中藥新藥開制備工藝前處理提取純化

中藥新藥制備工藝研究

1指導原則中藥、天然藥物原料前處理技術指導原則中藥、天然藥物提取純化技術指導原則中藥、天然藥物制劑研究技術指導原則中藥、天然藥物中試研究技術指導原則2內(nèi)容重要性特點、原則和程序前處理提取純化制劑中試申報資料常見問題3制備工藝研究的重要性中藥新藥研究的重要環(huán)節(jié)（新藥成敗和水平的關鍵）

質(zhì)標、藥效、毒理、臨床研究穩(wěn)定樣品的前提工藝不合理，會影響新藥的療效(有效性)工藝不穩(wěn)定，會影響各項實驗的結果(穩(wěn)定性)工藝不成熟，會影響新藥的正式投產(chǎn)(適用性、經(jīng)濟性)

如解表藥不提揮發(fā)油;小試工藝直接生產(chǎn),收率不穩(wěn)定4聯(lián)結中醫(yī)中藥之橋梁去粗取精增效減毒控速控量內(nèi)服外用5社會效益和經(jīng)濟效益的保證中成藥生產(chǎn)水平6系統(tǒng)性：處方組成、原料質(zhì)量、提取、純化、濃縮、干燥、劑型、輔料、制劑、中試、報批臨床、報批生成、試生產(chǎn)、生產(chǎn)篩選性：各環(huán)節(jié)從頭至尾的篩選優(yōu)化全面性：安全性、有效性，穩(wěn)定性、可控性，原輔料溶劑的成本、生產(chǎn)工藝的繁簡、產(chǎn)品生產(chǎn)成本等制備工藝研究的特點7中醫(yī)藥特色原則保存各藥的藥性（與功能主治相關的成分）實現(xiàn)君藥的特性（質(zhì)量控制指標）臨床需要之劑型功能與主治為主線貫穿研究過程

