臨床標(biāo)本的正確采集及結(jié)果評價(jià)

關(guān)于臨床標(biāo)本的正確采集及結(jié)果評價(jià)第一頁，共七十八頁，2022年，8月28日主要內(nèi)容第一部分影響臨床檢驗(yàn)結(jié)果的生理因素;第二部分臨床常用標(biāo)本的采集和處理;第三部分有關(guān)結(jié)果正確評價(jià);第二頁，共七十八頁，2022年，8月28日第一部分影響臨床試驗(yàn)結(jié)果的生理因素

一、飲食二、運(yùn)動三、生理節(jié)奏四、應(yīng)激能力五、體位六、藥物第三頁，共七十八頁，2022年，8月28日進(jìn)食可改變血液成分如：葡萄糖↑、甘油三酯↑氨基酸：羥脯胺酸↑激素：胃泌素↑（升高2～3倍）胰島素↑→鉀↓、磷↓生長激素↑↓

飲食

對試驗(yàn)結(jié)果的影響第四頁，共七十八頁，2022年，8月28日饑餓

可影響試驗(yàn)結(jié)果膽紅素↑、胡羅卜素↓多數(shù)垂體激素↓→甲狀腺激素↓、睪酮↓、雌激素↓糞便脂肪↓應(yīng)于試驗(yàn)前8～12小時(shí)禁食（多數(shù)試驗(yàn)）

第五頁，共七十八頁，2022年，8月28日食物

影響測定過程吸收到血液中的成分可產(chǎn)生渾濁,顏色而干擾測定。

有些成分可能參與測定的化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生干擾。第六頁，共七十八頁，2022年，8月28日試驗(yàn)對食物的特殊要求

舉例葡萄糖耐量試驗(yàn)前三天要給患者足夠的碳水化合物

肌酐清除率試驗(yàn)前不能進(jìn)食富含肌酐的食物（如肌肉）

第七頁，共七十八頁，2022年，8月28日CK↑AST↑LDH↑尿酸↑（男性,可能因排泄減少）內(nèi)分泌素↓(卵泡刺激素、黃體生成素、泌乳素、性激素)（停止運(yùn)動后數(shù)日可恢復(fù)正常）

運(yùn)動

的影響長期運(yùn)動可導(dǎo)致：第八頁，共七十八頁，2022年，8月28日120016002000000004000800120010203040Prolactin（ng/ml）催TimeofDay第九頁，共七十八頁，2022年，8月28日月周期變化舉例性激素：女性按月經(jīng)周期而變化膽固醇：月經(jīng)前高，排卵時(shí)最低纖維蛋白原：月經(jīng)前增高長周期影響維生素D夏天高，冬天低副甲狀腺激素、鈣有輕度的相同變化

第十頁，共七十八頁，2022年，8月28日表示身體對生理變化的應(yīng)答能力調(diào)節(jié)所引起試驗(yàn)結(jié)果的變化主要由激素和神經(jīng)遞質(zhì)二者完成

應(yīng)激能力(STRESS)第十一頁，共七十八頁，2022年，8月28日一般情況：5-羥色胺↑兒茶酚胺↑葡萄糖↑皮質(zhì)醇↑炎癥時(shí)：

細(xì)胞因子↑白細(xì)胞介素↑→纖維蛋白原↑血漿銅藍(lán)蛋白↑結(jié)合珠蛋白↑

ACTH↑(促腎)等中性粒細(xì)胞↑血小板↑→大多數(shù)垂體激素↓白蛋白↓、運(yùn)鐵蛋白↓膽固醇↓(40%)第十二頁，共七十八頁，2022年，8月28日

立位：水和電解質(zhì)從血管逸出，血漿蛋白、酶類、鈣、鐵、激素類、紅細(xì)胞比積、某些藥物等濃度增加（5%～8%）。

坐位：從立位到坐位，水的再平衡分布需要

15分鐘

臥位：從坐位到臥位，水和電解質(zhì)回到血管，血漿蛋白及和蛋白結(jié)合的物質(zhì)可降低

10%～15%。體位的影響第十三頁，共七十八頁，2022年，8月28日

從立位到臥位時(shí)血液成分的變化試驗(yàn)項(xiàng)目下降（%）

Hb4(0～17)Hct6(4～9)K1(0～3)Ca4(2～7)ALT7(4～14)AST9(6～11)ALP9(5～11)IgG7IgA7IgM5

甲狀腺素11

甘油三酯6第十四頁，共七十八頁，2022年，8月28日

藥物

的影響藥物對血、尿等成分及試驗(yàn)結(jié)果的影響是一個(gè)極其復(fù)雜的問題影響途徑：

藥理作用對生理病理過程的影響藥物的毒副作用對測定方法的影響第十五頁，共七十八頁，2022年，8月28日主要作用于內(nèi)分泌系統(tǒng)，兒茶酚胺明顯增加

并導(dǎo)致葡萄糖、胰島素的增加胃泌素增加可高于基線五倍皮質(zhì)醇、5-羥色胺增加幾種藥物影響舉例咖啡因第十六頁，共七十八頁，2022年，8月28日ABC01.02.0ReferencelimitMetanephrines(mg/day)第十七頁，共七十八頁，2022年，8月28日

