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文檔簡介

肺原位注射模型細胞準備取狀態(tài)良好的肺癌細胞(如A549)胰酶消化收集,用PBS分散細胞懸液,離心后,加入基質(zhì)膠(高濃度型),配比為50卩1細胞懸液+50卩1基質(zhì)膠,其中細胞懸液中的細胞量為3*106個。選取5-8周齡健康裸鼠操作步驟1裸鼠100卩1水合氯醛麻醉后右側(cè)臥位固定,右側(cè)胸部皮膚用酒精消毒。2?確定小鼠肺部位置,位于小鼠左側(cè)肋骨下緣以上約1cm處,有兩條縱向較粗的血管,肺部位于這兩條血管之間。3.用手術(shù)剪剪開右側(cè)胸部皮膚,一般可以看見顏色淺于肌肉的隨呼吸運動上下起伏的肺葉,如視野不明朗,可以用鑷子鈍性分離肌肉組織暴露目標視野。4.用胰島素針將準備好的細胞混合液,垂直進針,打入右肺中葉,進針深度在3-5mm,推針速度盡量慢,全部推進去后可以輕輕壓住進針處。5?縫合皮膚,消毒,待小鼠蘇醒后放回動物房繼續(xù)飼養(yǎng)注意事項基質(zhì)膠要注意使用溫度,保證在冰上進行,不要讓它凝固。

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