RNA的生物合成【】課件

11RNA的生物合成Chapter11RNABiosynthesis,Transcription11RNA的生物合成1本章重點與難點重點：掌握RNA生物合成方式、酶類及合成后加工，RNA合成后加工的意義，RNA合成的起始與終止、RNA的復制、核酶。難點：RNA合成的起始與終止；真核生物RNA轉(zhuǎn)錄后加工；核酶。本章重點與難點2一、轉(zhuǎn)錄(transcription)生物體以DNA為模板合成RNA的過程。

轉(zhuǎn)錄RNADNA

一、轉(zhuǎn)錄(transcription)轉(zhuǎn)錄RNADNA3復制和轉(zhuǎn)錄的區(qū)別復制和轉(zhuǎn)錄的區(qū)別4參與轉(zhuǎn)錄的物質(zhì)原料:

NTP(ATP,UTP,GTP,CTP)模板:

DNA酶:

RNA聚合酶(RNApolymerase,RNA-pol)其他蛋白質(zhì)因子參與轉(zhuǎn)錄的物質(zhì)原料:NTP(ATP,UTP,GTP5（一）轉(zhuǎn)錄模板DNA上為一種或幾種蛋白質(zhì)的全部氨基酸編碼的核苷酸順序稱為基因。DNA分子上編碼蛋白質(zhì)的基因片段，稱為結(jié)構(gòu)基因(structuralgene)。DNA上有重復基因、重疊基因和不連續(xù)基因。DNA上插入而不編碼的序列稱為內(nèi)含子被間隔的編碼蛋白質(zhì)的基因部分稱為外顯子。（一）轉(zhuǎn)錄模板DNA上為一種或幾種蛋白質(zhì)的全部氨基酸編碼的65′···GCAGTACATGTC···3′3′···cgtgatgtacag···5′5′···GCAGUACAUGUC···3′N······Ala·Val·His·Val······C編碼鏈模板鏈mRNA蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)錄翻譯DNA雙鏈中按堿基配對規(guī)律能指導轉(zhuǎn)錄生成RNA的一股單鏈，稱為模板鏈(templatestrand)，也稱作有意義鏈或Watson鏈。相對的另一股單鏈是編碼鏈(codingstrand)，也稱為反義鏈或Crick鏈。5′···GCAGTACATGTC···3′3′···c75335模板鏈編碼鏈編碼鏈模板鏈結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄方向轉(zhuǎn)錄方向53模板鏈編碼鏈編碼鏈模板鏈結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄方向轉(zhuǎn)錄方向8不對稱轉(zhuǎn)錄(asymmetrictranscription)

在DNA分子雙鏈上某一區(qū)段，一股鏈用作模板指引轉(zhuǎn)錄，另一股鏈不轉(zhuǎn)錄；模板鏈并非永遠在同一條單鏈上。不對稱轉(zhuǎn)錄(asymmetrictranscription9（二)RNA聚合酶1、原核生物的RNA聚合酶（二)RNA聚合酶1、原核生物的RNA聚合酶10核心酶(coreenzyme)全酶(holoenzyme)核心酶(coreenzyme)全酶(holoenzym11RNA聚合酶全酶在轉(zhuǎn)錄起始區(qū)的結(jié)合RNA聚合酶全酶在轉(zhuǎn)錄起始區(qū)的結(jié)合122、真核生物的RNA聚合酶2、真核生物的RNA聚合酶13（三）模板上酶的辨認、結(jié)合原核生物一個轉(zhuǎn)錄區(qū)段可視為一個轉(zhuǎn)錄單位，稱為操縱子(operon)，包括若干個結(jié)構(gòu)基因及其上游(upstream)的調(diào)控序列。

5335結(jié)構(gòu)基因調(diào)控序列RNA-polRNA聚合酶結(jié)合模板DNA的部位，稱為啟動子(promoter)。（三）模板上酶的辨認、結(jié)合原核生物一個轉(zhuǎn)錄區(qū)段可視為一個轉(zhuǎn)錄14開始轉(zhuǎn)錄TTGACAAACTGT-35區(qū)(Pribnowbox)TATAATPuATATTAPy-10區(qū)1-30-5010-10-40-205335原核生物啟動子保守序列RNA-pol辨認位點(recognitionsite)55RNA聚合酶保護區(qū)結(jié)構(gòu)基因33開始轉(zhuǎn)錄TTGACA-35區(qū)(Pribnowb15TATA盒CAAT盒GC盒

增強子

順式作用元件結(jié)構(gòu)基因-GCGC---CAAT---TATA轉(zhuǎn)錄起始真核生物啟動子保守序列TATA盒CAAT盒GC盒增強子順式作用元件結(jié)161）轉(zhuǎn)錄起始轉(zhuǎn)錄起始需解決兩個問題：RNA聚合酶必須準確地結(jié)合在轉(zhuǎn)錄模板的起始區(qū)域。DNA雙鏈解開，使其中的一條鏈作為轉(zhuǎn)錄的模板。（四）原核生物的轉(zhuǎn)錄過程1）轉(zhuǎn)錄起始轉(zhuǎn)錄起始需解決兩個問題：（四）原核生物的轉(zhuǎn)錄過程172.DNA雙鏈解開1.RNA聚合酶全酶(2)與模板結(jié)合3.在RNA聚合酶作用下發(fā)生第一次聚合反應，形成轉(zhuǎn)錄起始復合物RNApol(2)-DNA-pppGpN-OH3轉(zhuǎn)錄起始復合物:5-pppG-OH+

