2020國(guó)自然資源d14、供閱讀范例xu

自然科學(xué)基金申2010版)查保護(hù)文檔或打印文檔，請(qǐng)根據(jù)以下三個(gè)步驟操作：1)ord2000,orword2003Word自然科學(xué)基金申2010版)查保護(hù)文檔或打印文檔，請(qǐng)根據(jù)以下三個(gè)步驟操作：1)ord2000,orword2003Word附注說(shuō)明：宏的安全性設(shè)為:"中"方法:Word菜單->工具->宏->安全性->安全級(jí),設(shè)置為"中"項(xiàng)目名稱(chēng)：(如果您是Word97用戶，繼續(xù)執(zhí)行以下步驟)：(如果word左上角"安全警告"處"選項(xiàng)"依托：中的"啟用此內(nèi)容")通訊地址：2)：3)宏"按鈕，即可開(kāi)始填寫(xiě)本文檔或打印了申報(bào)日期：2010年3月6日自然科學(xué)基金委員會(huì)申請(qǐng)代碼受理部門(mén)收件日期受理編號(hào)基本信息男19454申學(xué)位學(xué)士教授每年工作時(shí)間（月）4請(qǐng)電電子郵箱人傳國(guó)別或地區(qū)中國(guó)信哈爾濱市南崗區(qū) 號(hào)息工作名稱(chēng)依托單位信息人郭松電子郵箱guosong0451－86669470地址單位 名稱(chēng)合作研究單位信息項(xiàng)目名稱(chēng)項(xiàng)資助類(lèi)別面上項(xiàng)目亞類(lèi)說(shuō)明目附注說(shuō)明基H0203:心肌細(xì)胞/細(xì)胞損傷、申請(qǐng)代碼H0109:肺循環(huán)及肺疾病本基地類(lèi)別科技部和黑龍江省生物工程\部門(mén)開(kāi)放信研究年限1—201312研究屬性基礎(chǔ)研究息400肺動(dòng)脈高壓(PAH)可導(dǎo)致右心肥大、衰竭甚至。PAH摘亡和心肌肥大的發(fā)生。但是，CaSR與PAH發(fā)生發(fā)展的關(guān)系，迄今國(guó)內(nèi)外尚無(wú)CaSRCaSR表達(dá)增加。一個(gè)新機(jī)制。為證實(shí)這一假說(shuō)，收縮和重構(gòu)，這可能是缺氧性肺動(dòng)脈高壓的要PAH的防治提供新靶點(diǎn)。PAH缺氧性肺動(dòng)脈高壓；鈣敏感受體；肺動(dòng)脈平滑??；鼠重構(gòu)；大(用分號(hào)52頁(yè)基本信息男19454申學(xué)位學(xué)士教授每年工作時(shí)間（月）4請(qǐng)電電子郵箱人傳國(guó)別或地區(qū)中國(guó)信哈爾濱市南崗區(qū) 號(hào)息工作名稱(chēng)依托單位信息人郭松電子郵箱guosong0451－86669470地址單位 名稱(chēng)合作研究單位信息項(xiàng)目名稱(chēng)項(xiàng)資助類(lèi)別面上項(xiàng)目亞類(lèi)說(shuō)明目附注說(shuō)明基H0203:心肌細(xì)胞/細(xì)胞損傷、申請(qǐng)代碼H0109:肺循環(huán)及肺疾病本基地類(lèi)別科技部和黑龍江省生物工程\部門(mén)開(kāi)放信研究年限1—201312研究屬性基礎(chǔ)研究息400肺動(dòng)脈高壓(PAH)可導(dǎo)致右心肥大、衰竭甚至。PAH摘亡和心肌肥大的發(fā)生。但是，CaSR與PAH發(fā)生發(fā)展的關(guān)系，迄今國(guó)內(nèi)外尚無(wú)CaSRCaSR表達(dá)增加。一個(gè)新機(jī)制。為證實(shí)這一假說(shuō)，收縮和重構(gòu)，這可能是缺氧性肺動(dòng)脈高壓的要PAH的防治提供新靶點(diǎn)。PAH缺氧性肺動(dòng)脈高壓；鈣敏感受體；肺動(dòng)脈平滑肌；鼠重構(gòu)；大(用分號(hào)52頁(yè)項(xiàng)目組主要參與者（注:項(xiàng)目組主要參與者不包括項(xiàng)目申請(qǐng)人，說(shuō)明:高級(jí)、中級(jí)、初級(jí)、博士后、博士生、 生數(shù)由申請(qǐng)人負(fù)責(zé)填報(bào)（含申請(qǐng)人，總?cè)藬?shù)由各分項(xiàng)自動(dòng)加和產(chǎn)生。3頁(yè)總?cè)藬?shù)高級(jí)中級(jí)初級(jí)博士后博士生生1013123編號(hào)姓名出生年月學(xué)位名稱(chēng)電子郵箱項(xiàng)目分工（月）11976-12-19女講師哈爾濱醫(yī)科大物學(xué)421977-03-08女講師博士哈爾濱醫(yī)科大ihongzhu19780308@126.com細(xì)胞內(nèi)鈣測(cè)定431970-03-05男博士生哈爾濱醫(yī)科大i肺 重構(gòu)的信號(hào)傳導(dǎo)641984-11-18女生學(xué)士哈爾濱醫(yī)科大a肌張力檢測(cè)651975-12-22女主治醫(yī)師哈爾濱醫(yī)科大疫組化361975-8-1女博士生哈爾濱醫(yī)科大胞周期671985-7-28女生學(xué)士哈爾濱醫(yī)科大生化測(cè)定481984-2-8女生學(xué)士哈爾濱醫(yī)科大型691978-10-15女助教哈爾濱醫(yī)科大物學(xué)4項(xiàng)目組主要參與者（注:項(xiàng)目組主要參與者不包括項(xiàng)目申請(qǐng)人，說(shuō)明:高級(jí)、中級(jí)、初級(jí)、博士后、博士生、 生數(shù)由申請(qǐng)人負(fù)責(zé)填報(bào)（含申請(qǐng)人，總?cè)藬?shù)由各分項(xiàng)自動(dòng)加和產(chǎn)生。3頁(yè)總?cè)藬?shù)高級(jí)中級(jí)初級(jí)博士后博士生生1013123編號(hào)姓名出生年月學(xué)位名稱(chēng)電子郵箱項(xiàng)目分工（月）11976-12-19女講師哈爾濱醫(yī)科大物學(xué)421977-03-08女講師博士哈爾濱醫(yī)科大ihongzhu19780308@126.com細(xì)胞內(nèi)鈣測(cè)定431970-03-05男博士生哈爾濱醫(yī)科大i肺 重構(gòu)的信號(hào)傳導(dǎo)641984-11-18女生學(xué)士哈爾濱醫(yī)科大a肌張力檢測(cè)651975-12-22女主治醫(yī)師哈爾濱醫(yī)科大疫組化361975-8-1女博士生哈爾濱醫(yī)科大胞周期671985-7-28女生學(xué)士哈爾濱醫(yī)科大生化測(cè)定481984-2-8女生學(xué)士哈爾濱醫(yī)科大型691978-10-15女助教哈爾濱醫(yī)科大物學(xué)4經(jīng)費(fèi)申請(qǐng)表（金額：萬(wàn)元）4頁(yè)科目申請(qǐng)經(jīng)費(fèi)備注（計(jì)算依據(jù)與說(shuō)明）一.研究經(jīng)費(fèi)29.64001.科研業(yè)務(wù)費(fèi)7.2000（1）測(cè)試/計(jì)算/分析費(fèi)2.2000mRNA 、引物 鏡檢查費(fèi)等（2）能源/動(dòng)力費(fèi)（3）會(huì)議費(fèi)/差旅費(fèi)1.9000學(xué)術(shù)會(huì)議0.4×4人次,科研調(diào)研差旅費(fèi)0.3（4） 物/文獻(xiàn)/信息 費(fèi)2.3000國(guó)內(nèi)外 0.3,答辯評(píng)審費(fèi)0.3,信息 費(fèi)0.3（5）其他0.8000不可預(yù)見(jiàn)費(fèi)2.實(shí)驗(yàn)材料費(fèi)20.7000（1）原材料/試劑/藥品購(gòu)置費(fèi)18.5000PCR（2）其他2.2000標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 及飼養(yǎng)3.儀器設(shè)備費(fèi)0.9400（1）購(gòu)置0.9400氮?dú)獍l(fā)生器（2）試制4. 改裝費(fèi)0.80005.協(xié)作費(fèi)二.國(guó)際合作與交流費(fèi)3.80001.項(xiàng)目組成員出國(guó)合作交流2.400012. 來(lái)華合作交流1.4000短期來(lái)華合作交流國(guó)際旅費(fèi)和生活費(fèi)三.勞務(wù)費(fèi)3.8000參加課題的 和博士后的勞務(wù)和生活補(bǔ)助費(fèi)四.1.96005％為合 計(jì)39.2000經(jīng)費(fèi)申請(qǐng)表（金額：萬(wàn)元）4頁(yè)科目申請(qǐng)經(jīng)費(fèi)備注（計(jì)算依據(jù)與說(shuō)明）一.研究經(jīng)費(fèi)29.64001.科研業(yè)務(wù)費(fèi)7.2000（1）測(cè)試/計(jì)算/分析費(fèi)2.2000mRNA 、引物 鏡檢查費(fèi)等（2）能源/動(dòng)力費(fèi)（3）會(huì)議費(fèi)/差旅費(fèi)1.9000學(xué)術(shù)會(huì)議0.4×4人次,科研調(diào)研差旅費(fèi)0.3（4） 物/文獻(xiàn)/信息 費(fèi)2.3000國(guó)內(nèi)外 0.3,答辯評(píng)審費(fèi)0.3,信息 費(fèi)0.3（5）其他0.8000不可預(yù)見(jiàn)費(fèi)2.實(shí)驗(yàn)材料費(fèi)20.7000（1）原材料/試劑/藥品購(gòu)置費(fèi)18.5000PCR（2）其他2.2000標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 及飼養(yǎng)3.儀器設(shè)備費(fèi)0.9400（1）購(gòu)置0.9400氮?dú)獍l(fā)生器（2）試制4. 改裝費(fèi)0.80005.協(xié)作費(fèi)二.國(guó)際合作與交流費(fèi)3.80001.項(xiàng)目組成員出國(guó)合作交流2.400012. 來(lái)華合作交流1.4000短期來(lái)華合作交流國(guó)際旅費(fèi)和生活費(fèi)三.勞務(wù)費(fèi)3.8000參加課題的 和博士后的勞務(wù)和生活補(bǔ)助費(fèi)四.1.96005％為合 計(jì)39.2000其他經(jīng)費(fèi)來(lái)源其他計(jì)劃資助經(jīng)費(fèi)其他經(jīng)費(fèi)資助（含部門(mén)匹配）其他經(jīng)費(fèi)來(lái)源合計(jì)0.0000報(bào)告正文（一）立項(xiàng)依據(jù)與研究?jī)?nèi)容1.