《DNA重組技術(shù)的基本工具》上課用課件

§1.1DNA重組技術(shù)的基本工具一、教學(xué)目標(biāo)：1.簡述DNA重組技術(shù)所需三種基本工具的作用。2.認(rèn)同基因工程的誕生和發(fā)展離不開理論研究和技術(shù)創(chuàng)新。二、教學(xué)重點(diǎn)：DNA重組技術(shù)所需的三種基本工具的作用。三、教學(xué)難點(diǎn)：基因工程載體需要具備的條件?！?.1DNA重組技術(shù)的基本工具一、教學(xué)目標(biāo)：1一、自學(xué)導(dǎo)引：基因工程的原理：1.概念：2.基因工程又叫DNA重組技術(shù)。3.過程：這種技術(shù)是在生物體

，通過對(duì)

分子進(jìn)行人工“剪切”和“拼接”，對(duì)生物的基因進(jìn)行

和重新組合，然后導(dǎo)入受體細(xì)胞內(nèi)，進(jìn)行

繁殖，使重組基因在受體細(xì)胞內(nèi)表達(dá)。一、自學(xué)導(dǎo)引：基因工程的原理：2二、基礎(chǔ)知識(shí)：4.基因工程的特點(diǎn)：1）它是一種按照人們意愿，定向改造生物遺傳特性的技術(shù)。2）在DNA分子水平上進(jìn)行操作。3）是在體外進(jìn)行的人為的基因重組。4）一旦成功，便可遺傳。5）主要技術(shù)是體外DNA重組技術(shù)和轉(zhuǎn)基因技術(shù)。二、基礎(chǔ)知識(shí)：4.基因工程的特點(diǎn)：3基因工程的別名操作環(huán)境操作對(duì)象操作水平基本過程實(shí)質(zhì)結(jié)果基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)生物體外基因DNA分子水平人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品切割→拼接→導(dǎo)入→表達(dá)基因重組總結(jié)：基因工程的別名操作環(huán)境操作對(duì)象操作水平基本過程實(shí)質(zhì)結(jié)果基因拼4基因工程培育抗蟲棉的簡要過程：普通棉花(無抗蟲特性)蘇云金芽孢桿菌獲取抗蟲基因與運(yùn)載體DNA拼接導(dǎo)入棉花細(xì)胞(含抗蟲基因)棉花植株(有抗蟲特性)上述培育抗蟲棉的關(guān)鍵步驟是什么？基因工程培育抗蟲棉的簡要過程：普通棉花(無抗蟲特性)蘇云金芽5基因工程培育抗蟲棉的關(guān)鍵步驟：關(guān)鍵步驟一：抗蟲基因從蘇云金芽孢桿菌細(xì)胞內(nèi)提取出來關(guān)鍵步驟二：抗蟲基因與運(yùn)載體DNA連接關(guān)鍵步驟三：抗蟲基因?qū)胧荏w(棉花)細(xì)胞基因工程培育抗蟲棉的關(guān)鍵步驟：關(guān)鍵步驟一：抗蟲基因從蘇云金芽6解決培育抗蟲棉的關(guān)鍵步驟需要哪些工具？關(guān)鍵步驟一的工具：關(guān)鍵步驟二的工具：關(guān)鍵步驟三的工具：“分子手術(shù)刀”——限制性內(nèi)切酶“分子縫合針”——DNA連接酶“分子運(yùn)載車”——載體解決培育抗蟲棉的關(guān)鍵步驟需要哪些工具？關(guān)鍵步驟一的工具：“分71.限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀”限制酶主要是從原核微生物中分離純化出來的。能識(shí)別雙鏈DNA的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。特點(diǎn)：特異性。即一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列，并且能在特定的切點(diǎn)上切割DNA分子。三、DNA重組技術(shù)的基本工具1.限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀”限制8《DNA重組技術(shù)的基本工具》上課用課件9《DNA重組技術(shù)的基本工具》上課用課件10大腸桿菌(EcoRΙ)的一種限制酶能識(shí)別GAATTC序列，并在G和A之間切開。限制酶大腸桿菌(EcoRΙ)的一種限制酶能識(shí)別GA11限制酶限制酶12黏性末端和平末端當(dāng)限制酶在它識(shí)別序列的中心軸線兩側(cè)將DNA的兩條鏈分別切開時(shí)，產(chǎn)生的是黏性末端。而當(dāng)限制酶在它識(shí)別序列的中心軸線處切開時(shí)，產(chǎn)生的則是平末端。黏性末端和平末端當(dāng)限制酶在它識(shí)別序列的中心軸13《DNA重組技術(shù)的基本工具》上課用課件14練習(xí)1、下列關(guān)于限制酶的說法不正確的是A．限制酶廣泛存在于各種生物中，微生物中很少分布B．一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列C．不同的限制酶切割DNA的切點(diǎn)不同D．限制酶的作用是用來提取目的基因練習(xí)1、下列關(guān)于限制酶的說法不正確的是15練習(xí)2、限制酶是一種核酸切割酶，可辨識(shí)并切割DNA分子上特定的核苷酸堿基序列。下圖為四種限制酶BamHI，EcoRI，HindⅢ以及BglⅡ的辨識(shí)序列。箭頭表示每一種限制酶的特定切割部位，其中哪兩種限制酶所切割出來的DNA片段末端可以互補(bǔ)黏合？其正確的末端互補(bǔ)序列為何？