NTP5-pppGpN

-OH3+ppi轉(zhuǎn)錄起始過程2.DNA雙鏈解開1.RNA聚合酶全酶(2)與182）轉(zhuǎn)錄延長1.亞基脫落，RNA–pol聚合酶核心酶變構(gòu)，與模板結(jié)合松弛，沿著DNA模板前移；

2.在核心酶作用下，NTP不斷聚合，RNA鏈不斷延長。(NMP)n

+

NTP(NMP)n+1

+PPi2）轉(zhuǎn)錄延長1.亞基脫落，RNA–pol聚合酶核心酶變構(gòu)19轉(zhuǎn)錄空泡(transcriptionbubble)：RNA-pol（核心酶）

····DNA

····RNA轉(zhuǎn)錄空泡(transcriptionbubble)：RNA20RNA的生物合成【】課件2153DNA原核生物轉(zhuǎn)錄過程中的羽毛狀現(xiàn)象核糖體RNARNA聚合酶53DNA原核生物轉(zhuǎn)錄過程中的羽毛狀現(xiàn)象核糖體RNARN22依賴Rho(ρ)因子的轉(zhuǎn)錄終止非依賴Rho因子的轉(zhuǎn)錄終止3）轉(zhuǎn)錄終止指RNA聚合酶在DNA模板上停頓下來不再前進，轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物RNA鏈從轉(zhuǎn)錄復合物上脫落下來。分類依賴Rho(ρ)因子的轉(zhuǎn)錄終止3）轉(zhuǎn)錄終止指RNA聚合酶在23ATP1.依賴Rho因子的轉(zhuǎn)錄終止ATP1.依賴Rho因子的轉(zhuǎn)錄終止242.非依賴Rho因子的轉(zhuǎn)錄終止DNA模板上靠近終止處，有些特殊的堿基序列，轉(zhuǎn)錄出RNA后，RNA產(chǎn)物形成特殊的結(jié)構(gòu)來終止轉(zhuǎn)錄。2.非依賴Rho因子的轉(zhuǎn)錄終止DNA模板上靠近終止處，有255`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU...3`5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU...3`

RNA5TTGCAGCCTGACAAATCAGGCTGATGGCTGGTGACTTTTTAGTCACCAGCCTTTTT...3DNAUUUU...…UUUU...…5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU...3`莖環(huán)(stem-loop)/發(fā)夾(hairpin)結(jié)構(gòu)5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGC26莖環(huán)結(jié)構(gòu)使轉(zhuǎn)錄終止的機理使RNA聚合酶變構(gòu)，轉(zhuǎn)錄停頓；使轉(zhuǎn)錄復合物趨于解離，RNA產(chǎn)物釋放。5′pppG5335RNA-pol莖環(huán)結(jié)構(gòu)使轉(zhuǎn)錄終止的機理使RNA聚合酶變構(gòu)，轉(zhuǎn)錄停頓；5′27（五）真核生物的轉(zhuǎn)錄起始1）轉(zhuǎn)錄起始真核生物的轉(zhuǎn)錄起始上游區(qū)段比原核生物多樣化，轉(zhuǎn)錄起始時，RNA-pol不直接結(jié)合模板，其起始過程比原核生物復雜。（五）真核生物的轉(zhuǎn)錄起始1）轉(zhuǎn)錄起始真核生物的轉(zhuǎn)錄起始上游區(qū)28轉(zhuǎn)錄起始點TATA盒CAAT盒GC盒增強子順式作用元件(cis-actingelement)1.轉(zhuǎn)錄起始前的上游區(qū)段AATAAA切離加尾轉(zhuǎn)錄終止點修飾點外顯子翻譯起始點內(nèi)含子OCT-1OCT-1：ATTTGCAT八聚體轉(zhuǎn)錄起始點TATA盒CAAT盒GC盒增強子順式作用元件(292.轉(zhuǎn)錄因子能直接、間接辨認和結(jié)合轉(zhuǎn)錄上游區(qū)段DNA的蛋白質(zhì)，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)數(shù)百種，統(tǒng)稱為反式作用因子(trans-actingfactors)。反式作用因子中，直接或間接結(jié)合RNA聚合酶的，則稱為轉(zhuǎn)錄因子(transcriptionalfactors,TF)。2.轉(zhuǎn)錄因子能直接、間接辨認和結(jié)合轉(zhuǎn)錄上游區(qū)段DNA的蛋30參與RNA-polⅡ轉(zhuǎn)錄的TFⅡ

參與RNA-polⅡ轉(zhuǎn)錄的TFⅡ313.轉(zhuǎn)錄起始前復合物(pre-initiationcomplex,PIC)