兒茶酚胺↑胃泌素↑皮質(zhì)醇↑生長激素↑（可達(dá)正常的10倍）免疫球蛋白↓維生素B12↓

碳氧血紅蛋白↑

Hct↑尼古丁第十八頁，共七十八頁，2022年，8月28日

決定于每次的飲酒量和飲酒時(shí)間的長短

葡萄糖↓甘油三酯↑GGT↑(顯著升高）HDL-C↑（與飲酒量相關(guān)）乙醇第十九頁，共七十八頁，2022年，8月28日

雌激素引起：

HDL-C↑、甲狀腺結(jié)合蛋白↑、銅藍(lán)蛋白↑、某些凝血因子↑

黃體酮引起：

HDL-C↓、

LDL-C↑口服避孕藥第二十頁，共七十八頁，2022年，8月28日藥物影響試驗(yàn)檢測舉例

試驗(yàn)升高降低葡萄糖酚噻嗪腎上腺素合成類固醇安非他明糖皮質(zhì)激素鋰戊烷瞇心得安尿素氮糖皮質(zhì)激素四環(huán)素雄性激素引起腎損傷的藥物膽固醇乙胺磺呋酮環(huán)孢菌素雌激素新霉素糖皮質(zhì)激素苯妥英甲狀腺激素酚噻嗪氟哌啶醇鈣拮抗劑阿司匹林某些口服避孕藥克尿噻β-腎上腺素拮抗劑

AST引起肝臟和肌肉損傷的藥物

ALT引起肝臟和肌肉損傷的藥物

Hb雄性激素口服避孕藥干擾素引起溶血或抑制骨髓的藥物

IgG美沙酮丙基硫氧嘧啶二氮嗪金能引起紅斑狼瘡的藥物糖皮質(zhì)激素苯妥英

第二十一頁，共七十八頁，2022年，8月28日第二部分臨床常用標(biāo)本采集和處理第二十二頁，共七十八頁，2022年，8月28日作好對患者的解釋工作，消除患者的顧慮指導(dǎo)患者如何進(jìn)行合作避免飲食、藥物、運(yùn)動、情緒等影響患者準(zhǔn)備的要點(diǎn)第二十三頁，共七十八頁，2022年，8月28日以下情況標(biāo)本拒收1.標(biāo)識不清或錯(cuò)誤2.容器使用不當(dāng)或錯(cuò)誤3.標(biāo)本超時(shí)送達(dá)或送達(dá)條件錯(cuò)誤4.標(biāo)本送檢量不足5.抗凝不充分6.條碼掃描錯(cuò)誤第二十四頁，共七十八頁，2022年，8月28日

標(biāo)本采集時(shí)間———

根據(jù)檢驗(yàn)?zāi)康倪x擇采血時(shí)間1）空腹采血（受進(jìn)食影響的試驗(yàn)）2）隨機(jī)時(shí)間（多為急診情況應(yīng)用）3）特定時(shí)間（視試驗(yàn)的要求而定）

采血部位

靜脈毛細(xì)血管動脈

第二十五頁，共七十八頁，2022年，8月28日毛細(xì)血管血和靜脈血常見成分的區(qū)別毛細(xì)血管血>靜脈血兩者無區(qū)別毛細(xì)血管血<靜脈血（%）（%）葡萄糖1.4磷膽紅素5.0鉀0.9尿素鈣4.6

鈉2.3

總蛋白3.3第二十六頁，共七十八頁，2022年，8月28日乙二胺四乙酸鹽(EDTA-K2)

用于血液學(xué)檢查，ICSH推薦血細(xì)胞計(jì)數(shù)用EDTA二鉀鹽抗凝枸櫞酸鈉對血液因子Ⅴ、Ⅷ有保護(hù)作用，用于凝血試驗(yàn)及紅細(xì)胞沉降率測定肝素適用于臨床化學(xué)分析，需要快速分離血漿時(shí)用于紅細(xì)胞滲透脆性試驗(yàn)抗凝氟化納有弱抗凝作用，通常作為血葡萄糖保護(hù)劑常用抗凝劑第二十七頁，共七十八頁，2022年，8月28日標(biāo)本采集

