乙肝實驗室檢查終版11.24課件

乙肝實驗室檢查主要內(nèi)容乙肝（我國）患者及治療情況現(xiàn)狀1乙肝的危害及其病理原因2乙肝常用實驗室檢查分析3乙肝兩對半定量與定性檢測的臨床比較4一乙肝（我國）患者及治療情況現(xiàn)狀慢性乙型肝炎（簡稱乙肝）是指乙肝病毒檢測為陽性，病程超過半年或發(fā)病日期不明確而臨床有慢性肝炎表現(xiàn)者。以下一組數(shù)據(jù)，是關(guān)于我國目前乙肝患者及乙肝治療情況：1、我國HBV感染者1.3億多，有2000萬以上慢性乙肝患者;2、我國73%慢性肝病患者，78%肝硬化及71%肝癌患者與乙肝病毒感染有關(guān);3、我國每年用于治療慢性肝炎、肝硬化、肝癌的直接診療耗費約300-500億元人民幣;4、以拉米夫定為代表的核苷類似物是抗HBV治療的推薦療法，目前其耐藥問題日益突出，已成為全球關(guān)注的熱點。SFDA批準的拉米夫定、阿德福韋酯和恩替卡韋都存在不同程度的耐藥情況。可見目前我國乙肝患者人數(shù)及乙肝治療的現(xiàn)狀不容樂觀，如何有效治療乙肝已經(jīng)成為人們談?wù)摰慕裹c。

危害：成年人一旦罹患乙肝大三陽，病毒就會通過不斷復(fù)制，破壞自身免疫系統(tǒng)，相當(dāng)一部分人最終惡化為肝硬化和肝癌。乙肝表面抗原陽性者，最終有1/3的人轉(zhuǎn)變成慢性遷延性肝炎患者，這其中又有1/3轉(zhuǎn)變成肝硬化，肝硬化患者中又有1/3轉(zhuǎn)變成肝癌。(2)乙肝病毒的特性1.頑強的抵抗力：對熱、對低溫、對干燥、對紫外線及一般濃度的化學(xué)消毒劑，都能耐受；在零下20度時可存活20年；在37度時可存活7天，在55度時仍然能存活6小時；酒精、來蘇兒、碘酒等對它不起作用。但是，加熱到100度10分鐘可使其失去傳染活性，對0.5％過氧乙酸、3％漂白粉、0.2％新潔爾滅敏感2.嗜肝性：HBV一旦入侵人體，侵襲肝臟，并在那里定居繁衍后代，這就是它們的嗜肝性。據(jù)研究，這是因為肝細胞表面有一種“受體”的緣故，專門接受HBV。大量HBV集中于肝細胞內(nèi)，并在其中復(fù)制，不斷侵襲，誘發(fā)肝細胞發(fā)生免疫損傷3.嚴格的種屬特性：到目前為止，只有人、黑猩猩、長臂猿、狒狒對HBV易于感染，雖然在吸血昆蟲體內(nèi)檢查到HBV的蹤跡，但只是暫時“居住”而已，一般不會在它們體內(nèi)復(fù)制和增殖4.慢性化：特別是幼兒期感染，多為慢性化過程，長期攜帶HBV，體內(nèi)呈“免疫耐受”狀態(tài)，不能將病毒清除，這個過程可長達10-30年或更久，是重要的傳染源

5.致癌性：HBV是肝癌的重要病因，約80％-90％的肝癌有乙肝背景。癌變的原因是HBV的基因整合到肝細胞基因上，發(fā)生突變，導(dǎo)致肝癌。6.HBV的基因變異性：HBV是極度易變異的病毒之一，它的四個基因組（S、C、P、X）均可變異，變異是病毒的特性7.乙肝病毒的基因組最引人注目的一個特征就是它非常小，而且乙肝病毒DNA的兩鏈長短不一，長鏈完整，長度恒定，為負鏈，短鏈是正鏈，長度可變，大概是長鏈的50％～80%。表面抗原和核心抗原都是由Dane顆粒的DNA編碼而來。