真核生物RNA-pol不與DNA分子直接結(jié)合，而需依靠眾多的轉(zhuǎn)錄因子。3.轉(zhuǎn)錄起始前復合物真核生物RNA-pol不與DNA分子直32POL-ⅡTFⅡFⅡAⅡB由RNA-PolⅡ催化轉(zhuǎn)錄的PICPOL-ⅡTFⅡFⅡHⅡETBPTAFTFⅡD-ⅡA-ⅡB-DNA復合物TATAⅡAⅡBTBPTAFTATAⅡHⅡECTD-PPIC組裝完成，TFⅡH使CTD磷酸化POL-ⅡTFⅡFⅡAⅡB由RNA-PolⅡ催化轉(zhuǎn)錄的PI332）轉(zhuǎn)錄延長真核生物轉(zhuǎn)錄延長過程與原核生物大致相似，但因有核膜相隔，沒有轉(zhuǎn)錄與翻譯同步的現(xiàn)象。RNA-pol前移處處都遇上核小體。轉(zhuǎn)錄延長過程中可以觀察到核小體移位和解聚現(xiàn)象。2）轉(zhuǎn)錄延長真核生物轉(zhuǎn)錄延長過程與原核生物大致相似，但因有核34RNA-PolRNA-PolRNA-Pol核小體轉(zhuǎn)錄延長中的核小體移位轉(zhuǎn)錄方向RNA-PolRNA-PolRNA-Pol核小體轉(zhuǎn)錄延長中的355------AAUAAA-5------AAUAAA--核酸酶-GUGUGUGRNA-polAATAAAGTGTGTG轉(zhuǎn)錄終止的修飾點55333加尾AAAAAAA······3mRNA3）轉(zhuǎn)錄終止——和轉(zhuǎn)錄后修飾密切相關(guān)。5------AAUAAA-5------AAUAAA36幾種主要的修飾方式1.剪接(splicing)2.剪切(cleavage)3.修飾(modification)4.添加(addition)二、RNA轉(zhuǎn)錄后的修飾Post-transcriptionalModification幾種主要的修飾方式1.剪接(splicing)2.剪切(37（一）真核生物mRNA的轉(zhuǎn)錄后加工1、首、尾的修飾5端形成帽子結(jié)構(gòu)(m7GpppGp—)3端加上多聚腺苷酸尾巴(polyAtail)（一）真核生物mRNA的轉(zhuǎn)錄后加工1、首、尾的修飾5端38帽子結(jié)構(gòu)帽子結(jié)構(gòu)395pppGp…5GpppGp…pppGppi鳥苷酸轉(zhuǎn)移酶5

m7GpppGp…甲基轉(zhuǎn)移酶SAM帽子結(jié)構(gòu)的生成5ppGp…磷酸酶Pi5pppGp…5GpppGp…pppGppi鳥苷酸402）mRNA的剪接1.

