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文檔簡介
2023學(xué)年高考生物模擬試卷考生須知:1.全卷分選擇題和非選擇題兩部分,全部在答題紙上作答。選擇題必須用2B鉛筆填涂;非選擇題的答案必須用黑色字跡的鋼筆或答字筆寫在“答題紙”相應(yīng)位置上。2.請用黑色字跡的鋼筆或答字筆在“答題紙”上先填寫姓名和準考證號。3.保持卡面清潔,不要折疊,不要弄破、弄皺,在草稿紙、試題卷上答題無效。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.除草劑敏感型的大豆經(jīng)輻射獲得抗性突變體,且敏感基因與抗性基因是1對等位基因。下列敘述正確的是A.突變體若為1條染色體的片段缺失所致,則該抗性基因一定為隱性基因B.突變體若為1對同源染色體相同位置的片段缺失所致,則再經(jīng)誘變可恢復(fù)為敏感型C.突變體若為基因突變所致,則再經(jīng)誘變不可能恢復(fù)為敏感型D.抗性基因若為敏感型基因中的單個堿基對替換所致,則該抗性基因一定不能編碼肽鏈2.葡萄果皮中花色苷含量決定葡萄果實的著色度,直接影響果實的外觀品質(zhì)?,F(xiàn)以三年生中熟品“巨玫瑰”為材料,在葡萄轉(zhuǎn)色期,分別用0、100、500、1000mg/L的ABA溶液浸泡果穗10s,測定其葡萄皮花色苷含量如圖所示,下列說法錯誤的是()A.一定濃度的ABA能顯著促進“巨玫瑰”葡萄果皮中花色苷積累B.清水處理組葡萄果實中也能產(chǎn)生脫落酸,引起花色苷含量發(fā)生變化C.在本實驗中,ABA處理濃度越高,果皮中花色苷含量越高D.ABA處理不但能增加葡萄果皮中花色苷的積累量,還能使葡萄果實提前完成轉(zhuǎn)色3.用含32P的培養(yǎng)基培養(yǎng)醋酸桿菌一段時間,能在醋酸桿菌中檢測出放射性的化合物是()A.油脂 B.腺苷 C.核苷酸 D.丙酮酸4.生物膜上的質(zhì)子泵(H+的載體蛋白)可分為三種:F—型質(zhì)子泵、P—型質(zhì)子泵和V—型質(zhì)子泵,前一種是生成ATP的質(zhì)子泵,后兩種是消耗ATP的質(zhì)子泵。下列關(guān)于H+跨膜運輸?shù)臄⑹?,正確的是()A.液泡膜通過V—型質(zhì)子泵吸收H+的方式是協(xié)助擴散B.葉綠體類囊體膜上的質(zhì)子泵是P—型質(zhì)子泵C.F—型質(zhì)子泵為H+逆濃度梯度運輸D.線粒體內(nèi)膜上的質(zhì)子泵是F—型質(zhì)子泵5.下列有關(guān)植物激素的說法,正確的是()A.植物激素的作用特點都具有兩重性B.植物激素在幼嫩組織中均進行極性運輸C.植物生長發(fā)育和適應(yīng)環(huán)境是多種激素共同調(diào)節(jié)的結(jié)果D.乙烯只存在于繁殖器官中,其主要作用是促進果實成熟6.下列關(guān)于正常人體內(nèi)生理活動的敘述中,不正確的是()A.神經(jīng)元在產(chǎn)生興奮時有Na+流入細胞,在靜息時則不發(fā)生Na+的運輸B.當(dāng)抑制性的神經(jīng)遞質(zhì)結(jié)合在突觸后膜上時,其膜電位仍表現(xiàn)為外正內(nèi)負,但膜內(nèi)外電位差值比靜息狀態(tài)時更大C.興奮在神經(jīng)纖維上的傳導(dǎo)方向與膜外局部電流方向相反D.興奮性神經(jīng)遞質(zhì)經(jīng)突觸前膜釋放后可以引發(fā)一次新的神經(jīng)沖動,也可以使肌肉收縮或某些腺體分泌7.各種育種方式,為人類的生產(chǎn)實踐提供了豐富的材料,下列關(guān)于育種的敘述,正確的是()A.黑農(nóng)5號大豆和轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的育種原理分別是染色體變異和基因重組B.三倍體無籽西瓜有機物含量高且高度不育,但仍屬可遺傳變異C.利用誘變育種,誘發(fā)家蠶常染色體基因移到性染色體上,其原理是基因突變D.單倍體育種可通過對花藥離體培養(yǎng)獲得的單倍體種子進行秋水仙素處理以獲得穩(wěn)定遺傳的后代8.(10分)在家雞中,顯性基因C是彩羽必需的,另一基因I為其抑制因子,白來航雞(CCII)和白溫多特雞(ccii)羽毛均為白色,而兩品種雜交F2代中出現(xiàn)了3/16的彩色羽毛,以下推測不正確的是()A.