項(xiàng)目的立項(xiàng)依據(jù)肺動(dòng)脈高壓(pulmonaryarterialhypertension，PAH)是不同病因?qū)е碌囊苑蝿?dòng)脈和肺血收縮、3】。通管阻力升高為特點(diǎn)的一組疾病或臨床綜合征，和率很高，其發(fā)病機(jī)制主要為重構(gòu)和血栓形成【1，2】。如果PAH不加治療，最終導(dǎo)致右心衰竭、容量負(fù)荷增加直至常肺動(dòng)脈高壓的判定標(biāo)準(zhǔn)為：平均肺動(dòng)脈 在靜息狀態(tài)下>25mmHg，運(yùn)動(dòng)狀態(tài)下>30mmHg。性肺動(dòng)脈高壓(PPH)和繼發(fā)性肺動(dòng)脈高壓(SPH)兩大2003年第3屆PAH會(huì)議，將PAHPAH(IPAH)；②性PAH(FPAH)；PAH(APAHPAH(PPHN)。根據(jù)美國(guó)疾控中心的資料，各類(lèi)型PAH患病率已超過(guò)3O～5O人／100萬(wàn)人【4，5】。囊泡性纖維化/支不良綜合癥神經(jīng)肌肉病等；（4）睡眠 吸：睡眠呼吸暫停等；（5）久居高山或高原；（6）【6】。性PAH主要與BMPR2等 變有關(guān)【7】。眾所周知，肺PAH的發(fā)生機(jī)制復(fù)雜。特發(fā)性和收縮是PAH的早期組分，由細(xì)胞內(nèi)鈣增加觸發(fā)，信號(hào)傳導(dǎo)通路主要包括PKC、Rho激酶和環(huán)磷酸腺苷（cAMP和cGMP），鈣庫(kù) 性鈣通道和電壓門(mén)控性鉀通道報(bào)告正文（一）立項(xiàng)依據(jù)與研究?jī)?nèi)容1.項(xiàng)目的立項(xiàng)依據(jù)肺動(dòng)脈高壓(pulmonaryarterialhypertension，PAH)是不同病因?qū)е碌囊苑蝿?dòng)脈和肺血收縮、3】。通管阻力升高為特點(diǎn)的一組疾病或臨床綜合征，和率很高，其發(fā)病機(jī)制主要為重構(gòu)和血栓形成【1，2】。如果PAH不加治療，最終導(dǎo)致右心衰竭、容量負(fù)荷增加直至常肺動(dòng)脈高壓的判定標(biāo)準(zhǔn)為：平均肺動(dòng)脈 在靜息狀態(tài)下>25mmHg，運(yùn)動(dòng)狀態(tài)下>30mmHg。性肺動(dòng)脈高壓(PPH)和繼發(fā)性肺動(dòng)脈高壓(SPH)兩大2003年第3屆PAH會(huì)議，將PAHPAH(IPAH)；②性PAH(FPAH)；PAH(APAHPAH(PPHN)。根據(jù)美國(guó)疾控中心的資料，各類(lèi)型PAH患病率已超過(guò)3O～5O人／100萬(wàn)人【4，5】。囊泡性纖維化/支不良綜合癥神經(jīng)肌肉病等；（4）睡眠 吸：睡眠呼吸暫停等；（5）久居高山或高原；（6）【6】。性PAH主要與BMPR2等 變有關(guān)【7】。眾所周知，肺PAH的發(fā)生機(jī)制復(fù)雜。特發(fā)性和收縮是PAH的早期組分，由細(xì)胞內(nèi)鈣增加觸發(fā)，信號(hào)傳導(dǎo)通路主要包括PKC、Rho激酶和環(huán)磷酸腺苷（cAMP和cGMP），鈣庫(kù) 性鈣通道和電壓門(mén)控性鉀通道（見(jiàn)圖1）【8】。圖1收縮、 單核巨噬細(xì)胞PAH發(fā)生的機(jī)制與激活 促炎反應(yīng)等有關(guān)（圖3）【9】。【7】氣體信號(hào) 調(diào)節(jié)等已成為PAH的研究熱點(diǎn) ，杜軍保等已開(kāi)展了系列研究。Notch35頁(yè)發(fā)展中作用開(kāi)始受到人們重視（LiXDetal,naturemedicine2009;15:1289-1299）近年來(lái)，哈醫(yī)大朱大嶺等對(duì)15-HETE在低氧性PAH的作用和機(jī)制進(jìn)行了系統(tǒng)研究【10，11】。圖2各種細(xì)胞在肺動(dòng)脈高壓時(shí)重構(gòu)中作用發(fā)展中作用開(kāi)始受到人們重視（LiXDetal,naturemedicine2009;15:1289-1299）近年來(lái)，哈醫(yī)大朱大嶺等對(duì)15-HETE在低氧性PAH的作用和機(jī)制進(jìn)行了系統(tǒng)研究【10，11】。圖2各種細(xì)胞在肺動(dòng)脈高壓時(shí)重構(gòu)中作用圖3（PAH）發(fā)生機(jī)制PAH發(fā)生的Kv開(kāi)放劑、TRP通道抑制劑、負(fù)性生存素、他汀類(lèi) 、PPARγ激動(dòng)劑、各種生長(zhǎng)因子受體的抑制劑、腎上腺髓質(zhì)素、Rho激酶抑制劑、內(nèi)皮祖細(xì)胞、環(huán)孢霉素A等治療【9】。自然科學(xué)基金委5年內(nèi)得到自然科學(xué)基金委資助的有關(guān)“肺動(dòng)脈高壓”研究項(xiàng)目合計(jì)377項(xiàng)，089項(xiàng)，0914項(xiàng)），研究?jī)?nèi)容主要涉及上述提到的有關(guān)因素【7-11】。但是，肺動(dòng)脈高壓的研究雖有100多年的歷史，其發(fā)病機(jī)制至今尚未闡明【1，7，12】。盡管現(xiàn)代化的，但其 率仍高達(dá)50%【13】。這就要求人們從治療明顯改善了PAH患者的生理功能和延長(zhǎng)了6頁(yè)新的視覺(jué)，進(jìn)一步闡明肺動(dòng)脈高壓的發(fā)生機(jī)制，以便為其有效防治提供新靶點(diǎn)。calcium-sensingreceptor,CaSR)是GC﹐BrownetalCaSR。CaSR（EC、7（TCD胞內(nèi)羧基尾部所組成（見(jiàn)圖4CaSR組織以及其他細(xì)胞（例如，中樞和外周神經(jīng)、肝臟，血細(xì)胞、胰腺β細(xì)胞等）。其功能主要是維持Ca2+、Gd3＋、新霉素、精胺（spermine）等多價(jià)陽(yáng)離子亦是CaSR的激動(dòng)劑[14]。新的視覺(jué)，進(jìn)一步闡明肺動(dòng)脈高壓的發(fā)生機(jī)制，以便為其有效防治提供新靶點(diǎn)。calcium-sensingreceptor,CaSR)是GC﹐BrownetalCaSR。CaSR（EC、7（TCD胞內(nèi)羧基尾部所組成（見(jiàn)圖4CaSR組織以及其他細(xì)胞（例如，中樞和外周神經(jīng)、肝臟，血細(xì)胞、胰腺β細(xì)胞等）。其功能主要是維持Ca2+、Gd3＋、新霉素、精胺（spermine）等多價(jià)陽(yáng)離子亦是CaSR的激動(dòng)劑[14]。4鈣敏感受體機(jī)構(gòu)示意圖心領(lǐng)域CaSR的研究開(kāi)展較晚。項(xiàng)目申請(qǐng)人與WangRui教授合作，首次在國(guó)際上證al.Calciumandpolyamineregulatedcalcium-sensing[15]EurJ.Biochem.2003，2702680–2688) 。迄今，該文被SCI等人報(bào)告，CaSR[16]。近年來(lái)，其他實(shí)驗(yàn)小組也提供了一些證據(jù)，表明CaSR在主動(dòng)脈等 的內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌有功能性表達(dá)[17－18]。最近，Masih-ulAlam等證實(shí)性腎衰時(shí)的 失【19】。平滑肌細(xì)胞功能性鈣敏感受體的丟20043：1）《大鼠心肌細(xì)胞鈣敏感受體代謝規(guī)律和"雙刃劍"作用機(jī)制的研究》（30470688，2005-2007）；（3）《鈣敏感受體對(duì)動(dòng)脈粥樣（30871122009-211在上述項(xiàng)目的資助下，本課題組首次發(fā)現(xiàn)：(1)CaSR在大鼠心肌組織中存在及不同鼠齡的表達(dá)規(guī)（2）CaSR激活通過(guò)G蛋白-PLCIP3通路引起[Ca2+]（3）CaSR-再iFas（4）PKCε介導(dǎo)CaSR（5）CaSRAngII誘導(dǎo)的大鼠（6CaSR表達(dá)增加可使動(dòng)脈粥樣硬化大鼠對(duì)心肌梗死的敏感性增加【15，20-28】表相關(guān)2008年黑龍江省自然科學(xué)二7頁(yè)等獎(jiǎng)（申請(qǐng)人排名第一）。目前已成為國(guó)際的研究熱點(diǎn)，在我國(guó)也開(kāi)始得到關(guān)注。迄今為止，關(guān)CaSR的研究項(xiàng)目共9項(xiàng)（見(jiàn)下表）：自然基金委資助有盡管?chē)?guó)內(nèi)外學(xué)者在心系統(tǒng)的鈣敏感受體（CaSR）方面開(kāi)展了一些研究，但是肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞有無(wú)CaSR的功能表達(dá)及其病理生理意義，迄今未見(jiàn)有PubMed收錄。PubMed8106、1314、472、1274篇論文，但是將“鈣敏感受體”與其他檢索詞檢索，則檢索結(jié)果均為“0（。Mo-JunLin等觀察到，慢性缺氧時(shí)瞬時(shí)受體電位(TRPC)負(fù)責(zé)編碼的鈣庫(kù)性陽(yáng)離子通道和受體 通道在肺動(dòng)脈平滑肌表達(dá)上調(diào)，并認(rèn)為這可能是缺氧性PAH的一個(gè)新機(jī)制等獎(jiǎng)（申請(qǐng)人排名第一）。目前已成為國(guó)際的研究熱點(diǎn)，在我國(guó)也開(kāi)始得到關(guān)注。迄今為止，關(guān)CaSR的研究項(xiàng)目共9項(xiàng)（見(jiàn)下表）：自然基金委資助有盡管?chē)?guó)內(nèi)外學(xué)者在心系統(tǒng)的鈣敏感受體（CaSR）方面開(kāi)展了一些研究，但是肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞有無(wú)CaSR的功能表達(dá)及其病理生理意義，迄今未見(jiàn)有PubMed收錄。PubMed8106、1314、472、1274篇論文，但是將“鈣敏感受體”與其他檢索詞檢索，則檢索結(jié)果均為“0（。Mo-JunLin等觀察到，慢性缺氧時(shí)瞬時(shí)受體電位(TRPC)負(fù)責(zé)編碼的鈣庫(kù)性陽(yáng)離子通道和受體 通道在肺動(dòng)脈平滑肌表達(dá)上調(diào)，并認(rèn)為這可能是缺氧性PAH的一個(gè)新機(jī)制【29】。