hnRNA和snRNA核內(nèi)的初級mRNA稱為雜化核RNA(hetero-nuclearRNA,hnRNA)snRNA(smallnuclearRNA)核內(nèi)的蛋白質(zhì)小分子核糖核酸蛋白體（并接體,splicesome）snRNA2）mRNA的剪接1.hnRNA和snRNA核內(nèi)的初41真核生物結(jié)構(gòu)基因，由若干個編碼區(qū)和非編碼區(qū)互相間隔開但又連續(xù)鑲嵌而成，去除非編碼區(qū)再連接后，可翻譯出由連續(xù)氨基酸組成的完整蛋白質(zhì)，這些基因稱為斷裂基因。斷裂基因(splitegene)CABD編碼區(qū)A、B、C、D非編碼區(qū)真核生物結(jié)構(gòu)基因，由若干個編碼區(qū)和非編碼區(qū)互相間隔開但又連續(xù)422.外顯子(exon)和內(nèi)含子(intron)外顯子在斷裂基因及其初級轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物上出現(xiàn)，并表達為成熟RNA的核酸序列。內(nèi)含子隔斷基因的線性表達而在剪接過程中被除去的核酸序列。2.外顯子(exon)和內(nèi)含子(intron)外顯子43雞卵清蛋白基因hnRNA首、尾修飾hnRNA剪接成熟的mRNA雞卵清蛋白基因及其轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄后修飾雞卵清蛋白基因hnRNA首、尾修飾hnRNA剪接成熟的mRN44雞卵清蛋白成熟mRNA與DNA雜交電鏡圖DNAmRNA雞卵清蛋白成熟mRNA與DNA雜交電鏡圖DNAmRNA453.內(nèi)含子的分類根據(jù)基因的類型和剪接的方式，通常把內(nèi)含子分為4類。I：主要存在于線粒體、葉綠體及某些低等真核生物的rRNA基因；II：也發(fā)現(xiàn)于線粒體、葉綠體，轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物是mRNA；III：是常見的形成套索結(jié)構(gòu)后剪接，大多數(shù)mRNA基因有此類內(nèi)含子；IV：是tRNA基因及其初級轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中的內(nèi)含子，剪接過程需酶及ATP。3.內(nèi)含子的分類根據(jù)基因的類型和剪接的方式，通常把內(nèi)含子464.mRNA的剪接——除去hnRNA中的內(nèi)含子，將外顯子連接。snRNP與hnRNA結(jié)合成為并接體①4.mRNA的剪接——除去hnRNA中的內(nèi)含子，將外顯子47②③UACUACA-AGUGU4U5U6E1E2U1U2UACUACA-AGUGU6E1E2U1、U4、U5②③UACUACA-AGUGU4U5U6E1E2U1U248pG-OH(ppG-OH,pppG-OH)U-OHGpUpGpA第一次轉(zhuǎn)酯反應第二次轉(zhuǎn)酯反應UpAGpU外顯子1內(nèi)含子外顯子2G-OHUpUpGpApG-OHU-OHGpUpGpA第一次轉(zhuǎn)酯反應第二次轉(zhuǎn)酯反應49?RNA編輯作用說明，基因的編碼序列經(jīng)過轉(zhuǎn)錄后加工，是可有多用途分化的，因此也稱為分化加工(differentialRNAprocessing)。5.mRNA的編輯(mRNAediting)人類apoB基因mRNA（14500個核苷酸）肝臟apoB100（分子量為500000）腸道細胞apoB48（分子量為240000）mRNA編輯?RNA編輯作用說明，基因的編碼序列經(jīng)過轉(zhuǎn)錄后加工，是可有50（二）tRNA的轉(zhuǎn)錄后加工tRNA前體RNApolⅢTGGCNNAGTGCGGTTCGANNCCDNA（二）tRNA的轉(zhuǎn)錄后加工tRNA前體RNApolⅢTG51RNAaseP、內(nèi)切酶RNAaseP、內(nèi)切酶52tRNA核苷酸轉(zhuǎn)移酶、連接酶ATPADPtRNA核苷酸轉(zhuǎn)移酶、連接酶ATPADP53堿基修飾（2）還原反應如：UDHU（3）核苷內(nèi)的轉(zhuǎn)位反應如：Uψ（4）脫氨反應如：AI如：AAm（1）甲基化（1）（1）（3）（2）（4）堿基修飾（2）還原反應如：UDHU（3）核苷內(nèi)的54（三）rRNA的轉(zhuǎn)錄后加工轉(zhuǎn)錄45S-rRNA剪接18S-rRNA5.8S和28S-rRNArDNA內(nèi)含子內(nèi)含子28S5.8S18S（三）rRNA的轉(zhuǎn)錄后加工轉(zhuǎn)錄45S-rRNA剪接18S55三、真核生物與原核生物轉(zhuǎn)錄的異同點P212－213相同點：不同點：四點三、真核生物與原核生物轉(zhuǎn)錄的異同點P212－21356四、核酶具有酶促活性的RNA稱為核酶。核酶(ribozyme)四、核酶具有酶促活性的RNA稱為核酶。核酶(riboz57四膜蟲rRNA內(nèi)含子的二級結(jié)構(gòu)四膜蟲rRNA的剪接采用自我剪接方式5′-端核苷酸序列四膜蟲rRNA內(nèi)含子的二級結(jié)構(gòu)四膜蟲rRNA的剪接采用自我剪58最簡單的核酶二級結(jié)構(gòu)——槌頭狀結(jié)構(gòu)(hammerheadstructure)底物部分通常為60個核苷酸左右同一分子上包括有催化部份和底物部份催化部份和底物部份組成錘頭結(jié)構(gòu)除rRNA外，tRNA、mRNA的加工也可采用自我剪接方式。最簡單的核酶二級結(jié)構(gòu)——槌頭狀結(jié)構(gòu)底物部分通常為60個核苷酸59GOH3′G5′OH5′3′GOH414G3995′3′3955′3′E1E2I四膜蟲RNA的自我剪接5′3′L19RNA具有催化活性的片段GOH3′G5′OH5′3′GOH414G3995′3′360核酶研究的意義核酶的發(fā)現(xiàn)，對中心法則作了重要補充；核酶的發(fā)現(xiàn)是對傳統(tǒng)酶學的挑戰(zhàn)；利用核酶的結(jié)構(gòu)設(shè)計合成人工核酶。核酶研究的意義核酶的發(fā)現(xiàn)，對中心法則作了重要補充；61人工設(shè)計的核酶粗線表示合成的核酸分子細線表示天然的核酸分子X表示一致性序列箭頭表示切斷點人工設(shè)計的核酶粗線表示合成的核酸分子629E+uZkPaF0v#lQbG0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B*qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+K5A*qVgL6B(qVgL6B(rWhM7C)sVgL6B(rWhM7C)sXiN7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!mQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI2x$nSdI3y%oB(rWhM7C)sXiN8D)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!mRcG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgK5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZjO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7B(rWhM7C)sXiN8D-tYz&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbF0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYiN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2x!mRcH2x$nSdI3y%o+uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2x!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B*qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaE+uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)sWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0vH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiN7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!mQbG1w!mRcH2x$n-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!mRbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+tYjO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhL6B(rWhM7C)sXiN#lQbG1w!mRcH1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A%oSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbG0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y9E+uZkPaF0v#lQbG1v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$nRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+K5A*qVgL6B(rVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkx$nSdI2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#kPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D)sXiN8D-tYjO9E+K5A*qVgL6B(rWhM7C)sVgL5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%nSdI3y%oTeJ4z&7C)sXiN8D-tYjN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B*qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF+uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeI3y%oTeJ4PaF0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A&pUfK5A*qVgL6B(rWx$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E-tYhM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7kO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbF0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfJ4z&pUfK5A*q1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYiN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B*qVgL6B(rWhM7CPa1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!mQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*pUfK5A*qVgL6jO9E+uZkPaF0v#kPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!mRcG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4zaF0v#lQbG1w!mRcH1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgK5A*qVgL6B(rUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbG0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3yL6B(qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF+uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)sXhM7C)sXiN8D-tYjOpUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A&pUfK5A*qVgL6B(rWfK5A*qVgL6B(rWhL6B(rWhM7SdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-sX0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbG0v#lQbG1w!mRcHiN8D-tYjO9E+uZkP8D-tYjO8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$nRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0uZkPaFgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiN7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfI3y%oTeJ4z&pTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2w!mRcH2x$nSdI3y%E+uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6A*qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkP9E+uZkPaF0v#lQbGTeJ4z&pUfK4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYPaF0v#lQbG1w#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjv#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiN7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!mRbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&F0v#lQbG1w!mRbG1w!mRcH2x$nSdI3y%mRcH2x$nSdI3y$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbF0dI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6A*qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkP9E+uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTdI3y%oTeJ4z&pUfK5QbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTdI3y%oTcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiNoTeJ4z&pUfK5A*pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!mRcG1w!mRcH2x$nSdI3y%oRcH2x$nSdI3y%nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+u5A*qVgL6B(rWhM7C)rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lQ9E+uZkPaF0v#lQbG0v#lQbG1w!mRcH6311RNA的生物合成Chapter11RNABiosynthesis,Transcription11RNA的生物合成64本章重點與難點重點：掌握RNA生物合成方式、酶類及合成后加工，RNA合成后加工的意義，RNA合成的起始與終止、RNA的復制、核酶。難點：RNA合成的起始與終止；真核生物RNA轉(zhuǎn)錄后加工；核酶。本章重點與難點65一、轉(zhuǎn)錄(transcription)生物體以DNA為模板合成RNA的過程。