臨床檢驗(yàn)標(biāo)本中血、尿標(biāo)本占95%以上。收集標(biāo)本應(yīng)注意：避免干擾物污染（特別是定量分析標(biāo)本）注明是否輸液中；采血部位和方法要正確；標(biāo)本標(biāo)記要無誤；無人為的溶血和混濁（收集標(biāo)本用力震蕩或用玻璃棒及木棍攪拌會導(dǎo)致溶血，餐后采血會出現(xiàn)脂血而混濁）；合理使用抗凝劑和防腐劑；收集區(qū)溫度最好不超過20℃；標(biāo)本采集后要盡快送至實(shí)驗(yàn)室。第二十八頁，共七十八頁，2022年，8月28日具體標(biāo)本的采集和處理（—）血常規(guī)檢驗(yàn)標(biāo)本一般用EDTA-2K（EDTA-K2.2H2O）1.5~2.2mg/ml抗凝（EDTA抗凝管）采血。采血注意事項(xiàng)為：采血后立即上下顛倒混勻（8-10次，不可用力震蕩）；應(yīng)按抗凝管刻度準(zhǔn)確采血至2ml；采血后應(yīng)盡快送檢（需顯微鏡觀察形態(tài)的標(biāo)本采血后應(yīng)及時(shí)推片固定，因?yàn)槌^2hWBC形態(tài)會發(fā)生改變）。第二十九頁，共七十八頁，2022年，8月28日（二）紅細(xì)胞沉降率（血沉，ESR）測定標(biāo)本靜脈采集枸櫞酸鈉（109mmol/L,即32.06g/L）抗凝血（枸櫞酸鈉抗凝管采血）。采血注意事項(xiàng)：采血后立即上下顛倒混合8-10次；單獨(dú)采1管血，準(zhǔn)確采血至2ml（抗凝劑：全血=0.4：1.6）；采血后應(yīng)盡快送檢（必須2h內(nèi)檢測）。第三十頁，共七十八頁，2022年，8月28日（三）凝血檢測（PT、APTT、TT、FBG、DD）標(biāo)本采血注意事項(xiàng)：