鑒于CaSR普遍在機(jī)體各系統(tǒng)、、組織和細(xì)胞中有表達(dá)，而且CaSR引起細(xì)胞內(nèi)鈣升高的機(jī)制也是通過(guò)鈣庫(kù)性鈣通道（SOCC）和受體性鈣通道（ROCC），因此，我們推測(cè)CaSR在肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞有功能表達(dá)，并可能參與缺氧性肺動(dòng)脈高壓的發(fā)生。這種假說(shuō)已在預(yù)實(shí)驗(yàn)中得到了初步證實(shí)（詳見(jiàn)工作基礎(chǔ)）：8頁(yè)我們研究小組和同濟(jì)醫(yī)學(xué)院胡清華研究小組在國(guó)內(nèi)同時(shí)開(kāi)展了肺動(dòng)脈CaSR的研究，并分別證明肺動(dòng)脈有CaSR的表達(dá)：胡清華教授的博士羅友根了他的“新的細(xì)胞外鈣感受機(jī)制在缺氧引起肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞胞槳鈣離子濃度變化中的作用（2009.5.2李光偉在《第七屆海峽心（2009.8.14-17,）也作了“鈣敏感受體在大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的功能性表達(dá)”的學(xué)術(shù)報(bào)告（KM222，目前英文稿件已投出【0。慢性呼吸系統(tǒng)疾病或缺氧情況在臨 很常見(jiàn)。例如，慢性阻塞性肺疾病(COPD)在我國(guó)的北方地區(qū)（尤其農(nóng)村）十分常見(jiàn)。慢性支炎→阻塞性肺氣腫→缺氧性肺動(dòng)脈高壓→右心肥大→右心(COPD)不僅給患者帶來(lái)了巨大的痛苦，也給家庭和帶來(lái)了沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。我們的研究將進(jìn)一步揭示缺氧性肺動(dòng)脈高壓的發(fā)生機(jī)制，為其有效防治提供新理論和新靶點(diǎn)。參考文獻(xiàn)我們研究小組和同濟(jì)醫(yī)學(xué)院胡清華研究小組在國(guó)內(nèi)同時(shí)開(kāi)展了肺動(dòng)脈CaSR的研究，并分別證明肺動(dòng)脈有CaSR的表達(dá)：胡清華教授的博士羅友根了他的“新的細(xì)胞外鈣感受機(jī)制在缺氧引起肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞胞槳鈣離子濃度變化中的作用（2009.5.2李光偉在《第七屆海峽心（2009.8.14-17,）也作了“鈣敏感受體在大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的功能性表達(dá)”的學(xué)術(shù)報(bào)告（KM222，目前英文稿件已投出【0。慢性呼吸系統(tǒng)疾病或缺氧情況在臨 很常見(jiàn)。例如，慢性阻塞性肺疾病(COPD)在我國(guó)的北方地區(qū)（尤其農(nóng)村）十分常見(jiàn)。慢性支炎→阻塞性肺氣腫→缺氧性肺動(dòng)脈高壓→右心肥大→右心(COPD)不僅給患者帶來(lái)了巨大的痛苦，也給家庭和帶來(lái)了沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。我們的研究將進(jìn)一步揭示缺氧性肺動(dòng)脈高壓的發(fā)生機(jī)制，為其有效防治提供新理論和新靶點(diǎn)。參考文獻(xiàn)LoscalzoJ．Pathogenicmechanismsofpulmonaryarterialhypertension．JMolCellCardiol，2008，44(1)：14-30StenmarkKR,McMurtryIF.Vascularremodelingvesusvasoconstrictioninchronichypoxicpulmonaryhypertension:atimeforreappraisal?CircRes2005;97:95-98FarberH,LoscalzoJ.Pulmonaryarterialhypertension.NEnglJMed2004;351:1655–654.張穎，劉雙，楊京華。肺動(dòng)脈高壓診斷及分類(lèi)。心肺病雜志2008，27（3）：191-193王偉，王玉林.肺動(dòng)脈高壓發(fā)病機(jī)制研究進(jìn)展.實(shí)用兒科臨床雜志2008，23（13）：1036-1038RedaE.Girgis,StephenC.Mathai.PulmonaryHypertensionAssociatedwithChronicRespiratoryDisease.ClinChestMed28(2007)219–232MainaliPrabha,JINHong-fang,TIANYue,TANGChao-shuandDUJun-bao.Mechanismsresponsibleforpulmonaryhypertension.ChinMedJ2008;121(24):2604-2609AngelCogolludo,LauraMoreno,EduardoVillamor.MechanismsControllingVascularToneinPulmonaryArterialHypertension:ImplicationsforVasodilatorTherapy.Pharmacology2007;79:65–75MarleneRabinovitch.Molecularpathogenesisofpulmonaryarterialhypertension.TheJournalofClinicalInvestigation10.LeiGuo,2008,118(7):2372–2379Tang,XiaojieChu,LihuaSun,LeiZhang,ZhaopingQiu,ShuoChen,YumeiLi,XiaodongZheng,DalingZhu.RoleofproteinkinaseCin15-HETE-inducedhypoxicpulmonaryvasoconstriction.Prostaglandins,LeukotrienesandEssentialFattyAcids80(2009)115–12311.ShuangWang,YaliWang,JingJiang,RuifangWang,LisaLi,ZhaopingQiu,HongWu,DalingZhu.15-HETE9頁(yè)protectsratpulmonaryarterialsmoothmusclecellsfromapoptosisviathePI3K/Aktpathway.Prostaglandins&otherLipidMediators91(2010)51–60ZaimanA,FijalkowskaI,HassounPM,TuderRM.OnehundredyearsofresearchintheprotectsratpulmonaryarterialsmoothmusclecellsfromapoptosisviathePI3K/Aktpathway.Prostaglandins&otherLipidMediators91(2010)51–60ZaimanA,FijalkowskaI,HassounPM,TuderRM.Onehundredyearsofresearchinthepathogenesisofpulmonaryhypertension.AmJRespirCellMolBiol2005;33:425-431WangXX,ZhangFR,ShangYP,ZhuJH,XieXD,TaoQM,etal.Transplantationofautologousendothelialbebeneficialinpatientswithidiopathicpulmonaryarterialhypertension:apilotrandomizedcontrolledtrial.JAmCollCardiol2007;49:1566-1571.M.,andR.JohnMacLeod.ExtracellularCalciumSensingandExtracellularCalciumSignaling.PhysiolRev81:239–297,2001WangR,XuCQ,ZhaoWM,etal.Calciumandpolyamineregulatedcalcium-sensingreceptorsincardiactissues.Eur.J.Biochem.270,2680–2688(2003)Tfelt-HansenJ,HansenJL,SmajilovicS,etal.Calciumreceptorisfunctionallyexpressedinratneonatalventricularcardiomyocytes.AmJPhysiolHeartCircPhysiol.2006;290(3):H1165-71RoyC.Ziegelstein,YaliXiong,ChaoxiaHe,etal.Expressionofafunctionalextracellularcalcium-sensingreceptorinhumanaorticendothelialcells.BiochemicalandBiophysicalResearchCommunications342(2006)153–163JakobLercheHansen,TueE.H.Christoffersen,etal.Extracellularcalciumsensinginrataorticvascularsmoothmusclecells.BiochemicalandBiophysicalResearchCommunications348(2006)1215–1223Masih-ulAlam,JohnPaulKirton,FionaL.Wilkinson,etal.Calcificationisassociatedwithlosscalcium-sensingreceptorinvascularsmoothmusclecells.CardiovascularResearch(2009)81,260–26820.徐長(zhǎng)慶（）李弘時(shí)颯趙雅君韓麗萍張紅雨。