A.BamHI和EcoRI；末端互補(bǔ)序列—AATT—B.BamHI和HindⅢ；末端互補(bǔ)序列—GATC—C.EcoRI和HindⅢ；末端互補(bǔ)序列—AATT—D.BamHI和BglII；末端互補(bǔ)序列—GATC—練習(xí)2、限制酶是一種核酸切割酶，可辨識(shí)并切割DNA分子上特定16要想獲得某個(gè)特定性狀的基因必須要用限制酶切幾個(gè)切口？可產(chǎn)生幾個(gè)黏性末端？要切兩個(gè)切口，產(chǎn)生四個(gè)黏性末端。如果把兩種來源不同的DNA用同一種限制酶來切割，會(huì)怎樣呢？會(huì)產(chǎn)生相同的黏性末端，然后讓兩者的黏性末端黏合起來，就似乎可以合成重組的DNA分子了。要想獲得某個(gè)特定性狀的基因必須要用限制酶切幾個(gè)切口？可產(chǎn)生幾17（1）種類：（2）作用部位：E·coliDNA連接酶（黏性末端）T4DNA連接酶（黏性末端和平末端）磷酸二酯鍵

DNA連接酶可把黏性末端之間的縫隙“縫合”起來，即把梯子兩邊扶手的斷口連接起來，這樣一個(gè)重組的DNA分子就形成了。

2、DNA連接酶——“分子縫合針”（1）種類：E·coliDNA連接酶（黏性末端）磷酸二酯鍵18《DNA重組技術(shù)的基本工具》上課用課件19練習(xí)3、在基因工程中用來完成基因的剪接的工具是A．限制酶和連接酶B．限制酶和水解酶C．限制酶和運(yùn)載體D連接酶和運(yùn)載體練習(xí)3、在基因工程中用來完成基因的剪接的工具是20練習(xí)4、依下圖有關(guān)基因工程的工具酶功能的敘述，不正確的是A．切斷a處的酶為限制核酸性內(nèi)切酶B．連接a處的酶為DNA連接酶C．切斷b處的酶為解旋酶D．切斷b處的為限制性內(nèi)切酶練習(xí)4、依下圖有關(guān)基因工程的工具酶功能的敘述，不正確的是21外源基因(如抗蟲基因)怎樣才能導(dǎo)入受體細(xì)胞(如棉花細(xì)胞)？導(dǎo)入過程需要運(yùn)輸工具——載體。載體的作用有哪些？作用一：作為運(yùn)輸工具，將外源基因(抗蟲基因)轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞(棉花細(xì)胞)中去。作用二：利用載體在受體細(xì)胞(棉花細(xì)胞)內(nèi)，對(duì)外源基因(抗蟲基因)進(jìn)行大量復(fù)制。外源基因(如抗蟲基因)怎樣才能導(dǎo)入受體細(xì)胞(如棉花細(xì)胞)？導(dǎo)22作為載體必須具備哪些條件？1）能夠在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定地保存。2）載體DNA必須有一個(gè)或多個(gè)限制酶切點(diǎn)，以便目的基因插入到載體上去。3）具有某些標(biāo)記基因，便于進(jìn)行篩選。如抗菌素的抗性基因、產(chǎn)物具有顏色反應(yīng)的基因等。載體DNA必須是安全的,不會(huì)對(duì)受體細(xì)胞有害,或不能進(jìn)入到除受體細(xì)胞外的其他生物細(xì)胞中去;5)載體DNA分子大小應(yīng)適合,以便提取和在體外進(jìn)行操作,太大就不便操作.作為載體必須具備哪些條件？1）能夠在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定地保233.基因進(jìn)入受體細(xì)胞的運(yùn)載——”分子運(yùn)輸車”常用的運(yùn)載體主要有兩類：