時代特色原則新技術、新工藝、新輔料、新設備、新劑型評價指標和評價方法現(xiàn)代化和綜合化

制備工藝研究的原則81、處方篩選藥味藥味比例口服劑量制備工藝研究的一般程序92、工藝篩選工藝路線（根據(jù)劑型、處方、藥味性質(zhì)、工廠技術、設備）工藝條件成型劑型：臨床適應性、質(zhì)量穩(wěn)定行、生產(chǎn)可行性方法輔料的種類、用量、用法造型工藝條件前處理粉碎藥物粉碎程度粉碎方法細粉收率提取提取藥物提取方法提取溶媒種類、用量提取工藝條件分離除雜濃縮干燥方法設備工藝條件半成品質(zhì)量標準及收率鑒定與檢驗炮制與加工提取純化103、包裝裝選選擇擇5、臨床床實實驗驗用藥藥品品的的制制備備工工藝藝（（制制備備方方法法））4、中試試6、生產(chǎn)產(chǎn)用用制制備備方方法法內(nèi)包包裝裝容容器器的的材材料料、、結結構構、、形形狀狀、、規(guī)規(guī)格格標簽簽設設計計說明明書書擬擬訂訂制備備臨臨床床實實驗驗用用藥藥及及各各種種考考核核樣樣品品3～5批以以上上考核核、、修修改改工工藝藝配套套設設備備初步步核核算算成成本本11中藥藥新新藥藥制制備備工工藝藝研研究究前處處理理12概念念必要要性性原料料的的鑒鑒定定與與檢檢驗驗藥材材的的炮炮制制與與加加工工原料料的的前前處處理理13概念念原料料－－處處方方中中的的藥藥材材、、中中藥藥飲飲片片、、提提取取物物（（包包括括有有效效部部位位））和和有有效效成成分分。。前處處理理－－僅僅指指投投料料前前原原料料的的鑒鑒定定、、檢檢驗驗、、炮炮制制與與加加工工。。強強調(diào)調(diào)鑒鑒定定與與檢檢驗驗，，是是為為了了確確保保投投料料的的準準確確。。14含竹竹簽簽蟲蟲草草必要要性性鑒定定及及檢檢驗驗是是保保證證臨臨床床用用藥藥安安全全有有效效的的前前提提。。（（大黃黃三三基基源源、、土土大大黃黃）炮制制及及加加工工是是中中藥藥制制劑劑特特色色，，保保證證制制劑劑質(zhì)質(zhì)量量及及療療效效。。15原料料的的鑒鑒定定與與檢檢驗驗1.目的的：檢檢驗驗合合格格后后方方可可投投料料，，確確保保投投料料準準確確，，制制劑劑質(zhì)質(zhì)量量均均一一2.依據(jù)據(jù)應為為法法定定標標準準無法法定定標標準準，，應應明明確確藥藥材材基基源源，，制制定定質(zhì)質(zhì)標標如有有修修訂訂，，應應執(zhí)執(zhí)行行修修訂訂后后標標準準。161））藥材材、、飲飲片片法法定定標標準準國家家藥藥品品標標準準（（藥藥典典、、部部標標））、、地地標標、、炮炮制制規(guī)規(guī)范范中藥藥大大辭辭典典、、中中藥藥志志、、中中草草藥藥匯匯編編、、收收載載于于藥藥典典或或部部頒頒附附錄錄中中只只有有藥藥材材來來源源的的不不能能作作為為法法定定標標準準地標標藥藥材材，，建建議議提提供供復復印印件件及及檢檢驗驗報報告告藥材材自自檢檢時時應應全全檢檢仿制制藥藥所所用用藥藥材材標標準準問問題題172）提取物和有有效成分法法定標準僅有國家藥藥品標準附于制劑標標準后的提提取物標準準只能作為為該制劑使使用應做有機溶溶劑殘留的的檢查，因因多數(shù)制備備使用了有有機溶劑183）多來源中藥材一般般應固定品種，品種不同同而質(zhì)量差差異較大的的藥材，必必須固定品品種，并提提供品種選選用依據(jù)。。(大黃，芥子子)4）藥材質(zhì)量量隨產(chǎn)地不同而有較較大變化時時，應固定定產(chǎn)地。（（中國和法國國麻黃）195）藥材質(zhì)量量隨采收期不同而明顯顯變化時，，（購買時時）應注意意采收期。。6）質(zhì)量標準過于簡單，難以滿足新新藥要求，應應自選完善標標準（多數(shù)為為增加含測）），作為企業(yè)業(yè)內(nèi)控標準。。207）毒性藥材應提供自檢報報告國務院頒布的的《醫(yī)療用毒毒性藥品管理理辦法》28品種：砒石、砒霜、、水銀、生馬馬錢子、生川川烏、生草烏烏、生白附子子、生附子、、生半夏、生生南星、生巴巴豆、斑蝥、、青娘蟲、紅紅娘蟲、生甘甘遂、生狼毒毒、生藤黃、、生千金子、、生天仙子、、鬧洋花、雪雪上一枝蒿、、紅升丹、白白降丹、蟾酥酥、洋金花、、紅粉、輕粉粉、雄黃8）瀕危物種藥材應注意來來源合法性、、符合國家規(guī)規(guī)定。說明購貨途徑徑，不須提供供發(fā)票21國家重點保護野生藥材材物種名錄收載野生生藥材物種76種，涉及及中藥材42種?；⒐枪?、、豹豹骨骨、、羚羚羊羊角角、、鹿鹿茸茸、、麝麝香香、、熊熊膽膽、、穿穿山山甲甲、、蟾蟾酥酥、、哈哈蟆蟆油油、、金金錢錢白白花花蛇蛇、、烏烏梢梢蛇蛇、、蘄蘄蛇蛇、、蛤蛤蚧蚧、、甘甘草草、、黃黃連連、、人人參參、、杜杜仲仲、、厚厚樸樸、、黃黃柏柏、、血血竭竭、、川川貝貝母母、、伊伊貝貝母母、、刺刺五五加加、、黃黃芩芩、、天天冬冬、、豬豬苓苓、、龍龍膽膽、、防防風風、、遠遠志志、、胡胡黃黃連連、、肉肉蓯蓯蓉蓉、、秦秦艽艽、、細細辛辛、、紫紫草草、、五五味味子子、、蔓蔓荊荊子子、、訶訶子子、、山山茱茱萸萸、、石石斛斛、、阿阿魏魏、、連連翹翹、、羌羌活活。?；⒐?、豹豹骨已被被禁用。22藥材的炮炮制與加加工依據(jù)：方劑對對藥性要要求、藥藥材質(zhì)地地和特性性、不同同提取方方法凈制：去除非非藥用雜雜質(zhì)，““凈藥材材”切制：鮮切、、軟化切切（防成成分損失失）；片片段絲塊塊炮炙：國家標準準或地方方規(guī)范，，水制、、火制、、水火共共制粉碎：粉碎度度及依據(jù)據(jù)、出粉粉率23黃芪片牛膝段陳皮絲大黃塊24中藥炮制制特色1、降毒毒：烏頭2、改變變或緩和和藥性（（寒熱溫溫涼，生地/熟地）3、增效效。如延胡索醋炙，大大大提高高了鎮(zhèn)痛痛效果。。4、改變或或增強藥物物作用趨向向（升降沉沉浮，酒酒炙大黃升提）5、改變藥藥物作用部部位或增強強對某一部部位的作用用（藥物歸歸經(jīng)）如醋醋炙入肝、、入鹽走腎腎等。6、便于調(diào)調(diào)劑和制劑劑，杏仁去皮7、確保藥藥物潔凈，，有利于儲儲存保管。。