轉(zhuǎn)錄RNADNA

一、轉(zhuǎn)錄(transcription)轉(zhuǎn)錄RNADNA66復制和轉(zhuǎn)錄的區(qū)別復制和轉(zhuǎn)錄的區(qū)別67參與轉(zhuǎn)錄的物質(zhì)原料:

NTP(ATP,UTP,GTP,CTP)模板:

DNA酶:

RNA聚合酶(RNApolymerase,RNA-pol)其他蛋白質(zhì)因子參與轉(zhuǎn)錄的物質(zhì)原料:NTP(ATP,UTP,GTP68（一）轉(zhuǎn)錄模板DNA上為一種或幾種蛋白質(zhì)的全部氨基酸編碼的核苷酸順序稱為基因。DNA分子上編碼蛋白質(zhì)的基因片段，稱為結(jié)構(gòu)基因(structuralgene)。DNA上有重復基因、重疊基因和不連續(xù)基因。DNA上插入而不編碼的序列稱為內(nèi)含子被間隔的編碼蛋白質(zhì)的基因部分稱為外顯子。（一）轉(zhuǎn)錄模板DNA上為一種或幾種蛋白質(zhì)的全部氨基酸編碼的695′···GCAGTACATGTC···3′3′···cgtgatgtacag···5′5′···GCAGUACAUGUC···3′N······Ala·Val·His·Val······C編碼鏈模板鏈mRNA蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)錄翻譯DNA雙鏈中按堿基配對規(guī)律能指導轉(zhuǎn)錄生成RNA的一股單鏈，稱為模板鏈(templatestrand)，也稱作有意義鏈或Watson鏈。相對的另一股單鏈是編碼鏈(codingstrand)，也稱為反義鏈或Crick鏈。5′···GCAGTACATGTC···3′3′···c705335模板鏈編碼鏈編碼鏈模板鏈結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄方向轉(zhuǎn)錄方向53模板鏈編碼鏈編碼鏈模板鏈結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄方向轉(zhuǎn)錄方向71不對稱轉(zhuǎn)錄(asymmetrictranscription)

在DNA分子雙鏈上某一區(qū)段，一股鏈用作模板指引轉(zhuǎn)錄，另一股鏈不轉(zhuǎn)錄；模板鏈并非永遠在同一條單鏈上。不對稱轉(zhuǎn)錄(asymmetrictranscription72（二)RNA聚合酶1、原核生物的RNA聚合酶（二)RNA聚合酶1、原核生物的RNA聚合酶73核心酶(coreenzyme)全酶(holoenzyme)核心酶(coreenzyme)全酶(holoenzym74RNA聚合酶全酶在轉(zhuǎn)錄起始區(qū)的結(jié)合RNA聚合酶全酶在轉(zhuǎn)錄起始區(qū)的結(jié)合752、真核生物的RNA聚合酶2、真核生物的RNA聚合酶76（三）模板上酶的辨認、結(jié)合原核生物一個轉(zhuǎn)錄區(qū)段可視為一個轉(zhuǎn)錄單位，稱為操縱子(operon)，包括若干個結(jié)構(gòu)基因及其上游(upstream)的調(diào)控序列。

5335結(jié)構(gòu)基因調(diào)控序列RNA-polRNA聚合酶結(jié)合模板DNA的部位，稱為啟動子(promoter)。（三）模板上酶的辨認、結(jié)合原核生物一個轉(zhuǎn)錄區(qū)段可視為一個轉(zhuǎn)錄77開始轉(zhuǎn)錄TTGACAAACTGT-35區(qū)(Pribnowbox)TATAATPuATATTAPy-10區(qū)1-30-5010-10-40-205335原核生物啟動子保守序列RNA-pol辨認位點(recognitionsite)55RNA聚合酶保護區(qū)結(jié)構(gòu)基因33開始轉(zhuǎn)錄TTGACA-35區(qū)(Pribnowb78TATA盒CAAT盒GC盒

