室內(nèi)空氣中細菌的測定課件

室內(nèi)空氣中細菌的測定——平皿暴露沉降法目的：學習和掌握平皿暴露沉降法測定公共場所空氣中細菌的總數(shù)。評價居室的衛(wèi)生狀況理論依據(jù)和實際應用：室內(nèi)空氣中的微生物主要來源是人們在室內(nèi)的生活和活動，使微生物隨飛沫與懸浮顆粒物飛揚于空氣中。所以室內(nèi)空氣中的微生物數(shù)量的多少取決于室內(nèi)衛(wèi)生狀況、居住密度、居民健康情況、人們的活動情況、室內(nèi)通風效果等。居住密度大、活動頻繁、通風不良時，細菌總數(shù)就多。所以它可以代表居室一般衛(wèi)生狀況的意義；三、原理：空氣中附著于塵埃或飛沫小滴上的細菌，經(jīng)過一段時間，可自然沉降于培養(yǎng)基的表面上，經(jīng)培養(yǎng)后，計數(shù)其生長的菌落數(shù)，再按公式推算出每立方米空氣中的細菌數(shù)。四、實驗準備：（一）儀器與設(shè)備：高壓蒸汽滅菌器電熱恒溫干燥箱恒溫培養(yǎng)箱電冰箱玻璃平皿及制備培養(yǎng)基用的一般設(shè)備（二）試劑與材料：營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基：（1）成份：蛋白胨10克牛肉浸膏3克氯化鈉5克磷酸二氫鈉1克瓊脂15～20克蒸餾水1000毫升（二）試劑與材料：營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基：（2）制法：將上述成分混合后，加熱溶解。調(diào)節(jié)PH值7.8～8.0。過濾除去沉渣，分裝于三角燒瓶中，經(jīng)121℃（103kPa）高壓蒸氣滅菌20分鐘，然后傾注適量（15～20毫升）于已滅菌處理的平皿內(nèi)，制成營養(yǎng)瓊脂平板備用。若當天不用，應置冰箱內(nèi)保存。（二）選擇采樣點的要求：1．采樣點的數(shù)量根據(jù)監(jiān)測室內(nèi)面積大小和現(xiàn)場情況而確定，以期能正確反映室內(nèi)空氣污染物的水平。原則上小于50㎡的房間應設(shè)（1～3）個點；50㎡～100㎡設(shè)（3～5）個點；100㎡以上至少設(shè)5個點。在對角線上或梅花式均勻分布。

2．采樣點應避開通風口，離墻壁距離應大于0.5m。

3．采樣點的高度：原則上與人的呼吸帶高度相一致。相對高度0.5m～1.5m之間。

六、結(jié)果與計算：1、奧梅梁斯基公式：100cm2的培養(yǎng)皿讓空氣沉降5分鐘，培養(yǎng)出的細菌數(shù)相當于10升空氣中的細菌數(shù)。

X=（N×100×100）/лR2

式中：X——每立方米空氣中的細菌數(shù)N——平板直接計數(shù)的平均菌落數(shù)R——平皿的底面積半徑（cm）：9cm3、將五個采樣點的菌落數(shù)平均計算出室內(nèi)平均的菌落數(shù)。

12345平均細菌數(shù)（CFU/皿）感應式菌落計數(shù)儀九、評價：室內(nèi)空氣中細菌總數(shù)規(guī)定撞擊法≤4000cfu/m3;沉降法≤45cfu/皿。（室內(nèi)空氣中細菌總數(shù)衛(wèi)生標準GB/T17093-1997）旅店業(yè)衛(wèi)生標準GB9663-1996Ⅰ類環(huán)境包括層流潔凈手術(shù)室和層流潔凈病房只能采用層流通風才能空氣中的微生物減到此標準以下。

Ⅱ類環(huán)境包括普通手術(shù)室、產(chǎn)房、嬰兒室、早產(chǎn)兒室、普通保護性隔離室、供應室潔凈區(qū)、燒傷病房、重癥監(jiān)護病房、采用循環(huán)風紫外線空氣消毒器或靜電吸附式空氣消毒器，這類均為有人房間，必須采用對人無毒無害且可連續(xù)消毒才能使空氣中的微生物減到此標準以下。

Ⅲ類環(huán)境包括兒科病房、婦產(chǎn)科檢查室、注射室、換藥室、治療室、供應室清潔區(qū)、急診室、化驗室、各類普通病房室和房間，采用紫外線消毒，化學消毒劑熏蒸或噴霧消毒。十、注意事項：1.若測定空氣中的溶血性鏈球菌及綠色鏈球菌，則用血瓊脂平板，其他操作及計算方法與細菌總數(shù)測定方法相同。2.平皿的底面積直徑不宜小于9cm。3.選擇采樣點時，應盡量避開空調(diào)、門窗等氣流變化較大處。整個采樣過程中，應動作輕緩，避免揚起灰塵，并要注意