8、有利于于服用（矯矯味），醋醋炙或酒炙炙水蛭25粉碎確定粉碎藥藥物龜板等質(zhì)地堅硬硬者為提取取而粉碎；；西洋參等貴重藥材為為直接入藥粉碎碎成細粉；山藥等含淀粉量多多者為直接入藥粉碎碎成細粉，兼作賦形劑劑26確定粉碎程度度提取藥材一般般粉碎成粗粉粉（過10目篩）眼用粉200目口服100-120目27確定粉碎方法法(1)干法粉碎混合粉碎：含含糖或膠質(zhì)、、粘性、油性性或動物的皮皮、肉、骨等等特殊藥料的的，須采用串串料、串油、、蒸罐等粉碎碎技術。單獨粉碎：貴貴重細料、毒毒性藥物、樹樹脂、樹膠類類藥物、質(zhì)地地堅硬藥物、、單獨提取的的藥物等需單單獨粉碎。(2)濕法粉碎：水飛法和加液液研磨法(3)低溫粉碎：樹脂、樹膠類類藥物如乳香香、沒藥等；；糖分、粘液質(zhì)質(zhì)、膠質(zhì)含量量較高的藥物物如玉竹、熟熟地等(4)超微粉碎28選擇粉碎機械械小型截切式磨磨粉機錘擊式粉碎機機（榔頭機））柴田式粉碎機機（萬能粉碎碎機）萬能磨粉機球磨機羚羊角粉碎機機流能磨：即氣氣流粉碎機超微粉碎機29計算細粉收率率出粉率太低、、導致處方比比例變化者，，應單獨粉碎碎根、根莖、莖莖木類藥材要要求出粉率達達95％以上全草類、花類類藥材要求達達到90％以上30中藥新藥制備備工藝研究提取純化研究究31目的及重要性性工藝路線選擇擇工藝條件選擇擇評價指標確定定實驗設計方法法提取純化工藝藝研究內(nèi)容32目的：去粗取精保保持或提高療療效、減小劑劑量、便于制制劑。重要性：直接決定藥藥物作用的物物質(zhì)基礎：安安全性、有效效性、制劑質(zhì)質(zhì)量。關系到藥材資資源能否充分分利用，大生生產(chǎn)可行性和和經(jīng)濟效益。。目的及重要性性33一般原則1、安全性和有效效性為前提（（特別是烏頭等等毒性有效成成分的限度）2、綜合性：：處方特點（（合提/分提）、藥材性質(zhì)質(zhì)（粉性/纖維性質(zhì)）、大生產(chǎn)可可行性和成本本及環(huán)保（有機溶劑使用用問題）3、科學性和和先進性（大孔吸附樹脂脂等現(xiàn)代分離離技術）工藝路線選擇擇（提取純化化）34內(nèi)容提取純化濃縮干燥人參龜甲黃芪、玉竹等等五味30％蔗糖吐溫－801％山梨酸2％）12倍水蒸餾6h滲漉液回收乙醇至1.18-1.22（60℃）濃縮液藥渣水提液8倍70％乙醇浸24h，滲漉9倍水煮三次3h/次石菖蒲等五味味藥渣濃縮液藥液揮發(fā)油藥渣10倍水煮2次2h/次藥渣藥液濃縮至1.15-1.20（60℃）60％醇沉，回收收乙醇至1.18-1.22（60℃）濃縮液枕中健腦液配液灌封濃縮至1.08-1.12（60℃）35分提實例提取純化工藝藝路線設計思思路文獻查閱：針針對功能主治治各藥粗提物物、部位、成成分的研究現(xiàn)有制劑中工工藝參考（五味子—醇提物—醇提工藝路線線）依據(jù)：新藥類類別、劑型、、給藥途徑、、處方及成分分性質(zhì)等（1類－成分－90％以上－硅膠膠柱－真空干干燥）考察：各步驟驟合理性、成成分轉(zhuǎn)移率、、純化物含測測及制訂依據(jù)據(jù)（工藝中含含測，特別是是新指標、新新方法，應進進行方法學考考察，原料－－半成品－成成品、工藝篩篩選指標測定定，如牛蒡苷元）36例：牛蒡苷元元的含測方法法學驗證線性關系考察察：A=1*107C-52628，R=0.9998穩(wěn)定性考察：：12h內(nèi)穩(wěn)定重現(xiàn)性、重復復性：良好好加樣回收：100.6%有效部位含量量測定：4.2%~5.5%37不同制劑，考考慮不同有效成分或有有效部位制劑，應根據(jù)據(jù)其性質(zhì)設計計提取路線（（復方丹參脂溶溶性、水溶性性-水醇法）復方制劑工藝路線設計計的基礎：臨臨床劑型需要要，處方君臣臣佐使、功能能主治，藥味味傳統(tǒng)用法、、藥物性質(zhì)，，成分與藥效效，單提混合合、合提與分分組提，混合合物、部位與與純品。黃芩—黃芩苷38合提分組提單提經(jīng)濟性******成分針對性******精制難度******成分沉淀影響******39不同提取方法法均有其特點與與使用范圍，，應根據(jù)成分分理化性質(zhì)（（狀態(tài)、極性性、溶解性）），或藥效研研究結果（青蒿鱉甲湯－－青蒿素－有有機溶劑提取取或萃取）根據(jù)目標提取物的性質(zhì)選擇分分離方法和條條件（人參皂苷－皂皂苷型大孔吸吸附樹脂）根據(jù)無效或有害組組分性質(zhì)選擇純化化方法和條件件（無效蛋白質(zhì)和和多糖－醇沉沉）40設計多條路線，通過預試驗驗加以選擇選擇合適的溶媒：有效成分提提取率高、安安全、環(huán)保、、價廉、易去去除等。水和和乙醇基本滿滿足這些條件件。盡量避免免使用一、二二類有機溶劑劑41《中國藥典》二部附錄VIIIP殘留溶劑測定定法表格有第第一、二、三三、四類溶劑劑分類苯等5種第一類溶劑“應該避免使使用”氯仿等27種第二類溶劑“應該限制使使用”醋酸、丙酮等等27種第三類溶劑“藥品GMP或其他質(zhì)量要要求限制使用用”石油醚等10中第四類溶劑“尚無足夠毒毒理學資料””42醇提法：全方飲片片70％乙醇回流3次，濾過，離離心，回收乙乙醇并濃縮溶溶劑至1∶1（生藥g/體積mL），得供試液液B，備用。水提法：全方飲片片浸泡、水煎煎煮3次，濾過，離離心，濃縮至至1∶1（生藥g/體積mL），得供試液液A，備用。水提醇沉法：全方飲片片按水提法得得1∶1（生藥g/體積mL）濃縮液，再再加乙醇至含含醇量為70％，0～4℃冷藏過夜，濾濾過，回收乙乙醇并濃縮至至1∶1（生藥g/體積mL），得供試液液C，備用。醇水雙提法：全方飲片片用70％醇回流1次，濾過，離離心，回收乙乙醇至無醇味味，備用；藥藥渣加水煎煮煮2次，濾過，離離心，加入醇醇提濃縮液，，濃縮至1∶1（生藥g/體積mL），得供試液液D，備用例：復黃片工工藝路線選擇擇43組別出血時間凝血時間血小板/μL空白組腎上腺色腙組痔寧片組ABCD33.95±16.082.49±

