類風(fēng)濕因子一抗核抗體檢測課件

實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)課件教學(xué)牡丹江醫(yī)學(xué)院檢驗(yàn)系實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)教研室實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)課件教學(xué)第八章臨床常用免疫學(xué)檢查第一節(jié)血清免疫球蛋白檢測第二節(jié)血清補(bǔ)體檢測第三節(jié)細(xì)胞免疫檢測第四節(jié)腫瘤標(biāo)志物檢檢測第五節(jié)自身抗體檢測第六節(jié)感染免疫檢測第八章臨床常用免疫學(xué)檢查第一節(jié)血清免疫球蛋白檢測第二節(jié)

第一節(jié)血清免疫球蛋白檢測

免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)是指一組具有抗體活性的球蛋白，由漿細(xì)胞合成與分泌；存在于機(jī)體的血液、體液、外分泌液和部分細(xì)胞的膜上。Ig因其功能和理化性質(zhì)分IgG、IgA、IgM、IgD和IgE五大類第一節(jié)血清免疫球蛋白檢測免疫球蛋白(immunogl第一節(jié)血清免疫球蛋白檢測本節(jié)重點(diǎn)及習(xí)題一、免疫球蛋白G檢測二、免疫球蛋白A檢測三．免疫球蛋白M檢測四、免疫球蛋白E檢測五、血清M蛋白檢測第一節(jié)血清免疫球蛋白檢測本節(jié)重點(diǎn)及習(xí)題一、免疫球蛋白G檢測一、免疫球蛋白檢測免疫球蛋白G(IgG)為人體含量最多和最主要的Ig占總免疫球蛋白的70％-80％對(duì)病毒、細(xì)菌和寄生蟲等都有抗體活性是唯一能夠通過胎盤的Ig，通過自然被動(dòng)免疫使新生兒獲得免疫抗體。一、免疫球蛋白檢測[臨床意義]1生理性變化：孕期22～28周間胎兒血IgG濃度與母體血濃度相等，出生后母體IgG逐漸減少，隨后逐漸增加，到16歲前達(dá)成人水平2病理性變化⑴IgG增高是再次免疫應(yīng)答的標(biāo)志。常見于各種慢性感染、慢性肝病、淋巴瘤、感染以及自身免疫性疾病如系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等[參考值]7.0～16.6g/L[臨床意義][參考值]7.0～16.6g/L單純性IgG增高:主要見于免疫增殖性疾病,如分泌型多發(fā)性骨髓瘤(MM),可見到IgG、lgA、lgD或IgE增高⑵IgG降低2.IgG降低見于各種先天性和獲得性體液免疫缺陷病、聯(lián)合免疫缺陷病也見于重鏈病、輕鏈病、腎病綜合征、病毒感染和免疫抑制劑患者。兒童較成年人低，女性稍高于男性單純性IgG增高:主要見于免疫增殖性疾病,如分泌型多發(fā)性骨髓

二、免疫球蛋白A檢測免疫球蛋白A(IgA)分為血清型以與分泌型IgA(SIgA)兩種。前者占血清總Ig的10％－15％,后者在外分泌系統(tǒng)中有更重要的免疫功能呼吸道、消化道、泌尿生殖道的淋巴樣組織合成大量的SIgASIgA與這些部位的局部感染、炎癥或腫瘤等病變密切相關(guān)。二、免疫球蛋白A檢測

[參考值]

成人血清IgA為0.7～3.5g/L

SIgA

唾液平均為0.3g/L

淚液為30～80g/L

初乳平均為5.06g/L

糞便平均為1.3g/L[參考值]

成人血清IgA為0.7～3.5g/L

[臨床意義]1生理性變化隨年齡增加而增加，到16歲前達(dá)成人水平⒉病理性變化⑴IgA增高:見于IgA型MM、SLE、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、肝硬化、濕疹和腎臟疾病等2.IgA降低:見于反復(fù)呼吸道感染、非IgA型MM、重鏈病、輕鏈病、原發(fā)性和繼發(fā)性免疫缺陷病和自身免疫性疾病等。[臨床意義]1生理性變化隨年齡增加而增加，到16歲前達(dá)成三．免疫球蛋白M檢測免疫球蛋白M(IgM)是分子質(zhì)量最大的Ig,約占血清總Ig的5％～10％IgM是有效的凝聚和溶解細(xì)胞的因子天然同族凝聚素(抗A、抗B)、冷凝集素及傷寒沙門菌的抗體均屬此類[參考值]成人血清IgM0.5～2.6g/L三．免疫球蛋白M檢測[臨床意義]⒈生理性變化從孕20周起，胎兒自身合成大量IgM，胎兒和新生兒IgM濃度是成人水平的10％，8-16歲前達(dá)成人水平⒉病理性變化⑴IgM增高:見于初期病毒性肝炎、肝硬化、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、SLE等單純IgM增高提示為病原體引起的原發(fā)性感染，若臍血中IgM＞0.2g/L時(shí)，提示宮內(nèi)感染此外,在原發(fā)性巨球蛋白血癥時(shí),IgM呈單克隆性明顯增高2.IgM降低:見于IgG型重鏈病、IgA型MM、先天性免疫缺陷癥、免疫抑制療法后、淋巴系統(tǒng)腫瘤和腎病綜合征等[臨床意義]四、免疫球蛋白E檢測免疫球蛋白E為血清中最少的一種Ig,約占血清總Ig的0.002％它是一種親細(xì)胞性抗體與變態(tài)反應(yīng)、寄生蟲感染及皮膚過敏等有關(guān)[參考值]ELISA法為0.1～0.9mg/L四、免疫球蛋白E檢測[臨床意義]⒈生理性變化嬰兒臍血IgE水平很低，12歲時(shí)達(dá)成人水平⒉病理性變化⑴IgE增高:見于IgE型MM、重鏈病、肝臟病、結(jié)節(jié)病、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，以及各種過敏性疾病如異位性皮炎、過敏性哮喘、過敏性鼻炎、間質(zhì)性肺炎、蕁麻疹、嗜酸性粒細(xì)胞增多癥、皰疹樣皮炎、寄生蟲感染等[臨床意義]⑵IgE降低見于先天性或獲得性丙種球蛋白缺乏癥惡性腫瘤長期用免疫抑制劑共濟(jì)失調(diào)性毛細(xì)血管擴(kuò)張癥等⑵IgE降低五、血清M蛋白檢測M蛋白(Mprotein)或稱單克隆免疫球蛋白它是一種單克隆B細(xì)胞增殖產(chǎn)生的、具有相同結(jié)構(gòu)和電泳遷移率的、免疫球蛋白分子及其分子片段[參考值]蛋白電泳法、免疫比濁法或免疫電泳法:正常人為陰性五、血清M蛋白檢測[臨床意義]

檢測到M蛋白，提示單克隆免疫球蛋白增殖病見于

①多發(fā)性骨髓瘤：以IgG型最常見，其次為IgA型，IgD和IgE罕見，也有IgM型的報(bào)道

②巨球蛋白血癥(Waldenstrom癥):存在大量單克隆IgM[臨床意義]

檢測到M蛋白，提示單克隆免疫球蛋白增殖病見于

③重鏈?。撼霈F(xiàn)Ig重鏈(γ、α和μ重鏈)④輕鏈?。撼霈F(xiàn)單克隆游離輕鏈⑤半分子?。合涤梢粭l重鏈和一條輕鏈組成的單克隆Ig片段⑥7SIgG病：為惡性M蛋白病等。③重鏈病：出現(xiàn)Ig重鏈(γ、α和μ重鏈)第二節(jié)血清補(bǔ)體檢測補(bǔ)體(complement,C)是一組具有酶原活性的糖蛋白它由傳統(tǒng)途徑的九種成分C1(Clq、C1r、C1s)～C9；旁路途徑的三種成分及其衍生物,B、D、P、H、I等因子組成第二節(jié)血清補(bǔ)體檢測補(bǔ)體(complement,C)是一組補(bǔ)體、體液因子或免疫細(xì)胞共同參與滅活病原體的免疫反應(yīng)也參與破壞自身組織或自身細(xì)胞而造成的免疫損傷補(bǔ)體的檢測可了解補(bǔ)體功能以及體內(nèi)免疫反應(yīng)、免疫損傷等狀態(tài)。補(bǔ)體、體液因子或免疫細(xì)胞共同參與滅活病原體的免疫反應(yīng)第二節(jié)血清補(bǔ)體檢測本節(jié)重點(diǎn)及習(xí)題一、總補(bǔ)體溶血活性檢測二、補(bǔ)體C1q檢測三、補(bǔ)體C3檢測四、補(bǔ)體C4檢測五、補(bǔ)體旁路B因子檢測第二節(jié)血清補(bǔ)體檢測本節(jié)重點(diǎn)一、總補(bǔ)體溶血活性檢測二、補(bǔ)體

