋白尿、血尿腸道；腹痛、脂肪痢、急性膽囊炎、胰腺炎、糖尿病胸；胸腔積液神經(jīng)系統(tǒng)；腦血栓、癱瘓心臟；心肌梗死、心包炎眼部飲食保健

1、丹參酒：2、赤豆煮米仁：3、黃豆冬瓜皮湯：4、赤豆桃仁蓮藕湯：5、桑椹湯：ANCA簡介抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（ANCA）：ANCA是一組以人中性粒細(xì)胞胞漿成分為靶抗原，與臨床多種小血管炎疾病密切相關(guān)的自身抗體,是系統(tǒng)性血管炎的標(biāo)志性抗體。除了系統(tǒng)性壞死性血管炎，ANCA也可見于慢性炎性腸病和自身免疫性肝炎。常采用間接免疫熒光法檢測ANCA。cANCApANCA主要的ANCA有三型：胞漿型（cytoplasmic,cANCA）和核周型（peripheral,pANCA）

，非典型ANCA（aANCA）cANCA針對的靶抗原為蛋白酶3（proteinase3.PR3）,為中性粒細(xì)胞嗜天青顆粒的主要成分，能水解彈性蛋白酶、IV型膠原纖維等多種組織成分。pANCA針對的靶抗原為髓過氧化物酶（MPO），為中性粒細(xì)胞嗜天青顆粒的另一主要成分。pANCA的靶抗原還有：殺傷/膜通透性增高蛋白(BPI)、人類白細(xì)胞彈性蛋白酶（HLE）、乳鐵蛋白（LF）、組織蛋白G（cathepsinG,CG）等。PR3和MPOPR3和抗MPO抗體在參與小血管炎的發(fā)病過程中起重要作用，它們可激活中性粒細(xì)胞導(dǎo)致脫顆粒反應(yīng)，使大量的蛋白水解酶活化，作用于小血管壁，并在其他免疫炎性介質(zhì)的協(xié)同作用下，造成血管炎癥。間接免疫熒光法測定ANCA原理檢測ANCA的經(jīng)典方法為間接免疫熒光法，這是一種初篩試驗?？乖怯闷咸烟亲越】等搜逯蟹蛛x出嗜中性粒細(xì)胞，按每高倍鏡視野10-20個細(xì)胞滴片制成，干燥后用甲醛或95%乙醇固定。依次向細(xì)胞片上滴加待測血清和熒光素標(biāo)記抗人IgG抗體，再用熒光顯微鏡檢查。結(jié)果判定胞漿型（cytoplasmic,cANCA）是在整個細(xì)胞質(zhì)中均勻分布由粗到細(xì)的顆粒型熒光，在細(xì)胞核葉間的熒光著染加深而核本身不著染。核周型（peripheral,pANCA）是圍繞在核周圍出現(xiàn)平滑的絲帶狀熒光，細(xì)胞核為陰性。線性免疫分析法檢測ANCA實驗原理本試劑盒應(yīng)用線性免疫分析法（LIA），將抗原印跡于硝化纖維膜上。包被抗原特性

PR3天然的MPO天然的GBM天然的封閉纖維膜阻止非特異反應(yīng)區(qū)發(fā)生反應(yīng)。檢測時，膜條與稀釋的病人血清共同孵育使血清中的抗體與膜條上的抗原結(jié)合。利用辣根過氧化物酶標(biāo)記抗人IgG二抗檢測此結(jié)合抗體。加入底物后，此結(jié)合抗體表現(xiàn)為可見的藍(lán)色條帶，終止反應(yīng)后為棕色。將實驗結(jié)果與試劑盒提供的LIA特異判讀卡比較，可判斷病人的自身抗體特性。臨床意義1.蛋白酶3（proteinase3.PR3）,為中性粒細(xì)胞嗜天青顆粒的主要成分，是cANCA的主要靶抗原。PR3在WG肉芽腫患者陽性率為85%，。該抗體水平與疾病活動性密切相關(guān)。常用作判斷療效和疾病復(fù)發(fā)的評估指標(biāo)。2.髓過氧化物酶（MPO）是pANCA的主要靶抗原，MPO的陽性率在壞死性新月體型腎小球腎炎為65%，變應(yīng)性肉芽腫性脈管炎為60%，而在WG肉芽腫患者陽性率僅10%。此抗體水平也與病情活動性相關(guān)，可用于療效及預(yù)后判斷3.抗GBM抗體抗GBM抗體（抗腎小球基底膜抗體）可在大約90%的Goodpasture（肺出血腎炎）綜合癥病人中查到。盡管抗Goodpasture綜合癥發(fā)病率低（0.5%的腎臟病人），但該病會快速發(fā)展，如果不予治療死亡率達(dá)75-90%。早期診斷和及時準(zhǔn)確的治療大大降低了死亡率。ANCA的臨床應(yīng)用最常見的疾病如韋格納肉芽腫（WG）、原發(fā)性局灶節(jié)段壞死性腎小球腎炎（NCGN）、結(jié)節(jié)性多動脈炎（PAN）等均可檢出ANCA。WG的cANCA陽性率可高達(dá)90%，抗PR3抗體是診斷WG的特異性指標(biāo)。在壞死性或新月型腎小球腎炎患者，ANCA的陽性率可達(dá)80%，pANCA對應(yīng)的特異性抗原主要為MPO。ANCA的檢測可大大提高腎血管炎的早期診斷率。