0.63572.5±

164.645.58±

2.80**1.58±

0.78*879.88±

257.81*11.35±

7.95**1.42±

0.57**792.8±

252.45*27.42±

3.752.18±

1.00702.25±

250.3114.50±

4.58**1.67±

0.81*878.88±

242.25*12.00±

5.10**1.71±

0.71*914.63±

314.77*12.33±

4.85**1.83±

0.64*934.89±

281.20*44例：清熱解毒毒口服液工藝藝路線處方：黃連15g黃芩10g大黃10g工藝路線：浸泡透心水水煎煮煮放放冷，濾過黃連、黃芩、、大黃水水煎煎液濃縮輔輔料灌灌裝質(zhì)檢檢藥液濃濃縮液液藥藥液成成品45實例問題分析析1.黃芩的炮制問問題：蒸、燀燀、沸水投料料2.混合水煎問題：產(chǎn)生生沉淀3.放冷過濾問題：黃芩苷苷大量損失4.劑型：液體制劑久久置易產(chǎn)生黃黃芩苷沉淀，，有效成分含量低46例：揮發(fā)油取取舍問題1、取其療效：柴胡揮發(fā)油解熱疏肝解郁當歸揮發(fā)油：：補血、活血、止痛、潤腸2、舍其毒性：肉豆蔻揮發(fā)油油（肉豆蔻醚醚）有肝臟毒毒性，未見心心血管方面活活性報道，因因此，某復方方制劑用于冠冠心病，提取取肉豆蔻揮發(fā)發(fā)油入藥則欠欠妥。473、含量：揮發(fā)油含量較較多者，如《中國藥典》有揮發(fā)油限量量規(guī)定的，丁丁香、小茴香香、姜黃、莪莪術等，需提取。含量較少者，，大生產(chǎn)根本本無法收集到到者，或僅能能收集芳香水水者，可考慮慮不提取，如如人參揮發(fā)油油、大黃揮發(fā)發(fā)油等。對于除揮發(fā)油油外，其他成成分也是有效效成分，且揮揮發(fā)油熱不穩(wěn)穩(wěn)定者，可考考慮不提取揮揮發(fā)油，只提提取其他成成分入藥，白白芷等。484、劑型：對于液體劑型型，一般需提提揮發(fā)油或者者芳香水，經(jīng)經(jīng)濃縮或在成成型配液時加加入，如酒劑劑、酊劑、醑醑劑、口服液、注注射劑。對于固體劑型型，若揮發(fā)油油量太少，可可不提取，防止工藝復雜雜化、生產(chǎn)成成本大大提高高。495、揮發(fā)油的環(huán)糊精包合：指標的選擇：：揮發(fā)油包合合率、揮發(fā)油油在包合物中中比例、包合合物收率。生產(chǎn)可行性問問題：磁力攪攪拌法、超聲聲包合法、攪攪拌槳法、膠膠體磨法50濃縮與干燥燥工藝路線線設計思路路依據(jù)制劑要要求（稠膏－沖劑劑，濃縮液液－口服液液）根據(jù)物料性性質(zhì)和影響響因素（醇提物噴干困困難）注意方法選擇擇（噴干、凍干）注意保持成分分的相對穩(wěn)定定（金蕎麥花青素素類成分）指標：濃縮或或干燥物收率率、指標成分分或大類成分分含量51一般原則工藝路線初步步確定的基礎上，進行科學學、合理的試試驗設計，優(yōu)優(yōu)化工藝條件件；影響工藝的因因素通常是多多方面的，指標要合理、方法要可行，對多多因素、多水水平同時進行行考察；應根據(jù)具體品種的情況選擇合合適的工藝及及設備，并固固定工藝流程程及相應設備備。工藝條件選擇擇52內(nèi)容提取工藝條件件選擇純化工藝條件件選擇濃縮干燥工藝藝條件選擇提取工藝條件件選擇可原粉入藥者者免提?。ㄋ幉牟男再|(zhì)）：貴重藥物；；用量極少的的藥物；某些些礦物藥。提取方法：浸漬法、煎煎煮法、滲漉漉法、回流提提取法、動態(tài)態(tài)提取法、動動態(tài)逆流提取取法、水蒸汽汽蒸餾、超臨臨界流體萃取取53提取溶劑種類及用量水溶性和極性性較大的成份份常用水和不不同濃度的乙乙醇；低極性成份可可選用丙酮、、乙醚、氯仿仿、乙酸乙酯酯、脂肪油、、汽油等。溶媒用量，一一般根、根莖莖、莖木類等等比重較大的的藥材，水為為藥材量的6～10倍，全全草類類、花花類等等比重重較小小的藥藥材，，為藥藥材量量的8～12倍。有有機溶溶劑為為溶媒媒可適適當減減少。。54全面考考慮影影響提提取效效果的的因素和和參數(shù)數(shù)（工工藝條條件）），進行行科學學、合合理的的選擇擇。提取揮揮發(fā)油油，優(yōu)優(yōu)選提提取時時間、、藥材材粒度度、提提取前前浸泡泡時間間等因因素。。醇提，，優(yōu)選選醇濃濃度、、用量量、提提取次次數(shù)（（包括括時間間）。。水提，，優(yōu)選選煎煮煮次數(shù)數(shù)、煎煎煮時時間、、加水水量等等。滲漉，，優(yōu)選選粒度度、滲滲漉液液收集集量、、滲漉漉速度度等。。常用正交試試驗或或均勻勻設計計等試驗驗篩選選最佳佳工藝藝55單因素素試驗驗設計計(全面試試驗)試驗次次數(shù)：多，，N=rqs次（s為因素素個數(shù)數(shù)，q為水平平數(shù)，，r為試驗驗重復復次數(shù)數(shù)）。。如有有3個因因素素，，每每個個因因素素有有5個水水平平，，不不重重復復試試驗驗，，試試驗驗次次數(shù)數(shù)最最少少為為53=125。全面面可可靠靠：設設計計全全面面，，數(shù)數(shù)據(jù)據(jù)可可靠靠，，結結果果可可比比性性強強應用用條條件件：因因素素水水平平較較少少時時才才采采用用，，只只能能有有一一個個變變量量56試驗號煮提時間t/min總游離有機酸含量/%120