一、總補(bǔ)體溶血活性檢測總補(bǔ)體溶血活性(totalhemilyticcomplementactivity,CH50)以溶血素(抗體)致敏的綿羊紅細(xì)胞(抗原抗體復(fù)合物)激活待測血清中的C1引起補(bǔ)體活化的連鎖反應(yīng),在綿羊紅細(xì)胞上形成多分子的聚合物,影響其膜表面的結(jié)構(gòu)與功能一、總補(bǔ)體溶血活性檢測最終導(dǎo)致綿羊紅細(xì)胞溶解。溶血程度與補(bǔ)體量呈正相關(guān)一般以50％溶血作為檢測終點(diǎn)(CH50),較為靈敏、準(zhǔn)確[參考值]試管法為50～100kU/L最終導(dǎo)致綿羊紅細(xì)胞溶解。溶血程度與補(bǔ)體量呈正相關(guān)[臨床意義]主要反映補(bǔ)體傳統(tǒng)途(C1～C9)活化的活性程度。①CH50增高見于急性炎癥組織損傷某些惡性腫瘤.[臨床意義]主要反映補(bǔ)體傳統(tǒng)途(C1～C9)活化的活性程度。②CH50減低:更有意義見于各種免疫復(fù)合物性疾病如腎小球腎炎自身免疫性疾病(如SLE)感染性心內(nèi)膜炎、病毒性肝炎和慢性肝病重癥營養(yǎng)不良和遺傳性補(bǔ)體成分缺乏癥等②CH50減低:更有意義

二、補(bǔ)體C1q檢測補(bǔ)體﹙comlement）C1q是構(gòu)成補(bǔ)體C1的重要組分C1是:一個(gè)C1q分子、2個(gè)C1r分子和2個(gè)C1s分子構(gòu)成的鈣離子依賴性復(fù)合物目前常規(guī)檢測Clq[參考值]ELISA法為0.18－0.19g/L二、補(bǔ)體C1q檢測[臨床意義]①Clq增加:見于骨髓炎、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)、過敏性紫癜等②Clq降低見于SLE和混合型結(jié)締組織疾病重度營養(yǎng)不良、腎病綜合征、重癥聯(lián)合免疫缺陷等[臨床意義]

三、補(bǔ)體C3檢測補(bǔ)體C3是一種由肝臟合成的β2-球蛋白由α和β兩條多肽鏈組成C3在補(bǔ)體系統(tǒng)各成分中含量最多是傳統(tǒng)途徑和旁路途徑被激活的關(guān)鍵物質(zhì)[參考值]成人0.8～1.5g/L三、補(bǔ)體C3檢測[臨床意義]1生理性變化隨年齡的增長而增長⒉病理性增高①增高:見于急性炎癥、傳染病早期、腫瘤、排異反應(yīng)等②減低:見于大多數(shù)急性腎小球腎炎、鏈球菌感染后腎炎、狼瘡性腎炎患者。還見于活動(dòng)性SLE和類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎活動(dòng)期、慢性活動(dòng)性肝炎、肝硬化、肝壞死等因此檢測C3對(duì)這些疾病診斷有價(jià)值[臨床意義]

四、補(bǔ)體C4檢測補(bǔ)體C4是一種多功能β1-球蛋白在補(bǔ)體傳統(tǒng)途徑活化中，C4被C1s水解為C4a、C4bC4a、C4b在補(bǔ)體活化、促進(jìn)吞噬、防止免疫復(fù)合物沉著和中和毒素等方面發(fā)揮作用[參考值]0.20～0.6g/L四、補(bǔ)體C4檢測[臨床意義]①升高:見于各種傳染病、急性風(fēng)濕熱、結(jié)節(jié)性動(dòng)脈周圍炎、皮肌炎、關(guān)節(jié)炎和組織損傷等②降低:見于自身免疫性肝炎、狼瘡性腎炎、SLE、I型糖尿病、胰腺癌、多發(fā)性硬化癥、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、IgA性腎病、遺傳性IgA缺乏癥[臨床意義]

五．補(bǔ)體旁路B因子檢測補(bǔ)體旁路﹙factor﹚B因子是一種不耐熱的β球蛋白,50℃30分鐘即可失活。它可被D因子裂解為Ba、Bb兩個(gè)片段Bb與C3b結(jié)合構(gòu)成旁路途徑的C3轉(zhuǎn)化酶B因子是補(bǔ)體旁路活化途徑中的一個(gè)重要成分,又稱C3激活劑前體五．補(bǔ)體旁路B因子檢測[參考值]0.10～0.4g／L[臨床意義]同補(bǔ)體旁路途徑溶血活性檢測增高見于某些自身免疫性疾病、腎病綜合征。慢性腎炎、惡性腫瘤減低見于肝病、急性腎小球腎炎、自身免疫性溶血性貧血[參考值]0.10～0.4g／L第三節(jié)細(xì)胞免疫檢測一T細(xì)胞亞群的檢測﹙一﹚T細(xì)胞花結(jié)實(shí)驗(yàn)﹙二﹚T細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)﹙三﹚T細(xì)胞分化抗原測定二B細(xì)胞分化抗原檢測三自然殺傷細(xì)胞免疫檢測四細(xì)胞因子檢測第三節(jié)細(xì)胞免疫檢測一T細(xì)胞亞群類風(fēng)濕因子一抗核抗體檢測課件類風(fēng)濕因子一抗核抗體檢測課件

﹙一﹚T細(xì)胞花結(jié)形成試驗(yàn)T細(xì)胞表面有特意性綿羊紅細(xì)胞﹙E﹚受體和T細(xì)胞識(shí)別受體﹙TCR﹚其中E受體曾廣泛被用做鑒定和計(jì)數(shù)T細(xì)胞的標(biāo)志。T細(xì)胞表面的E受體，可與綿羊紅細(xì)胞結(jié)合成花結(jié)樣細(xì)胞，稱E玫瑰花形成實(shí)驗(yàn)﹙ERFT﹚此實(shí)驗(yàn)花結(jié)形成實(shí)驗(yàn)因其操作簡便易行曾被廣泛使用，但影響因素較多，因此逐漸被檢測CD抗原方法所取代﹙一﹚T細(xì)胞花結(jié)形成試驗(yàn)﹙二﹚T細(xì)胞分化抗原測定T細(xì)胞表面有多種特意性抗原。WHO﹙1986年﹚統(tǒng)稱其為白細(xì)胞分化抗原﹙clusterdifferentiation，CD﹚CD3＋代表總T細(xì)胞，CD3＋/CD4＋代表T輔助細(xì)胞﹙Th﹚，CD3＋/CD8＋代表T抑制細(xì)胞﹙Ts﹚等。應(yīng)用這些細(xì)胞的單克隆抗體與T細(xì)胞表面抗原結(jié)合后，再與熒光標(biāo)記二抗﹙兔或羊抗鼠IgG﹚反應(yīng)，在熒光顯微鏡下或流式細(xì)胞儀中計(jì)數(shù)CD陽性細(xì)胞的百分率﹙二﹚T細(xì)胞分化抗原測定[參考值]免疫熒光法﹙IFA﹚CD3＋為63.1％±10.8％CD3＋/CD4＋（Th﹚為42.8％±9.5％CD3＋/CD8＋（Ts﹚為19.6％±5.9％CD4CD8﹙Th/Ts﹚為2.2％±0.7％：流式細(xì)胞術(shù)CD3＋為61％～85％；CD3＋/CD4＋（Th﹚28％～58％；CD3＋/CD8＋（Ts﹚為19％～48％；CD4CD8﹙Th/Ts﹚為0.9％～2.0％；

[參考值][臨床意義]①CD3＋降低：見于自身免疫性疾病。SLE類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎②CD3＋/CD4＋（Th﹚降低：惡性腫瘤、遺傳性免疫缺陷病、愛滋病③CD3＋/CD8＋（Ts﹚降低見于自身免疫性疾病或變態(tài)反應(yīng)性疾病。④CD4/CD8CD8﹙Th/Ts﹚比值降低：見于愛滋?、荼O(jiān)測器官移植排斥反應(yīng)CD4/CD8﹙Th/Ts﹚比值增高⑥CD3＋CD4＋CD8＋較高且有CD1＋CD2＋CD5＋CD7＋增高則可能為T細(xì)胞型急性淋巴細(xì)胞性白血病[臨床意義]二、B細(xì)胞分化抗原檢測B細(xì)胞是在鳥類法氏囊﹙bursaofFabricius﹚或其同功器官﹙骨髓bonemarrow﹚內(nèi)發(fā)育成熟的細(xì)胞，因此稱為法氏囊或骨髓依賴的淋巴細(xì)胞，簡稱B細(xì)胞。B細(xì)胞受抗原刺激后可分化為產(chǎn)生抗體的漿細(xì)胞，B細(xì)胞是體內(nèi)唯一能產(chǎn)生抗體﹙免疫球蛋白分子﹚的細(xì)胞二、B細(xì)胞分化抗原檢測[參考值]流式細(xì)胞術(shù)：CD19+﹙11.74±3.37﹚％[臨床意義]①升高：見于急性淋巴細(xì)胞白血病﹙B細(xì)胞型，且有SmIg、HLA-D表達(dá)﹚、慢性淋巴細(xì)胞白血病等②降低：見于無丙種球蛋白血癥、使用化療或免疫抑制劑后。[參考值]流式細(xì)胞術(shù)：CD19+﹙11.74±3.37﹚％第四節(jié)腫瘤標(biāo)志物檢測

