畢業(yè)論文答辯槲皮素脂質(zhì)納米粒的制備與表征課件

槲皮素脂質(zhì)納米粒的制備與表征班級(jí)：10制藥二班學(xué)號(hào)：06210211姓名：徐敏潔指導(dǎo)教師：夏強(qiáng)老師傅志賢老師畢業(yè)設(shè)計(jì)答辯槲皮素脂質(zhì)納米粒的制備與表征班級(jí)：10制藥二班1123研究背景與意義研究方案總結(jié)與展望畢業(yè)設(shè)計(jì)答辯4參考文獻(xiàn)研究背景與意義研究方案123研究背景與意義研究方案總結(jié)與展望畢業(yè)設(shè)計(jì)答辯4參考文獻(xiàn)2研究背景與意義研究背景與意義3槲皮素的概述

化學(xué)名：3,3',4',5,7-五羥基黃酮

分子式：C5H10O

7

結(jié)構(gòu)：黃酮類(lèi)化合物

功效：抗氧化作用皮膚增色及保護(hù)作用槲皮素的理化性質(zhì)

外觀：黃色針狀結(jié)晶熔點(diǎn)：313-314℃分子量：302化學(xué)性質(zhì)：呈弱酸性

不穩(wěn)定性：氧氣

光照

PH

金屬離子槲皮素的概述4

3.本課題旨在利用合適的微納米載體包裹槲皮素，改善其化學(xué)穩(wěn)定性，并提高該成分的生物利用度，使其能夠更好的應(yīng)用于食品和化妝品領(lǐng)域。1.解決槲皮素的穩(wěn)定性和水溶性問(wèn)題，提高該成分的生物利用度。2.與此同時(shí)，活性物載體可提高活性物的溶解性，使活性物易于吸收；3.本課題旨在利用合適的微納米載體包裹槲皮素，改善其化5研究方案研究方案6制備

在篩選良好脂質(zhì)和乳化劑的基礎(chǔ)上，將槲皮素、脂質(zhì)以及乳化劑溶解于油相，在水浴鍋中與水相混合，制成初乳，經(jīng)冷卻和分散，制備成水溶性穩(wěn)定性較好的槲皮素脂質(zhì)納米粒。槲皮素脂質(zhì)納米粒表征

考察槲皮素脂質(zhì)納米粒的理化穩(wěn)定性，不同儲(chǔ)存條件（溫度、時(shí)間、稀釋倍數(shù)、離心、升溫、凍融條件）對(duì)QT-NLCs水分散液的影響，以及槲皮素脂質(zhì)納米粒的抗氧化功能評(píng)價(jià)。制備槲皮素表征7脂質(zhì)篩選一：脂質(zhì)篩選一：8脂質(zhì)篩選二：脂質(zhì)篩選二：9脂質(zhì)篩選三：脂質(zhì)篩選三：10復(fù)配脂質(zhì)對(duì)QT的溶解情況：

根據(jù)以上單一的脂質(zhì)篩選結(jié)果，選擇GMS、CG、BHB進(jìn)行復(fù)配。復(fù)配脂質(zhì)對(duì)QT的溶解情況：根據(jù)以上單一的11乳化劑篩選：乳化劑篩選：12脂質(zhì)篩選及乳化劑篩選結(jié)果：圖1：制備流程圖圖2：三個(gè)體系的原液樣品脂質(zhì)篩選及乳化劑篩選結(jié)果：圖1：制備流程圖圖2：三個(gè)體系的原13槲皮素脂質(zhì)納米粒表征1.物理穩(wěn)定性考察：靜置穩(wěn)定性

離心穩(wěn)定性

稀釋穩(wěn)定性升溫穩(wěn)定性?xún)鋈诜€(wěn)定性

pH穩(wěn)定性

2.化學(xué)穩(wěn)定性檢測(cè)：

紫外-可見(jiàn)光譜法測(cè)含量：

對(duì)制備得到的槲皮素納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體進(jìn)行破乳，利用紫外