7.5323011.6834013.8045013.82五味味子子總總酸酸提提取取時時間間單單因因素素考考察察57試驗號加水量/倍總游離有機酸含量/%11010.3622012.2733013.8044013.81五味味子子總總酸酸提提取取加加水水量量考考察察58含義義：根根椐椐組組合合理理論論，，按按一一定定規(guī)規(guī)律律構構造造正正交交表表用用來來安安排排多多因因素素試試驗驗的的方方法法。。試驗驗次次數(shù)數(shù)：較較全全面面試試驗驗需需試試驗驗次次數(shù)數(shù)少少得得多多，，如如三三因因素素五五水水平平只只需需做做5２=25次試試驗驗（（全全面面試試驗驗為為53=125）正交交試試驗驗設設計計59指標標方法法因素素水平平表頭頭安排排選表表按表表試驗驗文獻獻知知識識經(jīng)驗驗預預試試因素素和和水水平平數(shù)數(shù)目目試驗驗工工作作量量L9（34）安排排因因素素（交交互互））指標標測測定定直觀觀分分析析方差差分分析析正交交表表分析析重復復驗證證三批批步驟驟60直觀觀分分析析方差差分分析析極差差計計算算檢驗驗重重要要性性確定定水水平平確定定組組合合離差差平平方方和和計計算算檢驗驗顯顯著著性性確定定水水平平確定定組組合合61多指指標標單指指標標綜合合評評分分綜合合平平衡衡多指指標標加加權權綜綜合合單指指標標化化各指指標標分分別別直觀觀/方差差分分析析直觀觀/方差差分分析析各結結論論綜綜合合平平衡衡結論論直接接分分析析62表頭設計ＡＢＣＤ評價指標鹽酸小檗堿（％）列號1234試驗號1111117.762122219.143133319.014212323.325223123.156231222.507313224.188321326.219332129.22Ⅰj55.9165.2666.4770.13A（相對密度1.10,1.15,1.20）