基因C和I位于非同源染色體上B.F1代個體的羽毛均為白色C.F2代白羽的基因型有4種D.F2代彩羽個體中有1/3純合子二、非選擇題9.(10分)某昆蟲(XY型性別決定)的體色和眼色分別由等位基因A(a)和B(b)控制,其中有一對基因位于性染色體上,現(xiàn)有多只黑身紅眼雄昆蟲與多只相同基因型的黃身紅眼雌昆蟲隨機交配(假定每對昆蟲子代數(shù)目相同),F(xiàn)1全為黃身,其中雄性全為紅眼,雌性紅眼:白眼=5:1,讓F1中紅眼雌雄個體隨機交配,F(xiàn)2的表現(xiàn)型及比例如下表。(不考慮突變)性別黃身紅眼黃身白眼黑身紅眼黑身白眼雌性51/1609/16017/1603/160雄性60/16020/160(1)該昆蟲的紅眼和白眼中,顯性性狀是________,眼色基因位于________染色體上。(2)親本中的雄昆蟲基因型及其比例為__________________。設(shè)計測交實驗來驗證親本雌昆蟲的基因型,并用遺傳圖解表示______。(3)F2中的黃身紅眼雌昆蟲有________種基因型,其中雙雜合子所占比例是________。10.(14分)人血清白蛋白(HSA)是血漿中含量最豐富的蛋白質(zhì),在維持血漿滲透壓、抗凝血等方面起著重要作用,具有重要的醫(yī)用價值。如圖是用基因工程技術(shù)獲取重組HSA(rHSA)的兩條途徑。(1)為獲取HSA基因,首先要提取人血細胞中的mRNA,利用_______法合成cDNA,再利用PCR技術(shù)進行快速擴增,在這一過程中,需要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根據(jù)這一序列合成_______,PCR過程中,溫度降低到55℃的目的是_________________。(2)構(gòu)建在水稻胚乳細胞內(nèi)特異表達rHSA的載體時,需要選擇水稻胚乳細胞啟動子,而不能選擇其他物種和組織細胞的啟動子,原因可能是_________________。(3)在利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化水稻受體細胞的過程中,為了吸引農(nóng)桿菌移向水稻受體細胞,需添加_________物質(zhì)。(4)選用大腸桿菌作為受體細胞的優(yōu)點有____________(答出兩點即可)。但相比于水稻胚乳細胞,利用大腸桿菌獲得的rHSA也有一些缺點,請從生物膜系統(tǒng)的角度進行分析_____________________。(5)利用上述方法獲得的rHSA不能直接用于臨床醫(yī)療,你推測的原因是_____________。11.(14分)為增加油葵種子中的含油量,科學(xué)家嘗試將花生中的酶A基因?qū)胗涂毎?,獲得轉(zhuǎn)基因油葵新品種。(1)為獲取目的基因,可從花生細胞中提取_________,經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA。以此cDNA為模板通過PCR技術(shù)擴增目的基因。(2)構(gòu)建重組DNA分子(如圖所示)最好選用_________限制酶,目的是可避免_________。(3)普通大腸桿菌細胞中沒有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因,將構(gòu)建的重組DNA分子導(dǎo)入農(nóng)桿菌中,將獲得的農(nóng)桿菌接種在含_________的固體平板上培養(yǎng)得到含重組質(zhì)粒的單菌落,再利用培養(yǎng)基震蕩培養(yǎng),可以得到用于轉(zhuǎn)化的浸染液。(4)剪取油葵的葉片放入浸染液中一段時間后,經(jīng)過篩選獲得轉(zhuǎn)基因油菜細胞。最后經(jīng)過__________________培育成轉(zhuǎn)基因油葵植株。此種技術(shù)的原理是_________。(5)研究發(fā)現(xiàn),如果將該酶A的20位和24位氨基酸變?yōu)榘腚装彼?,其催化能力將提?倍。通過蛋白質(zhì)工程對酶A進行改造,所需步驟有_________。a.蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)設(shè)計b.蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能分析c.蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的定向改造d.酶A基因的定向改造e.將改造后的酶A基因?qū)胧荏w細胞f.將定向改造的酶A導(dǎo)入受體細胞(6)經(jīng)過種植轉(zhuǎn)基因油葵發(fā)現(xiàn),雖然轉(zhuǎn)基因油葵種子中含油量上升,但是抗灰霉菌的能力丟失,其原因是_________。12.神經(jīng)纖毛蛋白-1(NRP-1)是血管內(nèi)皮生長因子的新型受體,經(jīng)實驗證明,與正常組織細胞相比,NRP-1在乳腺癌(MCF7)細胞中高表達,通過參與多種信號轉(zhuǎn)導(dǎo)來促進腫瘤血管的生成,進而促進腫瘤體積的增長。本研究將為NRP-1單克隆抗體靶向治療乳腺癌提供數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。(1)取乳腺癌(MCF7)組織塊,運用____________________技術(shù)獲得MCF7細胞用于后續(xù)實驗。用人的_____________________蛋白對小鼠進行注射,使小鼠產(chǎn)生免疫反應(yīng),制備雜交瘤細胞,將雜交瘤細胞轉(zhuǎn)到多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng),吸取培養(yǎng)孔中的________________(填上清液或沉淀細胞),應(yīng)用_________________技術(shù)進行抗體陽性檢測。經(jīng)多次篩選和細胞培養(yǎng),獲得NRP-1單克隆抗體(NRP-1MAb)。(2)將MCF7細胞制成單細胞懸液,等量注入4組裸鼠(即無胸腺裸鼠)右前腋下,接種后3天開始給藥NRP-1單克隆抗體(NRP-1MAb),共給藥7次,對照組注射等量的生理鹽水。每隔5天測算一次腫瘤的體積,如下圖所示:從上圖中可以看出_________________________(3)結(jié)合題干信息,綜合以上研究請你推測NRP-1MAb抑制腫瘤的作用機理是_____________________。(4)注射不同劑量NRP-1MAb33天后,剝離腫瘤組織稱重,實驗結(jié)果如下圖:從該結(jié)果中可以看出___________________________。綜合比較(3)和(5)的實驗結(jié)果,可見中高劑量和低劑量的NRP-1MAb在降低腫瘤體積和降低腫瘤重量上出現(xiàn)了不一致性。通過實驗研究,有助于指導(dǎo)實踐中科學(xué)用藥。
參考答案(含詳細解析)一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、A【答案解析】
A、若突變體為1條染色體缺失導(dǎo)致,則可能是帶有敏感型基因的片段缺失,原有的隱性基因(抗性基因)得以表達的結(jié)果,A正確;B、突變體為1對同源染色體的片段都缺失導(dǎo)致的,經(jīng)誘變再恢復(fù)原狀的可能性極小,B錯誤;C、突變體若為基因突變所致,基因突變具有不定向性,再經(jīng)誘變具有恢復(fù)的可能,但概率較低,C錯誤;D、敏感型基因中的單個堿基對發(fā)生替換導(dǎo)致該基因發(fā)生突變,也可能使控制的肽鏈提前終止或者延長,不一定是不能編碼蛋白質(zhì),D錯誤。2、C【答案解析】
分析題圖可知,與對照組(清水)相比,不同濃度的ABA溶液處理后花色苷含量均有所增加,據(jù)此分析作答?!绢}目詳解】A、與清水組對照相比,實驗中不同濃度ABA處理后均能促進“巨玫瑰”葡萄果皮中花色苷積累,A正確;B、果實中能產(chǎn)生內(nèi)源ABA,B正確;C、分析影響花色苷含量有兩個因素,一是ABA濃度,二是處理后天數(shù),應(yīng)改為在一定范圍內(nèi),處理后經(jīng)過相同的天數(shù),ABA濃度越高,花色苷含量越高,C錯誤;D、與對照組相比,不同實驗組不僅增加了最后花色苷的含量,還使花色苷含量提前達到高峰,D正確。故選C?!敬鸢更c睛】明確實驗設(shè)計的變量原則與對照關(guān)系,并能結(jié)合題圖信息分析各項是解答本題的關(guān)鍵。3、C【答案解析】