病理：（1）HBV抗原和抗體系統(tǒng)表面抗原(HBsAg)：HBV外膜糖蛋白=S+L+M蛋白

S蛋白：狹義的HBsAg指S蛋白。HBsAg陽性說明機體有HBV感染。

中分子蛋白：preS2+S大分子蛋白：preS1+preS2+SS蛋白中分子蛋白大分子蛋白PreS1PreS2S1.HBsAg和抗-HBse抗原(HBeAg)：是可溶性蛋白質(zhì)只存在于血液中是病毒復(fù)制和傳染性的標志e抗體(抗-HBe)：對HBV感染有一定的保護作用其出現(xiàn)標志著病毒復(fù)制減少、傳染性降低（2）HBeAg和抗-HBe58（4）HBV自然復(fù)制周期9三乙肝常用實驗室檢查分析乙肝病毒的檢測1.乙肝六項定性：ELISA定量：電化學(xué)發(fā)光2.乙肝病毒PCR定量：最直接的證據(jù)和最敏感的方法3.乙肝病毒YMDD變異：抗病毒治療是否有效的判斷指標酪氨酸(Y)、蛋氨酸(M)、天冬氨酸(D)、天冬氨酸(D)蛋氨酸(M)→異亮氨酸(I)/纈氨酸(V)突變最常見4.基因型檢測：A基因型可能與慢性化有關(guān)，B基因型感染者的肝組織學(xué)活動指數(shù)、壞死性炎癥，C基因型與肝癌的發(fā)生相關(guān)1.HBsAg：感染后4-7周出項，ALT上升前數(shù)周，急性自限性感染者,HBsAg在血清中存在時間不超過6個月。S基因發(fā)生變異，導(dǎo)致HBsAg多肽氨基酸序列改變的HBV感染，現(xiàn)行的HBsAg檢測試劑無法檢出，即HBsAg陰性的HBV感染2.HBsAb：中和性抗體，對同型病毒的再感染有保護作用，可持續(xù)存在數(shù)年，是乙肝痊愈及HBsAg疫苗免疫成功的標志3.HBeAg:HBV復(fù)制的指標之一在潛伏期與HBsAg同時或在HBsAg出現(xiàn)數(shù)天后可在血清中檢出，存在時間一般不超過10周，如超過則提示感染轉(zhuǎn)為慢性化4.HBeAb：出現(xiàn)于HBeAg轉(zhuǎn)陰后，出現(xiàn)比HBcAb晚但消失較早10（1）乙肝六項5.HBcAb:出現(xiàn)較早，常緊繼HBsAg和HBeAg之后就可在血清中檢出，早期以IgM為主，一般持續(xù)6-18周．HBcAb-IgM可作為急性HBV感染的的指標．慢性期以IgG為主6.HBcAg:是HBV存在和復(fù)制活躍的直接指標之一,不能直接檢測7.前S1抗原:比HBsAg更早出現(xiàn)（2）常見模式1）大三陽2）小三陽3）１、５4）２、４、５或２、５5）單獨HBsAg6）單獨HBcAb四乙肝兩對半定量與定性檢測的臨床比較（1）乙肝“兩對半”檢測應(yīng)用的誤區(qū)“兩對半”結(jié)果應(yīng)用的較大的誤區(qū)是因為：對這些病原體感染者體內(nèi)相應(yīng)抗原抗體的發(fā)生發(fā)展以及對疾病狀態(tài)和抗病毒治療之間的關(guān)系不了解所致。在乙肝“兩對半”中，真正有定量測定價值的只有抗HBs。但這種測定也不是用于臨床乙肝患者療效觀察，而是用于人群乙肝疫苗注射效果的判斷；也就是說，當(dāng)某人注射疫苗后，如外周血中抗HBs定量超過10mIU/ml，則說明受免疫者具有對乙肝病毒的免疫力，免疫力及持續(xù)時間與抗HBs含量高低應(yīng)成正比。總而言之，“兩對半”結(jié)果的實質(zhì)其實只是機體感染HBV后免疫應(yīng)答結(jié)果的反映，與乙型肝炎的發(fā)生和發(fā)展過程之間并無必然的聯(lián)系。因為絕大部分HBV感染者并不出現(xiàn)肝炎癥狀，而只是表現(xiàn)為攜帶者，但其同樣會有免疫應(yīng)答的產(chǎn)生，而得到不同的“兩對半”結(jié)果模式。因此，從根本意義上來講，“兩對半”結(jié)果的陽性，反映的只是感染了HBV，與臨床病情輕重之間可以說毫無因果關(guān)系。