B（乙醇濃度75-65-55%）C(pH7-6-5)Ⅱj68.9768.5071.6865.82Ⅲj79.6170.7366.3468.54Ⅰj18.6421.7522.1623.28Ⅱj22.9922.8323.8921.89Ⅲj26.5423.5822.1122.85Rj7.901.831.781.44SSj93.945.046.193.17醇提提君君藥藥黃黃連連中中鹽鹽酸酸小小檗檗堿堿直直觀觀分分析析63水平因素加水量提取時間提取次數(shù)A（倍）B（h）C（次）1200.51215123101.53L9（34）水水提提正正交交表表頭頭設設計計64試驗號因素ABCD（空白）評價指標11（20倍）1（1h）1（1次）1212（2h）2（2次）2313（3h3（3次）342（15倍）123522316231273（10倍）1328321393321L9（34）正正交交試試驗驗表表設設計計65水平因素原料粉碎度溶媒酸堿度溶媒用量提取溫度提取時間提取次數(shù)ＡＢ（pH）Ｃ（倍）Ｄ（℃）Ｅ（h）F（次）1原藥材51580112飲片712901.523粗顆粒9910023L18（37）正正交交表表頭頭設設計計66試驗號因素ABCDEFG空白評價指標111111112122222231333333421122335222331162331122731213238323213193313212L18（37）正正交交試試驗驗表表18次試試驗驗設設計計（（含含續(xù)續(xù)表表））67（續(xù)續(xù)））10113322111121133212132211313212313214223121315231232116313231217321312318332123168水平因素加水量煎煮時間煎煮次數(shù)醇沉濃度Ａ（倍）Ｂ（小時）Ｃ（次）Ｄ（％）11223802101.5270381160L9（34）正正交交表表頭頭錯錯誤誤舉舉例例因素素不不整整齊齊可可比比跨步步驟驟設設計計69水平因素藥液相對密度醇沉濃度醇溶液pH空白ＡＢ（%）ＣＤ11.10～1.15（50-60℃）75721.16～1.20（50-60℃）65631.21～1.25（50-60℃）555醇沉沉環(huán)環(huán)節(jié)節(jié)應應單單獨獨設設計計70例:復方方正正交交試試驗驗問問題題處方方:人參參10g黃芪芪15g山藥藥10g漢防防己己10g蒼術術10g豬苓苓20g操作作：取取人人參參1.0g、黃黃芪芪1.5g、山山藥藥1.0g、漢漢防防己己1.0g、蒼蒼術術1.0g、豬豬苓苓2.0g，共共9份，，按按表表1、表2安排試驗，，提取次數(shù)數(shù)按常規(guī)提提取2次。測定水提干干膏、醇沉沉干膏和水水提液中人人參皂苷Rg1和Re的含量，，以水提提干膏收收率、““（人參參皂苷Rg1+Re）/水提干干膏””的百百分率率、醇醇沉干干膏收收率為為指標標71水提醇醇沉正正交試試驗表表頭設設計水平A加水量（倍）B提取時間（h）C濃縮液相對密度（50-60℃）D醇沉濃度（%）1811.02-1.037021021.06-1.077531231.10-1.118072水提醇醇沉正正交試試驗表表試驗號A加水量（倍）B提取時間（h）C濃縮液相對密度D醇沉濃度（%）水提干膏收率（%）（人參皂苷Rg1+Re）/干膏（%）醇沉干膏收率（%）11（8）1（1）1（1.02-1.03）1（70）212（2）2（1.06-1.07）2（75）313（3）3（1.10-1.11）3（80）42（10）123522316231273（12）132832139332173實例問問題分分析取樣量量過少少，僅7.5g水提、、醇沉沉不同同工藝藝環(huán)節(jié)節(jié)放在在同一一正交交表中中考察察設計不不合理理：無無空白白項和重復復試驗驗評價指指標：：（人人參皂皂苷Rg1+Re）/干膏（%）、醇醇沉干干膏收收率（（%）不合合理，，應改改為2階段分別評評價水提階段：：水提干膏膏收率（%）、（人參參皂苷Rg1+Re）/100g藥材（%）；醇沉階段：：人參皂皂苷Rg1+Re保留率（%）、醇沉干干膏收率（（%）、人參皂皂苷Rg1+Re）/醇沉干膏（%）74正交試驗驗驗證試驗必必要性及及方法正交試試驗雖雖具可可比性性，但但一個個正交交試驗驗作完完，每每個試試驗僅僅作一一次，，未能能反映應出重重現(xiàn)性性，也也就不不知其其可行行性。。對優(yōu)選選出來來的方方案必必須進進行驗驗證試試驗：：即同同一方方案作作三次次，看看是否否與原原試驗驗結果果基本本一致致。75試驗號因素鹽酸小檗堿ＡＢＣ（%，mg/g）180%121.528.76280%121.530.59380%121.530.92試驗方案因素試驗結果ＡＢＣＡ３Ｂ３Ｃ２80%121.530.09%Ａ３Ｂ２Ｃ２80%101.529.15%最佳與與次佳佳的驗驗證比比較試試驗驗證試試驗76正交試試驗的的常見見問題題總結結取樣量量過少少：有的的每份份才10～20g，試驗驗誤差差對結結果干干擾大大不同工工藝放在同同一正正交表表中考考察，，難以以充分分說明明工藝藝的合合理性性：不同同的工工藝步步驟，，因各各自的的影響響因素素較多多，安安排在在同一一正交交表中中不能能充分分考察察各影影響因因素的的影響響，如如提取取與醇醇沉、、上柱柱吸附附與洗洗脫。。77因素水平設計不合理理：因素水水平的安排排應在預試試驗或者文文獻資料的的基礎上選選擇，不能能盲目選擇擇因素的水水平，否則則，會使所所選的因素素為非主要要因素，水水平嚴重偏偏離最佳條條件最優(yōu)點分分析：是是在考察察范圍內(nèi)內(nèi)的局部最優(yōu)優(yōu)，非全局局最優(yōu)，，在制劑劑研究工工作中，，只要達達到期望望的試驗驗目的，，試驗即即可中止止。78試驗安排排不合理理：正交交表一般般應設立立空白項，無空白白項應安安排重復復試驗。。一般需需對結果果做統(tǒng)計計分析（（正確認認真，數(shù)數(shù)據(jù)與結結論應相相符），，不應直直接以1～9號中的某某個較好好實驗結結果的條條件作為為最優(yōu)條條件。必要時，，應注意意驗證試驗驗：特別是是未選用用正交表表中的最最優(yōu)條件件，應進進行驗證證試驗，，以說明明工藝條條件選擇擇的合理理性。同同時，最最好提供供試驗用用藥材的含測數(shù)數(shù)據(jù)，以以計算提提取率。。79評價指標標不合理理：選擇主要要有效成成分或者者理化性性質(zhì)與有有效成分分相近的的指標性性成分的的提取量量為主要要考察指指標，一一般不能能僅僅只只以干浸膏收率為指標。其他合理指標：有機機溶劑浸出出物、大類類成分（總總多糖、總總生物堿、、總黃酮、、總皂苷等等）、TLC定量或半定定量、生物物學方法（（微生物學學的最小抑抑菌濃度、、主要藥效效學、毒理理學）80注意考察指指標的可比性：如：以提提取物中的的有效成分含含量為指標不妥妥，應以提提取的有效效成分量或或者提取率率為指標；；醇提時不同乙醇濃濃度的醇浸膏不妥。應注意主要指標與與次要指標標的區(qū)別81特點：據(jù)統(tǒng)計理理論設計，，只考慮試試驗點在試試驗范圍內(nèi)內(nèi)充分“均均勻分散””而忽略““整齊可比比”性。次數(shù)少：為為因素所取取水平數(shù)，，即N＝rq，三因素五五水平的試試驗，僅作作5１=5次試驗即可可。為多因因素、多水水平的試驗驗提供了一一種試驗次次數(shù)比較少少的設計方方法。均勻試驗設設計82指標方法因素水平選表按表試驗文獻知識經(jīng)驗預試因素和水平平數(shù)目試驗工作量量指標測定軟件件分分析析回歸歸方方程程分析析實踐踐經(jīng)經(jīng)驗驗專業(yè)業(yè)知知識識方程程分分析析設計計優(yōu)優(yōu)化化條條件件步驟驟83重復復驗證證新清清寧寧片片的的大大黃黃提提取取工工藝藝條條件件篩篩選選試試驗驗水平乙醇濃度（％）乙醇用量（倍）提取時間（min）提取次數(shù)（次）ABCD