空腹采靜脈血（餐后脂血影響檢測結(jié)果，使因子VII活化，導(dǎo)致PT延長）；采血時(shí)患者應(yīng)保持平靜狀態(tài)30min以上（劇烈活動可使因子VII活化，APTT明顯縮短）；標(biāo)本溶血；紅細(xì)胞膜的碎片相當(dāng)于組織因子；應(yīng)單獨(dú)采1管血；必須準(zhǔn)確采血至刻度線3.0ml；靜脈采集抗凝血（最好真空負(fù)壓系統(tǒng)采血），抗凝劑用枸櫞酸鈉（109mmol/L，即32.06g/L,抗凝劑：全血=0.3：2.7）。采血后應(yīng)立即上下顛倒混勻8-10次，不可有凝快；采血后應(yīng)盡快送檢（必須2h內(nèi)檢測）。第三十一頁，共七十八頁，2022年，8月28日（四）血型與血交叉標(biāo)本為EDTA-2K抗凝血。采血注意事項(xiàng)：最好血型與血交叉各采1管血（要求保留血樣）；采血量分別為1.0ml和0~2.0ml；采血后立即上下顛倒混勻（8-10次）。第三十二頁，共七十八頁，2022年，8月28日（五）尿液常規(guī)檢查標(biāo)本尿液常規(guī)檢查標(biāo)本應(yīng)按以下原則進(jìn)行采集：新鮮晨尿最佳，門診病人亦可留隨機(jī)尿；尿液采集于干凈帶蓋容器中，不可使用未經(jīng)洗滌的裝藥物或試劑的器皿；避免混有經(jīng)血、白帶、精液和糞便；尿液標(biāo)本冰箱可保存6-8h，但細(xì)胞等有形成分會有破壞，會有結(jié)晶析出；尿液成分定量檢查應(yīng)留取24h防腐混合尿100-200ml（需記取24h尿液總量）第三十三頁，共七十八頁，2022年，8月28日a甲醛，用于尿液有形成分檢查，濃度為400mg/L尿液即40%；b甲苯，常用于尿糖和尿蛋白等化學(xué)成分的定性或定量檢查，5-20ml/L尿液；c濃鹽酸，用于定量測定尿17-羥、17-酮、腎上腺素、兒茶酚胺和尿鈣等，濃度為1ml/L尿液。第三十四頁，共七十八頁，2022年，8月28日尿液常規(guī)檢查標(biāo)本采集方法：晨尿最好（安靜狀態(tài)下留取清晨第一次尿，濃縮，無其它影響）；隨機(jī)尿較常用（隨時(shí)留尿，適用于門、急診病人，結(jié)果易受多種因素影響）；清潔尿（中段尿、導(dǎo)管尿、膀胱穿刺尿，用于病原微生物學(xué)培養(yǎng)、鑒定和藥敏）；24h尿（用于尿液成分24h定量檢查分析，一定要教會病人留取24h尿正確方法）。3h、12h等記時(shí)尿和餐后尿等特殊實(shí)驗(yàn)?zāi)颍瑒t應(yīng)按醫(yī)囑要求進(jìn)行留尿。第三十五頁，共七十八頁，2022年，8月28日（六）糞便常規(guī)檢查標(biāo)本一般應(yīng)為新鮮的自然排出的糞便3-5g，必要是可肛拭子采取；送檢糞便應(yīng)盛于潔凈帶蓋的塑料盒中送檢，要做好標(biāo)記；要選取糞便的膿、血、黏液等異常成分進(jìn)行檢查，表面無異常時(shí)應(yīng)從糞便表面、深處及糞端多處取材；檢查蟯蟲卵需用透明塑料薄膜于半夜12pm或早晨排便前，于肛門周圍皺襞處拭取標(biāo)本，并立即送檢；第三十六頁，共七十八頁，2022年，8月28日檢查血吸蟲卵時(shí)應(yīng)取黏液、膿、血部分，如需孵化毛蚴應(yīng)留取不少于30g的糞便，并盡快送檢，必要時(shí)留取整份糞便送檢。檢查痢疾阿米巴滋養(yǎng)體時(shí)，應(yīng)床邊留取新排出的糞便，從膿血和稀軟部分取材，并立即保溫送實(shí)驗(yàn)室，并且實(shí)驗(yàn)室接受標(biāo)本后應(yīng)立即進(jìn)行檢查。做便隱血實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)囑病人檢查前3天內(nèi)禁食肉類、含動物血的食物、某些蔬菜，禁服鐵劑和維生素C等對實(shí)驗(yàn)有干擾的藥物。第三十七頁，共七十八頁，2022年，8月28日（七）漿膜腔積液檢查標(biāo)本(1)漿膜腔積液標(biāo)本一般由醫(yī)生無菌穿刺采取；（2）送檢標(biāo)本量：理學(xué)檢查、化學(xué)檢查、細(xì)菌學(xué)檢查個(gè)留取2ml；細(xì)菌學(xué)檢查用無菌管采集標(biāo)本，厭氧菌培養(yǎng)留取1ml，結(jié)核菌留取10ml。（3）標(biāo)本采集后必須立即送檢（否則可出現(xiàn)細(xì)胞變性，標(biāo)本凝集，細(xì)菌溶解）；（4）用于細(xì)胞學(xué)檢查時(shí)，可在標(biāo)本中加適量EDTA鹽抗凝，但還須留取1管不加抗凝劑的標(biāo)本用于觀察積液的凝固性；化學(xué)檢查標(biāo)本宜用肝素抗凝。第三十八頁，共七十八頁，2022年，8月28日（八）臨床化學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本臨床化學(xué)檢驗(yàn)用非抗凝血標(biāo)本，有條件應(yīng)使用真空負(fù)壓采血管。臨床化學(xué)檢驗(yàn)血標(biāo)本采集主要注意事項(xiàng)：1.多項(xiàng)化學(xué)檢測一般可采用1管血；2.采血量是檢查項(xiàng)目多少不同而異，但通常為4.0—5.0ml；3.如果檢測項(xiàng)目不多，生化和免疫也可以同采1管血；第三十九頁，共七十八頁，2022年，8月28日4多項(xiàng)檢測同時(shí)采血時(shí)應(yīng)按下列順序采血；(1)血培養(yǎng)；(2)無添加劑管(3)凝血管(4)有添加劑管的順序?yàn)?；a.拘櫞酸鹽管；b.肝素管;c.EDTA管；d.草酸鹽/氟化鈉管。5不論是抗凝血還是非抗凝血，為了縮短血清或血漿與血細(xì)胞的接觸時(shí)間，以避免由此而影響結(jié)果的準(zhǔn)確性，血液標(biāo)本采集后，都要盡可能的將血清或血漿從全血中分離出來。從血液標(biāo)本采集開始，必須在兩小時(shí)內(nèi)將全血處理為血清或血漿。第四十頁，共七十八頁，2022年，8月28日（1）血清（非抗凝血）：采集后標(biāo)本必須顛倒5~10次，22~25攝氏度（室溫）15~30分鐘后可自行（自發(fā)）完全凝固，禁用木棍和玻棒等剝離凝塊；冷藏標(biāo)本凝集較慢，加促凝劑時(shí)凝集加快。（2）血漿（抗凝血）：應(yīng)采用抗凝管采血，采血后立即顛倒混合8~10次，采血后數(shù)分鐘內(nèi)可離心分離血漿。（3）冷藏標(biāo)本：用于穩(wěn)定血液中溫度依賴性成份的（抑制細(xì)胞代謝），標(biāo)本于2~8攝氏度冷藏(標(biāo)本采集后立即置于冰屑或冰水混合物中，冷藏必須充分)標(biāo)本需冷藏的測定項(xiàng)目有：兒茶酚胺，胃泌素，甲旁素，PH/血?dú)?，NH3，乳酸，丙酮酸等。全血標(biāo)本一般不冷藏，血鉀測定標(biāo)本冷藏不得>2小時(shí)。第四十一頁，共七十八頁，2022年，8月28日(4）代謝抑制劑和防腐劑的應(yīng)用：用于抑制細(xì)胞代謝。血標(biāo)本中加入氟化鈉后，血細(xì)胞未分離情況下血標(biāo)本中GLU，22~25攝氏度穩(wěn)定24小時(shí)，2~8攝氏度穩(wěn)定48小時(shí)；氟化鈉不適用于新生兒及兒童得GLU測定（因兒童PCV高，細(xì)胞糖酵解難以控制）；氟化鈉-麝香草酚混合劑不適合酶學(xué)檢測（因氟化鈉-麝香草酚混合劑能抑制酶活性）；甲醛草酸鉀抗凝劑不適用于血糖測定。（5）實(shí)驗(yàn)室離心標(biāo)本的準(zhǔn)備：不主張用小棍強(qiáng)行剝離凝血塊（誘發(fā)溶血）；必須剝離時(shí)應(yīng)動作輕柔；真空采血管應(yīng)一直保持封閉垂直位置直到離心取出血清或血漿。第四十二頁，共七十八頁，2022年，8月28日(6)關(guān)于標(biāo)本離心（指標(biāo)本處于離心機(jī)里的一段時(shí)間）離心時(shí)間和相對離心力：離心時(shí)間為5-10min；相對離心力（RCF）為1000-1200*g；溫度控制離心：離心時(shí)產(chǎn)熱，不利于分析物穩(wěn)定。溫度依賴性分析物（ACTH、環(huán)腺苷酸、兒茶酚胺等）離心溫度應(yīng)控制在4攝氏度；無特殊溫度要求的分析物離心溫度在20-22攝氏度；冷藏運(yùn)送標(biāo)本應(yīng)利用溫度控制離心機(jī)離心。再離心：最好一次完成標(biāo)本離心。普通采血管二次離心時(shí)必須在首次離心后短時(shí)間內(nèi)完成；帶分離膠的采血管不可以二次離心。第四十三頁，共七十八頁，2022年，8月28日（九）血?dú)夥治鰳?biāo)本

