DNA重組技術(shù)的基本工具概述-課件

這就要用到定向改造生物的新技術(shù)

——基因工程這就要用到定向改造生物的新技術(shù)1DNA重組技術(shù)的基本工具概述-課件2又叫做基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)。通俗的說，就是按照人們的意愿，把一種生物的某種基因提取出來，加以修飾改造，然后放到另一種生物的細胞里，定向地改造生物的遺傳性狀。原理：操作水平：結(jié)果：基因重組DNA分子水平定向地改造生物的遺傳性狀，獲得人類所需要的品種?；蚬こ蹋河纸凶龌蚱唇蛹夹g(shù)或DNA重組技術(shù)。通俗的說3思考：為什么能把一種生物的基因“嫁接”到

另一種生物上并成功表達？1、大多數(shù)生物的遺傳物質(zhì)都是DNA，且主要為雙螺旋結(jié)構(gòu)，即不同生物的DNA分子基本結(jié)構(gòu)是相同的，都遵循堿基互補配對原則。所以不同的生物DNA可以嫁接2、地球上的所有生物共用一套遺傳密碼，所以，一種生物的基因可以在另外一種生物體內(nèi)得以表達思考：為什么能把一種生物的基因“嫁接”到

另一種生物上并成功4DNA重組技術(shù)的基本工具準確切割DNA的工具（“分子手術(shù)刀”）——限制性內(nèi)切酶DNA片段的連接工具（“分子縫合針”）——DNA連接酶基因轉(zhuǎn)移工具（“分子運輸車”）——基因進入受體細胞的載體DNA重組技術(shù)的基本工具準確切割DNA的工具（“分子手術(shù)刀”5“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶（簡稱限制酶）即一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列，并且能在特定的切點上切割DNA分子。特點：存在原核生物(主要是微生物)體內(nèi)。專一性來源：作用：切斷兩個特定核苷酸之間的磷酸二酯鍵“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶（簡稱限制酶）即一種限制酶6中軸線在G與A之間切割大腸桿菌的一種限制酶(EcoRⅠ)只能識GAATTC序列，并在G和A之間切開。舉例：中軸線在G與A之間切割大腸桿菌的一種限制酶(EcoRⅠ)只能7

黏性末端黏性末端EcoRI限制酶的切割

被限制酶切開的DNA兩條單鏈的切口，帶有幾個伸出的核苷酸，他們之間正好互補配對，這樣的切口叫黏性末端。黏性末端黏性末端EcoRI限制酶的切割8SmaI只能識別CCCGGG序列，并在C和G之間切開。中軸線SmaI限制酶的作用在G與C之間切割SmaI只能識別CCCGGG序列，并在C和G之間切開。中軸線9平末端平末端SmaI限制酶的切割當限制酶從識別序列的中心軸線處切開時，切開的DNA兩條單鏈的切口，是平整的，這樣的切口叫平末端。平末端平末端SmaI限制酶的切割當限制酶從識別序列的中10你能推測限制酶存在于原核生物中的作用是什么嗎？尋根問底

限制酶就是細菌的一種防御性工具，當外源DNA侵入時，會利用限制酶將外源DNA切割掉，以保證自身的安全。所以，限制酶在原核生物中主要起到切割外源DNA、使之失效，從而達到保護自身的目的。你能推測限制酶存在于原核生物中的作用是什么嗎？尋根問底11

DNA被限制酶切斷后有兩個反向互補的“黏性末端”。被同一種限制酶切斷的幾個DNA具有相同的黏性末端，能夠通過互補進行配對。是不是把兩者的黏性末端黏合起來，這樣就真的合成重組的DNA分子了?DNA被限制酶切斷后有兩個反向互補的“黏性末端”。被同一12基因的針線：DNA連接酶

G

AA

TT

CC

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GG

AA

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CC

TT

AA

GGC

TT

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AA

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GG

C

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AA

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C

GGC

TT

AA

AA

TT

C

G用同種限制酶切割基因的針線：DNA連接酶

GAATTCC13２、基因的針線──DNA連接酶連接酶的作用是：將互補配對的兩個黏性末端連接起來，使之成為一個完整的DNA分子。２、基因的針線──DNA連接酶連接酶的作用是：將互補配對1415類型來源功能相同點差別E·coliDNA連接酶T4DNA連接酶大腸桿菌T4噬菌體恢復(fù)磷酸二酯鍵只能連接黏性末端能連接黏性末端和平末端(效率較低)閱讀課本第5頁“分子縫合針”——DNA連接酶的相關(guān)內(nèi)容，填寫下表自主學(xué)習(xí)15類型來源功能相同點差別E·coliDNA連接酶T4DNA15DNA連接酶DNA聚合酶相同點作用實質(zhì)化學(xué)本質(zhì)不同點模板作用對象

作用結(jié)果 用途都能催化形成磷酸二酯鍵都是蛋白質(zhì)

不需要需要形成完整的重組DNA分子形成DNA的一條鏈基因工程DNA復(fù)制DNA連接酶與DNA聚合酶的比較只能將單個核苷酸連接到已有的DNA片段上，形成磷酸二酯鍵在兩個DNA片段之間形成磷酸二酯鍵DNA連接酶DNA聚合酶相同點作用實質(zhì)化學(xué)本質(zhì)模板作用對象16不同點：

連接酶的作用是：將DNA片段間互補配對的兩個黏性末端連接起來，使之成為一個完整的DNA分子。DNA聚合酶和DNA連接酶有何相同和不同點？聚合酶：以一條DNA為模板，將一個一個核苷酸連接起來相同點：都是通過形成磷酸二酯鍵連接起來不同點：DNA聚合酶和DNA連接酶有何相同和不同點？聚17載體的作用載體的必要條件載體的種類閱讀課本第6頁“分子運輸車”——運載體的相關(guān)內(nèi)容，填寫下表自主學(xué)習(xí)1）能夠在宿主細胞中復(fù)制并穩(wěn)定地保存。2）具多個限制酶切點，以便與外源基因連接。3）具有某些標記基因，便于進行鑒定和選擇。4）必須是安全的，對受體細胞無害。5）載體DNA分子應(yīng)大小適中，以便于提取和操作1）作為運載工具，將目的基因?qū)胧荏w細胞中2）在受體細胞內(nèi)對目的基因進行大量復(fù)制①細菌的質(zhì)粒②病毒：λ噬菌體衍生物、動植物病毒等。