不同鼠齡大鼠心肌組織中鈣敏感受體的表達(dá)2006，22（8）：1506－150921.ZhangWH,FuSB,LuFH,WuB,GongDM,PanZW,LvYJ,ZhaoYJ,LiQF,WangR,YangBF,XuCQ（ Involvementofcalcium–sensingreceptorinischemia/reperfusion–inducedapoptosisinratcardiomyocytes.BiochemiacalandBiophysicalResearchCommunications2006,347:872-88122．SunYH,LiuMN,LiH,ShiS,ZhaoYJ,WangR,XuCQ（）.Calcium-sensingreceptorinducesratneonatalventricularcardiomyocyteapoptosisBiochemicalandBiophysicalResearchCommunications350(2006)942–94823.JiangCM,HanLP,LiHZ,QuYB,ZhangZR,WangR,XuCQ（）,LiWM.Calcium-sensingreceptorsinduceapoptosisinculturedneonatalratventricularcardiomyocytesduringsimulatedischemia/reperfusion.CellBiologyInternational32(2008)792-800吳博,張偉華,李全鳳,高秀香,張力,楊金霞,王秀麗,張明爽,張卓然,徐長(zhǎng)慶（ ）.鈣敏感受體對(duì)大鼠心肌缺氧－復(fù)氧損傷時(shí)細(xì)胞凋亡的影響.中國(guó)病理生理雜志2007,23(7):1249-1253LuF,TianZ,ZhangW,ZhaoY,BaiS,RenH,ChenH,YuX,WangJ,WangL,LiH,PanZ,TianY,YangB,WangR,XuC（）.Calcium-SensingReceptorsInduceApoptosisinRatCardiomyocytesviatheEndo(sarco)plasmicReticulumPathwayduringHypoxia/Reoxygenation.BasicClinPharmacolToxicol.2009Dec22.[Epubaheadofprint]26.ZhangWH,LuFH,ZhaoYJ,WangLN,TianY,PanZW,LvYJ,WangYL,DuLJ,SunZR,YangBF,WangR,XuC（.Post-conditioningprotectsratcardiomyocytesviaPKC-mediatedcalcium-sensingreceptors.BiochemiacalandBiophysicalResearchCommunications2007,361:659-66427.WangLN,WangC,LinY,XiYH,ZhangWH,ZhaoYJ,LiHZ,TianY,LvYJ,YangBF,XuCQ（）.Involvementofcalcium-sensingreceptorincardiachypertrophy-inducedbyangiotensinIIthroughcalcineurin10頁(yè)pathwayinculturedneonatalratcardiomyocytes.BiochemicalandBiophysicalResearchCommunications2008,369(2):584-58928.GuoJ,LiHZ,ZhangWH,WangLC,WangLN,ZhangL,pathwayinculturedneonatalratcardiomyocytes.BiochemicalandBiophysicalResearchCommunications2008,369(2):584-58928.GuoJ,LiHZ,ZhangWH,WangLC,WangLN,ZhangL,LiGW,LiHX,Yang,BF，WuLY,WangR,XuCQ（Increasedexpressionofcalcium-sensingreceptorsinducedbyox-LDLamplifiesapoptosisof）.cardiomyocytesduringsimulatedischaemia–reperfusion.ClinicalandExperimentalPharmacologyandPhysiology(2010)37,e128–e13529.Mo-JunLin,GeorgeP.H.Leung,Wei-MinZhang,etal.ChronicHypoxia–InducedUpregulationofReceptor-OperatedCa2+ChannelsinPulmonaryArterialSmoothMuscleCells–ANovelMechanismofHypoxicPulmonaryHypertension.CircRes.2004;95:496-50530.LiGW,WangQS,HaoJH,XingWJ,GuoJ,LiHZ,BaiSZ,LiHX,YangBF,WuLY,WangRandXuCQ（）.Functionalexpressionoftheextracellularcalcium-sensingreceptorinratpulmonaryarterysmoothmusclecells.AMJPHYSIOL-LUNGC(insubmit)2.項(xiàng)目的研究?jī)?nèi)容、研究目標(biāo),以及擬解決的關(guān)鍵科學(xué)問(wèn)題研究?jī)?nèi)容（1）大鼠肺動(dòng)脈平滑肌鈣敏感受體的分布、表達(dá)和功能（已基本完成）CaSRPR-PCRBlotCaSRCaSR[Ca2+iCaSR對(duì)肺動(dòng)脈平滑肌張力的影響。慎密分組，應(yīng)用各環(huán)節(jié)激動(dòng)劑或抑制劑，以確保結(jié)論可靠（下詳。（2）缺氧時(shí)大鼠肺動(dòng)脈平滑肌鈣敏感受體表達(dá)的變化及其對(duì)收縮和重構(gòu)的影響氧（缺氧不同時(shí)間）對(duì)大鼠肺動(dòng)脈平滑肌的CaSR表達(dá)、肌張力、組織重構(gòu)（細(xì)胞增殖和細(xì)胞凋亡）的影響，揭示CaSR表達(dá)增加和激活對(duì)肺收縮、重構(gòu)的影響和信號(hào)傳導(dǎo)途徑，以便闡明CaSRi在缺氧性肺動(dòng)脈高壓中的作用和殖和細(xì)胞凋亡作為反映重構(gòu)的指標(biāo)，觀察形態(tài)學(xué)、增殖（凋亡）率、相應(yīng)信號(hào)傳導(dǎo)通路關(guān)鍵分子表達(dá)的變化。具體的研究?jī)?nèi)容、方法和路線，詳見(jiàn)下面的研究方案。研究目標(biāo)（1）證實(shí)大鼠肺動(dòng)脈平滑肌有功能性鈣敏感受體（CaSR）的表達(dá)。（2）揭示缺氧時(shí)肺動(dòng)脈平滑肌CaSR表達(dá)增加，通過(guò)促進(jìn)收縮、重構(gòu)參與缺氧性肺動(dòng)脈高壓（PAH）的形成，從新的視覺(jué)揭示其機(jī)制，為缺氧性PAH的防治提供新思路和新靶點(diǎn)。擬解決的關(guān)鍵科學(xué)問(wèn)題需用 學(xué)方法和功能性檢驗(yàn)證實(shí)：(1)[Ca2+]增加可引起[Ca2+]增加；(2)[Ca2+]增加來(lái)源于o i i11頁(yè)鈣庫(kù)動(dòng)員；(3)；(4)Gd3+Ca2+是激動(dòng)劑；(5)CaSR達(dá)的存在(用P-PCRnorthernblot,westernblot（K.Woneberger,鈣庫(kù)動(dòng)員；(3)；(4)Gd3+Ca2+是激動(dòng)劑；(5)CaSR達(dá)的存在(用P-PCRnorthernblot,westernblot（K.Woneberger,M.A.Scofield,P.Wangemann.Evidenceforacalcium-sensingreceptorinthevascularsmoothmusclecellsofthespiralmodiolarartery.JMembrBiol.20001;175(3):203-12。我們通過(guò)研究?jī)?nèi)容（）所示各種相關(guān)實(shí)驗(yàn)，將充分證實(shí)肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞有CaSR的功能性表達(dá)。（2）一般認(rèn)為，肺收縮、重構(gòu)和原位血栓形成是肺動(dòng)脈高壓（PAH）發(fā)生發(fā)展的重要病理生理基礎(chǔ)。本實(shí)驗(yàn)擬通過(guò)實(shí)驗(yàn)證實(shí)缺氧（尤其慢性缺氧）能使肺動(dòng)脈平滑肌CaSR表達(dá)增多，后者又通過(guò)細(xì)胞內(nèi)鈣增加促進(jìn)肺收縮，通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡和細(xì)胞增殖引起重構(gòu)，進(jìn)而導(dǎo)致缺氧性“CaSR的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。研究成果將具有重要理論意義和潛在的應(yīng)用前景。3.擬采取的研究方案及可行性分析自身前后對(duì)照，并進(jìn)行相應(yīng)的統(tǒng)計(jì)分析。（1）實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和技術(shù)路線1）正常大鼠肺動(dòng)脈平滑肌CaSR的功能性表達(dá)Wister200-250g,雌雄不拘，清潔級(jí)，哈醫(yī)大動(dòng)物中心提供。每組n=7-13(視具體情況而定)。