分光光度計(jì)檢測(cè)槲皮素的含量。超濾離心法測(cè)包封率：3.抗氧化功能評(píng)價(jià)：清除DPPH自由基法抑制率=

槲皮素脂質(zhì)納米粒表征14槲皮素脂質(zhì)納米粒的表征——靜置穩(wěn)定性方法：將樣品分別密封存放于4℃、25℃、40℃下，避光靜置7天、15天和30天，通過(guò)PCS測(cè)量其粒徑、PDI變化情況。4℃25℃40℃槲皮素脂質(zhì)納米粒的表征——靜置穩(wěn)定性方法：4℃15槲皮素脂質(zhì)納米粒的表征——離心穩(wěn)定性方法：考察三個(gè)體系在10000rpm的高速離心不同時(shí)間后的粒徑、PDI及外觀變化。槲皮素脂質(zhì)納米粒的表征——離心穩(wěn)定性方法：16槲皮素脂質(zhì)納米粒的表征——升溫穩(wěn)定性方法：

取QT-NLC樣品，將其平均分成6份，將這6份放入不同的恒溫培養(yǎng)箱儲(chǔ)存，溫度分別為20、30、40、50、60和70℃，通過(guò)PCS考察粒徑和PDI。槲皮素脂質(zhì)納米粒的表征——升溫穩(wěn)定性方法：17槲皮素脂質(zhì)納米粒的表征——凍融穩(wěn)定性方法：

取QT-NLC樣品，將其平均分成5份，將這5份放入-20℃的冰箱冷凍0、30、60、120和180min，取出后進(jìn)行PCS測(cè)試，進(jìn)行粒徑和PDI的考察。槲皮素脂質(zhì)納米粒的表征——凍融穩(wěn)定性方法：18槲皮素脂質(zhì)納米粒的表征——pH穩(wěn)定性方法：

利用檸檬酸緩沖液和磷酸鹽緩沖液將QT-NLC水分散液稀釋成不同pH的水分散液，對(duì)不同pH條件下的粒徑和PDI進(jìn)行測(cè)試。槲皮素脂質(zhì)納米粒的表征——pH穩(wěn)定性方法：19槲皮素脂質(zhì)納米粒的表征——稀釋穩(wěn)定性方法：將同一批次的槲皮素脂質(zhì)納米粒，分別在稀釋不同倍數(shù)后進(jìn)行離心，觀察是否分層，隨后測(cè)量其粒徑與分布情況，來(lái)判斷體系的穩(wěn)定性。槲皮素脂質(zhì)納米粒的表征——稀釋穩(wěn)定性方法：20槲皮素脂質(zhì)納米粒的表征——包封率測(cè)試圖1：QT-無(wú)水乙醇溶液的紫外掃描圖圖2：QT-無(wú)水乙醇溶液的標(biāo)準(zhǔn)曲線體系吸光度濃度/ug*ml-1Wt/ug*ml-1Wf/ug*ml-1包封率/%無(wú)水0.13770.33767.46.7486.36%6%水0.31192.084416.841.6891.34%11%水0.34742.44048848.894.52%373.5nmy=0.1041+0.0997x槲皮素脂質(zhì)納米粒的表征——包封率測(cè)試圖1：QT-無(wú)水乙醇溶液21清除DPPH自由基法測(cè)抗氧化性DPPH水待測(cè)樣乙醇517nmA03.9ml100ul——A13.9ml—100ul—AS——100ul3.9ml

可見(jiàn)三種負(fù)載槲皮素2%的體系具有較好的DPPH自由基抑制率，并且是由于槲皮素本身的抗氧化功效性，而非配方內(nèi)的其他物質(zhì)。DPPH自由基抑制率=清除DPPH自由基法測(cè)抗氧化性DPPH水待測(cè)樣乙醇517nm22總結(jié)與展望y=0.1041+0.0997x總結(jié)與展望y=0.1041+0.0997x23[1]Torchilin,V.Drugtargeting[J].EuropeanJournalofPharmaceutical

Sciences2000.S81-S91.[2]溫濤,賈濤,etal.納米載體藥物應(yīng)用的研究進(jìn)展[J].藥學(xué)學(xué)報(bào)2003.003:236-240.[3]鮑廷錚，王慶倫，廖志輝.槲皮素的研究近況[J].江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)1998.2:90-91.[4]袁鵬群，納米技術(shù)在藥物研究領(lǐng)域中的應(yīng)用[J].解放軍藥學(xué)學(xué)報(bào)2001.17:40.[5]朱宇，王曉蓉，曲麗穎，等.中藥槲皮素對(duì)皮膚增色作用的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志2007.4:3.[6]Jenning,V.,A.Thünemann,etal.Characterisationofanovelsolidlipidnanoparticlecarriersystembasedonbinarymixturesofliquidandsolidlipids[J].Internationaljournalofpharmaceutics2000.2:167-177.[7]劉瑞，孟芳，白懷等.槲皮素、蘆丁及葛根素意志LDL氧化修飾作用的研究[J].中國(guó)中藥雜志2007.19:23.[8]Bunjes,H.,K.Westesen,etal.Crystallizationtendencyandpolymorphic

transitionsintriglyceridenanoparticles[J].Internationaljournalofpharmaceutics1996.1-2:159-173.[9]趙麗婷，郭長(zhǎng)江，蔡?hào)|聯(lián)，等.補(bǔ)充槲皮素對(duì)大鼠外周血抗氧化體系的影響[J].