載體的作用載體的必要條件載體的種類閱讀課本第6頁“分子運輸車18有標記基因的存在，可用含青霉素的培養(yǎng)基鑒別。有切割位點能復(fù)制并帶著插入的目的基因一起復(fù)制質(zhì)粒——裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨立于細菌染色體（即擬核DNA）之外，并具有自我復(fù)制能力的很小的雙鏈環(huán)狀DNA分子。最常用運載體——質(zhì)粒

實際上在基因工程操作中，真正被用作載體的質(zhì)粒，都是在天然質(zhì)粒的基礎(chǔ)上進行過人工改造的。有標記基因的存在，可用含青霉素的培養(yǎng)基鑒別。有切割位點能復(fù)制19最常用的運載體——質(zhì)粒分布：存在于許多細菌以及酵母菌等生物中。最常用的質(zhì)粒是大腸桿菌的質(zhì)粒。本質(zhì)：細胞染色體(或擬核)外能自主復(fù)制的小型環(huán)狀DNA分子。質(zhì)粒的存在與否對宿主細胞生存沒有決定性作用，但復(fù)制只能在宿主細胞內(nèi)成。最常用的運載體——質(zhì)粒分布：存在于許多細菌以及酵母菌等生物中20基因的運輸工具——質(zhì)粒能復(fù)制并帶著插入的目的基因一起復(fù)制有切割位點有標記基因的存在，將來可用含青霉素的培養(yǎng)基鑒別?；虻倪\輸工具——質(zhì)粒能復(fù)制并帶著插入的目的基因一起復(fù)制有切21作為運載體必須具備哪些條件？1.能夠在宿主細胞中復(fù)制并穩(wěn)定地保存。2.具多個限制酶切點，以便與外源基因連接。3.具有某些標記基因，便于進行篩選。如抗菌素的抗性基因、產(chǎn)物具有顏色反應(yīng)的基因等。4.對受體細胞無害。作為運載體必須具備哪些條件？1.能夠在宿主細胞中復(fù)制并穩(wěn)定地22基因工程的基本操作程序主要包括四個基本步驟：1）目的基因的獲取2）基因表達載體的構(gòu)建3）將目的基因?qū)胧荏w細胞4）目的基因的檢測與鑒定基因工程的基本操作程序主要包括1）目的基因的獲取23步驟一：目的基因的獲取

目的基因是人們所需要轉(zhuǎn)移或改造的基因,獲取目的基因是實施基因工程的第一步。

如蘇云金芽孢桿菌的抗蟲基因，還有植物的抗?。共《尽⒖辜毦┗?、種子貯藏蛋白的基因，以及人的胰島素基因、干擾素基因等。步驟一：目的基因的獲取目的基因是人們所需要轉(zhuǎn)移24補：原核細胞的基因結(jié)構(gòu)非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)上游編碼區(qū)下游與RNA聚合酶結(jié)合位點啟動子終止子

RNA聚合酶能夠識別調(diào)控序列中的結(jié)合位點，并與其結(jié)合。轉(zhuǎn)錄開始后，RNA聚合酶沿DNA分子移動，并以DNA分子的一條鏈為模板合成RNA。轉(zhuǎn)錄完畢后，RNA鏈釋放出來，緊接著RNA聚合酶也從DNA模板鏈上脫落下來。補：原核細胞的基因結(jié)構(gòu)非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)上游編碼25①不能轉(zhuǎn)錄為信使RNA，不能編碼蛋白質(zhì)。：能轉(zhuǎn)錄相應(yīng)的信使RNA，能編碼蛋白質(zhì)編碼區(qū)非編碼區(qū)原核細胞的基因結(jié)構(gòu)②有調(diào)控遺傳信息表達的核苷酸序列，在該序列中，最重要的是位于編碼區(qū)上游的RNA聚合酶結(jié)合位點。啟動子①不能轉(zhuǎn)錄為信使RNA，不能：能轉(zhuǎn)錄相應(yīng)的信使RNA，能26補：真核細胞的基因結(jié)構(gòu)編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)與RNA聚合酶結(jié)合位點內(nèi)含子外顯子能夠編碼蛋白質(zhì)的序列叫做外顯子不能夠編碼蛋白質(zhì)的序列叫做內(nèi)含子啟動子終止子編碼區(qū)上游編碼區(qū)下游內(nèi)含子：外顯子：補：真核細胞的基因結(jié)構(gòu)編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)與RNA聚合酶內(nèi)27真核細胞的基因結(jié)構(gòu)編碼區(qū)非編碼區(qū)外顯子：能編碼蛋白質(zhì)的序列內(nèi)含子：不能編碼蛋白質(zhì)的序列：有調(diào)控作用的核苷酸序列，包括位于編碼區(qū)上游的RNA

聚合酶結(jié)合位點。非編碼序列：包括非編碼區(qū)和內(nèi)含子真核細胞的基因結(jié)構(gòu)編碼區(qū)非編碼區(qū)外顯子：能編碼蛋白質(zhì)的序28原核細胞真核細胞不同點編碼區(qū)是_____的編碼區(qū)是間隔的、_____的相同點都由能夠編碼蛋白質(zhì)的______和具有調(diào)控作用的______區(qū)組成的原核細胞與真核細胞的基因結(jié)構(gòu)比較思考編碼相同數(shù)目氨基酸的蛋白質(zhì)，原核細胞與真核細胞基因結(jié)構(gòu)一樣長嗎？連續(xù)不連續(xù)編碼區(qū)非編碼原核細胞真核細胞不同點編碼區(qū)是編碼區(qū)是間隔的、_____的都29一、目的基因的獲取1、目的基因主要是指______________________編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因請舉出三個以上的例子2、獲取目的基因的常用方法有哪些?（1）從基因文庫中獲?。?）利用PCR技術(shù)擴增（3）人工合成請閱讀P9第一和二兩段一、目的基因的獲取1、目的基因主要是指___________30(一)從基因文庫中獲取目的基因