腫瘤標(biāo)志物(tumormarker)是由腫瘤細(xì)胞本身合成、釋放或者是由機(jī)體對(duì)腫瘤細(xì)胞反應(yīng)而產(chǎn)生的一類物質(zhì)。這類物質(zhì)可反映細(xì)胞惡變各個(gè)階段的表型及基因特征性。主要包括蛋白質(zhì)類。糖類物質(zhì)和酶類腫瘤標(biāo)志物。附圖第四節(jié)腫瘤標(biāo)志物檢測腫瘤標(biāo)志物(tumormarke第三節(jié)腫瘤標(biāo)志物檢測一、蛋白質(zhì)腫瘤標(biāo)志物的檢測(一)甲種胎兒球蛋白測定(二)癌胚抗原測定(三)組織多肽抗原測定(四)前列腺特異抗原測定第三節(jié)腫瘤標(biāo)志物檢測一、蛋白質(zhì)腫瘤標(biāo)志物的檢測(一)甲種胎第四節(jié)腫瘤標(biāo)志物檢測一、蛋白質(zhì)腫瘤標(biāo)志物的檢測二、糖脂腫瘤標(biāo)志物檢測本節(jié)重點(diǎn)及習(xí)題(五)鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原測定(三)糖鏈抗原19－9測定(四)癌抗原125測定第四節(jié)腫瘤標(biāo)志物檢測一、蛋白質(zhì)腫瘤標(biāo)志物的檢測本節(jié)重點(diǎn)及習(xí)

一、蛋白質(zhì)腫瘤標(biāo)志物的檢測(一)甲種胎兒球蛋白測定甲種胎兒球蛋白(alphafetoprotein,AFP)是在胎兒早期由肝臟合成的一種糖蛋白出生后合成受到抑制一、蛋白質(zhì)腫瘤標(biāo)志物的檢測當(dāng)干細(xì)胞或生殖腺胚胎組織發(fā)生惡性病變時(shí)，有關(guān)基因重新被激活使原來已喪失合成AFP能力的細(xì)胞重新開始合成,以致血中AFP含量明顯升高因此血中AFP濃度檢測對(duì)診斷干細(xì)胞癌及滋養(yǎng)細(xì)胞惡性腫瘤有重要的臨床價(jià)值當(dāng)干細(xì)胞或生殖腺胚胎組織發(fā)生惡性病變時(shí)，有關(guān)基因重新被激活[參考價(jià)值]RIA或ELISA法為低于25μg/L[臨床意義]1.原發(fā)性肝細(xì)胞性肝癌患者血清AFP增高，診斷閾值為超過300μg/L，增高率約為75％-80％；約有10％的原發(fā)性肝癌患者其AFP為陰性。[參考價(jià)值]2.生殖腺胚胎癌(睪丸癌、卵巢癌、畸胎瘤等)、胃癌或胰腺癌時(shí)，血中AFP含量也可升高。3.病毒性肝炎、肝硬化時(shí)AFP也有不同程度的升高(20-200μg/L)4.妊娠3-4個(gè)月、孕婦AFP開始升高；7-8個(gè)月達(dá)高峰，以后下降；但多低于300μg/L。2.生殖腺胚胎癌(睪丸癌、卵巢癌、畸胎瘤等)、胃癌或胰腺癌時(shí)(二)癌胚抗原測定癌胚抗原(carcinoembryonicantigen,CEA)是一種富含多糖的蛋白復(fù)合物胎兒早期的消化管及某些組織均有合成CEA的能力，但孕六個(gè)月以后含量逐漸減少，出生后含量極低檢測它對(duì)腫瘤的診斷、預(yù)后、復(fù)發(fā)判斷有意義(二)癌胚抗原測定[參考值]ELISA法和RIA法為＜15μg/L[臨床意義]1.CEA明顯增高見于、胰腺癌、結(jié)腸癌、乳腺癌、胃癌、肺癌等患者。[參考值]ELISA法和RIA法為＜15μg/L2.動(dòng)態(tài)觀察一般病情好轉(zhuǎn)時(shí)，CEA濃度下降，病情加重時(shí)可升高3.結(jié)腸炎、胰腺炎、肝臟疾病、肺氣腫及支氣管哮喘等也常見CEA輕度升高4.96％～97％非吸煙健康人血清CEA濃度＜2.5μg/L，大量吸煙者中有20％～40％的人CEA＞2.5μg/L，少數(shù)人大于5.0μg/L。2.動(dòng)態(tài)觀察一般病情好轉(zhuǎn)時(shí)，CEA濃度下降，病情加重時(shí)可升高(三)組織多肽抗原測定組織多肽抗原(tissuepolypeptideantigen,TPA)是存在于胎盤和大部分腫瘤組織細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)中的一種單鏈多肽。在惡性腫瘤患者血清中的檢出率高達(dá)70％以上但它的增高與腫瘤發(fā)生部位和組織類型無相關(guān)性在觀察療效上則有較高的敏感性[參考值]ELISA法為＜130U/L(三)組織多肽抗原測定[臨床意義]1.惡性腫瘤患者血清TPA水平可顯著升高。2.經(jīng)治療好轉(zhuǎn)后，TPA水平降低；若TPA再次升高，提示有腫瘤復(fù)發(fā)。3.TPA和CEA同時(shí)檢測可有利于惡性與非惡性乳腺病的鑒別診斷。4.急性肝炎、胰腺炎、肺炎、妊娠后3個(gè)月都可升高。[臨床意義]

(四)前列腺特異抗原測定前列腺特異抗原(prostatespecificantigen,PSA)是一種由前列腺分泌的單鏈糖蛋白,它存在于前列腺管道的上皮細(xì)胞中。在前列腺癌時(shí)可見PSA血清水平明顯升高(四)前列腺特異抗原測定今年發(fā)現(xiàn)血清總PSA(T-PSA)80％以結(jié)合形式存在,稱復(fù)合PSA(c-PSA)20％的以游離PSA形式存在(F-PSA)其比值對(duì)診斷更有特異和準(zhǔn)確性今年發(fā)現(xiàn)血清總PSA(T-PSA)[參考值]RIA法和（酶聯(lián)免疫印跡技術(shù)）CLIA法：T-PSA＜4.0μg/L，F(xiàn)-PSA<0.8μg/LF/T比值＞0.25[臨床意義]1.前列腺癌時(shí)60％－90％患者血清PSA水平明顯升高；當(dāng)行外科切除術(shù)后，90％患者血清PSA水平明顯降低[參考值]RIA法和（酶聯(lián)免疫印跡技術(shù)）CLIA法：2.若見PSA水平升高，即有轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)的可能3.良性前列腺瘤、前列腺肥大或急性前列腺炎時(shí)，約有14％的患者血清PSA水平升高，此時(shí)應(yīng)注意鑒別2.若見PSA水平升高，即有轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)的可能(五)鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原測定鱗狀上皮細(xì)胞抗原(squamuscellcarcinomaantigen,SCC)是腫瘤相關(guān)抗原TA-4的亞型，是一種糖蛋白[參考值]RIA和CLIA法為≤1.5μg/L。(五)鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原測定[臨床意義]1.血清中SCC水平升高，可見于83％的宮頸癌、25％-75％的肺鱗狀細(xì)胞癌、30％Ⅰ期食管癌、89％的Ⅲ期食管癌；2.也見于卵巢癌、子宮癌和頸部鱗狀上皮細(xì)胞癌。3.臨床上用于檢測上述惡性腫瘤的治療效果、復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移或評(píng)價(jià)預(yù)后。[臨床意義]二、糖脂腫瘤標(biāo)志物檢測(三)糖鏈抗原19－9測定糖鏈抗原19－9(carbohydrateantigen19-9,CA19-9)是一種糖蛋白。胚胎期分布于胎兒的胰腺。肝膽和腸等組織；在成人的胰、膽等部位也有少量存在。[參考值]固相放射免疫分析(IRMA)法和ELISA法：健康人血清CA19-93.7萬U/L二、糖脂腫瘤標(biāo)志物檢測[臨床意義]1.胰腺癌、肝膽和胃腸道疾病時(shí)血中CA19-9的水平可明顯升高。其陽性率胰腺癌為85％－95％膽囊癌和膽管癌為85％左右胃癌、結(jié)腸癌為40％直腸癌為30％－50％但無早期診斷價(jià)值,對(duì)早期病人的敏感度僅為30％[臨床意義]2.連續(xù)檢測對(duì)病情進(jìn)展、手術(shù)療效、預(yù)后估計(jì)及復(fù)發(fā)診斷有重要價(jià)值。3.急性胰腺炎、膽汁淤積型膽管炎、膽石癥、急性肝炎、肝硬化等，血清CA19-9也可出現(xiàn)不同程度的升高。4.結(jié)合CEA檢測,對(duì)胃癌診斷符合率可達(dá)85％2.連續(xù)檢測對(duì)病情進(jìn)展、手術(shù)療效、預(yù)后估計(jì)及復(fù)發(fā)診斷有重要價(jià)