武警醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)2009.4:10.[10]孫涓，余世春.槲皮素的研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代中藥研究與實(shí)踐2011.3:4.參考文獻(xiàn)[1]Torchilin,V.Drugtargeting24謝謝！祝各位：工作順利！

謝謝！祝各位：工作順利！

25槲皮素脂質(zhì)納米粒的制備與表征班級(jí)：10制藥二班學(xué)號(hào)：06210211姓名：徐敏潔指導(dǎo)教師：夏強(qiáng)老師傅志賢老師畢業(yè)設(shè)計(jì)答辯槲皮素脂質(zhì)納米粒的制備與表征班級(jí)：10制藥二班26123研究背景與意義研究方案總結(jié)與展望畢業(yè)設(shè)計(jì)答辯4參考文獻(xiàn)研究背景與意義研究方案123研究背景與意義研究方案總結(jié)與展望畢業(yè)設(shè)計(jì)答辯4參考文獻(xiàn)27研究背景與意義研究背景與意義28槲皮素的概述

化學(xué)名：3,3',4',5,7-五羥基黃酮

分子式：C5H10O

7

結(jié)構(gòu)：黃酮類(lèi)化合物

功效：抗氧化作用皮膚增色及保護(hù)作用槲皮素的理化性質(zhì)

外觀：黃色針狀結(jié)晶熔點(diǎn)：313-314℃分子量：302化學(xué)性質(zhì)：呈弱酸性

不穩(wěn)定性：氧氣

光照

PH

金屬離子槲皮素的概述29

3.本課題旨在利用合適的微納米載體包裹槲皮素，改善其化學(xué)穩(wěn)定性，并提高該成分的生物利用度，使其能夠更好的應(yīng)用于食品和化妝品領(lǐng)域。1.解決槲皮素的穩(wěn)定性和水溶性問(wèn)題，提高該成分的生物利用度。2.與此同時(shí)，活性物載體可提高活性物的溶解性，使活性物易于吸收；3.本課題旨在利用合適的微納米載體包裹槲皮素，改善其化30研究方案研究方案31制備

在篩選良好脂質(zhì)和乳化劑的基礎(chǔ)上，將槲皮素、脂質(zhì)以及乳化劑溶解于油相，在水浴鍋中與水相混合，制成初乳，經(jīng)冷卻和分散，制備成水溶性穩(wěn)定性較好的槲皮素脂質(zhì)納米粒。槲皮素脂質(zhì)納米粒表征

考察槲皮素脂質(zhì)納米粒的理化穩(wěn)定性，不同儲(chǔ)存條件（溫度、時(shí)間、稀釋倍數(shù)、離心、升溫、凍融條件）對(duì)QT-NLCs水分散液的影響，以及槲皮素脂質(zhì)納米粒的抗氧化功能評(píng)價(jià)。制備槲皮素表征32脂質(zhì)篩選一：脂質(zhì)篩選一：33脂質(zhì)篩選二：脂質(zhì)篩選二：34脂質(zhì)篩選三：脂質(zhì)篩選三：35復(fù)配脂質(zhì)對(duì)QT的溶解情況：

根據(jù)以上單一的脂質(zhì)篩選結(jié)果，選擇GMS、CG、BHB進(jìn)行復(fù)配。復(fù)配脂質(zhì)對(duì)QT的溶解情況：根據(jù)以上單一的36乳化劑篩選：乳化劑篩選：37脂質(zhì)篩選及乳化劑篩選結(jié)果：圖1：制備流程圖圖2：三個(gè)體系的原液樣品脂質(zhì)篩選及乳化劑篩選結(jié)果：圖1：制備流程圖圖2：三個(gè)體系的原38槲皮素脂質(zhì)納米粒表征1.物理穩(wěn)定性考察：靜置穩(wěn)定性