將含有某種生物不同基因的許多DNA片斷，導(dǎo)入到受體菌的群體中，各個受體菌分別含有這種生物的不同基因，稱為基因文庫基因文庫

基因組文庫部分基因文庫（如:cDNA文庫）1.基因文庫(一)從基因文庫中獲取目的基因?qū)⒑?1基因組文庫與部分基因文庫的關(guān)系怎樣從基因文庫中得到我們所需的目的基因呢?基因組文庫與部分基因文庫的關(guān)系怎樣從基因文庫中得到我們所需的32目的基因的提取方法直接分離基因人工合成基因反轉(zhuǎn)錄法根據(jù)已知的氨基酸序列合成DNA：鳥槍法目的基因的提取方法直接分離基因反轉(zhuǎn)錄法：鳥槍法33鳥槍法：供體細胞中的DNA許多DNA片段運載體限制酶與載體連接載入受體細胞產(chǎn)生特定性狀導(dǎo)入外源DNA擴增目的基因分離(直接分離法)1、直接分離基因鳥槍法：供體細胞中的DNA許多DNA片段運載體限制酶與載體連341）反轉(zhuǎn)錄法：以目的基因轉(zhuǎn)錄成的信使RNA為模板，反轉(zhuǎn)錄成互補的單鏈DNA，然后在酶的作用下合成雙鏈DNA，從而獲得所需的基因。目的基因的mRNA單鏈DNA(cDNA)雙鏈DNA(即目的基因)反轉(zhuǎn)錄合成2.人工合成基因法1）反轉(zhuǎn)錄法：目的基因的mRNA單鏈DNA(cDNA)雙鏈D352）根據(jù)已知的氨基酸序列合成DNA法：根據(jù)已知蛋白質(zhì)的氨基酸序列，推測出相應(yīng)的信使RNA序列，然后按照堿基互補配對原則，推測出它的結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列，再通過化學(xué)方法，以單核苷酸為原料合成目的基因。蛋白質(zhì)的氨基酸序列mRNA的核苷酸序列結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列推測推測目的基因化學(xué)合成2）根據(jù)已知的氨基酸序列合成DNA法：根據(jù)36上述三種目的基因提取的方法有何優(yōu)缺點？優(yōu)點缺點鳥槍法反轉(zhuǎn)錄法根據(jù)已知氨基酸合成DNA法操作簡便廣泛使用工作量大，盲目，分離出來的有時并非一個基因?qū)Ｒ恍詮姴僮鬟^程麻煩，mRNA很不穩(wěn)定，要求的技術(shù)條件較高專一性最強僅限于合成核苷酸對較少的簡單基因思考:為什么要構(gòu)建基因文庫?直接從含有目的基因的生物體內(nèi)提取不行嗎?上述三種目的基因提取的方法有何優(yōu)缺點？優(yōu)點缺點鳥槍法反轉(zhuǎn)錄法37哪些新技術(shù)能大大簡化基因工程的操作技術(shù)？1）DNA序列自動測序儀：2）PCR技術(shù)：

對提取出來的基因進行核苷酸序列分析。

使目的基因的片段在短時間內(nèi)成百萬倍地擴增。哪些新技術(shù)能大大簡化基因工程的操作技術(shù)？1）DNA序列自動測38(二)利用PCR技術(shù)擴增目的基因(二)利用PCR技術(shù)擴增目的基因39①

概念：PCR全稱為_______________，是一項在生物____復(fù)制___________的核酸合成技術(shù)

③條件：_______________________、

_______________、___________(做啟動子)、___________.前提條件：②原理：__________④方式：以_____方式擴增，即____（n為擴增循環(huán)的次數(shù)）⑤結(jié)果：選修1P60聚合酶鏈式反應(yīng)體外特定DNA片段DNA復(fù)制已知基因的核苷酸序列四種脫氧核苷酸一對引物DNA聚合酶指數(shù)2n使目的基因的片段在短時間內(nèi)成百萬倍地擴增(二)利用PCR技術(shù)擴增目的基因①概念：PCR全稱為_______________，是一項40DNA重組技術(shù)的基本工具概述-課件41⑥過程：a、DNA變性（90℃-96℃）：雙鏈DNA模板在熱作用下，_____斷裂，形成___________b、退火（復(fù)性25℃-65℃）：系統(tǒng)溫度降低，引物與DNA模板結(jié)合，形成局部________。c、延伸（70℃-75℃）：在Taq酶的作用下，從引物的5′端→3′端延伸，合成與模板互補的________。氫鍵單鏈DNA雙鏈DNA鏈⑥過程：a、DNA變性（90℃-96℃）：雙鏈DNA模板b、421.用一定的_________切割質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個切口，露出____________。2.用_____________切斷目的基因，使其產(chǎn)生_________________。(二)基因表達載體的構(gòu)建——核心3.將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的______處，再加入適量___________，形成了一個重組

DNA分子（重組質(zhì)粒）限制酶黏性末端同一種限制酶的黏性末端切口DNA連接酶相同1.用一定的_________切割(二)基因表達載體的構(gòu)建—43質(zhì)粒DNA分子限制酶處理一個切口兩個黏性末端兩個切口獲得目的基因DNA連接酶重組DNA分子（重組質(zhì)粒）——核心同一種(二)基因表達載體的構(gòu)建4.過程:質(zhì)粒DNA分子限制酶處理一個切口兩個切口DNA連接酶重組DN445.基因表達載體的組成：復(fù)制原點+目的基因+啟動子+終止子+標記基因它們有什么作用？5.基因表達載體的組成：復(fù)制原點+目的基因+啟動子+終止子+45常用的受體細胞：