(四)癌抗原125測定癌抗原125(cancerantigen125,CA125)為一種糖蛋白性腫瘤相關(guān)抗原,存在于卵巢腫瘤的上皮細(xì)胞內(nèi)。當(dāng)患有上皮性卵巢癌和子宮內(nèi)膜癌時(shí),病人血清CA125水平可明顯升高。[參考值]＜3.5萬U/L(四)癌抗原125測定[臨床意義]1.卵巢癌病人血清CA125水平明顯升高,其陽性率高達(dá)60％-90％,故對(duì)診斷卵巢癌有較大臨床價(jià)值,尤其對(duì)觀察治療效果和判斷復(fù)發(fā)較為靈敏。[臨床意義]2.宮頸癌、乳腺癌、胰腺癌、膽道癌、肝癌、胃癌、結(jié)腸癌、肺癌等也有一定的陽性反應(yīng)。3.3％～6％的良性卵巢瘤、子宮肌瘤病人血清CA125有時(shí)也會(huì)明顯升高,但多數(shù)不超過10萬U/L。4.肝硬化失代償期血清CA125明顯升高。2.宮頸癌、乳腺癌、胰腺癌、膽道癌、肝癌、胃癌、結(jié)腸癌、肺癌第四節(jié)自身抗體檢測

某些原因削弱或破壞健康人的自身免疫耐受(autoimmunetolerance)，免疫系統(tǒng)就會(huì)對(duì)自身組織或成分產(chǎn)生免疫應(yīng)答，稱為自身免疫(autoimmunity)。由于自身免疫而產(chǎn)生的疾病稱為自身免疫病(autoimmunedisease,AID)。按自身抗原分布的范圍可分器官特異性和非器官特異性。診斷自身免疫病的重要方法是作自身抗體免疫檢測。第四節(jié)自身抗體檢測某些原因削弱或破壞健康人的自身免疫耐第四節(jié)自身抗體檢測二、抗核抗體檢測本節(jié)重點(diǎn)及習(xí)題一、類風(fēng)濕因子(一)抗核抗體檢測(二)抗DNA抗體測定第四節(jié)自身抗體檢測本節(jié)重點(diǎn)及習(xí)題一、類風(fēng)濕因子(一)抗核抗一、類風(fēng)濕因子類風(fēng)濕因子(rheumatoidfactor,RF)是變性lgG刺激機(jī)體產(chǎn)生的一種自身抗體，主要存在于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者的血清和關(guān)節(jié)液內(nèi)。它有IgM型，也有IgG、IgA、lgD和IgE型。用乳膠凝集法測出的主要是IgM型；速率法敏感但不能分類型。[參考值]乳膠凝集法、血清稀釋度低于1:10速率比值法＜30U/L。一、類風(fēng)濕因子[臨床意義]類風(fēng)濕性疾病時(shí)，RF的陽性率可高達(dá)70％－90％，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的陽性率為70％。IgG型:與患者的滑膜炎、血管炎和關(guān)節(jié)外癥狀有關(guān)IgM型與IgA型的效價(jià)與病情、骨質(zhì)破壞有關(guān)[臨床意義]其他自身免疫性疾病，如多發(fā)性肌炎、硬皮病、干燥綜合征、SLE、自身免疫性溶血、慢性活動(dòng)性肝炎等也見RF陽性。某些感染性疾病，如傳染性單核細(xì)胞增多癥、結(jié)節(jié)病、感染性心內(nèi)膜炎等也多呈現(xiàn)陽性反應(yīng)。故本試驗(yàn)的特異性不高，應(yīng)予鑒別。其他自身免疫性疾病，如多發(fā)性肌炎、硬皮病、干燥綜合征、SLE

二、抗核抗體檢測

(一)抗核抗體檢測

抗核抗體檢測(antinuclearantibody,ANA)是指抗細(xì)胞核成分［脫氧核糖核蛋白(DNP)、DNA、可提取的核抗原(ENA)和RNA等］的自身抗體的總稱

ANA的性質(zhì)主要是IgG,也有IgM、IgA。這種抗體無器官和種族的特異性二、抗核抗體檢測◎免疫熒光法以鼠肝細(xì)胞核作抗原時(shí),該抗體可與之結(jié)合,再加入熒光標(biāo)記抗人Ig后,胞核區(qū)發(fā)出黃綠色熒光而胞漿區(qū)不發(fā)熒光。根據(jù)細(xì)胞核染熒光的圖像可分析為均質(zhì)型、邊緣型、顆粒型和核仁型等四型?！騕參考值](間接熒光抗體試驗(yàn))IFA法為陰性,血清滴度＞1:40為陽性?！蛎庖邿晒夥ㄒ允蟾渭?xì)胞核作抗原時(shí),該抗體可與之結(jié)合,再加入熒[臨床意義]1.ANA陽性⑴最多見于未治療的SLE,陽性率達(dá)80％～100％;活動(dòng)期SLE幾乎100％陽性。經(jīng)皮質(zhì)激素治療后,陽性率可降低⑵藥物性狼瘡(100％)⑶混合性結(jié)締組織病(10％)⑷全身性硬皮病(85％-95％)[臨床意義]⑸多發(fā)性肌炎(3％-90％)⑹狼瘡性腎炎(95％-100％)⑺原發(fā)性膽汁性肝硬化(95％-100％)⑻其他還見于干燥綜合征、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎,橋本甲狀腺炎等。2.熒光核型:細(xì)胞核熒光有四種核型，其形狀和意義見表。⑸多發(fā)性肌炎(3％-90％)(三)抗DNA抗體測定抗DNA抗體（anti-DNAantibody,抗-DNA)分為抗單鏈DNA(singlestranded-DNA,ss－DNA)抗體和抗雙鏈抗ds-DNA抗體和抗Z－DNA抗體?？筪s-DNA抗體的靶抗原是細(xì)胞核中DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)，它的檢測有臨床重要性。目前最敏感和特異的方法是用馬疫錐蟲或綠蠅短膜蟲作為抗原基質(zhì)進(jìn)行間接免疫熒光測定[結(jié)果判定]。短膜蟲動(dòng)基體均勻質(zhì)性著色，核漿成弱均質(zhì)性為陽性。(三)抗DNA抗體測定[臨床意義]1.抗ds-DNA抗體陽性：見于活動(dòng)期的SLE,陽性率70%-90%。本試驗(yàn)特異性較高,但敏感性較低。目前認(rèn)為,能結(jié)合補(bǔ)體的抗ds-DNA抗體,在SLE特別是并發(fā)狼瘡性腎炎患者的發(fā)病機(jī)制中起重要作用。其他風(fēng)濕病中抗ds-DNA抗體也可陽性[臨床意義]2.抗ss－DNA抗體陽性:見于SLE(陽性率70％－95％)，尤其是合并有狼瘡性腎炎。還可見于一些重疊結(jié)締組織病、藥物誘導(dǎo)的狼瘡和慢性活動(dòng)性肝炎等，但不具特異性。2.抗ss－DNA抗體陽性:見于SLE(陽性率70％－95％抗線粒體抗體測定；抗線粒體抗體是一種針對(duì)細(xì)胞質(zhì)中線粒體內(nèi)膜和外膜蛋白成分的自身抗體，無器官和屬特異性，該抗體主要是IgG。許多肝臟疾病時(shí)可檢出AMA。其陽性率在原發(fā)性膽汁性肝硬化為90.5肝外膽管阻塞為陰性。AMA可作為原發(fā)性膽汁性肝硬化和肝外膽道阻塞性肝硬化癥的鑒別診斷。抗線粒體抗體測定；抗線粒體抗體是一種針對(duì)細(xì)胞質(zhì)中線粒體內(nèi)膜和抗甲狀腺抗體測定甲狀腺功能亢進(jìn)慢性甲狀腺炎甲狀腺功能低下具有自身免疫病的特征，?？蓽y出甲狀腺抗體。抗甲狀腺球蛋白抗體和抗甲狀腺微粒體抗體?？辜谞钕偾虻鞍卓贵w和抗甲狀腺微粒體抗體在臨床實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用最廣，診斷價(jià)值也較大1.抗甲狀腺球蛋白抗體甲狀腺球蛋白是由甲狀腺濾泡細(xì)胞合成的一種糖蛋白，主要是IgG。90%-95%橋本甲狀腺炎，52%-58%甲亢和35%甲狀腺癌患者可出現(xiàn)抗TG陽性。重癥肌無力、肝臟病、風(fēng)濕性血管病、糖尿病也可出現(xiàn)陽性抗甲狀腺抗體測定甲狀腺功能亢進(jìn)慢性甲狀腺炎甲狀腺功能低下具有抗甲狀腺微粒體抗體是針對(duì)甲狀腺微粒體的一種抗體?？筎M陽性檢出率；橋本甲狀腺炎為50%-100%，甲減為88.9%；甲狀腺腫瘤為13.1%，單純甲狀腺腫為8.6%；亞急性甲狀腺炎為17.2%-25%；SLE為15.4%-44.7%；其他風(fēng)濕病為30%，抗TG與抗TM同時(shí)檢測，可以提高陽性檢出率?？辜谞钕傥⒘ｓw抗體是針對(duì)甲狀腺微粒體的一種抗體?？剐募】贵w測定；抗心肌抗體的自身抗原包括線粒體內(nèi)膜上的腺苷酸轉(zhuǎn)移蛋白、心肌肌質(zhì)蛋白、原肌球蛋白和熱休克蛋白。心肌炎、心肌衰竭、風(fēng)濕熱、重癥肌無力、心疾病和心臟手術(shù)后患者均可檢測到抗心肌抗體?？剐募】贵w測定；抗心肌抗體的自身抗原包括線粒體內(nèi)膜上的腺苷酸抗心磷脂抗體測定；抗心磷脂抗體測定是一組針對(duì)各種帶負(fù)電荷磷脂的自身抗體?？沽字贵w與內(nèi)皮細(xì)胞或血小板膜上的磷脂結(jié)合，破壞細(xì)胞的功能。造成血液的高凝狀態(tài)；與紅細(xì)胞結(jié)合，在補(bǔ)體的參與下，造成溶血性貧血。ACA是抗磷脂抗體中的一種，特異性較強(qiáng)，能干擾磷脂依賴的凝血過程，與各種疾病關(guān)系的研究較多，與自身免疫性疾病和磷脂綜合征的關(guān)系較為密切?？剐牧字贵w測定；抗心磷脂抗體測定是一組針對(duì)各種帶負(fù)電荷磷脂ACA在SACA在S