1）細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)的質(zhì)粒

2）λ噬菌體衍生物或某些動(dòng)植物病毒3.基因進(jìn)入受體細(xì)胞的運(yùn)載——”分子運(yùn)輸車”常用的運(yùn)載體主24質(zhì)粒：質(zhì)粒是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單、獨(dú)立于細(xì)菌染色體之外，并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子

質(zhì)粒是基因工程最常用的載體。絕大多數(shù)細(xì)菌質(zhì)粒都是閉合環(huán)狀DNA分子。有的一個(gè)細(xì)菌中有一個(gè)，有的一個(gè)細(xì)菌中有多個(gè)。質(zhì)粒：質(zhì)粒是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單、獨(dú)立于細(xì)菌25大腸桿菌的質(zhì)粒：

最常用的質(zhì)粒是大腸桿菌的質(zhì)粒，其中常含有抗藥基因，如四環(huán)素的標(biāo)記基因。質(zhì)粒的存在與否對(duì)宿主細(xì)胞生存沒有決定性作用，但復(fù)制只能在宿主細(xì)胞內(nèi)成。大腸桿菌的質(zhì)粒：最常用的質(zhì)粒是大腸桿菌的質(zhì)粒26練習(xí)5、限制性內(nèi)切酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G↓GATCC—，限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—↓GATC—。在質(zhì)粒上有酶Ⅰ的一個(gè)切點(diǎn)，在目的基因的兩側(cè)各有1個(gè)酶Ⅱ的切點(diǎn)。①請(qǐng)畫出質(zhì)粒被限制酶Ⅰ切割后形成的黏性未端。___________________________②請(qǐng)畫出目的基因兩側(cè)被限制酶Ⅱ切割后形成的黏性未端。_____________________練習(xí)5、限制性內(nèi)切酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是27本節(jié)內(nèi)容小結(jié)：1.知識(shí)梳理：DNA重組技術(shù)的基本工具：①限制酶（分子手術(shù)刀）：識(shí)別特定的核苷酸序列并切割兩核苷酸之間的磷酸二酯鍵；②DNA連接酶（分子縫合針）：連接兩核苷酸之間的磷酸二酯鍵；③基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體（分子運(yùn)輸車）：最常用的是細(xì)菌質(zhì)粒，還有λ噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒等。本節(jié)內(nèi)容小結(jié)：1.知識(shí)梳理：282.方法、技巧、規(guī)律總結(jié)：限制酶切割的是磷酸二酯鍵，而DNA連接酶連接的正是兩個(gè)斷開此鍵的DNA片段?！胺肿舆\(yùn)輸車”是目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體，它具有的若干特點(diǎn)是基因工程鑒定、選擇、表達(dá)的關(guān)鍵，可以說，沒有它，目的基因即使進(jìn)入受體細(xì)胞，也難以穩(wěn)定保存，更談不上復(fù)制和表達(dá)。3.思維誤區(qū)提示：DNA連接酶與DNA聚合酶根本不是同類酶，其功能特點(diǎn)大不相同，注意其區(qū)別。2.方法、技巧、規(guī)律總結(jié)：限制酶切割的是磷酸二酯鍵，而DNA294.DNA連接酶和DNA聚合酶的異同：基因工程中所用的連接酶有兩種：從大腸桿菌中分離得到的E·coli連接酶、從T4噬菌體中分離得到的T4連接酶。這兩種酶的催化反應(yīng)基本相同，都是連接雙鏈DNA的缺口，而不能連接單鏈DNA。連接酶和聚合酶的作用都是形成磷酸二酯鍵。DNA聚合酶只能將單個(gè)核苷酸加到已有的核苷酸片段的3’末端的羥基上，形成磷酸二酯鍵；而連接酶是在兩個(gè)DNA片段之間形成磷酸二酯鍵。4.DNA連接酶和DNA聚合酶的異同：基因工程中所用的連接304.DNA連接酶和DNA聚合酶的異同：DNA聚合酶是以一條DNA鏈為模板，將單個(gè)核苷酸通過磷酸二酯鍵形成子鏈；而連接酶是將DNA雙鏈上的兩個(gè)缺口同時(shí)連接起來，因此連接酶不需要模板。兩者都是由蛋白質(zhì)構(gòu)成的酶，但組成和性質(zhì)各不相同。4.DNA連接酶和DNA聚合酶的異同：DNA聚合酶是以一條31演講完畢，謝謝觀看！演講完畢，謝謝觀看！32§1.1DNA重組技術(shù)的基本工具一、教學(xué)目標(biāo)：1.簡述DNA重組技術(shù)所需三種基本工具的作用。2.認(rèn)同基因工程的誕生和發(fā)展離不開理論研究和技術(shù)創(chuàng)新。二、教學(xué)重點(diǎn)：DNA重組技術(shù)所需的三種基本工具的作用。三、教學(xué)難點(diǎn)：基因工程載體需要具備的條件?！?.1DNA重組技術(shù)的基本工具一、教學(xué)目標(biāo)：33一、自學(xué)導(dǎo)引：基因工程的原理：1.概念：2.基因工程又叫DNA重組技術(shù)。3.過程：這種技術(shù)是在生物體