有大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌、酵母菌和動植物細胞等。將目的基因?qū)胧荏w細胞的原理借鑒細菌或病毒侵染細胞的途徑。步驟三：目的基因?qū)胧荏w細胞常用的受體細胞：有大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)46(三)將目的基因?qū)胧荏w細胞轉(zhuǎn)化——方法將目的基因?qū)胫参锛毎麑⒛康幕驅(qū)雱游锛毎麑⒛康幕驅(qū)胛⑸锛毎r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法花粉管通道法——顯微注射法——感受態(tài)細胞目的基因進入_________內(nèi)，并且在受體細胞內(nèi)維持_____和_____的過程受體細胞穩(wěn)定表達(三)將目的基因?qū)胧荏w細胞轉(zhuǎn)化——方法將目的基因?qū)雽⒛?71、將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ǎ恨r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法（1）農(nóng)桿菌介紹（2）原理及適用范圍(三)將目的基因?qū)胧荏w細胞1、將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ǎ恨r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法(三)將目的基482、將目的基因?qū)雱游锛毎?）方法：顯微注射法（2）程序：(三)將目的基因?qū)胧荏w細胞3、將目的基因?qū)胛⑸锛毎?）思考：為什么選用微生物作為受體細胞？（2）方法：2、將目的基因?qū)雱游锛毎?三)將目的基因?qū)胧荏w細胞3、將494、目的基因的檢測和鑒定大量的受體細胞接受不多的目的基因。處理的受體細胞中真正攝入了目的基因的很少，必須將它從中檢測出來。將每個受體細胞單獨培養(yǎng)形成菌落，檢測菌落中是否有目的基因的表達產(chǎn)物。淘汰無表達產(chǎn)物的菌落，保留有表達產(chǎn)物的進一步培養(yǎng)、研究。無表達產(chǎn)物無表達產(chǎn)物有表達產(chǎn)物無表達產(chǎn)物

4、目的基因的檢測和鑒定大量的受體細胞接受不多的目的基因50(四)目的基因的檢測與鑒定——檢查是否成功檢測—鑒定——①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA

上是否插入了目的基因②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等方法——方法——方法——DNA分子雜交分子雜交（DNA-RNA雜交）抗原抗體雜交(四)目的基因的檢測與鑒定——檢查是否成功檢測—鑒定——①檢51DNA分子雜交示意圖采用一定的技術(shù)手段，將兩種生物的DNA分子的單鏈放在一起，如果這兩個單鏈具有互補的堿基序列，那么，互補的堿基序列就會結(jié)合在一起，形成雜合雙鏈區(qū)；在沒有互補堿基序列的部位，仍然是兩條游離的單鏈。DNA分子雜交示意圖采用一定的技術(shù)手段，將兩種生物52二、基因工程的應(yīng)用二、基因工程的應(yīng)用53一、植物基因工程碩果累累一、植物基因工程碩果累累54一、基因工程與作物育種轉(zhuǎn)黃瓜抗青枯病基因的甜椒轉(zhuǎn)魚抗寒基因的番茄轉(zhuǎn)基因工程技術(shù)主要用于提高農(nóng)作物的抗逆能力,以及改良農(nóng)作物的品質(zhì)和利用植物生產(chǎn)藥物等方面.一、基因工程與作物育種轉(zhuǎn)黃瓜抗青枯病基因的甜椒轉(zhuǎn)魚抗寒基因的55利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì)利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì)56

1、繁殖具有抗病能力、高產(chǎn)仔率、高產(chǎn)奶率和高質(zhì)量的皮毛等優(yōu)良品質(zhì)的轉(zhuǎn)基因動物。二、基因工程在畜牧養(yǎng)殖業(yè)上的應(yīng)用將人的生長激素基因和牛的生長激素基因分別注射到小白鼠受精卵中，得到的“超級小鼠”。

生長快、肉質(zhì)好的轉(zhuǎn)基因鯉魚(中國)超級羊1、繁殖具有抗病能力、高產(chǎn)仔率、高產(chǎn)奶率和高質(zhì)量的皮毛等57乳汁中含有人生長激素的轉(zhuǎn)基因牛(阿根廷)

2、利用某些特定的外源基因在哺乳動物體內(nèi)表達，從這些動物的乳腺細胞中生產(chǎn)藥物，如激素、抗體及酶類等。基因工程在畜牧養(yǎng)殖業(yè)上的應(yīng)用乳汁中含有人生長激素的轉(zhuǎn)基因牛(阿根廷)2、利用某些特定583.用轉(zhuǎn)基因的動物作器官移植的供體導(dǎo)入人基因具特殊用途的豬背上長人耳的老鼠3.用轉(zhuǎn)基因的動物作器官移植的供體導(dǎo)入人基因具特殊用途的豬背59三、基因工程與藥物研制我國生產(chǎn)的部分基因

工程疫苗和藥物許多藥品的生產(chǎn)是從生物組織中提取的。受材料來源限制產(chǎn)量有限，其價格往往十分昂貴。微生物生長迅速，容易控制，適于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。若將生物合成相應(yīng)藥物成分的基因?qū)胛⑸锛毎麅?nèi)，讓它們產(chǎn)生相應(yīng)的藥物，不但能解決產(chǎn)量問題，還能大大降低生產(chǎn)成本。三、基因工程與藥物研制我國生產(chǎn)的部分基因

工程疫苗和藥物60生產(chǎn)基因工程藥品胰島素——治療糖尿病的特效藥。干擾素——抗病毒的特效藥。方法特點胰島素干擾素傳統(tǒng)方法直接從生物體的組織、細胞或血液中提取產(chǎn)量低價格昂貴4~5g/100kg胰腺1mg/300L血液基因工程“工程菌”發(fā)酵工業(yè)化生產(chǎn)高質(zhì)量低成本100g/2000L大腸桿菌培養(yǎng)液20~40mg/1kg細菌培養(yǎng)物生產(chǎn)基因工程藥品胰島素——治療糖尿病的特效藥。干擾素——抗病61人造血液及其生產(chǎn)我國生產(chǎn)的部分基因

工程疫苗和藥物白細胞介素、溶血栓劑、凝血因子、人造血液代用品疫苗：乙肝、狂犬病、百日咳、霍亂、傷寒、瘧疾基因工程藥品人造血液及其生產(chǎn)我國生產(chǎn)的部分基因

工程疫苗和藥物白細胞介素62基因診斷：也稱為DNA診斷或基因探針技術(shù)，即在DNA水平分析檢測某一基因，從而對特定的疾病進行診斷。

基因治療曙光初照是指是把健康的外源基因?qū)胗谢蛉毕莸募毎?，達到治療疾病的目的?；蛑委煟夯蛟\斷：也稱為DNA診斷或基因探針技術(shù)，即在D63基因工程與環(huán)境保護環(huán)境監(jiān)測：

檢測環(huán)境中的病毒、細菌等污染。用DNA探針可以檢測飲用水中病毒的含量。1t水中有10個病毒也能被檢測出來快速靈敏基因工程與環(huán)境保護環(huán)境監(jiān)測：