105301

2106401

3207501

4308602

5409702

65010802

76011903

870121003

980131103

試驗驗次次數(shù)數(shù)單因因素素94正交交92均勻勻984試驗號/因素ABCD游離蒽醌提取率（％）112450.4804224810.3712336360.6428448720.3013551270.6186663630.5431775180.8449887540.6167999990.6034均勻勻設設計計U9（96）表表試試驗驗安安排排及及結結果果85多元元回回歸歸處理理，，得得回回歸歸方方程程：：Y=0.4954+0.0025A-0.0031C+0.0579D復相相關關系系數(shù)數(shù)r＝0.9501剩余余標標準準差差S＝0.0708F=9.2685（P<0.05），，有有顯顯著著性性意意義義乙醇醇濃濃度度和和提提取取次次數(shù)數(shù)主要要影影響響因因素素。大黃提取最佳工藝條條件為：80％乙醇每次次5倍量回流提提取3次，每次30分鐘。根據(jù)據(jù)此工藝驗驗證三批，，得游離蒽蒽醌平均提提取率為0.8394%，與均勻設設計試驗結結果無顯著著性差異，，說明工藝藝穩(wěn)定可行行。86單因素試驗正交設計均勻設計形式單因素表正交表均勻設計表試驗次數(shù)******結果分析直觀比較直觀/方差分析手工/軟件分析軟件分析試驗結果真實真實/驗證真實/驗證經(jīng)濟性******處方、前處處理、提取取純化、濃濃縮干燥、、成型、質(zhì)量標準樣樣品提取方方法、穩(wěn)定定性影響因因素等環(huán)節(jié)節(jié)均可應用用87純化工藝條條件優(yōu)選根據(jù)純化的的目的、方方法的原理理和影響因因素，選擇適宜的的純化方法法。應考慮擬擬制成的劑劑型與服用用量、有效效成分與去去除成分的的性質(zhì)、后后續(xù)制劑成成型工藝的的需要、生生產(chǎn)的可行行性等固液分離方方法：沉降法、、濾過法（（板框壓濾法法、微孔濾濾膜濾過法法和超濾法法)、離心分離法法（籃式離心機機、蝶片式式離心機和和高速管式離離心機）。常用的分離純化方方法：溶劑萃取取法、沉淀淀法、大孔孔樹脂吸附附法、離子子交換樹脂脂法、聚酰酰胺法、葡葡聚糖凝膠膠色譜法、、膜分離技技術、超速速離心法88例：大孔樹樹脂吸附樹脂前處理理、型號選選擇、用量量、洗脫溶溶媒種類及及用量的選選擇、再生生、更新。。針對苯乙烯烯類大孔吸吸附樹脂，，殘留溶劑劑檢查（苯苯、甲苯、、二甲苯、、苯乙烯、、二乙烯基基苯、烷烴烴類）苯<2ppm;其他<20ppm89影響大孔吸吸附樹脂吸吸附作用的的因素樹脂化學結結構成分性質(zhì)：：極性與非非極性、分分子大小、、類別上樣溶劑性性質(zhì)：溶解解性、pH上樣溶液濃濃度上樣溶液速速度：吸附附流速洗脫劑性質(zhì)質(zhì)：種類、、pH洗脫流速90脂種類選擇擇選擇常用吸吸附劑D101皂苷吸附樹樹脂吸附容量測測定例：三七總總皂苷樹樹脂純化上柱前三七總皂苷量上柱后三七總皂苷量吸附容量