32P具有放射性,細胞吸收的磷酸鹽可用于合成含有P的物質(zhì)或結(jié)構(gòu),若用含32P的磷酸鹽的營養(yǎng)液培養(yǎng)醋酸桿菌,一段時間后,含有P的物質(zhì)或結(jié)構(gòu)都可能出現(xiàn)放射性?!绢}目詳解】A、油脂的元素組成是C、H、O,不含P,A錯誤;B、腺苷由腺嘌呤和核糖構(gòu)成,不含P,B錯誤;C、核苷酸是構(gòu)成核酸的基本單位、含有P,C正確;D、丙酮酸的結(jié)構(gòu)式是CH3COCOOH、不含P,D錯誤。故選C。【答案點睛】本題考查細胞中的元素和化合物的知識,考生識記細胞中常見幾種化合物的元素組成是解題的關(guān)鍵。4、D【答案解析】
根據(jù)題意分析,“一種為生成ATP的F-型質(zhì)子泵,生成ATP的場所為細胞質(zhì)基質(zhì)、類囊體薄膜、線粒體內(nèi)膜和線粒體基質(zhì)”,“兩種為消耗ATP的P-型質(zhì)子泵和V-型質(zhì)子泵,可見這兩種質(zhì)子泵為H+逆濃度梯度運輸”?!绢}目詳解】A、根據(jù)以上分析可知,V—型質(zhì)子泵為H+逆濃度梯度運輸,屬于主動運輸,A錯誤;B、類囊體薄膜是生成ATP的場所之一,該膜上的質(zhì)子泵為F—型,B錯誤;C、H+逆濃度梯度運輸需要消耗ATP,而F—型質(zhì)子泵是一種能生成ATP的質(zhì)子泵,C錯誤;D、線粒體內(nèi)膜是生成ATP的場所之一,該膜上的質(zhì)子泵為F—型,D正確。故選D。5、C【答案解析】
植物激素是由植物體內(nèi)產(chǎn)生,能從產(chǎn)生部位運送到作用部位,對植物的生長發(fā)育有顯著影響的微量有機物。植物體內(nèi)存在的目前分認的植物激素有:生長素、細胞分裂素、赤霉素、乙烯和脫落酸等?!绢}目詳解】生長素的作用表現(xiàn)出兩重性,其他植物激素沒有兩重性,A錯誤;生長素在幼嫩組織進行極性運輸,其他植物激素不進行極性運輸,B錯誤;在植物的生長發(fā)育和適應(yīng)環(huán)境變化的過程中,各種植物激素并是是孤立地起作用,而是多種激素相互作用共同調(diào)節(jié)的結(jié)果,C正確;植物體各個部位都能合成乙烯,乙烯的主要作用是促進果實成熟,D錯誤;因此選C?!敬鸢更c睛】扎實的生物學(xué)基礎(chǔ)知識是解題的關(guān)鍵。6、A【答案解析】
抑制性遞質(zhì)的作用機理:同樣是突觸前神經(jīng)元軸突末梢興奮,但釋放到突觸間隙中的是抑制性遞質(zhì)。此遞質(zhì)與突觸后膜特異性受體結(jié)合,使離子通道開放,提高膜對鉀離子、氯離子,尤其是氯離子的通透性,使突觸后膜的膜電位增大?!绢}目詳解】A、神經(jīng)元在產(chǎn)生興奮時有Na+流入細胞,在靜息時需要鈉鉀-泵將Na+運出,K+轉(zhuǎn)入,A錯誤;B、當(dāng)抑制性的神經(jīng)遞質(zhì)結(jié)合在突觸后膜上時,會使陰離子進入突觸后膜,因此,其膜電位仍表現(xiàn)為外正內(nèi)負,但膜內(nèi)外電位差值比靜息狀態(tài)時更大,B正確;C、興奮在神經(jīng)纖維上的傳導(dǎo)方向與膜外局部電流方向相反,而與膜內(nèi)局部電流方向相同,C正確;D、興奮性神經(jīng)遞質(zhì)經(jīng)突觸前膜釋放后,其作用的具體表現(xiàn)為可以引發(fā)一次新的神經(jīng)沖動,也可以使肌肉收縮或某些腺體分泌,D正確。故選A。7、B【答案解析】
四種育種方法的比較如下表:雜交育種誘變育種單倍體育種多倍體育種方法雜交→自交→選優(yōu)輻射誘變、激光誘變、化學(xué)藥劑處理花藥離體培養(yǎng)、秋水仙素誘導(dǎo)加倍秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗原理基因重組基因突變?nèi)旧w變異(染色體組先成倍減少,再加倍,得到純種)染色體變異(染色體組成倍增加)【題目詳解】A、黑農(nóng)5號大豆是誘變育種的結(jié)果,其育種原理為基因突變;轉(zhuǎn)基因抗蟲棉是基因工程育種的結(jié)果,其育種原理是基因重組,A錯誤;