檢測環(huán)境中的病毒、細菌64

利用基因工程培育的“指示生物”能十分靈敏地反映環(huán)境污染的情況，卻不易因環(huán)境污染而大量死亡，甚至還可以吸收和轉(zhuǎn)化污染物。利用基因工程培育的“指示生物”能十分靈敏地反映環(huán)境污染的情65環(huán)境污染治理

1）用基因工程產(chǎn)物——“超級細菌”分解石油，可以大大提高細菌分解石油的效率。3）通過基因重組構(gòu)建新的殺蟲劑，取代生產(chǎn)過程中耗能多、易造成環(huán)境污染的農(nóng)藥，并試圖通過基因工程回收和利用工業(yè)廢物。2）用基因工程培養(yǎng)出“吞噬”汞和降解土壤中DDT的細菌，以及能夠凈化鎘污染的植物。環(huán)境污染治理1）用基因工程產(chǎn)物——“超級細菌”分解石66基因工程與食品業(yè)基因工程為人類開辟新的食物來源。

1）雞蛋白基因在大腸桿菌和酵母菌中表達獲得成功。這表明，未來能用發(fā)酵罐培養(yǎng)的大腸桿菌或酵母菌來生產(chǎn)人類所需要的卵清蛋白。

2）用基因工程的方法從微生物中獲得人們所需要的糖類、脂肪和維生素等產(chǎn)品。基因工程為食品工業(yè)中提供了什么前景？基因工程與食品業(yè)基因工程為人類開辟新的食物來源?；蚬こ虨槭?7當人類擁有了只有大自然才擁有的改造生物、創(chuàng)造生物的能力時，我們是否感到很坦然呢？當人類擁有了只有大自然才擁有的改造生物、創(chuàng)造68

轉(zhuǎn)基因食品

安全嗎?!轉(zhuǎn)基因食品安全嗎?69目前，大多數(shù)專家認為，已經(jīng)投入商品化生產(chǎn)的轉(zhuǎn)基因番茄、玉米等農(nóng)產(chǎn)品都是安全的。迄今為止尚無食用轉(zhuǎn)基因生物產(chǎn)品引起任何嚴重問題的科學(xué)報道。目前，大多數(shù)專家認為，已經(jīng)投入商品化生產(chǎn)的轉(zhuǎn)基因番茄、玉米等701、質(zhì)粒是基因工程中最常用的運載體，它的主要特點是①能自主復(fù)制②不能自主復(fù)制③結(jié)構(gòu)很小④蛋白質(zhì)⑤環(huán)狀RNA⑥環(huán)狀DNA⑦能“友好”地“借居”A．①③⑤⑦ B．①④⑥C．①③⑥⑦ D．②③⑥⑦1、質(zhì)粒是基因工程中最常用的運載體，它的主要特點是71人們常選用的細菌質(zhì)粒分子往往帶有一個抗菌素抗性基因，該抗性基因的主要作用是A.提高受體細胞在自然環(huán)境中的耐藥性B.有利于對目的基因是否導(dǎo)入進行檢測C.增加質(zhì)粒分子的分子量D．便于與外源基因連接人們常選用的細菌質(zhì)粒分子往往帶有一個抗菌素抗性基因，該抗性基72演講完畢，謝謝觀看！演講完畢，謝謝觀看！73這就要用到定向改造生物的新技術(shù)

——基因工程這就要用到定向改造生物的新技術(shù)74DNA重組技術(shù)的基本工具概述-課件75又叫做基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)。通俗的說，就是按照人們的意愿，把一種生物的某種基因提取出來，加以修飾改造，然后放到另一種生物的細胞里，定向地改造生物的遺傳性狀。原理：操作水平：結(jié)果：基因重組DNA分子水平定向地改造生物的遺傳性狀，獲得人類所需要的品種?；蚬こ蹋河纸凶龌蚱唇蛹夹g(shù)或DNA重組技術(shù)。通俗的說76思考：為什么能把一種生物的基因“嫁接”到

另一種生物上并成功表達？1、大多數(shù)生物的遺傳物質(zhì)都是DNA，且主要為雙螺旋結(jié)構(gòu)，即不同生物的DNA分子基本結(jié)構(gòu)是相同的，都遵循堿基互補配對原則。所以不同的生物DNA可以嫁接2、地球上的所有生物共用一套遺傳密碼，所以，一種生物的基因可以在另外一種生物體內(nèi)得以表達思考：為什么能把一種生物的基因“嫁接”到

另一種生物上并成功77DNA重組技術(shù)的基本工具準確切割DNA的工具（“分子手術(shù)刀”）——限制性內(nèi)切酶DNA片段的連接工具（“分子縫合針”）——DNA連接酶基因轉(zhuǎn)移工具（“分子運輸車”）——基因進入受體細胞的載體DNA重組技術(shù)的基本工具準確切割DNA的工具（“分子手術(shù)刀”78“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶（簡稱限制酶）即一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列，并且能在特定的切點上切割DNA分子。特點：存在原核生物(主要是微生物)體內(nèi)。專一性來源：作用：切斷兩個特定核苷酸之間的磷酸二酯鍵“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶（簡稱限制酶）即一種限制酶79中軸線在G與A之間切割大腸桿菌的一種限制酶(EcoRⅠ)只能識GAATTC序列，并在G和A之間切開。舉例：中軸線在G與A之間切割大腸桿菌的一種限制酶(EcoRⅠ)只能80

黏性末端黏性末端EcoRI限制酶的切割

被限制酶切開的DNA兩條單鏈的切口，帶有幾個伸出的核苷酸，他們之間正好互補配對，這樣的切口叫黏性末端。黏性末端黏性末端EcoRI限制酶的切割81SmaI只能識別CCCGGG序列，并在C和G之間切開。中軸線SmaI限制酶的作用在G與C之間切割SmaI只能識別CCCGGG序列，并在C和G之間切開。中軸線82平末端平末端SmaI限制酶的切割當限制酶從識別序列的中心軸線處切開時，切開的DNA兩條單鏈的切口，是平整的，這樣的切口叫平末端。平末端平末端SmaI限制酶的切割當限制酶從識別序列的中83你能推測限制酶存在于原核生物中的作用是什么嗎？尋根問底

限制酶就是細菌的一種防御性工具，當外源DNA侵入時，會利用限制酶將外源DNA切割掉，以保證自身的安全。所以，限制酶在原核生物中主要起到切割外源DNA、使之失效，從而達到保護自身的目的。你能推測限制酶存在于原核生物中的作用是什么嗎？尋根問底84