第六節(jié)感染免疫檢測一、細(xì)菌感染免疫檢測人感染病原體后經(jīng)過一段時(shí)間產(chǎn)生的特異性抗體一般可持續(xù)數(shù)月或更長時(shí)間，因而檢測抗體不僅可用于現(xiàn)癥診斷，還是疾病追溯性調(diào)查的一種方法。(一)血清抗鏈球菌溶血素“O”試驗(yàn)溶血素“O”是A群溶血性鏈球菌產(chǎn)生的具有溶血活性的代謝產(chǎn)物，相應(yīng)抗體稱抗鏈球菌溶血素“O”(抗O或ASO)。第六節(jié)感染免疫檢測一、細(xì)菌感染免疫檢測[臨床意義]陽性表示病人近期內(nèi)有A群溶血性鏈球菌感染，常見于活動(dòng)性風(fēng)濕熱、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕性心肌炎、急性腎小球腎炎、急性上呼吸道感染、皮膚和軟組織的感染等臨床意義]陽性表示病人近期內(nèi)有A群[溶血性鏈球菌感染，常見于活動(dòng)性風(fēng)濕熱、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕性心肌炎、急性腎小球腎炎、急性上呼吸道感染、皮膚和軟組織的感染等。[臨床意義]陽性表示病人近期內(nèi)有A群溶血性鏈球菌感染，常見于2.傷寒和副傷寒沙門菌抗體IgM測定[參考值]ELISA法陰性或滴度＜1:20[臨床意義]IgM抗體于發(fā)病后一周即出現(xiàn)升高，有早期診斷價(jià)值。3.傷寒和副傷寒沙門菌可溶性抗原測定[參考值]乳膠凝集法為陰性。[臨床意義]對(duì)確診傷寒沙門菌感染有重要意義。2.傷寒和副傷寒沙門菌抗體IgM測定(五)結(jié)核分枝桿菌抗體和DNA測定[參考值]膠體金或ELISA法檢測抗體陰性；PCR法檢測DNA陰性。[臨床意義]抗體陽性表示有結(jié)核分枝桿菌感染；DNA檢測特異性更強(qiáng)，靈敏度更高。(五)結(jié)核分枝桿菌抗體和DNA測定二、病毒感染免疫檢測(一)流行性乙型腦炎病毒抗體IgM測定流行性乙型腦炎病毒是我國夏秋季流行的主要傳染病之一。[參考值]ELISA和微量間接免疫熒光法陰性[臨床意義]當(dāng)恢復(fù)期血清抗體滴度比急性期≥4倍時(shí)，有輔助診斷意義，可用于臨床回顧性診斷二、病毒感染免疫檢測（一）TORCH試驗(yàn)為婦產(chǎn)科產(chǎn)前的常規(guī)檢查項(xiàng)目TORCH包括：弓形蟲，風(fēng)疹病毒，巨細(xì)胞病毒，單純皰疹病毒Ⅰ型和Ⅱ型的病原抗體檢測⒈風(fēng)疹病毒檢測若在早孕時(shí)發(fā)生胎兒先天性風(fēng)疹感染，新生兒致殘致畸率可達(dá)80％，主要損害五官神經(jīng)系統(tǒng)和智力，有流行性【參考值】IgM、IgG抗體均為陰性?！九R床意義】（一）TORCH試驗(yàn)為婦產(chǎn)科產(chǎn)前的常規(guī)檢查項(xiàng)目TORCH包括如果被檢者2種抗體均無，應(yīng)視為易感者，可注射疫苗保護(hù)。有IgM抗體出現(xiàn)均應(yīng)做婦產(chǎn)科咨詢后決定是否治療性流產(chǎn)或繼續(xù)妊娠。僅有IgG抗體應(yīng)注意其滴度變化，如果滴度低且無變化為既往感染，若測定患者急性期和恢復(fù)期雙份血清，抗體滴度明顯升高4倍以上，則具有診斷近期風(fēng)疹感染的意義。如果被檢者2種抗體均無，應(yīng)視為易感者，可注射疫苗⒉單純皰疹病毒（Ⅰ型和Ⅱ型）檢測單純皰疹病毒（Ⅰ型和Ⅱ型）均有一定的致畸性、先天感染后影響新生兒神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育，孕早期感染影響胎兒發(fā)育，故也作為早孕臨床篩檢項(xiàng)目，抗原檢測應(yīng)用不廣泛?？贵w檢測可分別進(jìn)行Ⅰ型和Ⅱ型的IgM和IgG抗體的檢測，IgM型為近期感染，IgG型多為既往感染。⒉單純皰疹病毒（Ⅰ型和Ⅱ型）檢測⒊巨細(xì)胞病毒﹙CMV﹚檢測巨細(xì)胞病毒屬皰疹類病毒，其先天感染的致畸性僅次于風(fēng)疹病毒，主要也是造成神經(jīng)系統(tǒng)及智力的障礙。實(shí)驗(yàn)室可用EIA法測CMV-IgM以了解近期感染，抗CMV-IgG可以用流行病學(xué)調(diào)查。⒋弓形蟲檢測先天性弓型蟲感染可引起神經(jīng)系統(tǒng)，特別是生后原期智力障礙?？贵w檢測可測特意性IgM和IgG型抗體。IgM型抗體提示現(xiàn)癥感染，IgG型抗體一般提示既往感染。⒊巨細(xì)胞病毒﹙CMV﹚檢測巨細(xì)胞病毒屬皰疹類病毒，其先天感染二、病毒感染免疫檢測(二)流行性乙型腦炎病毒抗體IgM測定流行性乙型腦炎病毒是我國夏秋季流行的主要傳染病之一。[參考值]ELISA和微量間接免疫熒光法陰性[臨床意義]當(dāng)恢復(fù)期血清抗體滴度比急性期≥4倍時(shí)，有輔助診斷意義，可用于臨床回顧性診斷二、病毒感染免疫檢測(三)嗜異性凝集試驗(yàn)及吸收試驗(yàn)傳染性單核細(xì)胞增多癥由EB病毒感染所致。[參考值]陰性或凝集效價(jià)<1:7(紅細(xì)胞凝集法)[臨床意義]EB病毒感染后2周抗體效價(jià)達(dá)高峰，常＞1：56；以后下降；3個(gè)月后消失；若第一次檢測效價(jià)增高不明顯；而追蹤檢查時(shí)效價(jià)上升4倍以上；更有診斷價(jià)值。(三)嗜異性凝集試驗(yàn)及吸收試驗(yàn)(七)嚴(yán)重急性呼吸綜合征病毒抗體及RNA測定嚴(yán)重急性呼吸綜合征(SARS)是由SARS冠狀病毒(SARS－CoV)引起的21世紀(jì)的新傳染病。SARS－CoV是具有包膜的單鏈正義RNA病毒是導(dǎo)致SARS(俗稱非典型肺炎”)的病原體。[參考值]ELISA和IFAte檢測抗體陰性；RT－PCR檢測RNA陰性[臨床意義]抗體陽性結(jié)果表明曾感染過SARS－CoV，由陰性到陽性的血清轉(zhuǎn)化，或者，急性期到恢復(fù)期抗體效價(jià)增高4倍以上，表明有近期感染；PCR陽性可表示標(biāo)本中有SARS－CoV的遺傳物質(zhì)（RNA）。(七)嚴(yán)重急性呼吸綜合征病毒抗體及RNA測定三、寄生蟲感染免疫檢測(一)弓形蟲抗體和DNA測定弓形蟲感染為人畜共患性疾病，可引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)和眼的病變，也可引起流產(chǎn)和先天畸形等。[參考值]IgG和IgM均陰性(間接血凝試驗(yàn)、IFA法和ELISA法)；DNA陰性(PCR法和DNA雜交技術(shù))[臨床意義]IgM升高是近期感染的指標(biāo)；IgG增高是既往感染的指標(biāo)；雙份血清IgG抗體滴度4倍以上增高或單份血清IgG滴度≥1：512，提示近期感染可能性大。三、寄生蟲感染免疫檢測二)囊蟲抗體測定囊蟲病是一種人和豬共患的寄生蟲病。[參考值]①ELISA法：血清低于1：64為陰性；腦脊液低于1：8為陰性②間接血凝法：血清低于1：128為陰性；腦脊液低于1：8為陰性。[臨床意義]IgG陽性見于囊蟲病，可用作流行病學(xué)調(diào)查。