離心穩(wěn)定性

稀釋穩(wěn)定性升溫穩(wěn)定性?xún)鋈诜€(wěn)定性

pH穩(wěn)定性

2.化學(xué)穩(wěn)定性檢測(cè)：

紫外-可見(jiàn)光譜法測(cè)含量：

對(duì)制備得到的槲皮素納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體進(jìn)行破乳，利用紫外

分光光度計(jì)檢測(cè)槲皮素的含量。超濾離心法測(cè)包封率：3.抗氧化功能評(píng)價(jià)：清除DPPH自由基法抑制率=

槲皮素脂質(zhì)納米粒表征39槲皮素脂質(zhì)納米粒的表征——靜置穩(wěn)定性方法：將樣品分別密封存放于4℃、25℃、40℃下，避光靜置7天、15天和30天，通過(guò)PCS測(cè)量其粒徑、PDI變化情況。4℃25℃40℃槲皮素脂質(zhì)納米粒的表征——靜置穩(wěn)定性方法：4℃40槲皮素脂質(zhì)納米粒的表征——離心穩(wěn)定性方法：考察三個(gè)體系在10000rpm的高速離心不同時(shí)間后的粒徑、PDI及外觀變化。槲皮素脂質(zhì)納米粒的表征——離心穩(wěn)定性方法：41槲皮素脂質(zhì)納米粒的表征——升溫穩(wěn)定性方法：

取QT-NLC樣品，將其平均分成6份，將這6份放入不同的恒溫培養(yǎng)箱儲(chǔ)存，溫度分別為20、30、40、50、60和70℃，通過(guò)PCS考察粒徑和PDI。槲皮素脂質(zhì)納米粒的表征——升溫穩(wěn)定性方法：42槲皮素脂質(zhì)納米粒的表征——凍融穩(wěn)定性方法：

取QT-NLC樣品，將其平均分成5份，將這5份放入-20℃的冰箱冷凍0、30、60、120和180min，取出后進(jìn)行PCS測(cè)試，進(jìn)行粒徑和PDI的考察。槲皮素脂質(zhì)納米粒的表征——凍融穩(wěn)定性方法：43槲皮素脂質(zhì)納米粒的表征——pH穩(wěn)定性方法：

利用檸檬酸緩沖液和磷酸鹽緩沖液將QT-NLC水分散液稀釋成不同pH的水分散液，對(duì)不同pH條件下的粒徑和PDI進(jìn)行測(cè)試。槲皮素脂質(zhì)納米粒的表征——pH穩(wěn)定性方法：44槲皮素脂質(zhì)納米粒的表征——稀釋穩(wěn)定性方法：將同一批次的槲皮素脂質(zhì)納米粒，分別在稀釋不同倍數(shù)后進(jìn)行離心，觀察是否分層，隨后測(cè)量其粒徑與分布情況，來(lái)判斷體系的穩(wěn)定性。槲皮素脂質(zhì)納米粒的表征——稀釋穩(wěn)定性方法：45槲皮素脂質(zhì)納米粒的表征——包封率測(cè)試圖1：QT-無(wú)水乙醇溶液的紫外掃描圖圖2：QT-無(wú)水乙醇溶液的標(biāo)準(zhǔn)曲線體系吸光度濃度/ug*ml-1Wt/ug*ml-1Wf/ug*ml-1包封率/%無(wú)水0.13770.33767.46.7486.36%6%水0.31192.084416.841.6891.34%11%水0.34742.44048848.894.52%373.5nmy=0.1041+0.0997x槲皮素脂質(zhì)納米粒的表征——包封率測(cè)試圖1：QT-無(wú)水乙醇溶液46清除DPPH自由基法測(cè)抗氧化性DPPH水待測(cè)樣乙醇517nmA03.9ml100ul——A13.9ml—100ul—AS——100ul3.9ml

可見(jiàn)三種負(fù)載槲皮素2%的體系具有較好的DPPH自由基抑制率，并且是由于槲皮素本身的抗氧化功效性，而非配方內(nèi)的其他物質(zhì)。DPPH自由基抑制率=清除DPPH自由基法測(cè)抗氧化性DPPH水待測(cè)樣乙醇517nm47總結(jié)與展望y=0.1041+0.0997x總結(jié)與展望y=0.1041+0.0997x48[1]Torchilin,V.Drugtargeting[J].EuropeanJournalofPharmaceutical

Sciences2000.S81-S91.[2]溫濤,賈濤,etal.納米載體藥物應(yīng)用的研究進(jìn)展[J].藥學(xué)學(xué)報(bào)2003.003:236-240.[3]鮑廷錚，王慶倫，廖志輝.槲