增強子

順式作用元件結(jié)構(gòu)基因-GCGC---CAAT---TATA轉(zhuǎn)錄起始真核生物啟動子保守序列TATA盒CAAT盒GC盒增強子順式作用元件結(jié)791）轉(zhuǎn)錄起始轉(zhuǎn)錄起始需解決兩個問題：RNA聚合酶必須準確地結(jié)合在轉(zhuǎn)錄模板的起始區(qū)域。DNA雙鏈解開，使其中的一條鏈作為轉(zhuǎn)錄的模板。（四）原核生物的轉(zhuǎn)錄過程1）轉(zhuǎn)錄起始轉(zhuǎn)錄起始需解決兩個問題：（四）原核生物的轉(zhuǎn)錄過程802.DNA雙鏈解開1.RNA聚合酶全酶(2)與模板結(jié)合3.在RNA聚合酶作用下發(fā)生第一次聚合反應，形成轉(zhuǎn)錄起始復合物RNApol(2)-DNA-pppGpN-OH3轉(zhuǎn)錄起始復合物:5-pppG-OH+

NTP5-pppGpN

-OH3+ppi轉(zhuǎn)錄起始過程2.DNA雙鏈解開1.RNA聚合酶全酶(2)與812）轉(zhuǎn)錄延長1.亞基脫落，RNA–pol聚合酶核心酶變構(gòu)，與模板結(jié)合松弛，沿著DNA模板前移；

2.在核心酶作用下，NTP不斷聚合，RNA鏈不斷延長。(NMP)n

+

NTP(NMP)n+1

+PPi2）轉(zhuǎn)錄延長1.亞基脫落，RNA–pol聚合酶核心酶變構(gòu)82轉(zhuǎn)錄空泡(transcriptionbubble)：RNA-pol（核心酶）

····DNA

····RNA轉(zhuǎn)錄空泡(transcriptionbubble)：RNA83RNA的生物合成【】課件8453DNA原核生物轉(zhuǎn)錄過程中的羽毛狀現(xiàn)象核糖體RNARNA聚合酶53DNA原核生物轉(zhuǎn)錄過程中的羽毛狀現(xiàn)象核糖體RNARN85依賴Rho(ρ)因子的轉(zhuǎn)錄終止非依賴Rho因子的轉(zhuǎn)錄終止3）轉(zhuǎn)錄終止指RNA聚合酶在DNA模板上停頓下來不再前進，轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物RNA鏈從轉(zhuǎn)錄復合物上脫落下來。分類依賴Rho(ρ)因子的轉(zhuǎn)錄終止3）轉(zhuǎn)錄終止指RNA聚合酶在86ATP1.依賴Rho因子的轉(zhuǎn)錄終止ATP1.依賴Rho因子的轉(zhuǎn)錄終止872.非依賴Rho因子的轉(zhuǎn)錄終止DNA模板上靠近終止處，有些特殊的堿基序列，轉(zhuǎn)錄出RNA后，RNA產(chǎn)物形成特殊的結(jié)構(gòu)來終止轉(zhuǎn)錄。2.非依賴Rho因子的轉(zhuǎn)錄終止DNA模板上靠近終止處，有885`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU...3`5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU...3`

RNA5TTGCAGCCTGACAAATCAGGCTGATGGCTGGTGACTTTTTAGTCACCAGCCTTTTT...3DNAUUUU...…UUUU...…5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU...3`莖環(huán)(stem-loop)/發(fā)夾(hairpin)結(jié)構(gòu)5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGC89莖環(huán)結(jié)構(gòu)使轉(zhuǎn)錄終止的機理使RNA聚合酶變構(gòu)，轉(zhuǎn)錄停頓；使轉(zhuǎn)錄復合物趨于解離，RNA產(chǎn)物釋放。5′pppG5335RNA-pol莖環(huán)結(jié)構(gòu)使轉(zhuǎn)錄終止的機理使RNA聚合酶變構(gòu)，轉(zhuǎn)錄停頓；5′90（五）真核生物的轉(zhuǎn)錄起始1）轉(zhuǎn)錄起始真核生物的轉(zhuǎn)錄起始上游區(qū)段比原核生物多樣化，轉(zhuǎn)錄起始時，RNA-pol不直接結(jié)合模板，其起始過程比原核生物復雜。（五）真核生物的轉(zhuǎn)錄起始1）轉(zhuǎn)錄起始真核生物的轉(zhuǎn)錄起始上游區(qū)91轉(zhuǎn)錄起始點TATA盒CAAT盒GC盒增強子順式作用元件(cis-actingelement)1.轉(zhuǎn)錄起始前的上游區(qū)段AATAAA切離加尾轉(zhuǎn)錄終止點修飾點外顯子翻譯起始點內(nèi)含子OCT-1OCT-1：ATTTGCAT八聚體轉(zhuǎn)錄起始點TATA盒CAAT盒GC盒增強子順式作用元件(922.轉(zhuǎn)錄因子能直接、間接辨認和結(jié)合轉(zhuǎn)錄上游區(qū)段DNA的蛋白質(zhì)，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)數(shù)百種，統(tǒng)稱為反式作用因子(trans-actingfactors)。反式作用因子中，直接或間接結(jié)合RNA聚合酶的，則稱為轉(zhuǎn)錄因子(transcriptionalfactors,TF)。2.轉(zhuǎn)錄因子能直接、間接辨認和結(jié)合轉(zhuǎn)錄上游區(qū)段DNA的蛋93參與RNA-polⅡ轉(zhuǎn)錄的TFⅡ

參與RNA-polⅡ轉(zhuǎn)錄的TFⅡ943.轉(zhuǎn)錄起始前復合物(pre-initiationcomplex,PIC)