細(xì)菌寄生蟲形態(tài)及檢測二)囊蟲抗體測定四、性傳播疾病免疫檢測性傳播疾病近年在我國的發(fā)病率呈上升趨勢，多由衣原體、支原體、梅毒螺旋體、淋球菌、人獲得性免疫缺陷病毒引起。(一)衣原休抗體測定衣原體包括沙眼衣原體、鸚鵡熱衣原體和肺炎衣原體三種，其中沙眼衣原體(CT)是引起性傳播疾病常見的病原體之一。[參考值]IFA法IGM效價(jià)<l：32，IgG效價(jià)＜1:512。[臨床意義]①IgM陽性提示近期有CT感染，有利于早期診斷；②IgG在發(fā)病后6－8周出現(xiàn)，持續(xù)時(shí)間較長；提示曾有過CT感染四、性傳播疾病免疫檢測(二)支原體的血清學(xué)檢測對(duì)人致病的主要有肺炎支原體、解脲人原體、人型支原體和生殖道支原體。[參考值]補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)：效價(jià)＜1：64；間接血凝試驗(yàn)：陰性[臨床意義]單份血清效價(jià)＞1：64－128者或雙份血清有4倍以上增長者，有診斷意義。間接血凝試驗(yàn)的敏感性高于補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)，感染發(fā)病后7天出現(xiàn)陽性。(二)支原體的血清學(xué)檢測(三)梅毒螺旋體抗體測定梅毒螺旋體侵入人體后，在血清中除可出現(xiàn)特異性抗體外，還可出現(xiàn)非特異性抗體(反應(yīng)素)。[參考值]檢測非特異性抗體的定性試驗(yàn)：快速血漿反應(yīng)素試驗(yàn)(RPR)陰性；不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)(USR)陰性；性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)(VDRL)陰性；檢測梅毒螺旋體的特異性抗體的確診試驗(yàn)：梅毒螺旋體血凝試驗(yàn)(TPHA)和熒光螺旋體抗體吸收試驗(yàn)(FTA－ABS)均陰性。(三)梅毒螺旋體抗體測定[臨床意義]梅毒螺旋體反應(yīng)素試驗(yàn)敏感性高；定性試驗(yàn)陽性的情況下，必須進(jìn)行確診試驗(yàn)，若陽性可確診梅毒。(四)淋球菌血清學(xué)測定及DNA測定[參考值]協(xié)同凝集試驗(yàn)陰性；PCR定量試驗(yàn)陰性[臨床意義]協(xié)同凝集試驗(yàn)特異性強(qiáng)、敏感性高且操作簡便；PCR可做確診試驗(yàn)。hhug[臨床意義]梅毒螺旋體反應(yīng)素試驗(yàn)敏感性高；定性試驗(yàn)陽性的情況(五)人獲得性免疫缺陷病毒抗體及RNA測定人獲得性免疫缺陷病毒(HIV)是艾滋病(AIDS)的病原體。[參考值]①篩選試驗(yàn)：ELISA法和快速蛋白印跡法(RWB)均為陰性；②確診試驗(yàn)：蛋白印跡試驗(yàn)(WB)和RT－PCR法RNA均陰性。[臨床意義]篩選試驗(yàn)靈敏度高，但特異性不高，故有假陽性；所以篩選試驗(yàn)陽性時(shí)應(yīng)用確診試驗(yàn)證實(shí)。確診試驗(yàn)陽性，特別是RT－PCR法檢測HIV－RNA陽性，對(duì)肯定診斷和早期診斷頗有價(jià)值。

(五)人獲得性免疫缺陷病毒抗體及RNA測定第七節(jié)其他免疫檢測

一、循環(huán)免疫復(fù)合物檢驗(yàn)二、冷球蛋白檢測三、C-反應(yīng)蛋白檢測四、特異性IgE檢測第七節(jié)其他免疫檢測一、循環(huán)免疫復(fù)合物檢驗(yàn)三C-反應(yīng)蛋白檢測C-反應(yīng)蛋白﹙C-reactiveprotein，CRP﹚是一種由肝臟合成的，能與肺炎雙球菌細(xì)胞壁C-多糖起反應(yīng)的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白。CRP不僅能結(jié)合多種細(xì)菌、真菌及原蟲等體內(nèi)的多糖物質(zhì)，在鈣離子存在的情況下，還可以結(jié)合卵磷脂和核酸等，有激活補(bǔ)體、促進(jìn)吞噬和調(diào)節(jié)免疫作用。廣泛存在于血清和其他體液中。三C-反應(yīng)蛋白檢測C-反應(yīng)蛋白﹙【原理】抗原抗體結(jié)合形成復(fù)合物，在一定介質(zhì)條件下產(chǎn)生濁度，當(dāng)光通過時(shí)發(fā)生散射，根據(jù)散射強(qiáng)度判定待測物質(zhì)含量。【參考值】＜2.87mg/L﹙速率散射比濁法﹚【臨床意義】CRP是急性時(shí)相反應(yīng)極靈敏的指標(biāo)①CRP升高：見于化膿性感染、組織壞死（心機(jī)梗死、嚴(yán)重創(chuàng)傷、大手術(shù)、燒傷）、惡性腫瘤、結(jié)羝組織病、器官移植、急性排斥。②鑒別細(xì)菌性和非細(xì)菌性感染；前者CRP升高，后者不升高【原理】抗原抗體結(jié)合形成復(fù)合物，在一定介質(zhì)條件下產(chǎn)生濁度，類風(fēng)濕因子一抗核抗體檢測課件類風(fēng)濕因子一抗核抗體檢測課件類風(fēng)濕因子一抗核抗體檢測課件類風(fēng)濕因子一抗核抗體檢測課件Ig的基本結(jié)構(gòu)(單體)抗體的酶解片段Ig的基本結(jié)構(gòu)(單體)抗體的酶解片段類風(fēng)濕因子一抗核抗體檢測課件類風(fēng)濕因子一抗核抗體檢測課件圖3SIgA二聚體圖3SIgA二聚體類風(fēng)濕因子一抗核抗體檢測課件IgM五聚體