DNA被限制酶切斷后有兩個反向互補的“黏性末端”。被同一種限制酶切斷的幾個DNA具有相同的黏性末端，能夠通過互補進行配對。是不是把兩者的黏性末端黏合起來，這樣就真的合成重組的DNA分子了?DNA被限制酶切斷后有兩個反向互補的“黏性末端”。被同一85基因的針線：DNA連接酶

G

AA

TT

CC

TT

AA

GG

AA

TT

CC

TT

AA

GGC

TT

AA

AA

TT

C

GG

C

TT

AA

AA

TT

C

GGC

TT

AA

AA

TT

C

G用同種限制酶切割基因的針線：DNA連接酶

GAATTCC86２、基因的針線──DNA連接酶連接酶的作用是：將互補配對的兩個黏性末端連接起來，使之成為一個完整的DNA分子。２、基因的針線──DNA連接酶連接酶的作用是：將互補配對8788類型來源功能相同點差別E·coliDNA連接酶T4DNA連接酶大腸桿菌T4噬菌體恢復(fù)磷酸二酯鍵只能連接黏性末端能連接黏性末端和平末端(效率較低)閱讀課本第5頁“分子縫合針”——DNA連接酶的相關(guān)內(nèi)容，填寫下表自主學(xué)習(xí)15類型來源功能相同點差別E·coliDNA連接酶T4DNA88DNA連接酶DNA聚合酶相同點作用實質(zhì)化學(xué)本質(zhì)不同點模板作用對象

作用結(jié)果 用途都能催化形成磷酸二酯鍵都是蛋白質(zhì)

不需要需要形成完整的重組DNA分子形成DNA的一條鏈基因工程DNA復(fù)制DNA連接酶與DNA聚合酶的比較只能將單個核苷酸連接到已有的DNA片段上，形成磷酸二酯鍵在兩個DNA片段之間形成磷酸二酯鍵DNA連接酶DNA聚合酶相同點作用實質(zhì)化學(xué)本質(zhì)模板作用對象89不同點：

連接酶的作用是：將DNA片段間互補配對的兩個黏性末端連接起來，使之成為一個完整的DNA分子。DNA聚合酶和DNA連接酶有何相同和不同點？聚合酶：以一條DNA為模板，將一個一個核苷酸連接起來相同點：都是通過形成磷酸二酯鍵連接起來不同點：DNA聚合酶和DNA連接酶有何相同和不同點？聚90載體的作用載體的必要條件載體的種類閱讀課本第6頁“分子運輸車”——運載體的相關(guān)內(nèi)容，填寫下表自主學(xué)習(xí)1）能夠在宿主細胞中復(fù)制并穩(wěn)定地保存。2）具多個限制酶切點，以便與外源基因連接。3）具有某些標記基因，便于進行鑒定和選擇。4）必須是安全的，對受體細胞無害。5）載體DNA分子應(yīng)大小適中，以便于提取和操作1）作為運載工具，將目的基因?qū)胧荏w細胞中2）在受體細胞內(nèi)對目的基因進行大量復(fù)制①細菌的質(zhì)粒②病毒：λ噬菌體衍生物、動植物病毒等。

載體的作用載體的必要條件載體的種類閱讀課本第6頁“分子運輸車91有標記基因的存在，可用含青霉素的培養(yǎng)基鑒別。有切割位點能復(fù)制并帶著插入的目的基因一起復(fù)制質(zhì)粒——裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨立于細菌染色體（即擬核DNA）之外，并具有自我復(fù)制能力的很小的雙鏈環(huán)狀DNA分子。最常用運載體——質(zhì)粒

實際上在基因工程操作中，真正被用作載體的質(zhì)粒，都是在天然質(zhì)粒的基礎(chǔ)上進行過人工改造的。有標記基因的存在，可用含青霉素的培養(yǎng)基鑒別。有切割位點能復(fù)制92最常用的運載體——質(zhì)粒分布：存在于許多細菌以及酵母菌等生物中。最常用的質(zhì)粒是大腸桿菌的質(zhì)粒。本質(zhì)：細胞染色體(或擬核)外能自主復(fù)制的小型環(huán)狀DNA分子。質(zhì)粒的存在與否對宿主細胞生存沒有決定性作用，但復(fù)制只能在宿主細胞內(nèi)成。最常用的運載體——質(zhì)粒分布：存在于許多細菌以及酵母菌等生物中93基因的運輸工具——質(zhì)粒能復(fù)制并帶著插入的目的基因一起復(fù)制有切割位點有標記基因的存在，將來可用含青霉素的培養(yǎng)基鑒別。基因的運輸工具——質(zhì)粒能復(fù)制并帶著插入的目的基因一起復(fù)制有切94作為運載體必須具備哪些條件？1.能夠在宿主細胞中復(fù)制并穩(wěn)定地保存。2.具多個限制酶切點，以便與外源基因連接。3.具有某些標記基因，便于進行篩選。如抗菌素的抗性基因、產(chǎn)物具有顏色反應(yīng)的基因等。4.對受體細胞無害。作為運載體必須具備哪些條件？1.能夠在宿主細胞中復(fù)制并穩(wěn)定地95基因工程的基本操作程序主要包括四個基本步驟：1）目的基因的獲取2）基因表達載體的構(gòu)建3）將目的基因?qū)胧荏w細胞4）目的基因的檢測與鑒定基因工程的基本操作程序主要包括1）目的基因的獲取96步驟一：目的基因的獲取

目的基因是人們所需要轉(zhuǎn)移或改造的基因,獲取目的基因是實施基因工程的第一步。

如蘇云金芽孢桿菌的抗蟲基因，還有植物的抗病（抗病毒、抗細菌）基因、種子貯藏蛋白的基因，以及人的胰島素基因、干擾素基因等。步驟一：目的基因的獲取目的基因是人們所需要轉(zhuǎn)移97補：原核細胞的基因結(jié)構(gòu)非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)上游編碼區(qū)下游與RNA聚合酶結(jié)合位點啟動子終止子