真核生物RNA-pol不與DNA分子直接結(jié)合，而需依靠眾多的轉(zhuǎn)錄因子。3.轉(zhuǎn)錄起始前復合物真核生物RNA-pol不與DNA分子直95POL-ⅡTFⅡFⅡAⅡB由RNA-PolⅡ催化轉(zhuǎn)錄的PICPOL-ⅡTFⅡFⅡHⅡETBPTAFTFⅡD-ⅡA-ⅡB-DNA復合物TATAⅡAⅡBTBPTAFTATAⅡHⅡECTD-PPIC組裝完成，TFⅡH使CTD磷酸化POL-ⅡTFⅡFⅡAⅡB由RNA-PolⅡ催化轉(zhuǎn)錄的PI962）轉(zhuǎn)錄延長真核生物轉(zhuǎn)錄延長過程與原核生物大致相似，但因有核膜相隔，沒有轉(zhuǎn)錄與翻譯同步的現(xiàn)象。RNA-pol前移處處都遇上核小體。轉(zhuǎn)錄延長過程中可以觀察到核小體移位和解聚現(xiàn)象。2）轉(zhuǎn)錄延長真核生物轉(zhuǎn)錄延長過程與原核生物大致相似，但因有核97RNA-PolRNA-PolRNA-Pol核小體轉(zhuǎn)錄延長中的核小體移位轉(zhuǎn)錄方向RNA-PolRNA-PolRNA-Pol核小體轉(zhuǎn)錄延長中的985------AAUAAA-5------AAUAAA--核酸酶-GUGUGUGRNA-polAATAAAGTGTGTG轉(zhuǎn)錄終止的修飾點55333加尾AAAAAAA······3mRNA3）轉(zhuǎn)錄終止——和轉(zhuǎn)錄后修飾密切相關(guān)。5------AAUAAA-5------AAUAAA99幾種主要的修飾方式1.剪接(splicing)2.剪切(cleavage)3.修飾(modification)4.添加(addition)二、RNA轉(zhuǎn)錄后的修飾Post-transcriptionalModification幾種主要的修飾方式1.剪接(splicing)2.剪切(100（一）真核生物mRNA的轉(zhuǎn)錄后加工1、首、尾的修飾5端形成帽子結(jié)構(gòu)(m7GpppGp—)3端加上多聚腺苷酸尾巴(polyAtail)（一）真核生物mRNA的轉(zhuǎn)錄后加工1、首、尾的修飾5端101帽子結(jié)構(gòu)帽子結(jié)構(gòu)1025pppGp…5GpppGp…pppGppi鳥苷酸轉(zhuǎn)移酶5

m7GpppGp…甲基轉(zhuǎn)移酶SAM帽子結(jié)構(gòu)的生成5ppGp…磷酸酶Pi5pppGp…5GpppGp…pppGppi鳥苷酸1032）mRNA的剪接1.