，通過對(duì)

分子進(jìn)行人工“剪切”和“拼接”，對(duì)生物的基因進(jìn)行

和重新組合，然后導(dǎo)入受體細(xì)胞內(nèi)，進(jìn)行

繁殖，使重組基因在受體細(xì)胞內(nèi)表達(dá)。一、自學(xué)導(dǎo)引：基因工程的原理：34二、基礎(chǔ)知識(shí)：4.基因工程的特點(diǎn)：1）它是一種按照人們意愿，定向改造生物遺傳特性的技術(shù)。2）在DNA分子水平上進(jìn)行操作。3）是在體外進(jìn)行的人為的基因重組。4）一旦成功，便可遺傳。5）主要技術(shù)是體外DNA重組技術(shù)和轉(zhuǎn)基因技術(shù)。二、基礎(chǔ)知識(shí)：4.基因工程的特點(diǎn)：35基因工程的別名操作環(huán)境操作對(duì)象操作水平基本過程實(shí)質(zhì)結(jié)果基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)生物體外基因DNA分子水平人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品切割→拼接→導(dǎo)入→表達(dá)基因重組總結(jié)：基因工程的別名操作環(huán)境操作對(duì)象操作水平基本過程實(shí)質(zhì)結(jié)果基因拼36基因工程培育抗蟲棉的簡要過程：普通棉花(無抗蟲特性)蘇云金芽孢桿菌獲取抗蟲基因與運(yùn)載體DNA拼接導(dǎo)入棉花細(xì)胞(含抗蟲基因)棉花植株(有抗蟲特性)上述培育抗蟲棉的關(guān)鍵步驟是什么？基因工程培育抗蟲棉的簡要過程：普通棉花(無抗蟲特性)蘇云金芽37基因工程培育抗蟲棉的關(guān)鍵步驟：關(guān)鍵步驟一：抗蟲基因從蘇云金芽孢桿菌細(xì)胞內(nèi)提取出來關(guān)鍵步驟二：抗蟲基因與運(yùn)載體DNA連接關(guān)鍵步驟三：抗蟲基因?qū)胧荏w(棉花)細(xì)胞基因工程培育抗蟲棉的關(guān)鍵步驟：關(guān)鍵步驟一：抗蟲基因從蘇云金芽38解決培育抗蟲棉的關(guān)鍵步驟需要哪些工具？關(guān)鍵步驟一的工具：關(guān)鍵步驟二的工具：關(guān)鍵步驟三的工具：“分子手術(shù)刀”——限制性內(nèi)切酶“分子縫合針”——DNA連接酶“分子運(yùn)載車”——載體解決培育抗蟲棉的關(guān)鍵步驟需要哪些工具？關(guān)鍵步驟一的工具：“分391.限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀”限制酶主要是從原核微生物中分離純化出來的。能識(shí)別雙鏈DNA的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。特點(diǎn)：特異性。