血?dú)夥治鰳?biāo)本為動脈（股、肱、撓動脈）抗凝全血，抗凝劑為肝素鈉（0.05mg/ml，即1000u/ml,用9g/l的生理鹽水配置）。標(biāo)本采集注意事項(xiàng)為：采血一定要用厭氧技術(shù)（讓血液盡量少的和空氣接觸）；采血前先吸入足夠量液體肝素抗凝劑于注射器內(nèi)，使其盡可能濕潤注射器內(nèi)壁，然后排出液體肝素，留下注射器死區(qū)內(nèi)液體肝素約0.1ml即可；采血量0.5-1.0ml（最好2.0ml）；抽出的血液不能有氣泡，如有氣泡應(yīng)立即排出；標(biāo)本采好后立即封閉注射器針頭，用兩手挫動注射器針筒使標(biāo)本混勻后立即送檢。第四十四頁，共七十八頁，2022年，8月28日（十）微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本的正確采集、運(yùn)送及處理，與細(xì)菌的培養(yǎng)、鑒定結(jié)果有十分密切的關(guān)系；對可疑烈性呼吸道傳染病（如SARS、炭疽、肺鼠疫等）患者采集標(biāo)本時(shí)，護(hù)士必須按國家規(guī)范化要求嚴(yán)格注意生物安全；醫(yī)生、檢驗(yàn)人員均應(yīng)重視微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本正確采集的有關(guān)問題，并有責(zé)任向患者及其家屬進(jìn)行正確采集標(biāo)本的宣傳和指導(dǎo)；第四十五頁，共七十八頁，2022年，8月28日1微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本采集、運(yùn)送、驗(yàn)收和處理注意事項(xiàng)（1）標(biāo)本采集

1）申請單必須記清楚（姓名、性別、年齡、病歷號、臨床診斷、標(biāo)本來源、采集時(shí)間、檢查項(xiàng)目、抗生素應(yīng)用情況等），以便實(shí)驗(yàn)室能夠合理選擇培養(yǎng)環(huán)境和培養(yǎng)基；盡量在抗生素應(yīng)用之前采集標(biāo)本，避免漏檢和提高陽性檢出率；3）標(biāo)本采集應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作；4）咽拭、肛拭、傷口拭子等拭子標(biāo)本應(yīng)插入運(yùn)送培養(yǎng)基送檢；5）痰、尿液、傷口拭子等混有正常菌群的標(biāo)本，不可放入肉湯培養(yǎng)基內(nèi)送檢6）采集標(biāo)本的容器必須經(jīng)滅菌處理，但不可用消毒劑。第四十六頁，共七十八頁，2022年，8月28日（2）標(biāo)本運(yùn)送標(biāo)本采集后應(yīng)盡快送到微生物實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本采集后在室溫下超過2h未送到實(shí)驗(yàn)室，可視為不合格標(biāo)本。（3）標(biāo)本驗(yàn)收實(shí)驗(yàn)室只能接受和處理合格標(biāo)本實(shí)驗(yàn)室對不合格標(biāo)本退回必須說明原因，并應(yīng)及時(shí)與臨床聯(lián)系。（4）處理根據(jù)檢驗(yàn)?zāi)康慕Y(jié)合臨床資料選擇合適的培養(yǎng)基接種標(biāo)本；混有正常菌群的標(biāo)本應(yīng)做定量細(xì)菌培養(yǎng)；不能精確定量或常規(guī)定量操作較困難的痰、傷拭子等標(biāo)本，應(yīng)分離出優(yōu)勢菌做細(xì)菌鑒定和藥敏實(shí)驗(yàn)，同時(shí)注明菌量做指標(biāo)；抗菌藥物治療的標(biāo)本，必要時(shí)應(yīng)加入某些物質(zhì)以中和藥物對細(xì)菌的抑制作用。第四十七頁，共七十八頁，2022年，8月28日