②重要試劑的使用濃度：CaSR激動(dòng)劑：CaSR抑制劑GdCl3NPS23900.3mM–1mM10μM（SR）鈣泵抑制劑：Thapsigargin10μMU73122的類(lèi)似物U73122U73343NiCl2CdCl2Coffeine10μM10μM10mM0.2mMSR鈣庫(kù)耗竭劑：10mM（后詳）④技術(shù)路線：12頁(yè)圖1正常大鼠肺動(dòng)脈和肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞CaSR的表達(dá)、、功能檢測(cè)和機(jī)制探討2）慢性缺氧大鼠肺動(dòng)脈平滑肌CaSR表達(dá)變化及其與肺動(dòng)脈高壓的關(guān)系①實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：同上②重要試劑的使用濃度：同上（后詳）④技術(shù)路線：A.CaSR圖1正常大鼠肺動(dòng)脈和肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞CaSR的表達(dá)、、功能檢測(cè)和機(jī)制探討2）慢性缺氧大鼠肺動(dòng)脈平滑肌CaSR表達(dá)變化及其與肺動(dòng)脈高壓的關(guān)系①實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：同上②重要試劑的使用濃度：同上（后詳）④技術(shù)路線：A.CaSR圖2CaSR激動(dòng)劑和抑制劑對(duì)急性缺氧條件下肺動(dòng)脈環(huán)肌張力的影響13頁(yè)B.CaSR3慢性缺氧時(shí)大鼠肺動(dòng)脈CaSR的表達(dá)與肺動(dòng)脈高壓相關(guān)參數(shù)的變化B.CaSR3慢性缺氧時(shí)大鼠肺動(dòng)脈CaSR的表達(dá)與肺動(dòng)脈高壓相關(guān)參數(shù)的變化C.缺氧時(shí)肺動(dòng)脈CaSR重構(gòu)的影響及其機(jī)制14頁(yè)圖4缺氧對(duì)培養(yǎng)肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞CaSR表達(dá)和細(xì)胞增殖及凋亡的影響及其信號(hào)傳導(dǎo)通路（2）研究方法1）肺動(dòng)脈張力的測(cè)定圖4缺氧對(duì)培養(yǎng)肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞CaSR表達(dá)和細(xì)胞增殖及凋亡的影響及其信號(hào)傳導(dǎo)通路（2）研究方法1）肺動(dòng)脈張力的測(cè)定：15頁(yè)Wister2%（2g/kg4℃Hepes0.3-0.7mm周?chē)竞徒Y(jié)締組有4mlKrebs95%O2-5%CO230min內(nèi)逐漸給肺動(dòng)脈環(huán)負(fù)荷0.3g的基礎(chǔ)張力，平衡1h后，分別測(cè)定不同條件下的張力。,RomanRJ,JacobsER(1998)TissuesourcesofcytochromeWister2%（2g/kg4℃Hepes0.3-0.7mm周?chē)竞徒Y(jié)締組有4mlKrebs95%O2-5%CO230min內(nèi)逐漸給肺動(dòng)脈環(huán)負(fù)荷0.3g的基礎(chǔ)張力，平衡1h后，分別測(cè)定不同條件下的張力。,RomanRJ,JacobsER(1998)TissuesourcesofcytochromeP4504Aand20-HETExynthesesinrabbitlungs,AmJRespirCellMolBiol,19,121-128】2）肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的原代及傳代培養(yǎng)：[2]200g2ml醛麻醉。將麻醉后的大鼠固定于手術(shù)臺(tái)，用棉對(duì)大鼠表面皮膚進(jìn)行。沿著大鼠劍突部位剪開(kāi)胸腔，心臟和肺部，用鑷子輕提心臟，沿處取下肺部，至于PBS緩沖液中。將肺葉固定于硅膠板上，用顯微手術(shù)剪在體式顯微鏡下取出遠(yuǎn)端肺動(dòng)脈，去內(nèi)皮后用剪刀將剪成碎塊，置于Ⅱ型膠原酶中消化成絮狀。用20%DMEM高糖培養(yǎng)液終止消化后，用20005分鐘，取下層沉淀，用培養(yǎng)液重懸，放于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。隔天進(jìn)行換液，一周后進(jìn)行鑒定。2-460%左右融合時(shí)，換無(wú)血清培養(yǎng)24h，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。LüChang-Lian,YEHong,TANG,ZHUDa-Ling,(2005)ERK1/2signalingpathwayisinvolvedinacid-inducedhypoxiapulmonaryvosoconstriction,ActaPhysiologicaSinica,57(5):606-611.】3）肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞鑒定α-actin免疫組化染色)：取正常培養(yǎng)，未加任何處理的肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)在多聚賴(lài)氨酸處理的蓋玻片上，純固定15min后，PBS，0.5%H2O2稀釋的甲醇室溫作用20min，滅活內(nèi)源性酶，PBS兩次。滴加正常山羊血清，室溫作用20in。滴加抗鼠α肌動(dòng)蛋白抗體（1：104℃過(guò)夜。PS3次，滴37℃孵育30min，PBS洗3次。滴加SABC，37℃孵育20min，DAB顯色10min。自來(lái)水沖洗，蘇木素復(fù)染，二甲苯透明，封片，光鏡下觀察攝片。4）大鼠缺氧細(xì)胞模型的：培養(yǎng)的肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞置于的可封閉的有機(jī)2495N2、2%O2、3%CO2的混合氣體，37恒溫浴箱中。5）大鼠缺氧在體模型的：健康雄性大鼠，體重為150-350g，正常組吸入大氣,氧氣分?jǐn)?shù)為(FiO2)21.0%。缺氧組大鼠置（下圖），103d、7d、14d、21d。。缺氧箱上有通氣孔可使缺氧箱內(nèi)外空氣相通，氧氣器檢測(cè)缺氧箱內(nèi)氧濃度，并自動(dòng)控制氮16頁(yè)SPB-3SPB-3SPN-300過(guò)程產(chǎn)生氮?dú)?，氮?dú)饨?jīng)出進(jìn)入到缺氧箱內(nèi)，氮?dú)獾牧坑裳鯕馄鞲鶕?jù)氧氣分?jǐn)?shù)的大小而自動(dòng)CO29dCO2、水蒸氣分別用氧化鈣和無(wú)水氯化鈣吸收，排出的氨氣由硼酸吸收，大鼠自由采食和飲水。即成為缺氧模型。氧化鈣，無(wú)水氯化鈣，硼酸的量自行掌握，不要出現(xiàn)霧氣，氣味為宜。缺氧箱示意圖al.Toleranceofthedevelopinghearttoischemia:impactofhypoxemiafrombirth.AmJPhysiol,（1995）,268:H1165-11731】3d、7d、14d21d3d明顯升高和缺氧性肺7dSPB-3SPB-3SPN-300過(guò)程產(chǎn)生氮?dú)猓獨(dú)饨?jīng)出進(jìn)入到缺氧箱內(nèi)，氮?dú)獾牧坑裳鯕馄鞲鶕?jù)氧氣分?jǐn)?shù)的大小而自動(dòng)CO29dCO2、水蒸氣分別用氧化鈣和無(wú)水氯化鈣吸收，排出的氨氣由硼酸吸收，大鼠自由采食和飲水。即成為缺氧模型。氧化鈣，無(wú)水氯化鈣，硼酸的量自行掌握，不要出現(xiàn)霧氣，氣味為宜。缺氧箱示意圖al.Toleranceofthedevelopinghearttoischemia:impactofhypoxemiafrombirth.AmJPhysiol,（1995）,268:H1165-11731】3d、7d、14d21d3d明顯升高和缺氧性肺7d14d肥大性改變?！緟⒁?jiàn)：胡瑞成,戴愛(ài)國(guó),譚雙香,等.缺氧性肺動(dòng)脈高壓發(fā)病中肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖與凋亡變化[J].大學(xué)學(xué)報(bào),2001,29(5):445-448】檢測(cè)模型成功的標(biāo)準(zhǔn)：①HE染色觀察肺動(dòng)脈管壁結(jié)構(gòu)的改變。②透射電鏡觀察肺動(dòng)脈管壁超微結(jié)構(gòu)的變化。③以右心導(dǎo)管法測(cè)定肺動(dòng)脈脈傳感器與powerlab多導(dǎo)生理17頁(yè)④固定48h,沿溝除去心房及大平稱(chēng)量(RVHI):RVHI=游離壁)×100%。⑤肺小,HE染色,光鏡下觀察肺小 重塑情況取直徑100μm左右的肺動(dòng)脈,用ICM-100細(xì)胞圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行形態(tài)計(jì)量分析,以壁橫斷面積占(WA%)作為衡量缺氧性肺重塑的指標(biāo)。,別畢華,張珍祥,等.胰島素樣生長(zhǎng)因子在低氧性肺動(dòng)脈高壓大鼠心肺內(nèi)表達(dá)的觀察[J].中華結(jié)核和呼吸雜志,1999,22(7):422】6）Westernblot4012000為標(biāo)準(zhǔn)，用Bradford20μg蛋白樣品，10%SDS-PAGE電泳，100V轉(zhuǎn)移1h至硝酸纖維素薄膜,放入封閉液中37℃封閉1④固定48h,沿溝除去心房及大平稱(chēng)量(RVHI):RVHI=游離壁)×100%。⑤肺小,HE染色,光鏡下觀察肺小 重塑情況取直徑100μm左右的肺動(dòng)脈,用ICM-100細(xì)胞圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行形態(tài)計(jì)量分析,以壁橫斷面積占(WA%)作為衡量缺氧性肺重塑的指標(biāo)。,別畢華,張珍祥,等.胰島素樣生長(zhǎng)因子在低氧性肺動(dòng)脈高壓大鼠心肺內(nèi)表達(dá)的觀察[J].中華結(jié)核和呼吸雜志,1999,22(7):422】6）Westernblot4012000為標(biāo)準(zhǔn)，用Bradford20μg蛋白樣品，10%SDS-PAGE電泳，100V轉(zhuǎn)移1h至硝酸纖維素薄膜,放入封閉液中37℃封閉1h；一抗4℃過(guò)TBST液孵育，作為對(duì)照。反復(fù)洗膜后，將膜與堿性磷酸酶(AP)標(biāo)Westernblotting印跡觀察，用圖像分析測(cè)定各帶吸(A)值作定量分析?！緟⒁?jiàn)我們已的：21.ZhangWH,FuSB,XuCQ（）etal.Involvementofcalcium–sensingreceptorinischemia/reperfusion–inducedapoptosisinratcardiomyocytes. BiochemiacalandBiophysicalResearchCommunications2006,347:872-88125.LuF,ZhangW,XuC（）etal.Calcium-SensingReceptorsInduceApoptosisinRatCardiomyocytesviatheEndo(sarco)plasmicReticulumPathwayduringHypoxia/Reoxygenation.BasicClinPharmacolToxicol.2009Dec22.