B、三倍體無籽西瓜有機物含量高且高度不育,其原理是染色體數(shù)目變異,所以仍屬可遺傳變異,B正確;
C、利用誘變育種,誘發(fā)家蠶常染色體基因移到性染色體上,其原理是染色體結(jié)構(gòu)變異,C錯誤;
D、由于單倍體高度不育,不能結(jié)種子,所以單倍體育種可通過對花藥離體培養(yǎng)獲得的單倍體幼苗進行秋水仙素處理以獲得穩(wěn)定遺傳的后代,D錯誤。
故選B?!敬鸢更c睛】本題考查育種的相關(guān)知識,要求考生識記幾種育種方法的原理、方法、優(yōu)點、缺點及實例,能結(jié)合所學(xué)的知識準確判斷各選項。8、C【答案解析】
顯性基因C是彩羽必需的,另一基因I為其抑制因子,親本白來航雞(CCII)和白溫多特雞(ccii)羽毛均為白色,F(xiàn)1為CcIi(白色),F(xiàn)2為彩色(3C_ii)∶白色(9C_I_、4cc__)=3∶13,是9∶3∶3∶1的變式?!绢}目詳解】A、兩品種雜交F2代中出現(xiàn)了3/16的彩色羽毛,一共出現(xiàn)16份,與9∶3∶3∶1相符,因此基因C和I位于兩對同源染色體即非同源染色體上,A正確;B、F1代個體的基因型為CcIi,顯性基因C是彩羽必需的,另一基因I為其抑制因子,因此F1代個體的羽毛均為白色,B正確;C、F2代白羽的基因型有7種(CCII、CcII、CCIi、CcIi、ccIi、ccII、ccii),C錯誤;D、F2代彩羽個體(3C_ii)中有1/3純合子(1CCii),D正確。故選C。二、非選擇題9、紅眼X、YaaXBYB:aaXbYB=2:1420/51【答案解析】
題意分析,親本黑身和黃身個體雜交,F(xiàn)1全為黃身,說明黃身對黑身為顯性,結(jié)合子二代的性狀表現(xiàn)可知控制體色的基因位于常染色體上,結(jié)合題目信息(某昆蟲(XY型性別決定)的體色和眼色分別由等位基因A(a)和B(b)控制,其中有一對基因位于性染色體上)可知控制眼色的基因位于性染色體上,親本全為紅眼,而后代中出現(xiàn)白眼,說明紅眼對白眼為顯性,且相關(guān)基因位于性染色體上,結(jié)合題意中的子一代中的雄性個體全表現(xiàn)為紅眼可知B(b)基因位于X、Y的同源區(qū)域,則親本的基因型為:父本基因型:2aaXBYB:1aaXbYB;母本基因型:AAXBXb?!绢}目詳解】(1)由分析可知,該昆蟲的性狀表現(xiàn)為,紅眼對白眼為顯性,且眼色基因[B(b)]位于X、Y染色體上。(2)由中F1雌性紅眼:白眼=5:1,可知,親本中的雄性個體不是一種基因型,父本紅眼的基因型為XBYB和XbYB,而且只有滿足aaXBYB:aaXbYB=2:1時,子代中的雌性個體才會出現(xiàn)上述的比例。親本中雌性昆蟲的基因型為AAXBXb,為了驗證親本雌昆蟲的基因型,需要設(shè)計測交實驗,用黑身白眼的雄性個體(aaXbYb)與該雌性個體進行雜交,遺傳圖解如下:(3)由分析可知,親本中父本基因型:2aaXBYB:1aaXbYB;母本基因型:AAXBXb,F(xiàn)1均為Aa,其中雄性:1AaXBYB:1AaXbYB,雌性:2XBXB:3XBXb:1XbXb;取F1紅眼雌雄個體隨機交配,則F2中的黃身紅眼雌昆蟲的基因型為(1AA:2Aa)×(7XBXB:10XBXb),顯然有2×2=4種基因型,其中雙雜合子的比例是2/3×10/17=20/51?!敬鸢更c睛】熟知伴性遺傳和常染色體遺傳的特性并能利用該特性進行基因位置的判斷是解答本題的關(guān)鍵!學(xué)會用分離定律的思路解答自由組合定律的計算問題是解答本題的另一關(guān)鍵!10、反轉(zhuǎn)錄引物兩種引物通過互補配對與兩條單鏈DNA結(jié)合啟動子具有(物種及組織)特異性酚類繁殖快;單細胞;遺傳物質(zhì)少大腸桿菌沒有生物膜系統(tǒng)(或內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體),不能對rHSA進行深加工rHSA可能沒有生物活性或功能性較差或rHSA可能有安全隱忠【答案解析】