2.微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本采集和處理

（1）尿液標(biāo)本采集和處理通常留取晨起第一次尿液（此時(shí)尿液在膀胱內(nèi)儲存4h以上）；尿液采集后要及時(shí)送檢，并保證2h內(nèi)接種；不能及時(shí)送檢和接種時(shí)，尿液應(yīng)置4-8度冰箱保存；冷藏標(biāo)本應(yīng)于8h內(nèi)接種；懷疑沙門氏菌感染時(shí)，應(yīng)于發(fā)病2W左右采集尿液，懷疑鉤端螺旋體感染時(shí)，應(yīng)于發(fā)病后2W采集尿液，上述時(shí)間此時(shí)陽性率高。尿液微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本采集方法如下。第四十八頁，共七十八頁，2022年，8月28日中斷尿采集方法：成年男性和女性分別用肥皂水清洗尿道口和外陰部，在用滅菌水沖洗尿道口，然后排尿棄去前段尿液，于帶蓋的無菌盛器中留取中段尿5-10ml導(dǎo)尿法：用導(dǎo)尿管導(dǎo)取10-15ml尿液，置滅菌容器中送檢；長期留置導(dǎo)尿管者應(yīng)更換新導(dǎo)尿管留尿；留置導(dǎo)尿時(shí)，用無菌消毒法消毒導(dǎo)尿管外部及導(dǎo)尿管口，用無菌注射器通過導(dǎo)尿管抽取尿液送檢（不可采集尿液收集袋中的尿液送檢）；集尿法：懷疑結(jié)核分枝桿菌感染時(shí)于清潔盛器中留取24h尿液，取其沉渣10-15ml送檢；恥骨上膀胱穿刺法：培養(yǎng)結(jié)果與臨床病情矛盾時(shí)可采用此法，一般較少應(yīng)用；腎盂尿采集法：必須由臨床醫(yī)生采集。第四十九頁，共七十八頁，2022年，8月28日（2）糞便標(biāo)本采集和處理

1）采集時(shí)間：》1腹瀉患者于急性期，盡量在用藥前采集糞便；》2傷寒患者于發(fā)病2W以后采集糞便；》3懷疑霍亂時(shí)立即采集糞便送檢。2）采集方法：1自然排便：取新鮮糞便的粘液，膿血或絮狀物等有意義成分，2~3克或1~2ML，盛無菌容器內(nèi)或置于保存液或增菌液內(nèi)送檢；2直腸拭子：用于難得獲得糞便或排便困難的患者和嬰幼兒，標(biāo)本采集后插入滅菌試管內(nèi)送檢。第五十頁，共七十八頁，2022年，8月28日（3）痰及下呼吸道標(biāo)本采集和處理

1）自然咳痰法：a晨痰為佳；b先冷開水漱口，清潔口腔和牙齒；c再用力咳出呼吸道深部的痰；d痰里不得少于1ML；e痰咳出困難時(shí)可先霧化吸入Nacl溶液(100g/l,加溫到45度)使痰容易咳出。2）小兒取痰法：用彎壓舌板向后壓舌，將拭子深入咽部，小兒因壓舌板刺激引起咳嗽，噴出的肺或氣管分泌物粘在拭子上可送檢。3）支氣管鏡，支氣管穿刺，支氣管肺泡灌洗等采集法：此采集方法必須由醫(yī)生操作。第五十一頁，共七十八頁，2022年，8月28日（4）血液及骨髓培養(yǎng)標(biāo)本