即一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列，并且能在特定的切點(diǎn)上切割DNA分子。三、DNA重組技術(shù)的基本工具1.限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀”限制40《DNA重組技術(shù)的基本工具》上課用課件41《DNA重組技術(shù)的基本工具》上課用課件42大腸桿菌(EcoRΙ)的一種限制酶能識(shí)別GAATTC序列，并在G和A之間切開。限制酶大腸桿菌(EcoRΙ)的一種限制酶能識(shí)別GA43限制酶限制酶44黏性末端和平末端當(dāng)限制酶在它識(shí)別序列的中心軸線兩側(cè)將DNA的兩條鏈分別切開時(shí)，產(chǎn)生的是黏性末端。而當(dāng)限制酶在它識(shí)別序列的中心軸線處切開時(shí)，產(chǎn)生的則是平末端。黏性末端和平末端當(dāng)限制酶在它識(shí)別序列的中心軸45《DNA重組技術(shù)的基本工具》上課用課件46練習(xí)1、下列關(guān)于限制酶的說法不正確的是A．限制酶廣泛存在于各種生物中，微生物中很少分布B．一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列C．不同的限制酶切割DNA的切點(diǎn)不同D．限制酶的作用是用來提取目的基因練習(xí)1、下列關(guān)于限制酶的說法不正確的是47練習(xí)2、限制酶是一種核酸切割酶，可辨識(shí)并切割DNA分子上特定的核苷酸堿基序列。下圖為四種限制酶BamHI，EcoRI，HindⅢ以及BglⅡ的辨識(shí)序列。箭頭表示每一種限制酶的特定切割部位，其中哪兩種限制酶所切割出來的DNA片段末端可以互補(bǔ)黏合？其正確的末端互補(bǔ)序列為何？

A.BamHI和EcoRI；末端互補(bǔ)序列—AATT—B.BamHI和HindⅢ；末端互補(bǔ)序列—GATC—C.EcoRI和HindⅢ；末端互補(bǔ)序列—AATT—D.BamHI和BglII；末端互補(bǔ)序列—GATC—練習(xí)2、限制酶是一種核酸切割酶，可辨識(shí)并切割DNA分子上特定48要想獲得某個(gè)特定性狀的基因必須要用限制酶切幾個(gè)切口？可產(chǎn)生幾個(gè)黏性末端？要切兩個(gè)切口，產(chǎn)生四個(gè)黏性末端。如果把兩種來源不同的DNA用同一種限制酶來切割，會(huì)怎樣呢？會(huì)產(chǎn)生相同的黏性末端，然后讓兩者的黏性末端黏合起來，就似乎可以合成重組的DNA分子了。要想獲得某個(gè)特定性狀的基因必須要用限制酶切幾個(gè)切口？可產(chǎn)生幾49（1）種類：（2）作用部位：E·coliDNA連接酶（黏性末端）T4DNA連接酶（黏性末端和平末端）磷酸二酯鍵