IgM五聚體類風(fēng)濕因子一抗核抗體檢測課件粉螨粉螨類風(fēng)濕因子一抗核抗體檢測課件抗體的生物學(xué)活性抗體的生物學(xué)活性類風(fēng)濕因子一抗核抗體檢測課件類風(fēng)濕因子一抗核抗體檢測課件類風(fēng)濕因子一抗核抗體檢測課件著絲點(diǎn)型胞漿型著絲點(diǎn)型胞漿型均質(zhì)型斑點(diǎn)型均質(zhì)型斑點(diǎn)型核仁型核仁型風(fēng)濕病患者血中的抗核抗體風(fēng)濕病患者血中的抗核抗體抗核抗體抗雙鏈DNA熒光染色抗核抗體抗雙鏈DNA熒光染色類風(fēng)濕因子一抗核抗體檢測課件類風(fēng)濕因子一抗核抗體檢測課件類風(fēng)濕因子一抗核抗體檢測課件類風(fēng)濕因子一抗核抗體檢測課件類風(fēng)濕因子一抗核抗體檢測課件類風(fēng)濕因子一抗核抗體檢測課件類風(fēng)濕因子一抗核抗體檢測課件類風(fēng)濕因子一抗核抗體檢測課件類風(fēng)濕因子一抗核抗體檢測課件類風(fēng)濕因子一抗核抗體檢測課件類風(fēng)濕因子一抗核抗體檢測課件類風(fēng)濕因子一抗核抗體檢測課件類風(fēng)濕因子一抗核抗體檢測課件類風(fēng)濕因子一抗核抗體檢測課件在補(bǔ)體的作用下紅細(xì)胞溶解在補(bǔ)體的作用下紅細(xì)胞溶解熒光核型的形態(tài)和意義核型熒光特點(diǎn)抗原類型ANA效價(jià)和疾病低(1:10-1:20)中(1:40-1:80)高>1:100均質(zhì)型邊緣型顆粒型核仁型全細(xì)胞核均勻一致熒光細(xì)胞核邊緣熒光明亮散在明亮熒光顆粒核內(nèi)呈塊狀熒光DNA核蛋白DNAENARNAPSS,SjS,RA,肝硬化SLE,SjS,PSSSLE(緩解型,非腎型)和RA型等SLE,SjS,RASLE,SjS,PSS,MCTDSLE(活動(dòng)期)SjSPSS,Crest征SLE(活動(dòng)期)SLE(活動(dòng)期,腎型)熒光核型的形態(tài)和意義ANA效價(jià)和疾病低(1:10-1:20)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)課件教學(xué)牡丹江醫(yī)學(xué)院檢驗(yàn)系實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)教研室實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)課件教學(xué)第八章臨床常用免疫學(xué)檢查第一節(jié)血清免疫球蛋白檢測第二節(jié)血清補(bǔ)體檢測第三節(jié)細(xì)胞免疫檢測第四節(jié)腫瘤標(biāo)志物檢檢測第五節(jié)自身抗體檢測第六節(jié)感染免疫檢測第八章臨床常用免疫學(xué)檢查第一節(jié)血清免疫球蛋白檢測第二節(jié)

第一節(jié)血清免疫球蛋白檢測

免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)是指一組具有抗體活性的球蛋白，由漿細(xì)胞合成與分泌；存在于機(jī)體的血液、體液、外分泌液和部分細(xì)胞的膜上。Ig因其功能和理化性質(zhì)分IgG、IgA、IgM、IgD和IgE五大類第一節(jié)血清免疫球蛋白檢測免疫球蛋白(immunogl第一節(jié)血清免疫球蛋白檢測本節(jié)重點(diǎn)及習(xí)題一、免疫球蛋白G檢測二、免疫球蛋白A檢測三．免疫球蛋白M檢測四、免疫球蛋白E檢測五、血清M蛋白檢測第一節(jié)血清免疫球蛋白檢測本節(jié)重點(diǎn)及習(xí)題一、免疫球蛋白G檢測一、免疫球蛋白檢測免疫球蛋白G(IgG)為人體含量最多和最主要的Ig占總免疫球蛋白的70％-80％對(duì)病毒、細(xì)菌和寄生蟲等都有抗體活性是唯一能夠通過胎盤的Ig，通過自然被動(dòng)免疫使新生兒獲得免疫抗體。一、免疫球蛋白檢測[臨床意義]1生理性變化：孕期22～28周間胎兒血IgG濃度與母體血濃度相等，出生后母體IgG逐漸減少，隨后逐漸增加，到16歲前達(dá)成人水平2病理性變化⑴IgG增高是再次免疫應(yīng)答的標(biāo)志。常見于各種慢性感染、慢性肝病、淋巴瘤、感染以及自身免疫性疾病如系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等[參考值]7.0～16.6g/L[臨床意義][參考值]7.0～16.6g/L單純性IgG增高:主要見于免疫增殖性疾病,如分泌型多發(fā)性骨髓瘤(MM),可見到IgG、lgA、lgD或IgE增高⑵IgG降低2.IgG降低見于各種先天性和獲得性體液免疫缺陷病、聯(lián)合免疫缺陷病也見于重鏈病、輕鏈病、腎病綜合征、病毒感染和免疫抑制劑患者。兒童較成年人低，女性稍高于男性單純性IgG增高:主要見于免疫增殖性疾病,如分泌型多發(fā)性骨髓

二、免疫球蛋白A檢測免疫球蛋白A(IgA)分為血清型以與分泌型IgA(SIgA)兩種。前者占血清總Ig的10％－15％,后者在外分泌系統(tǒng)中有更重要的免疫功能呼吸道、消化道、泌尿生殖道的淋巴樣組織合成大量的SIgASIgA與這些部位的局部感染、炎癥或腫瘤等病變密切相關(guān)。二、免疫球蛋白A檢測

[參考值]

成人血清IgA為0.7～3.5g/L

SIgA

唾液平均為0.3g/L

淚液為30～80g/L

初乳平均為5.06g/L

糞便平均為1.3g/L[參考值]

成人血清IgA為0.7～3.5g/L

[臨床意義]1生理性變化隨年齡增加而增加，到16歲前達(dá)成人水平⒉病理性變化⑴IgA增高:見于IgA型MM、SLE、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、肝硬化、濕疹和腎臟疾病等2.IgA降低:見于反復(fù)呼吸道感染、非IgA型MM、重鏈病、輕鏈病、原發(fā)性和繼發(fā)性免疫缺陷病和自身免疫性疾病等。[臨床意義]1生理性變化隨年齡增加而增加，到16歲前達(dá)成三．免疫球蛋白M檢測免疫球蛋白M(IgM)是分子質(zhì)量最大的Ig,約占血清總Ig的5％～10％IgM是有效的凝聚和溶解細(xì)胞的因子天然同族凝聚素(抗A、抗B)、冷凝集素及傷寒沙門菌的抗體均屬此類[參考值]成人血清IgM0.5～2.6g/L三．免疫球蛋白M檢測[臨床意義]⒈生理性變化從孕20周起，胎兒自身合成大量IgM，胎兒和新生兒IgM濃度是成人水平的10％，8-16歲前達(dá)成人水平⒉病理性變化⑴IgM增高:見于初期病毒性肝炎、肝硬化、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、SLE等單純IgM增高提示為病原體引起的原發(fā)性感染，若臍血中IgM＞0.2g/L時(shí)，提示宮內(nèi)感染此外,在原發(fā)性巨球蛋白血癥時(shí),IgM呈單克隆性明顯增高2.IgM降低:見于IgG型重鏈病、IgA型MM、先天性免疫缺陷癥、免疫抑制療法后、淋巴系統(tǒng)腫瘤和腎病綜合征等[臨床意義]四、免疫球蛋白E檢測免疫球蛋白E為血清中最少的一種Ig,約占血清總Ig的0.002％它是一種親細(xì)胞性抗體與變態(tài)反應(yīng)、寄生蟲感染及皮膚過敏等有關(guān)[參考值]ELISA法為0.1～0.9mg/L四、免疫球蛋白E檢測[臨床意義]⒈生理性變化嬰兒臍血IgE水平很低，12歲時(shí)達(dá)成人水平⒉病理性變化⑴IgE增高:見于IgE型MM、重鏈病、肝臟病、結(jié)節(jié)病、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，以及各種過敏性疾病如異位性皮炎、過敏性哮喘、過敏性鼻炎、間質(zhì)性肺炎、蕁麻疹、嗜酸性粒細(xì)胞增多癥、皰疹樣皮炎、寄生蟲感染等[臨床意義]⑵IgE降低見于先天性或獲得性丙種球蛋白缺乏癥惡性腫瘤長期用免疫抑制劑共濟(jì)失調(diào)性毛細(xì)血管擴(kuò)張癥等⑵IgE降低五、血清M蛋白檢測M蛋白(Mprotein)或稱單克隆免疫球蛋白它是一種單克隆B細(xì)胞增殖產(chǎn)生的、具有相同結(jié)構(gòu)和電泳遷移率的、免疫球蛋白分子及其分子片段[參考值]蛋白電泳法、免疫比濁法或免疫電泳法:正常人為陰性五、血清M蛋白檢測[臨床意義]

檢測到M蛋白，提示單克隆免疫球蛋白增殖病見于

①多發(fā)性骨髓瘤：以IgG型最常見，其次為IgA型，IgD和IgE罕見，也有IgM型的報(bào)道

②巨球蛋白血癥(Waldenstrom癥):存在大量單克隆IgM[臨床意義]