1）抗生素治療前，嚴(yán)格無菌靜脈血8~10ml（兒童1~4ml）；2)無菌注入專用培養(yǎng)瓶（成人，兒童，需氧菌，厭氧菌，L型細(xì)菌不同培養(yǎng)瓶）中送檢；3）如已用抗生素不能停用時(shí)，可用48h內(nèi)分別于下次用抗生素之前，采取6份血液標(biāo)本送檢；4）必要時(shí)可需養(yǎng)菌、厭氧菌（占10%）和L型細(xì)菌同時(shí)培養(yǎng)；5）疑為心內(nèi)膜炎時(shí)，為提高陽性檢出率，可酌情不同部位、不同時(shí)間，多次采血或動脈采血進(jìn)行培養(yǎng)；6）必要時(shí)可取骨髓1—2ml，無菌注入專用培養(yǎng)瓶中送檢；第五十二頁，共七十八頁，2022年，8月28日（5）腦脊液培養(yǎng)標(biāo)本采集時(shí)間：懷疑腦膜炎時(shí)應(yīng)立即采集腦脊液，最好是在應(yīng)用抗生素之前采集腦脊液。采集方法：無菌腰穿采集腦脊液3—5ml，分裝到三個(gè)小瓶中（各1—2ml）。用于細(xì)菌和病毒檢測時(shí)腦脊液量不少于1ml；用于真菌和抗酸桿菌檢測腦脊液量不少于2ml。第五十三頁，共七十八頁，2022年，8月28日（6）穿刺液培養(yǎng)標(biāo)本包括胸水、腹水、心包液、關(guān)節(jié)液、鞘膜液等穿刺液培養(yǎng)標(biāo)本。采集時(shí)間：一般在用抗生素等抗菌藥物治療之前，或停止使用抗菌藥物之后3—4d采集標(biāo)本。采集方法：①無菌操作穿刺抽取標(biāo)本或外科手術(shù)采集標(biāo)本；②標(biāo)本采集量應(yīng)＞1ml（結(jié)核分支桿菌培養(yǎng)時(shí)應(yīng)為1—5ml）；③標(biāo)本采集后注入無菌小瓶或無菌試管中送檢；④可在盛器中先加入滅菌肝素然后再加入穿刺液，以防止穿刺液凝固（0.5ml肝素可抗凝5ml標(biāo)本）。第五十四頁，共七十八頁，2022年，8月28日（7）胃液及膽汁培養(yǎng)標(biāo)本抽取空腹胃液5ml，置無菌管內(nèi)送檢；膽汁培養(yǎng)標(biāo)本由十二指腸引流法或膽囊穿刺法或手術(shù)中流取膽汁，采集膽汁量為5ml，置無菌管內(nèi)送檢；胃液和膽汁采集后必須立即送檢第五十五頁，共七十八頁，2022年，8月28日（8）膽汁和病灶分泌物培養(yǎng)標(biāo)本采集前局部消毒后，無菌采取膽汁或病灶分泌物或組織，標(biāo)本采集后立即置無菌管內(nèi)送檢。第五十六頁，共七十八頁，2022年，8月28日（9）眼，耳，鼻，咽拭子培養(yǎng)標(biāo)本用拭子常--------規(guī)采集各種標(biāo)本。

標(biāo)本采集過程中應(yīng)注意避免被黏膜上的正常菌群污染，標(biāo)本采集后連同拭子一起置無菌管內(nèi)送檢。第五十七頁，共七十八頁，2022年，8月28日（10）泌尿生殖道培養(yǎng)標(biāo)本1）尿道分泌物：清洗尿道，采取尿道逸出的膿性等分泌物，或用無菌拭子插入尿道2~4cm處輕輕轉(zhuǎn)動后取出，置無菌試管中送檢。2）陰道，宮頸分泌物：通過陰道擴(kuò)張器，用滅菌拭子采取陰道口或?qū)m頸管1~2cm處分泌物，置無菌試管中送檢。3）宮腔分泌物：在必要時(shí)用外套保護(hù)膜的滅菌導(dǎo)管抽取。4）前列腺液：清洗尿道，沖洗膀胱后用前列腺按摩法采取前列腺液送檢。5）精液：受檢者應(yīng)五天未排精，清洗尿道后手淫或體外排精法，射精與無菌容器內(nèi)送檢。6）潰瘍分泌物：滅菌生理鹽水溶液清洗患處用無菌拭子取其邊緣或基地不得分泌物，置無菌試管中送檢。第五十八頁，共七十八頁，2022年，8月28日（11）燒傷感染培養(yǎng)標(biāo)本燒傷十二小時(shí)后用無菌棉拭子無菌操作采集標(biāo)本；要注意從多個(gè)創(chuàng)面取樣；燒傷嚴(yán)重感染時(shí)易發(fā)生敗血癥，創(chuàng)面取樣的同時(shí)應(yīng)該采集血樣送做血培養(yǎng)（最好同時(shí)做需氧菌和厭氧菌培養(yǎng)）。第五十九頁，共七十八頁，2022年，8月28日（12）厭氧菌感染菌培養(yǎng)標(biāo)本1）標(biāo)本采集①要注意避免標(biāo)本污染和空氣接觸，嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作；②要用注射器抽取胸水，腹水，心包液，關(guān)節(jié)液，膽汁，腦脊液或無菌手術(shù)抽出膿液；③抽出液體標(biāo)本后，要盡快排出注射器內(nèi)的空氣2）標(biāo)本運(yùn)送①標(biāo)本采集后不得冰箱儲存，必須盡快（半小時(shí)內(nèi)）送實(shí)驗(yàn)室；②運(yùn)送方法：a注射器運(yùn)送（標(biāo)本抽取后盡快排除空氣）或接種到專門的運(yùn)送培養(yǎng)基中直接運(yùn)送；b含運(yùn)送培養(yǎng)基的無氧小瓶運(yùn)送；c厭氧罐運(yùn)送（組織塊）；d大量液體標(biāo)本運(yùn)送時(shí)要裝滿標(biāo)本瓶，并立即驅(qū)氧，加蓋運(yùn)送；e一般不采用棉試子法。第六十頁，共七十八頁，2022年，8月28日（13）真菌感染培養(yǎng)標(biāo)本1）淺部真菌感染標(biāo)本采集①皮膚：常規(guī)消毒皮膚，從皮膚癬菌皮損邊緣刮取鱗屑，置無菌平皿內(nèi)送檢；皮膚潰瘍則采集病損邊緣膿汁或組織；②指（趾）甲：消毒指（趾）甲并去掉其表面部分，用刀片修成小薄片5—6片，置無菌容器內(nèi)送檢；③毛發(fā)：采集根部折斷處，至少5—6根送檢。2）深部真菌感染標(biāo)本采集①血液：無菌采血8—10ml，注入未用過抗生素的或可中和抗生素的血培養(yǎng)瓶中，立即送檢；如不能立即送檢時(shí)血培養(yǎng)瓶應(yīng)放室溫，但不可超過8—9h；②腦脊液：采樣量不少于3—5ml，分別注入兩支無菌試管中送檢（一管做真菌培養(yǎng)和墨汁染色；一管測陰球菌抗原和其他培養(yǎng)）；③呼吸道及泌尿生殖道深部真菌感染標(biāo)本采集同一般菌培養(yǎng)標(biāo)本。第六十一頁，共七十八頁，2022年，8月28日（14）病毒感染標(biāo)本1）標(biāo)本采集原則：根據(jù)不同檢查目的采集不同的標(biāo)本，見表。盡量與疾病期采集標(biāo)本；尸檢標(biāo)本應(yīng)在患者死亡后6h內(nèi)采集標(biāo)本。第六十二頁，共七十八頁，2022年，8月28日