3.85g2.38g46mg/g樹脂9180ml50ml50ml60%醇洗脫測定A0.30140.17730.141870%醇洗脫測定A0.90800.40090.186380%醇洗脫測定A0.73290.005-0.0223洗脫劑種類類選擇92洗脫曲線洗脫液（ml）505050505050三七總皂苷mg883.2421.3113.153.20.60.1取三七，粉粉碎成最粗粗粉，用80％乙醇回流流二次，每次加醇8倍量、回流流1.5h，濾過，減減壓回收乙乙醇，濃縮至0.2g/ml時上D101皂苷吸附樹樹脂柱，水洗，70％乙醇洗脫脫，減壓回收乙乙醇近干，，真空干燥燥，，即即得得。。93濃縮縮與與干干燥燥工工藝藝條條件件具有有相相應應生生產(chǎn)產(chǎn)設設備備的的條條件件下下進進行行。。結結合合制制劑劑的的要要求求對對其其進進行行研研究究和和篩篩選選。。（（稠膏膏－－沖沖劑劑，，濃濃縮縮液液－－口口服服液液）通過過濃濃縮縮或或干干燥燥前前后后指指標標比比較較確確定定合合理理性性（（固形形物物、、成成分分）94方法選擇依據(jù)、種類、、條件。濃縮方法：蒸發(fā)法、減減壓濃縮、薄薄膜濃縮(離心式、外循循環(huán)式、強制制循環(huán)式等)注意在濃縮中中要規(guī)定溫度度、時間、測測定比重或總總固體量或某某指標性成份份的含量。干燥方法：烘干法、真真空干燥法、、噴霧干燥法法、冷凍干燥燥法在工藝研究中中應考察干燥燥的方法、溫溫度及干燥程程度。95濃縮干燥注意意問題部分申報資料料中應提供相相關研究資料料濃縮干燥工藝藝雖簡單，但但對有效成分分保留有重要要影響常壓干燥、減減壓干燥、噴噴霧干燥、冷冷凍干燥等，，不同的方法法和條件對熱熱敏性成分的的破壞程度相相差很大，應應比較96實驗室和大生生產(chǎn)的濃縮干干燥工藝方法法和條件大不不一樣，對有有效成分（特特別是熱不穩(wěn)穩(wěn)定性成分））的破壞程度度大不一樣。。實驗室條件件不具備，應應在中試或者大生生產(chǎn)時補充或者修修改。對制定質(zhì)量標標準的含量測測定限度有直直接關系。對對藥效、毒理理和臨床療效效也有影響。。97現(xiàn)狀原則有效成分和有有效部位制劑劑的評價指標標單味或復方制制劑的評價指指標評價指標確定定98現(xiàn)狀（化學、、生物或藥效效）成分:以方中某一藥藥材的某一成成分或有效部部位的提取轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)移率為指標標，可以是有有效成分或指指示性成分；；浸出物:以水浸出物或或有機溶劑浸出物為指標；綜合:以某一成分的的轉(zhuǎn)移率、浸浸出物的量等等幾個指標綜合評分，以其結結果作為評價價指標；整體效果:以生物學或藥效效學指標作為指標標。99質(zhì)標選擇原則則科學、客觀、、可量化指標標。應與藥理作用用相吻合盡可能兼顧其其他成分檢測方法較成成熟結合中藥特點點，從化學成成分、生物學學指標以及環(huán)環(huán)保、工藝成成本等多方面面綜合考慮。。100有效成分和有有效部位制劑劑的評價指標標得率、純度作為有效成分分主要評價指指標，如葛根素得率、含量、成分種種類組成作為有效效部位主要評評價指標，如如麻黃生物堿101單味或復方制制劑的評價指指標僅以浸膏量為指標，難難以評價?？煽紤]選擇有有代表性的多個成分或大大類成分作為評價指標標。102選擇生物學指標或藥效學指標環(huán)保、工藝經(jīng)經(jīng)濟問題考慮慮有可能引起安安全隱患的成成分應納入（有機溶劑，文文獻報道毒副副作用成分）103主藥（君藥、、臣藥）有效效成分或有效效部位明確的的，以有效