基因工程的操作步驟:目的基因的獲取;構(gòu)建基因表達載體(含目的基因、啟動子、終止子、復(fù)制原點和標記基因);把目的基因?qū)胧荏w細胞(顯微注射法、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、鈣離子處理法);目的基因的檢測和鑒定(分子水平、個體水平檢測)。【題目詳解】(1)獲取HSA基因,提取人血細胞中的mRNA,在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化下利用反轉(zhuǎn)錄法合成cDNA,再利用PCR技術(shù)進行快速擴增,PCR過程中,需要一段已知目的基因的核苷酸序列合成引物,溫度降低到55℃的目的是兩種引物通過互補配對與兩條單鏈DNA結(jié)合。(2)由于啟動子具有物種或組織特異性,構(gòu)建在水稻胚乳細胞內(nèi)特異表達rHSA的載體時,需要選擇水稻胚乳細胞啟動子。(3)酚類物質(zhì)會吸引農(nóng)桿菌移向水稻受體細胞,在利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化水稻受體細胞的過程中,故需添加酚類物質(zhì)。(4)大腸桿菌受體細胞的優(yōu)點有繁殖快;單細胞。但相比于水稻胚乳細胞,大腸桿菌沒有生物膜系統(tǒng)(或內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體),不能對rHSA進行深加工。(5)利用上述方法獲得的rHSA可能沒有活性,不能直接用于臨床醫(yī)療?!敬鸢更c睛】解答本題的關(guān)鍵是識記基因工程的操作工具及具體的操作步驟,掌握各步驟中的相關(guān)細節(jié),能結(jié)合題干信息準確答題。11、mRNABamHⅠ和PstⅠ質(zhì)粒自身的黏性末端連接或目的基因與質(zhì)粒反向連接氨芐青霉素植物組織培養(yǎng)技術(shù)植物細胞的全能性b、a、d、e抗灰霉菌基因沒有表達(或丟失等)【答案解析】
基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。(2)基因表達載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細胞:根據(jù)受體細胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。(4)目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù);②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù);③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù);個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?!绢}目詳解】(1)逆轉(zhuǎn)錄過程需要從供體細胞內(nèi)提取出的mRNA為模板,以脫氧核苷酸為原料合成cDNA。(2)構(gòu)建重組DNA分子時選用的限制酶要不破壞目的基因,所以不能用EcoRI,同時盡量防止質(zhì)粒自身的黏性末端連接或目的基因與質(zhì)粒反向連接,所以最好選用兩種限制酶,即BamHⅠ和PstⅠ。(3)根據(jù)限制酶的切割位點,由于使用BamHⅠ和PstⅠ會破壞抗四環(huán)素標記基因,但抗氨芐青霉素的標記基因是完整的所以只能用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基篩選含重組質(zhì)粒的單菌落。(4)得到轉(zhuǎn)基因細胞后,要培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因植株,需要用植物的組織培養(yǎng)技術(shù)才能實現(xiàn),其依據(jù)的原理是植物細胞的全能性。(5)蛋白質(zhì)工程的步驟是:蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能分析→蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)設(shè)計→酶A基因的定向改造→將改造后的酶A基因?qū)胧荏w細胞→獲得所需蛋白質(zhì)。(6)轉(zhuǎn)基因油葵種子中含油量上升,但
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