[Epubaheadofprint]26.ZhangWH,LuFH,XuCQ（）etal.Post-conditioningprotectsratcardiomyocytesviaPKC-mediatedcalcium-sensingreceptors.BiochemiacalandBiophysicalResearchCommunications2007,361:659-66427.WangLN,WangC,XuCQ（ ）etal.Involvementofcalcium-sensingreceptorincardiachypertrophy-inducedbyangiotensinIIthroughcalcineurinpathwayinculturedneonatalratcardiomyocytes.BiochemicalandBiophysicalResearchCommunications2008,369(2):584-58928.GuoJ,LiHZ,XuCQ（）etal.Increasedexpressionofcalcium-sensingreceptorsinducedbyox-LDLamplifiesapoptosisofcardiomyocytesduringsimulatedischaemia–reperfusion.ClinicalandExperimentalPharmacologyandPhysiology(2010)37,e128–e1357）RT-PCRCaSRmRNA肺動(dòng)脈低溫充分勻漿后，用Trizol試劑抽提總RNA，取總RNA5μL，在20μL逆轉(zhuǎn)錄體系中合成cDNA，以5μLcDNA為模板加入靶上下游引物，在50μL體系中進(jìn)行PCR擴(kuò)增。18頁(yè)【參見(jiàn)我們已的 ：21.ZhangWH,FuSB,XuCQ（）etal.Involvementofcalcium–sensingreceptorinischemia/reperfusion–inducedapoptosisinratcardiomyocytes. BiochemiacalandBiophysicalResearchCommunications2006,347:872-88128.GuoJ,LiHZ,【參見(jiàn)我們已的 ：21.ZhangWH,FuSB,XuCQ（）etal.Involvementofcalcium–sensingreceptorinischemia/reperfusion–inducedapoptosisinratcardiomyocytes. BiochemiacalandBiophysicalResearchCommunications2006,347:872-88128.GuoJ,LiHZ,XuCQ（）etal.Increasedexpressionofcalcium-sensingreceptorsinducedbyox-LDLamplifiesapoptosisofcardiomyocytesduringsimulatedischaemia–reperfusion.ClinicalandExperimentalPharmacologyandPhysiology(2010)37,e128–e1358）免疫熒光技術(shù)檢測(cè)CaSR蛋白表達(dá)的組織和細(xì)胞細(xì)胞（肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞4%6孔培養(yǎng)板內(nèi)）0.1MPBS沖洗，4min，山℃)；一抗孵育，4PBS代替一抗；0.1MPBS3IgG371h；PBS3次，熒光顯微鏡下觀察。組織（肺動(dòng)脈錫箔紙模具中，模具中充滿冰凍包埋劑，迅速置于液氮中，冰凍切片機(jī)切片，后，PBS，0.5%2220inPBS20min。4℃過(guò)夜。PBS3次，滴加生物素標(biāo)記的山羊抗兔二抗，37℃孵育30min，PBS洗3次，抗熒光淬滅劑封片。熒光顯微鏡下觀察。9）用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)平滑肌增殖和凋亡情況分別取各組培養(yǎng)的肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞，經(jīng)0.25%胰蛋白酶消化后，用PBS洗滌2次，調(diào)整細(xì)胞密度為1×106/L100μlBindingBuffer和FITC標(biāo)記的30minPI(50μg/ml)5μl5min400μlPI=(S+G2/M)/(S+G2/M+G0/G1)，計(jì)算細(xì)胞增殖指數(shù)。同時(shí)觀察細(xì)胞凋亡情況。10）激光掃描共聚焦顯微鏡檢測(cè)心肌細(xì)胞游離鈣濃度Ca2+敏觀察CaSR不同的激動(dòng)劑及缺氧對(duì)細(xì)胞內(nèi)鈣的影響。PASMCs首先用5–10μMFluo-3AM（先用二甲基。正常臺(tái)氏液含有（mM）：137NaCl,5.4KCl,2CaCl2,1MgCl2,10HEPES,and10glucose,pH7.4NaOH調(diào)節(jié))。然后，PASMCs用臺(tái)氏液徹底沖洗，以便移除細(xì)胞外Fluo-3AM，并置于細(xì)胞池靜止15–30min，使脫脂。最后用ZeissLSM-510倒置激光顯微鏡激光圖像。用488nm氬激光激發(fā)，用505nm測(cè)量。用行掃描模式（掃描速度：0.075μm/像素，512，2ms間隔），在加藥前后對(duì)同一培養(yǎng)皿內(nèi)來(lái)自不同細(xì)胞的圖19頁(yè)像進(jìn)行。通過(guò)聲光可調(diào)濾波器將激光減弱到最大功率(25mW)的1%，使漂白作用和激光對(duì)細(xì)胞的Ca2+損傷降到最低。那些在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)對(duì)含有10mM和0.5mM不發(fā)生反應(yīng)的細(xì)胞被拋棄。所有的實(shí)驗(yàn)均在室溫下進(jìn)行。Wei-MinZhang,Mo-JunLin,andJamesS.K.Sham.Endothelin-1andIP3InducedCa2+SparksinPulmonaryArterialSmoothMuscleCells.JCardiovascPharmacol?2004;44(suppl1):S121–S124】（3）可行性分析1）理論可行性：一般認(rèn)為，收縮、重構(gòu)以及血栓形成是肺動(dòng)脈高壓形成的主要病理生理基礎(chǔ)。文獻(xiàn)報(bào)道，慢性缺氧時(shí)瞬時(shí)受體電位(TRPC)性陽(yáng)離子通道和受體性陽(yáng)離子通道在肺動(dòng)脈平滑肌表達(dá)上調(diào)，可能是缺氧性肺動(dòng)脈高壓的一個(gè)新機(jī)制(Mo-JunLin,etal.ChronicUpregulationofStore-OperatedandReceptor-OperatedCa2+ChannelsinPulmonaryArterial像進(jìn)行。通過(guò)聲光可調(diào)濾波器將激光減弱到最大功率(25mW)的1%，使漂白作用和激光對(duì)細(xì)胞的Ca2+損傷降到最低。那些在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)對(duì)含有10mM和0.5mM不發(fā)生反應(yīng)的細(xì)胞被拋棄。所有的實(shí)驗(yàn)均在室溫下進(jìn)行。Wei-MinZhang,Mo-JunLin,andJamesS.K.Sham.Endothelin-1andIP3InducedCa2+SparksinPulmonaryArterialSmoothMuscleCells.JCardiovascPharmacol?2004;44(suppl1):S121–S124】（3）可行性分析1）理論可行性：一般認(rèn)為，收縮、重構(gòu)以及血栓形成是肺動(dòng)脈高壓形成的主要病理生理基礎(chǔ)。文獻(xiàn)報(bào)道，慢性缺氧時(shí)瞬時(shí)受體電位(TRPC)性陽(yáng)離子通道和受體性陽(yáng)離子通道在肺動(dòng)脈平滑肌表達(dá)上調(diào)，可能是缺氧性肺動(dòng)脈高壓的一個(gè)新機(jī)制(Mo-JunLin,etal.ChronicUpregulationofStore-OperatedandReceptor-OperatedCa2+ChannelsinPulmonaryArterialCellsANovelMechanismofHypoxicPulmonaryHypertension.CircRes2004;95:496-505)。是啟動(dòng)缺氧性肺收縮的關(guān)鍵 活途徑和Ca2+進(jìn)入通路的JeremyPTWard1andIvanFMcMurtry.Mechanismsofhypoxicpulmonaryvasoconstrictionandtheirrolesinpulmonaryhypertension:newfindingsforanoldproblemCurrentOpinioninPharmacology2009,9:287–296)。CaSR激活導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)鈣升高的機(jī)制，也是通過(guò)鈣庫(kù)（SOCC）和受體（ROCC）。我們前期研預(yù)實(shí)驗(yàn)也初步證實(shí)缺氧能使肺動(dòng)脈平滑肌CaSR表達(dá)增多。因此，我們提出的“CaSR通過(guò)促進(jìn)肺在理論上是可行的。收縮和重構(gòu)而參與缺氧性肺動(dòng)脈高壓的發(fā)生”的假說(shuō)2）方法可行性：課題組所在具有開(kāi)展本需的一切儀器設(shè)備（見(jiàn)下面的工作條件項(xiàng)。擬采用的所有實(shí)驗(yàn) 和技術(shù)，均為課題組成員所熟悉和掌握【15，20-28。3）可行性：項(xiàng)目申請(qǐng)人徐長(zhǎng)慶教授為博士和CaSR的研究方面有一定建樹(shù)（見(jiàn)研究基礎(chǔ)）。