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飼料養(yǎng)分瘤胃降解率測定報告人:陳博2014.05.06前言目前,尼龍袋法是評定飼料養(yǎng)分瘤胃動態(tài)降解率和有效降解率的常用方法。本方法采用數(shù)學(xué)非線性回歸擬合方法來對獲得的各時間點降解率數(shù)據(jù)進行瘤胃食糜流通速度(Kp)影響因素的權(quán)重處理,進而將降解率數(shù)值改為用瘤胃養(yǎng)分有效降解率(ED,effectivedegradability)指標。原理:在瘤胃內(nèi)放置裝有少量飼料樣本的尼龍袋發(fā)酵降解少量飼料樣本,培養(yǎng)一定時間后,根據(jù)袋內(nèi)飼料樣本某樣分含量的減少,計算其在瘤胃中相應(yīng)時間點的消失率,再根據(jù)各時間點的消失率來計算有效降解率。優(yōu)點:飼料數(shù)量少;不影響瘤胃正常發(fā)酵;袋內(nèi)環(huán)境與瘤胃內(nèi)環(huán)境能夠保持一致。被測樣本:自然狀態(tài)風(fēng)干或65℃烘干,2.5mm篩孔粉碎;尼龍袋:選擇孔眼為40~60m的尼龍布,制成長×寬為8cm×12cm的尼龍袋,袋底部兩角呈鈍圓形,以免樣本殘留。尼龍袋用細滌綸線雙線縫合,使用前清洗干凈并進行65℃烘干;半軟塑料管(輸液管):用于固定尼龍袋,并保證裝有待測樣品的尼龍袋始終沉浸于瘤胃食糜中。為了不使管輕易斷裂,可以用對折后魚線穿在管中,用針線將裝有樣本的尼龍袋縫在該管上。操作步驟稱樣用分析天平稱取烘干后尼龍袋的重量,稱取精飼料樣品每個袋10-15g,粗飼料樣品每個袋2-5g,并小心放入尼龍袋底部,注意袋口處切勿沾染樣品。尼龍袋和待測樣品均精確至0.0001克,每根管上可以縫2個或4個尼龍袋。放置尼龍袋在早晨飼喂前2h,將固定尼龍袋的半軟塑料管連同尼龍袋一起送入瘤胃腹囊食糜中。用塑料管內(nèi)的魚線將半軟塑料管固定于瘺管蓋上。每頭(只)試驗動物放置的軟管數(shù)根據(jù)實際情況而定,一般每只羊最多可以放4根管,沒根管上縫4個尼龍袋,共16個尼龍袋。由于牛的瘤胃相對較大,可以放置更多的尼龍袋;沖洗
將取出的尼龍袋浸泡在冰水中,并立即用自來水沖洗,在沖洗過程中可用手輕輕撫動袋子,不要搓洗,直至水清為止。在沖洗過程中嚴格防止尼龍袋中的殘余物隨水逃逸,最后將沖洗后的尼龍袋放在65℃烘干。樣品空白試驗?zāi)承┘毿〉臉颖绢w??赡懿唤?jīng)瘤胃降解就迅速通過尼龍袋孔逃逸,此部分實際上并未真正參加瘤胃的降解過程,因而應(yīng)從裝袋樣品中扣除。這部分未經(jīng)瘤胃降解就直接從尼龍袋中逃逸的樣品可通過空白試驗進行校正,即在進行上述操作的同時,按以上完全一樣的步驟操作另裝2個尼龍袋,但不將其放入瘤胃內(nèi),然后進行沖洗、烘干處理。
目標成分降解量的計算采用下式計算樣品各目標成分各培養(yǎng)時間點的降解量:
某目標成分某培養(yǎng)時間點的降解量(g)=[校正裝袋樣品量(g)×空白試驗殘余物中某目標成分的含量(%)]-[某培養(yǎng)時間點殘余物的重量(g)×某培養(yǎng)時間點殘余物中某目標成分的含量(%)]
目標成分實時降解率的計算降解參數(shù)的計算飼料中某成分在瘤胃中的實時降解率符合指數(shù)曲線:P=a+b(1-e-ct)P為t時刻被測樣品某目標成分的實時瘤胃降解率,%;a為被測樣品某目標成分的快速降解部分,%;b為被測樣品某目標成分的慢速降解部分,%;c為b部分的降解速率,%/h;t為飼料在瘤胃內(nèi)停留的時間,h。利用各培養(yǎng)時間點實時降解率的數(shù)據(jù)(P和t),采用最小二乘法,或統(tǒng)計軟件中的非線性回歸程序,或飼料瘤胃降解參數(shù)計算軟件,計算式中a、b和c值。有效降解率的計算利用上述的計算結(jié)果(a、b、c值)采用下式計算待測飼料目標成分的有效降解率:P=a+bc/(c+k)k為待測樣品某目標成分的瘤胃外流速率,%/h。k值可按本規(guī)程的附錄《反芻動物飼料瘤胃外流速率的測定》中所規(guī)定的方法測
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