hnRNA和snRNA核內(nèi)的初級mRNA稱為雜化核RNA(hetero-nuclearRNA,hnRNA)snRNA(smallnuclearRNA)核內(nèi)的蛋白質(zhì)小分子核糖核酸蛋白體（并接體,splicesome）snRNA2）mRNA的剪接1.hnRNA和snRNA核內(nèi)的初104真核生物結(jié)構(gòu)基因，由若干個編碼區(qū)和非編碼區(qū)互相間隔開但又連續(xù)鑲嵌而成，去除非編碼區(qū)再連接后，可翻譯出由連續(xù)氨基酸組成的完整蛋白質(zhì)，這些基因稱為斷裂基因。斷裂基因(splitegene)CABD編碼區(qū)A、B、C、D非編碼區(qū)真核生物結(jié)構(gòu)基因，由若干個編碼區(qū)和非編碼區(qū)互相間隔開但又連續(xù)1052.外顯子(exon)和內(nèi)含子(intron)外顯子在斷裂基因及其初級轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物上出現(xiàn)，并表達為成熟RNA的核酸序列。內(nèi)含子隔斷基因的線性表達而在剪接過程中被除去的核酸序列。2.外顯子(exon)和內(nèi)含子(intron)外顯子106雞卵清蛋白基因hnRNA首、尾修飾hnRNA剪接成熟的mRNA雞卵清蛋白基因及其轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄后修飾雞卵清蛋白基因hnRNA首、尾修飾hnRNA剪接成熟的mRN107雞卵清蛋白成熟mRNA與DNA雜交電鏡圖DNAmRNA雞卵清蛋白成熟mRNA與DNA雜交電鏡圖DNAmRNA1083.內(nèi)含子的分類根據(jù)基因的類型和剪接的方式，通常把內(nèi)含子分為4類。I：主要存在于線粒體、葉綠體及某些低等真核生物的rRNA基因；II：也發(fā)現(xiàn)于線粒體、葉綠體，轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物是mRNA；III：是常見的形成套索結(jié)構(gòu)后剪接，大多數(shù)mRNA基因有此類內(nèi)含子；IV：是tRNA基因及其初級轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中的內(nèi)含子，剪接過程需酶及ATP。3.內(nèi)含子的分類根據(jù)基因的類型和剪接的方式，通常把內(nèi)含子1094.mRNA的剪接——除去hnRNA中的內(nèi)含子，將外顯子連接。snRNP與hnRNA結(jié)合成為并接體①4.mRNA的剪接——除去hnRNA中的內(nèi)含子，將外顯子110②③UACUACA-AGUGU4U5U6E1E2U1U2UACUACA-AGUGU6E1E2U1、U4、U5②③UACUACA-AGUGU4U5U6E1E2U1U2111pG-OH(ppG-OH,pppG-OH)U-OHGpUpGpA第一次轉(zhuǎn)酯反應第二次轉(zhuǎn)酯反應UpAGpU外顯子1內(nèi)含子外顯子2G-OHUpUpGpApG-OHU-OHGpUpGpA第一次轉(zhuǎn)酯反應第二次轉(zhuǎn)酯反應112?RNA編輯作用說明，基因的編碼序列經(jīng)過轉(zhuǎn)錄后加工，是可有多用途分化的，因此也稱為分化加工(differentialRNAprocessing)。5.mRNA的編輯(mRNAediting)人類apoB基因mRNA（14500個核苷酸）肝臟apoB100（分子量為500000）腸道細胞apoB48（分子量為240000）mRNA編輯?RNA編輯作用說明，基因的編碼序列經(jīng)過轉(zhuǎn)錄后加工，是可有113（二）tRNA的轉(zhuǎn)錄后加工tRNA前體RNApolⅢTGGCNNAGTGCGGTTCGANNCCDNA（二）tRNA的轉(zhuǎn)錄后加工tRNA前體RNApolⅢTG114RNAaseP、內(nèi)切酶RNAaseP、內(nèi)切酶115tRNA核苷酸轉(zhuǎn)移酶、連接酶ATPADPtRNA核苷酸轉(zhuǎn)移酶、連接酶ATPADP116堿基修飾（2）還原反應如：UDHU（3）核苷內(nèi)的轉(zhuǎn)位反應如：Uψ（4）脫氨反應如：AI如：AAm（1）甲基化（1）（1）（3）（2）（4）堿基修飾（2）還原反應如：UDHU（3）核苷內(nèi)的117（三）rRNA的轉(zhuǎn)錄后加工轉(zhuǎn)錄45S-rRNA剪接18S-rRNA5.8S和28S-rRNArDNA內(nèi)含子內(nèi)含子28S5.8S18S（三）rRNA的轉(zhuǎn)錄后加工轉(zhuǎn)錄45S-rRNA剪接18S118三、真核生物與原核生物轉(zhuǎn)錄的異同點P212－213相同點：不同點：四點三、真核生物與原核生物轉(zhuǎn)錄的異同點P212－213119四、核酶具有酶促活性的RNA稱為核酶。核酶(ribozyme)四、核酶具有酶促活性的RNA稱為核酶。核酶(riboz120四膜蟲rRNA內(nèi)含子的二級結(jié)構(gòu)四膜蟲rRNA的剪接采用自我剪接方式5′-端核苷酸序列四膜蟲rRNA內(nèi)含子的二級結(jié)構(gòu)四膜蟲rRNA的剪接采用自我剪121最簡單的核酶二級結(jié)構(gòu)——槌頭狀結(jié)構(gòu)(hammerheadstructure)底物部分通常為60個核苷酸左右同一分子上包括有催化部份和底物部份催化部份和底物部份組成錘頭結(jié)構(gòu)除rRNA外，tRNA、mRNA的加工也可采用自我剪接方式。最簡單的核酶二級結(jié)構(gòu)——槌頭狀結(jié)構(gòu)底物部分通常為60個核苷酸122GOH3′G5′OH5′3′GOH414G3995′3′3955′3′E1E2I四膜蟲RNA的自我剪接5′3′L19RNA具有催化活性的片段GOH3′G5′OH5′3′GOH414G3995′3′3123核酶研究的意義核酶的發(fā)現(xiàn)，對中心法則作了重要補充；核酶的發(fā)現(xiàn)是對傳統(tǒng)酶學的挑戰(zhàn)；利用核酶的結(jié)構(gòu)設(shè)計合成人工核酶。核酶研究的意義核酶的發(fā)現(xiàn)，對中心法則作了重要補充；124人工設(shè)計的核酶粗線表示合成的核酸分子細線表示天然的核酸分子X表示一致性序列箭頭表示切斷點人工設(shè)計的核酶粗線表示合成的核酸分子1259E+uZkPaF0v#lQbG0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B*qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+K5A*qVgL6B(qVgL6B(rWhM7C)sVgL6B(rWhM7C)sXiN7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!mQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI2x$nSdI3y%oB(rWhM7C)sXiN8D)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!mRcG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgK5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZjO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7B(rWhM7C)sXiN8D-tYz&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbF0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYiN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2x!mRcH2x$nSdI3y%o+uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2x!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B*qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaE+uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)sWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0vH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiN7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!mQbG1w!mRcH2x$n-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!mRbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+tYjO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhL6B(rWhM7C)sXiN#lQbG1w!mRcH1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A%oSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbG0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y9E+uZkPaF0v#lQbG1v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$nRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+K5A*qVgL6B(rVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkx$nSdI2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#kPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D)sXiN8D-tYjO9E+K5A*qVgL6B(rWhM7C)sVgL5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%nSdI3y%oTeJ4z&7C)sXiN8D-tYjN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B*qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF+uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeI3y%oTeJ4PaF0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeI3y%oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A&pUfK5A*qVgL6B(rWx$nSdI3y%oTeJ4z&pUfK5A*pUfK5A*qVgL6B(rWhM7C)sXiN8D-tYjO9E-tYhM7C)sXiN8D-tYjO9E+uZkPaF0v#lPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%oTeJ4z&oTeJ4z&pUfK5A*qVgL6B(rWhM7kO9E+uZkPaF0v#lQbG1w!mRcH2x$nSdI3y%nSd