現(xiàn)有在研博士85外，還有從事多年肺纖維化發(fā)生機(jī)制研究的臨床醫(yī)生（實(shí)驗(yàn)的要求。）參加，這些構(gòu)成能完全能滿足開(kāi)展4.本項(xiàng)目的特色與創(chuàng)新之處（1）研究領(lǐng)域的創(chuàng)新：20頁(yè)中在心臟和體循環(huán)系統(tǒng)，對(duì)肺動(dòng)脈的研究還是一片“地”（參加前面立題依據(jù)中檢索結(jié)果）。CaSRCaSR（信號(hào)通路）【30】。我們國(guó)內(nèi)這兩個(gè)小組的研究首次證明肺動(dòng)脈平滑肌有功能性鈣敏感受體的表達(dá)，這不僅填補(bǔ)了國(guó)內(nèi)外的研究空白，也拓寬了CaSR的知識(shí)內(nèi)涵，為后續(xù)研究奠定了理論和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。（2）揭示缺氧性肺動(dòng)脈高壓發(fā)生機(jī)制的新靶點(diǎn)：在缺氧性肺動(dòng)脈高壓的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中，CaSR是否發(fā)揮重要作用,目前國(guó)內(nèi)外還沒(méi)有相關(guān)的研究。胡清華教授的博士羅友根副教授去年中標(biāo)一項(xiàng)自然科學(xué)基金課題“鈣敏感受體在缺氧誘Aβ過(guò)量生成中作用及其。本課題以大鼠慢性在體缺氧模型和肺動(dòng)脈平CaSR的表達(dá)變化與張力、重構(gòu)（細(xì)胞增殖和細(xì)胞凋亡）的關(guān)系及其相關(guān)信號(hào)傳導(dǎo)通路。我們的課題和羅友根副教授的課題的研究大方向相同，但是研究的內(nèi)容和側(cè)重點(diǎn)不同，可謂之“優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)，相得益彰”。我們的研究成果有望成為揭示缺氧性肺動(dòng)脈高壓發(fā)生的一種新機(jī)制，也將為缺氧性肺動(dòng)脈高壓的防治提供藥物作用新靶點(diǎn)。5.年度研究計(jì)劃及預(yù)期研究結(jié)果（包括擬組織的重要學(xué)術(shù)交流活動(dòng)、國(guó)際合作與交流計(jì)劃等）CaSR在大鼠肺動(dòng)脈平滑肌和細(xì)胞的表達(dá)和 i中在心臟和體循環(huán)系統(tǒng)，對(duì)肺動(dòng)脈的研究還是一片“地”（參加前面立題依據(jù)中檢索結(jié)果）。CaSRCaSR（信號(hào)通路）【30】。我們國(guó)內(nèi)這兩個(gè)小組的研究首次證明肺動(dòng)脈平滑肌有功能性鈣敏感受體的表達(dá)，這不僅填補(bǔ)了國(guó)內(nèi)外的研究空白，也拓寬了CaSR的知識(shí)內(nèi)涵，為后續(xù)研究奠定了理論和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。（2）揭示缺氧性肺動(dòng)脈高壓發(fā)生機(jī)制的新靶點(diǎn)：在缺氧性肺動(dòng)脈高壓的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中，CaSR是否發(fā)揮重要作用,目前國(guó)內(nèi)外還沒(méi)有相關(guān)的研究。胡清華教授的博士羅友根副教授去年中標(biāo)一項(xiàng)自然科學(xué)基金課題“鈣敏感受體在缺氧誘Aβ過(guò)量生成中作用及其。本課題以大鼠慢性在體缺氧模型和肺動(dòng)脈平CaSR的表達(dá)變化與張力、重構(gòu)（細(xì)胞增殖和細(xì)胞凋亡）的關(guān)系及其相關(guān)信號(hào)傳導(dǎo)通路。我們的課題和羅友根副教授的課題的研究大方向相同，但是研究的內(nèi)容和側(cè)重點(diǎn)不同，可謂之“優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)，相得益彰”。我們的研究成果有望成為揭示缺氧性肺動(dòng)脈高壓發(fā)生的一種新機(jī)制，也將為缺氧性肺動(dòng)脈高壓的防治提供藥物作用新靶點(diǎn)。5.年度研究計(jì)劃及預(yù)期研究結(jié)果（包括擬組織的重要學(xué)術(shù)交流活動(dòng)、國(guó)際合作與交流計(jì)劃等）CaSR在大鼠肺動(dòng)脈平滑肌和細(xì)胞的表達(dá)和 i時(shí)完成大鼠慢性缺氧模型的和相應(yīng)指標(biāo)檢測(cè)。2012.1—2012.12繼續(xù)完成大鼠慢性缺氧模型的和相應(yīng)指標(biāo)檢測(cè)，同時(shí) 肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞缺氧模型，觀測(cè)CaSR表達(dá)規(guī)律，揭示它與張力、重構(gòu)（細(xì)胞增殖和細(xì)胞凋亡）的關(guān)系及其信號(hào)傳導(dǎo)通路。2013.1—2013.12一步補(bǔ)充相應(yīng)實(shí)驗(yàn)，力求在理論上有所發(fā)現(xiàn)、 醫(yī)科大學(xué)主辦1次心 系統(tǒng)鈣敏感受體的2-3月時(shí)間進(jìn)行課題總結(jié)、撰寫(xiě)和成果申報(bào)工作。預(yù)期研究結(jié)果：（1）首次證實(shí)在大鼠肺動(dòng)脈平滑肌組織和細(xì)胞有鈣敏感受體的功能性表達(dá)存在。CaSR收縮和重構(gòu)的機(jī)制，從而從新的視覺(jué)闡明缺氧性肺動(dòng)脈高壓的發(fā)生機(jī)制。21頁(yè)（3）預(yù)期研究2SCI收錄，并申報(bào)科技成果獎(jiǎng)。（二）研究基礎(chǔ)與工作條件1、工作基礎(chǔ)七五、八五攻關(guān)課題、863課題和近20項(xiàng)自然科學(xué)基金課題，20（1）在心肌鈣敏感受體（CaSR）的研究中的部分成果在多項(xiàng)解心肌細(xì)胞和原代培養(yǎng)乳鼠心肌細(xì)胞為對(duì)象，采用高效液相色譜、流式細(xì)胞儀、膜片鉗、激光共聚（3）預(yù)期研究2SCI收錄，并申報(bào)科技成果獎(jiǎng)。（二）研究基礎(chǔ)與工作條件1、工作基礎(chǔ)七五、八五攻關(guān)課題、863課題和近20項(xiàng)自然科學(xué)基金課題，20（1）在心肌鈣敏感受體（CaSR）的研究中的部分成果在多項(xiàng)解心肌細(xì)胞和原代培養(yǎng)乳鼠心肌細(xì)胞為對(duì)象，采用高效液相色譜、流式細(xì)胞儀、膜片鉗、激光共聚、免疫熒光、TUNEL2003（CaSR）的研究中取得了一些研究成果{15.20-28}：1)首次發(fā)現(xiàn)CaSR在大鼠心肌組織中存在及不同鼠齡的表達(dá)規(guī)律；2）首次發(fā)現(xiàn)CaSR激活通過(guò)G蛋白-PLC-IP3通路引起細(xì)胞內(nèi)鈣增加，參與心肌鈣穩(wěn)態(tài)和興奮－收縮偶聯(lián)的調(diào)控，并是細(xì)胞鈣超載的發(fā)生機(jī)制之一；3）首次揭示心肌缺血-再灌注時(shí)CaSR表達(dá)規(guī)律和關(guān)鍵作用，通過(guò)激活MAPKs（包括p38MAPK,22頁(yè)JNK和ERK）c-Caspase-3Fas通路，誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡；MorphologicalchangesofJNK和ERK）c-Caspase-3Fas通路，誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡；Morphologicalchangesofcardiactissueindifferentgroups(×400).A:control;B:anoxia;C:A/R;D:NiCl2+CdCl2+A/R;E:GdCl3+NiCl2+CdCl2+A/R.ReresentativeillustrationofTUNELstainingincardiomyocytes(×400).A:control;B:anoxia;C:A/R;D:NiCl2+CdCl2+A/R;E:GdCl3+NiCl2+CdCl2+A/R.#P<0.05vs4）首次發(fā)現(xiàn)PKCε介導(dǎo)的CaSR活性改變參與了缺血后適應(yīng)的心肌保護(hù)作用；23頁(yè)5）首次發(fā)現(xiàn)CaSR通過(guò)神經(jīng)鈣調(diào)磷酸酶（CaN）參與AngII誘導(dǎo)的大鼠心肌肥大；6）首次發(fā)現(xiàn)動(dòng)脈粥樣硬化大鼠心肌鈣敏感受體的表達(dá)增加，可促進(jìn)細(xì)胞凋亡，增加對(duì)心肌梗死的敏感性。迄今，已相關(guān)SCI16（詳見(jiàn)申請(qǐng)人簡(jiǎn)介）。其中自然基金項(xiàng)目《大鼠心肌細(xì)胞鈣敏感受體的生物學(xué)活性及其在心肌缺血/再灌注損傷中的作用》已獲20085）首次發(fā)現(xiàn)CaSR通過(guò)神經(jīng)鈣調(diào)磷酸酶（CaN）參與AngII誘導(dǎo)的大鼠心肌肥大；6）首次發(fā)現(xiàn)動(dòng)脈粥樣硬化大鼠心肌鈣敏感受體的表達(dá)增加，可促進(jìn)細(xì)胞凋亡，增加對(duì)心肌梗死的敏感性。迄今，已相關(guān)SCI16（詳見(jiàn)申請(qǐng)人簡(jiǎn)介）。其中自然基金項(xiàng)目《大鼠心肌細(xì)胞鈣敏感受體的生物學(xué)活性及其在心肌缺血/再灌注損傷中的作用》已獲2008年黑龍江省自然科學(xué)二等獎(jiǎng)。24頁(yè)（2）有關(guān)肺動(dòng)脈CaSR的前期實(shí)驗(yàn)和預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果CaSR的假設(shè)，本課題開(kāi)展了有關(guān)肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞有CaSR功能表達(dá)的前期實(shí)驗(yàn)，并對(duì)CaSR在大鼠缺（2）有關(guān)肺動(dòng)脈CaSR的前期實(shí)驗(yàn)和預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果CaSR的假設(shè)，本課題開(kāi)展了有關(guān)肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞有CaSR功能表達(dá)的前期實(shí)驗(yàn)，并對(duì)CaSR在大鼠缺氧肺動(dòng)脈收縮及重構(gòu)作了部分初步預(yù)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如下：（1RTPCR和WesternblotCaSRL-Ca2+呈劑量依賴(lài)性引起肺動(dòng)脈平滑肌肌張力升高。