RNA聚合酶能夠識別調(diào)控序列中的結(jié)合位點，并與其結(jié)合。轉(zhuǎn)錄開始后，RNA聚合酶沿DNA分子移動，并以DNA分子的一條鏈為模板合成RNA。轉(zhuǎn)錄完畢后，RNA鏈釋放出來，緊接著RNA聚合酶也從DNA模板鏈上脫落下來。補：原核細胞的基因結(jié)構(gòu)非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)上游編碼98①不能轉(zhuǎn)錄為信使RNA，不能編碼蛋白質(zhì)。：能轉(zhuǎn)錄相應(yīng)的信使RNA，能編碼蛋白質(zhì)編碼區(qū)非編碼區(qū)原核細胞的基因結(jié)構(gòu)②有調(diào)控遺傳信息表達的核苷酸序列，在該序列中，最重要的是位于編碼區(qū)上游的RNA聚合酶結(jié)合位點。啟動子①不能轉(zhuǎn)錄為信使RNA，不能：能轉(zhuǎn)錄相應(yīng)的信使RNA，能99補：真核細胞的基因結(jié)構(gòu)編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)與RNA聚合酶結(jié)合位點內(nèi)含子外顯子能夠編碼蛋白質(zhì)的序列叫做外顯子不能夠編碼蛋白質(zhì)的序列叫做內(nèi)含子啟動子終止子編碼區(qū)上游編碼區(qū)下游內(nèi)含子：外顯子：補：真核細胞的基因結(jié)構(gòu)編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)與RNA聚合酶內(nèi)100真核細胞的基因結(jié)構(gòu)編碼區(qū)非編碼區(qū)外顯子：能編碼蛋白質(zhì)的序列內(nèi)含子：不能編碼蛋白質(zhì)的序列：有調(diào)控作用的核苷酸序列，包括位于編碼區(qū)上游的RNA

聚合酶結(jié)合位點。非編碼序列：包括非編碼區(qū)和內(nèi)含子真核細胞的基因結(jié)構(gòu)編碼區(qū)非編碼區(qū)外顯子：能編碼蛋白質(zhì)的序101原核細胞真核細胞不同點編碼區(qū)是_____的編碼區(qū)是間隔的、_____的相同點都由能夠編碼蛋白質(zhì)的______和具有調(diào)控作用的______區(qū)組成的原核細胞與真核細胞的基因結(jié)構(gòu)比較思考編碼相同數(shù)目氨基酸的蛋白質(zhì)，原核細胞與真核細胞基因結(jié)構(gòu)一樣長嗎？連續(xù)不連續(xù)編碼區(qū)非編碼原核細胞真核細胞不同點編碼區(qū)是編碼區(qū)是間隔的、_____的都102一、目的基因的獲取1、目的基因主要是指______________________編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因請舉出三個以上的例子2、獲取目的基因的常用方法有哪些?（1）從基因文庫中獲?。?）利用PCR技術(shù)擴增（3）人工合成請閱讀P9第一和二兩段一、目的基因的獲取1、目的基因主要是指___________103(一)從基因文庫中獲取目的基因

將含有某種生物不同基因的許多DNA片斷，導(dǎo)入到受體菌的群體中，各個受體菌分別含有這種生物的不同基因，稱為基因文庫基因文庫

基因組文庫部分基因文庫（如:cDNA文庫）1.基因文庫(一)從基因文庫中獲取目的基因?qū)⒑?04基因組文庫與部分基因文庫的關(guān)系怎樣從基因文庫中得到我們所需的目的基因呢?基因組文庫與部分基因文庫的關(guān)系怎樣從基因文庫中得到我們所需的105目的基因的提取方法直接分離基因人工合成基因反轉(zhuǎn)錄法根據(jù)已知的氨基酸序列合成DNA：鳥槍法目的基因的提取方法直接分離基因反轉(zhuǎn)錄法：鳥槍法106鳥槍法：供體細胞中的DNA許多DNA片段運載體限制酶與載體連接載入受體細胞產(chǎn)生特定性狀導(dǎo)入外源DNA擴增目的基因分離(直接分離法)1、直接分離基因鳥槍法：供體細胞中的DNA許多DNA片段運載體限制酶與載體連1071）反轉(zhuǎn)錄法：以目的基因轉(zhuǎn)錄成的信使RNA為模板，反轉(zhuǎn)錄成互補的單鏈DNA，然后在酶的作用下合成雙鏈DNA，從而獲得所需的基因。目的基因的mRNA單鏈DNA(cDNA)雙鏈DNA(即目的基因)反轉(zhuǎn)錄合成2.人工合成基因法1）反轉(zhuǎn)錄法：目的基因的mRNA單鏈DNA(cDNA)雙鏈D1082）根據(jù)已知的氨基酸序列合成DNA法：根據(jù)已知蛋白質(zhì)的氨基酸序列，推測出相應(yīng)的信使RNA序列，然后按照堿基互補配對原則，推測出它的結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列，再通過化學(xué)方法，以單核苷酸為原料合成目的基因。蛋白質(zhì)的氨基酸序列mRNA的核苷酸序列結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列推測推測目的基因化學(xué)合成2）根據(jù)已知的氨基酸序列合成DNA法：根據(jù)109上述三種目的基因提取的方法有何優(yōu)缺點？優(yōu)點缺點鳥槍法反轉(zhuǎn)錄法根據(jù)已知氨基酸合成DNA法操作簡便廣泛使用工作量大，盲目，分離出來的有時并非一個基因?qū)Ｒ恍詮姴僮鬟^程麻煩，mRNA很不穩(wěn)定，要求的技術(shù)條件較高專一性最強僅限于合成核苷酸對較少的簡單基因思考:為什么要構(gòu)建基因文庫?直接從含有目的基因的生物體內(nèi)提取不行嗎?上述三種目的基因提取的方法有何優(yōu)缺點？優(yōu)點缺點鳥槍法反轉(zhuǎn)錄法110哪些新技術(shù)能大大簡化基因工程的操作技術(shù)？1）DNA序列自動測序儀：2）PCR技術(shù)：

對提取出來的基因進行核苷酸序列分析。

使目的基因的片段在短時間內(nèi)成百萬倍地擴增。哪些新技術(shù)能大大簡化基因工程的操作技術(shù)？1）DNA序列自動測111(二)利用PCR技術(shù)擴增目的基因(二)利用PCR技術(shù)擴增目的基因112①