DNA連接酶可把黏性末端之間的縫隙“縫合”起來，即把梯子兩邊扶手的斷口連接起來，這樣一個(gè)重組的DNA分子就形成了。

2、DNA連接酶——“分子縫合針”（1）種類：E·coliDNA連接酶（黏性末端）磷酸二酯鍵50《DNA重組技術(shù)的基本工具》上課用課件51練習(xí)3、在基因工程中用來完成基因的剪接的工具是A．限制酶和連接酶B．限制酶和水解酶C．限制酶和運(yùn)載體D連接酶和運(yùn)載體練習(xí)3、在基因工程中用來完成基因的剪接的工具是52練習(xí)4、依下圖有關(guān)基因工程的工具酶功能的敘述，不正確的是A．切斷a處的酶為限制核酸性內(nèi)切酶B．連接a處的酶為DNA連接酶C．切斷b處的酶為解旋酶D．切斷b處的為限制性內(nèi)切酶練習(xí)4、依下圖有關(guān)基因工程的工具酶功能的敘述，不正確的是53外源基因(如抗蟲基因)怎樣才能導(dǎo)入受體細(xì)胞(如棉花細(xì)胞)？導(dǎo)入過程需要運(yùn)輸工具——載體。載體的作用有哪些？作用一：作為運(yùn)輸工具，將外源基因(抗蟲基因)轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞(棉花細(xì)胞)中去。作用二：利用載體在受體細(xì)胞(棉花細(xì)胞)內(nèi)，對(duì)外源基因(抗蟲基因)進(jìn)行大量復(fù)制。外源基因(如抗蟲基因)怎樣才能導(dǎo)入受體細(xì)胞(如棉花細(xì)胞)？導(dǎo)54作為載體必須具備哪些條件？1）能夠在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定地保存。2）載體DNA必須有一個(gè)或多個(gè)限制酶切點(diǎn)，以便目的基因插入到載體上去。3）具有某些標(biāo)記基因，便于進(jìn)行篩選。如抗菌素的抗性基因、產(chǎn)物具有顏色反應(yīng)的基因等。載體DNA必須是安全的,不會(huì)對(duì)受體細(xì)胞有害,或不能進(jìn)入到除受體細(xì)胞外的其他生物細(xì)胞中去;5)載體DNA分子大小應(yīng)適合,以便提取和在體外進(jìn)行操作,太大就不便操作.作為載體必須具備哪些條件？1）能夠在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定地保553.基因進(jìn)入受體細(xì)胞的運(yùn)載——”分子運(yùn)輸車”常用的運(yùn)載體主要有兩類：

1）細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)的質(zhì)粒

2）λ噬菌體衍生物或某些動(dòng)植物病毒3.基因進(jìn)入受體細(xì)胞的運(yùn)載——”分子運(yùn)輸車”常用的運(yùn)載體主56質(zhì)粒：質(zhì)粒是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單、獨(dú)立于細(xì)菌染色體之外，并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子

質(zhì)粒是基因工程最常用的載體。絕大多數(shù)細(xì)菌質(zhì)粒都是閉合環(huán)狀DNA分子。有的一個(gè)細(xì)菌中有一個(gè)，有的一個(gè)細(xì)菌中有多個(gè)。質(zhì)粒：質(zhì)粒是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單、獨(dú)立于細(xì)菌57大腸桿菌的質(zhì)粒：

最常用的質(zhì)粒是大腸桿菌的質(zhì)粒，其中常含有抗藥基因，如四環(huán)素的標(biāo)記基因。質(zhì)粒的存在與否對(duì)宿主細(xì)胞生存沒有決定性作用，但復(fù)制只能在宿主細(xì)胞內(nèi)成。大腸桿菌的質(zhì)粒：最常用的質(zhì)粒是大腸桿菌的質(zhì)粒58練習(xí)5、限制性內(nèi)切酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G↓GATCC—，限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—↓GATC—。在質(zhì)粒上有酶Ⅰ的一個(gè)切點(diǎn)，在目的基因的兩側(cè)各有1個(gè)酶Ⅱ的切點(diǎn)。①請(qǐng)畫出質(zhì)粒被限制酶Ⅰ切割后形成的黏性未端。______________