25頁(yè)QSHaoJHQSHaoJHXingWJ,GuoJ,LiHZ,BaiSZ,LiHXYangLY,WangRandXuCQ（extracellularcalcium-sensingreceptorinratpulmonaryarterysmoothmusclecells.AMJPHYSIOL-LUNGCinsubm）。（2）采取上述方法，觀察到急性缺氧（1-5h）或慢性缺氧（12-48h）時(shí)大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞CaSRMTT（PCNA）CaSR26頁(yè)激活均可促進(jìn)細(xì)胞增殖。上述這些研究成果，項(xiàng)目的順利實(shí)施創(chuàng)造了條件，打下了良好的基礎(chǔ)。2、工作條件申請(qǐng)者所在的為黑龍江省和科技部共建培育基地。本設(shè)備(如膜片鉗儀，鉗儀，數(shù)模轉(zhuǎn)換儀，電極拉制器，倒置顯微鏡，三維推進(jìn)器，恒溫控制系統(tǒng)等，pclamp軟件等)；電鏡，生物學(xué)檢測(cè)的配套相應(yīng)設(shè)備(如PCR冰箱，DNA儀，DNA儀，細(xì)胞培養(yǎng)室所需的各種設(shè)備，層析和色譜技術(shù)所需的各種設(shè)備，制冰機(jī)等)，多道生理儀器。儀，雙光束紫外分光光度儀，液閃計(jì)數(shù)儀等進(jìn)口上述工作條件，完全能滿足開(kāi)展本項(xiàng)目所需的全部實(shí)驗(yàn)技術(shù)要求。27頁(yè)激活均可促進(jìn)細(xì)胞增殖。上述這些研究成果，項(xiàng)目的順利實(shí)施創(chuàng)造了條件，打下了良好的基礎(chǔ)。2、工作條件申請(qǐng)者所在的為黑龍江省和科技部共建培育基地。本設(shè)備(如膜片鉗儀，鉗儀，數(shù)模轉(zhuǎn)換儀，電極拉制器，倒置顯微鏡，三維推進(jìn)器，恒溫控制系統(tǒng)等，pclamp軟件等)；電鏡，生物學(xué)檢測(cè)的配套相應(yīng)設(shè)備(如PCR冰箱，DNA儀，DNA儀，細(xì)胞培養(yǎng)室所需的各種設(shè)備，層析和色譜技術(shù)所需的各種設(shè)備，制冰機(jī)等)，多道生理儀器。儀，雙光束紫外分光光度儀，液閃計(jì)數(shù)儀等進(jìn)口上述工作條件，完全能滿足開(kāi)展本項(xiàng)目所需的全部實(shí)驗(yàn)技術(shù)要求。27頁(yè)3、申請(qǐng)人簡(jiǎn)介申請(qǐng)人徐長(zhǎng)慶教授學(xué)歷和研究工作簡(jiǎn)歷1965.81970.7，1970.7－1979.21979.2－2006.6黑龍江省拜泉縣醫(yī)院、綏化地區(qū)結(jié)核醫(yī)院任內(nèi)科醫(yī)師哈醫(yī)大病生教研室助教、講師、副教授、教授；副 、；博士生導(dǎo)師2006.6哈醫(yī)大心臟病理生理研究室、教授、博士生導(dǎo)師1988.12－1990.11994.3－1994.8心臟病研究中心學(xué)習(xí)膜片鉗技術(shù)；在生物膜與生物工程，進(jìn)行丹參酮對(duì)豚鼠心肌細(xì)胞鈣離子電流影響的研究；2001.8－2002.5作為高級(jí)學(xué)者在RuiWANG從事心肌鈣敏感受體等研究，在蒙特利爾大學(xué)心研究鉀通道與心律失常的關(guān)系。ZhiguoWANG學(xué)術(shù)美國(guó)紐約國(guó)際；美國(guó)科學(xué)促進(jìn)學(xué)會(huì)國(guó)際會(huì)員；國(guó)際心臟研究會(huì)中國(guó)分會(huì)執(zhí)行委員；中國(guó)病理生理學(xué)會(huì)理事；中國(guó)病理生理學(xué)會(huì)心專(zhuān)業(yè)委員會(huì)委員；中國(guó)病理生理學(xué)會(huì)教育工作委兼病理生理學(xué)專(zhuān)業(yè)委員會(huì)委員；黑龍江省對(duì)俄科技合作咨詢委員會(huì)委員；中國(guó)病理生理雜志編委；國(guó)際雜志“HEARTVESSELS”、中華心病雜志、特約審稿；863；自然科學(xué)；黑龍基金課題評(píng)審 ；（中華醫(yī)學(xué)）科技獎(jiǎng)評(píng)審委員；教育部科技進(jìn)步獎(jiǎng)評(píng)審江省優(yōu)秀中青年 。入選世界名人錄3、申請(qǐng)人簡(jiǎn)介申請(qǐng)人徐長(zhǎng)慶教授學(xué)歷和研究工作簡(jiǎn)歷1965.81970.7，1970.7－1979.21979.2－2006.6黑龍江省拜泉縣醫(yī)院、綏化地區(qū)結(jié)核醫(yī)院任內(nèi)科醫(yī)師哈醫(yī)大病生教研室助教、講師、副教授、教授；副 、；博士生導(dǎo)師2006.6哈醫(yī)大心臟病理生理研究室、教授、博士生導(dǎo)師1988.12－1990.11994.3－1994.8心臟病研究中心學(xué)習(xí)膜片鉗技術(shù)；在生物膜與生物工程，進(jìn)行丹參酮對(duì)豚鼠心肌細(xì)胞鈣離子電流影響的研究；2001.8－2002.5作為高級(jí)學(xué)者在RuiWANG從事心肌鈣敏感受體等研究，在蒙特利爾大學(xué)心研究鉀通道與心律失常的關(guān)系。ZhiguoWANG學(xué)術(shù)美國(guó)紐約國(guó)際；美國(guó)科學(xué)促進(jìn)學(xué)會(huì)國(guó)際會(huì)員；國(guó)際心臟研究會(huì)中國(guó)分會(huì)執(zhí)行委員；中國(guó)病理生理學(xué)會(huì)理事；中國(guó)病理生理學(xué)會(huì)心專(zhuān)業(yè)委員會(huì)委員；中國(guó)病理生理學(xué)會(huì)教育工作委兼病理生理學(xué)專(zhuān)業(yè)委員會(huì)委員；黑龍江省對(duì)俄科技合作咨詢委員會(huì)委員；中國(guó)病理生理雜志編委；國(guó)際雜志“HEARTVESSELS”、中華心病雜志、特約審稿；863；自然科學(xué)；黑龍基金課題評(píng)審 ；（中華醫(yī)學(xué)）科技獎(jiǎng)評(píng)審委員；教育部科技進(jìn)步獎(jiǎng)評(píng)審江省優(yōu)秀中青年 。入選世界名人錄(Who’sWhointheWorld)。承擔(dān)課題主家自然科學(xué)基金課題5項(xiàng):（5）《鈣敏感受體對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化大鼠急性心肌梗死易感性的影響和保護(hù)研究》（3087101，200920；（4在研已結(jié)題[（3]；已結(jié)題（30470688，2005-200（2（30370577，2004-200（1（39570305，1996-1991項(xiàng)：已結(jié)題28頁(yè)（1）《鈣敏感受體在大鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型誘發(fā)的急性心肌梗死中的作用及機(jī)制》在研（20070226012，2008－2010）主持其他省、廳級(jí)課題5（略）已結(jié)題獲獎(jiǎng)情況0（9：9）徐長(zhǎng)慶，2008，第一名)；8）杜智敏、楊寶峰、周晉、孫建平、張波、徐長(zhǎng)慶IK1調(diào)節(jié)劑對(duì)改善心功能的研究》（黑龍江省，2004，第六名）7）徐長(zhǎng)慶、朱世軍、王孝銘、楊寶峰、傅國(guó)輝：《氧自由基在心肌缺血/再灌注損傷中的中心作用及心肌保護(hù)研究》(黑龍江省自然科學(xué)二等獎(jiǎng)，2003，第一名)；6）楊寶峰、羅大力、周晉、何樹(shù)莊、王志國(guó)、徐長(zhǎng)慶：（，2001，；（1）《鈣敏感受體在大鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型誘發(fā)的急性心肌梗死中的作用及機(jī)制》在研（20070226012，2008－2010）主持其他省、廳級(jí)課題5（略）已結(jié)題獲獎(jiǎng)情況0（9：9）徐長(zhǎng)慶，2008，第一名)；8）杜智敏、楊寶峰、周晉、孫建平、張波、徐長(zhǎng)慶IK1調(diào)節(jié)劑對(duì)改善心功能的研究》（黑龍江省，2004，第六名）7）徐長(zhǎng)慶、朱世軍、王孝銘、楊寶峰、傅國(guó)輝：《氧自由基在心肌缺血/再灌注損傷中的中心作用及心肌保護(hù)研究》(黑龍江省自然科學(xué)二等獎(jiǎng)，2003，第一名)；6）楊寶峰、羅大力、周晉、何樹(shù)莊、王志國(guó)、徐長(zhǎng)慶：（，2001，；研究》（2000；4）楊寶峰、何樹(shù)莊、周晉、李玉榮、徐長(zhǎng)慶（黑龍江省2000；3）楊寶峰、李玉榮、徐長(zhǎng)慶、杜智敏、羅大力：《幾種中藥抗心律失常作用與鉀離子通道關(guān)系的研究》（科技進(jìn)步三等獎(jiǎng)，1999；2）李玉榮、楊寶峰、徐長(zhǎng)慶、杜智敏、李寶馨：《幾種中藥抗心律失常作用與鉀離子通道亞型關(guān)系的研究》（，1999；1）王孝銘、張力、付國(guó)輝、徐長(zhǎng)慶、李相忠：《丹參對(duì)心肌保護(hù)作用的細(xì)胞及 機(jī)理研究》（黑龍江省科技進(jìn)步三等獎(jiǎng)，1993，第四名）情況5年來(lái)，在國(guó)內(nèi)外期刊科研SCI20Yang）.Calcium-SensingReceptorsInduceApoptosisinRatCardiomyocytesviatheReticulumPathwayduringHypoxia/Reoxygenation.BasicClinPharmacolToxicol.200