概念：PCR全稱為_______________，是一項在生物____復(fù)制___________的核酸合成技術(shù)

③條件：_______________________、

_______________、___________(做啟動子)、___________.前提條件：②原理：__________④方式：以_____方式擴增，即____（n為擴增循環(huán)的次數(shù)）⑤結(jié)果：選修1P60聚合酶鏈式反應(yīng)體外特定DNA片段DNA復(fù)制已知基因的核苷酸序列四種脫氧核苷酸一對引物DNA聚合酶指數(shù)2n使目的基因的片段在短時間內(nèi)成百萬倍地擴增(二)利用PCR技術(shù)擴增目的基因①概念：PCR全稱為_______________，是一項113DNA重組技術(shù)的基本工具概述-課件114⑥過程：a、DNA變性（90℃-96℃）：雙鏈DNA模板在熱作用下，_____斷裂，形成___________b、退火（復(fù)性25℃-65℃）：系統(tǒng)溫度降低，引物與DNA模板結(jié)合，形成局部________。c、延伸（70℃-75℃）：在Taq酶的作用下，從引物的5′端→3′端延伸，合成與模板互補的________。氫鍵單鏈DNA雙鏈DNA鏈⑥過程：a、DNA變性（90℃-96℃）：雙鏈DNA模板b、1151.用一定的_________切割質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個切口，露出____________。2.用_____________切斷目的基因，使其產(chǎn)生_________________。(二)基因表達載體的構(gòu)建——核心3.將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的______處，再加入適量___________，形成了一個重組

DNA分子（重組質(zhì)粒）限制酶黏性末端同一種限制酶的黏性末端切口DNA連接酶相同1.用一定的_________切割(二)基因表達載體的構(gòu)建—116質(zhì)粒DNA分子限制酶處理一個切口兩個黏性末端兩個切口獲得目的基因DNA連接酶重組DNA分子（重組質(zhì)粒）——核心同一種(二)基因表達載體的構(gòu)建4.過程:質(zhì)粒DNA分子限制酶處理一個切口兩個切口DNA連接酶重組DN1175.基因表達載體的組成：復(fù)制原點+目的基因+啟動子+終止子+標記基因它們有什么作用？5.基因表達載體的組成：復(fù)制原點+目的基因+啟動子+終止子+118常用的受體細胞：

有大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌、酵母菌和動植物細胞等。將目的基因?qū)胧荏w細胞的原理借鑒細菌或病毒侵染細胞的途徑。步驟三：目的基因?qū)胧荏w細胞常用的受體細胞：有大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)119(三)將目的基因?qū)胧荏w細胞轉(zhuǎn)化——方法將目的基因?qū)胫参锛毎麑⒛康幕驅(qū)雱游锛毎麑⒛康幕驅(qū)胛⑸锛毎r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法花粉管通道法——顯微注射法——感受態(tài)細胞目的基因進入_________內(nèi)，并且在受體細胞內(nèi)維持_____和_____的過程受體細胞穩(wěn)定表達(三)將目的基因?qū)胧荏w細胞轉(zhuǎn)化——方法將目的基因?qū)雽⒛?201、將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ǎ恨r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法（1）農(nóng)桿菌介紹（2）原理及適用范圍(三)將目的基因?qū)胧荏w細胞1、將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ǎ恨r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法(三)將目的基1212、將目的基因?qū)雱游锛毎?）方法：顯微注射法（2）程序：(三)將目的基因?qū)胧荏w細胞3、將目的基因?qū)胛⑸锛毎?）思考：為什么選用微生物作為受體細胞？（2）方法：2、將目的基因?qū)雱游锛毎?三)將目的基因?qū)胧荏w細胞3、將1224、目的基因的檢測和鑒定大量的受體細胞接受不多的目的基因。處理的受體細胞中真正攝入了目的基因的很少，必須將它從中檢測出來。將每個受體細胞單獨培養(yǎng)形成菌落，檢測菌落中是否有目的基因的表達產(chǎn)物。淘汰無表達產(chǎn)物的菌落，保留有表達產(chǎn)物的進一步培養(yǎng)、研究。無表達產(chǎn)物無表達產(chǎn)物有表達產(chǎn)物無表達產(chǎn)物

4、目的基因的檢測和鑒定大量的受體細胞接受不多的目的基因123(四)目的基因的檢測與鑒定——檢查是否成功檢測—鑒定——①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA

上是否插入了目的基因②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等方法——方法——方法——DNA分子雜交分子雜交（DNA-RNA雜交）抗原抗體雜交(四)目的基因的檢測與鑒定——檢查是否成功檢測—鑒定——①檢124DNA分子雜交示意圖采用一定的技術(shù)手段，將兩種生物的DNA分子的單鏈放在一起，如果這兩個單鏈具有互補的堿基序列，那么，互補的堿基序列就會結(jié)合在一起，形成雜合雙鏈區(qū)；在沒有互補堿基序列的部位，仍然是兩條游離的單鏈。DNA分子雜交示意圖采用一定的技術(shù)手段，將兩種生物125二、基因工程的應(yīng)用二、基因工程的應(yīng)用126一、植物基因工程碩果累累一、植物基因工程碩果累累127一、基因工程與作物育種轉(zhuǎn)黃瓜抗青枯病基因的甜椒轉(zhuǎn)魚抗寒基因的番茄轉(zhuǎn)基因工程技術(shù)主要用于提高農(nóng)作物的抗逆能力,以及改良農(nóng)作物的品質(zhì)和利用植物生產(chǎn)藥物等方面.一、基因工程與作物育種轉(zhuǎn)黃瓜抗青枯病基因的甜椒轉(zhuǎn)魚抗寒基因的128利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì)利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì)129

1、繁殖具有抗病能力、高產(chǎn)仔率、高產(chǎn)奶率和高質(zhì)量的皮毛等優(yōu)良品質(zhì)的轉(zhuǎn)基因動物。二、基因工程在畜牧養(yǎng)殖業(yè)上的應(yīng)用將人的生長激素基因和牛的生長激素基因分別注射到小白鼠受精卵中，得到的“超級小鼠”。

生長快、肉質(zhì)好的轉(zhuǎn)基因鯉魚(中國)超級羊1、繁殖具有抗病能力、高產(chǎn)仔率、高產(chǎn)奶率和高質(zhì)量的皮毛等130