定量肝炎試劑與定性肝炎試劑的區(qū)別

電化學(xué)發(fā)光法定量檢測肝炎項目優(yōu)勢常規(guī)方法存在HBsAg漏檢的情況，電化學(xué)發(fā)光法檢測的靈敏度達0.01-0.04IU/ml，常規(guī)方法對于高濃度的Anti-HBs樣本要進行預(yù)稀釋，以致帶來系統(tǒng)誤差和重復(fù)測定的浪費，電化學(xué)發(fā)光法在無樣本預(yù)稀釋下，線性范圍可達1000IU/L，覆蓋了多數(shù)樣本可能達到的濃度。Anti-HBc測定由于血清中乙肝核心抗體蛋白的干擾，可出現(xiàn)假陽性。電化學(xué)發(fā)光法使用特制的DTT進行標本預(yù)處理后，能極大地減少假陽性。HbsAg與Anti-HBc的檢測都會受到干擾物質(zhì)非特異性信號的影響，電化學(xué)發(fā)光法采用靈敏的標記物和高純度、高特異性的試劑，有效解決了非特異性信號的干擾。各種模式臨床意義

HBsAgAnti-HBsHBeAgAnti-HBeAnti-HBc臨床意義備注1————＋a.既往或慢性感染b.HDV或HCV共同感染c.逃避診斷的變異型d.非特異性陽性e.HBsAg極低檢測不出f.HBsAg、抗-HBs空白期建議聯(lián)合檢測HDV、HCV、HIV2—＋—＋＋a.急性乙肝恢復(fù)期b.既往有HBV感染，已有免疫力c.感染后康復(fù)期HBeAb與HBsAb會并存數(shù)月/年3＋————a.急性乙肝感染早期b.慢性HBsAg攜帶者孕婦陽性致嬰兒感染率10%4＋—＋——a.急性乙肝感染b.傳染性強孕婦陽性致嬰兒感染率90%5＋—＋＋＋a.急性感染趨向恢復(fù)b.HBsAg向HBsAb過渡c.傳染性中等，慢性攜帶者繼續(xù)跟蹤，定期復(fù)查6——＋——a.非典型急性感染b.提示非甲非乙型肝炎c.乙肝早期，HBsAg量少建議加做定量PCR確認7＋——＋—a.乙肝急性感染趨向恢復(fù)b.慢性攜帶者易轉(zhuǎn)陰易發(fā)生基因整合8＋＋———a.有HBsAg-Ab復(fù)合物b.兩次感染不同壓型c.免疫逃逸變異株選擇高靈敏度和特異性更高的檢測方法復(fù)查9——＋＋＋a.急性感染中期繼續(xù)跟蹤，定期復(fù)查10——＋—＋a.非典型急性感染繼續(xù)跟蹤，定期復(fù)查11———＋—a.急慢性乙肝感染恢復(fù)期b.乙肝感染可疑做乙肝DNA進一步鑒定12—＋＋—±a.非典型亞臨床感染繼續(xù)跟蹤，定期復(fù)查13—＋—＋—a.乙肝感染后已恢復(fù)b.可能有乙