病毒名稱采取標(biāo)本腺病毒咽洗液、痰、鼻咽拭子腮腺炎病毒咽液、腦脊液流感病毒咽洗液、鼻咽拭子狂犬病病毒唾液副流感病毒咽洗液、鼻咽拭子乙腦病毒血液腸道病毒糞便、腦脊液水痘-帶狀皰疹病毒糞便、腦脊液薩奇病毒水泡液咽洗液單純皰疹病毒水泡液、結(jié)膜拭子風(fēng)疹病毒咽洗液第六十三頁，共七十八頁，2022年，8月28日2）標(biāo)本采集方法：①呼吸道病毒標(biāo)本用咽試子采集；讓患者先咳嗽，再口服0.5%乳蛋白水解物15ml，反復(fù)含漱3-4次后吐到容器中立即送檢；兒童應(yīng)用無菌棉拭子先蘸好0.5%乳蛋白水解物，再去除拭扁桃體周圍組織，并立即泡在0.5%乳蛋白水解物中，立即送檢；②乙腦病毒需采集血清或血漿，置無菌容器中盡快送檢；③尿液則取中段尿立即送檢（否則置4攝氏度冰箱12h內(nèi)接種）；④腸道病毒和柯薩奇病毒則采集新鮮糞便盡快送檢3）標(biāo)本運(yùn)送及保存：多數(shù)病毒對熱不穩(wěn)定，標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢接種；如48h接種，需置4攝氏度冰箱保存；空運(yùn)標(biāo)本需置冰壺中48h內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室并接種。第六十四頁，共七十八頁，2022年，8月28日第三部分檢驗(yàn)結(jié)果的解釋

(正確評價(jià))

重要概念參考值危急值醫(yī)學(xué)決定水平危險(xiǎn)因素第六十五頁，共七十八頁，2022年，8月28日一.參考值

參考值:在指明的特定條件下，用特定的方法所得到的有關(guān)試驗(yàn)的生理、生化參數(shù)是解釋該試驗(yàn)結(jié)果正?；虍惓５囊罁?jù)

第六十六頁，共七十八頁，2022年，8月28日影響參考值的因素

樣本對象：性別、年齡、民族、地域、職業(yè)、生活習(xí)慣、采取標(biāo)本的環(huán)境和生理?xiàng)l件、標(biāo)本采集方法。統(tǒng)計(jì)方法：樣本數(shù)量、分布狀態(tài)（正態(tài)或偏態(tài)分布）。試驗(yàn)方法：靈敏度、特異度等

參考值的可移用性：用于同樣人群、使用同一方法本試驗(yàn)室應(yīng)在使用前用相同方法驗(yàn)證

第六十七頁，共七十八頁，2022年，8月28日二.危急值（criticalvalues）危急值:通常指檢驗(yàn)結(jié)果高度異常，當(dāng)出現(xiàn)這個(gè)檢驗(yàn)結(jié)果時(shí)，患者可能已處于生命危險(xiǎn)邊緣，臨床醫(yī)師如不及時(shí)處理，有可能危及患者安全甚至生命。第六十八頁，共七十八頁，2022年，8月28日常用危急值第六十九頁，共七十八頁，2022年，8月28日例如說明血糖:通常成人生物參考值為3.9——6.1mmol/l；當(dāng)空腹血糖多次〉=7.0mmol/l或任何時(shí)候血糖〉=11.1mmol/l時(shí)，應(yīng)考慮糖尿病的診斷。但當(dāng)血糖〉=22.2mmol/l時(shí)將產(chǎn)生糖尿病昏迷，這時(shí)必須及時(shí)進(jìn)行搶救。同樣，血糖如小于等于2.2mmol/l,將產(chǎn)生低血糖休克，也必須立即進(jìn)行搶救。那么7.0mmol/l,11.1mmol/l為診斷糖尿病的“閾值”，即醫(yī)學(xué)決定水平;而