檢測到M蛋白，提示單克隆免疫球蛋白增殖病見于

③重鏈病：出現(xiàn)Ig重鏈(γ、α和μ重鏈)④輕鏈?。撼霈F(xiàn)單克隆游離輕鏈⑤半分子?。合涤梢粭l重鏈和一條輕鏈組成的單克隆Ig片段⑥7SIgG?。簽閻盒訫蛋白病等。③重鏈?。撼霈F(xiàn)Ig重鏈(γ、α和μ重鏈)第二節(jié)血清補(bǔ)體檢測補(bǔ)體(complement,C)是一組具有酶原活性的糖蛋白它由傳統(tǒng)途徑的九種成分C1(Clq、C1r、C1s)～C9；旁路途徑的三種成分及其衍生物,B、D、P、H、I等因子組成第二節(jié)血清補(bǔ)體檢測補(bǔ)體(complement,C)是一組補(bǔ)體、體液因子或免疫細(xì)胞共同參與滅活病原體的免疫反應(yīng)也參與破壞自身組織或自身細(xì)胞而造成的免疫損傷補(bǔ)體的檢測可了解補(bǔ)體功能以及體內(nèi)免疫反應(yīng)、免疫損傷等狀態(tài)。補(bǔ)體、體液因子或免疫細(xì)胞共同參與滅活病原體的免疫反應(yīng)第二節(jié)血清補(bǔ)體檢測本節(jié)重點(diǎn)及習(xí)題一、總補(bǔ)體溶血活性檢測二、補(bǔ)體C1q檢測三、補(bǔ)體C3檢測四、補(bǔ)體C4檢測五、補(bǔ)體旁路B因子檢測第二節(jié)血清補(bǔ)體檢測本節(jié)重點(diǎn)一、總補(bǔ)體溶血活性檢測二、補(bǔ)體

一、總補(bǔ)體溶血活性檢測總補(bǔ)體溶血活性(totalhemilyticcomplementactivity,CH50)以溶血素(抗體)致敏的綿羊紅細(xì)胞(抗原抗體復(fù)合物)激活待測血清中的C1引起補(bǔ)體活化的連鎖反應(yīng),在綿羊紅細(xì)胞上形成多分子的聚合物,影響其膜表面的結(jié)構(gòu)與功能一、總補(bǔ)體溶血活性檢測最終導(dǎo)致綿羊紅細(xì)胞溶解。溶血程度與補(bǔ)體量呈正相關(guān)一般以50％溶血作為檢測終點(diǎn)(CH50),較為靈敏、準(zhǔn)確[參考值]試管法為50～100kU/L最終導(dǎo)致綿羊紅細(xì)胞溶解。溶血程度與補(bǔ)體量呈正相關(guān)[臨床意義]主要反映補(bǔ)體傳統(tǒng)途(C1～C9)活化的活性程度。①CH50增高見于急性炎癥組織損傷某些惡性腫瘤.[臨床意義]主要反映補(bǔ)體傳統(tǒng)途(C1～C9)活化的活性程度。②CH50減低:更有意義見于各種免疫復(fù)合物性疾病如腎小球腎炎自身免疫性疾病(如SLE)感染性心內(nèi)膜炎、病毒性肝炎和慢性肝病重癥營養(yǎng)不良和遺傳性補(bǔ)體成分缺乏癥等②CH50減低:更有意義

二、補(bǔ)體C1q檢測補(bǔ)體﹙comlement）C1q是構(gòu)成補(bǔ)體C1的重要組分C1是:一個(gè)C1q分子、2個(gè)C1r分子和2個(gè)C1s分子構(gòu)成的鈣離子依賴性復(fù)合物目前常規(guī)檢測Clq[參考值]ELISA法為0.18－0.19g/L二、補(bǔ)體C1q檢測[臨床意義]①Clq增加:見于骨髓炎、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)、過敏性紫癜等②Clq降低見于SLE和混合型結(jié)締組織疾病重度營養(yǎng)不良、腎病綜合征、重癥聯(lián)合免疫缺陷等[臨床意義]

三、補(bǔ)體C3檢測補(bǔ)體C3是一種由肝臟合成的β2-球蛋白由α和β兩條多肽鏈組成C3在補(bǔ)體系統(tǒng)各成分中含量最多是傳統(tǒng)途徑和旁路途徑被激活的關(guān)鍵物質(zhì)[參考值]成人0.8～1.5g/L三、補(bǔ)體C3檢測[臨床意義]1生理性變化隨年齡的增長而增長⒉病理性增高①增高:見于急性炎癥、傳染病早期、腫瘤、排異反應(yīng)等②減低:見于大多數(shù)急性腎小球腎炎、鏈球菌感染后腎炎、狼瘡性腎炎患者。還見于活動(dòng)性SLE和類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎活動(dòng)期、慢性活動(dòng)性肝炎、肝硬化、肝壞死等因此檢測C3對(duì)這些疾病診斷有價(jià)值[臨床意義]

四、補(bǔ)體C4檢測補(bǔ)體C4是一種多功能β1-球蛋白在補(bǔ)體傳統(tǒng)途徑活化中，C4被C1s水解為C4a、C4bC4a、C4b在補(bǔ)體活化、促進(jìn)吞噬、防止免疫復(fù)合物沉著和中和毒素等方面發(fā)揮作用[參考值]0.20～0.6g/L四、補(bǔ)體C4檢測[臨床意義]①升高:見于各種傳染病、急性風(fēng)濕熱、結(jié)節(jié)性動(dòng)脈周圍炎、皮肌炎、關(guān)節(jié)炎和組織損傷等②降低:見于自身免疫性肝炎、狼瘡性腎炎、SLE、I型糖尿病、胰腺癌、多發(fā)性硬化癥、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、IgA性腎病、遺傳性IgA缺乏癥[臨床意義]

五．補(bǔ)體旁路B因子檢測補(bǔ)體旁路﹙factor﹚B因子是一種不耐熱的β球蛋白,50℃30分鐘即可失活。它可被D因子裂解為Ba、Bb兩個(gè)片段Bb與C3b結(jié)合構(gòu)成旁路途徑的C3轉(zhuǎn)化酶B因子是補(bǔ)體旁路活化途徑中的一個(gè)重要成分,又稱C3激活劑前體五．補(bǔ)體旁路B因子檢測[參考值]0.10～0.4g／L[臨床意義]同補(bǔ)體旁路途徑溶血活性檢測增高見于某些自身免疫性疾病、腎病綜合征。慢性腎炎、惡性腫瘤減低見于肝病、急性腎小球腎炎、自身免疫性溶血性貧血[參考值]0.10～0.4g／L第三節(jié)細(xì)胞免疫檢測一T細(xì)胞亞群的檢測﹙一﹚T細(xì)胞花結(jié)實(shí)驗(yàn)﹙二﹚T細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)﹙三﹚T細(xì)胞分化抗原測定二B細(xì)胞分化抗原檢測三自然殺傷細(xì)胞免疫檢測四細(xì)胞因子檢測第三節(jié)細(xì)胞免疫檢測一T細(xì)胞亞群類風(fēng)濕因子一抗核抗體檢測課件類風(fēng)濕因子一抗核抗體檢測課件

﹙一﹚T細(xì)胞花結(jié)形成試驗(yàn)T細(xì)胞表面有特意性綿羊紅細(xì)胞﹙E﹚受體和T細(xì)胞識(shí)別受體﹙TCR﹚其中E受體曾廣泛被用做鑒定和計(jì)數(shù)T細(xì)胞的標(biāo)志。T細(xì)胞表面的E受體，可與綿羊紅細(xì)胞結(jié)合成花結(jié)樣細(xì)胞，稱E玫瑰花形成實(shí)驗(yàn)﹙ERFT﹚此實(shí)驗(yàn)花結(jié)形成實(shí)驗(yàn)因其操作簡便易行曾被廣泛使用，但影響因素較多，因此逐漸被檢測CD抗原方法所取代﹙一﹚T細(xì)胞花結(jié)形成試驗(yàn)﹙二﹚T細(xì)胞分化抗原測定T細(xì)胞表面有多種特意性抗原。WHO﹙1986年﹚統(tǒng)稱其為白細(xì)胞分化抗原﹙clusterdifferentiation，CD﹚CD3＋代表總T細(xì)胞，CD3＋/CD4＋代表T輔助細(xì)胞﹙Th﹚，CD3＋/CD8＋代表T抑制細(xì)胞﹙Ts﹚等。應(yīng)用這些細(xì)胞的單克隆抗體與T細(xì)胞表面抗原結(jié)合后，再與熒光標(biāo)記二抗﹙兔或羊抗鼠IgG﹚反應(yīng)，在熒光顯微鏡下或流式細(xì)胞儀中計(jì)數(shù)CD陽性細(xì)胞的百分率﹙二﹚T細(xì)胞分化抗原測定[參考值]免疫熒光法﹙IFA﹚CD3＋為63.1％±10.8％CD3＋/CD4＋（Th﹚為42.8％±9.5％CD3＋/CD8＋（Ts﹚為19.6％±5.9％CD4CD8﹙Th/Ts﹚為2.2％±0.7％：流式細(xì)胞術(shù)CD3＋為61％～85％；CD3＋/CD4＋（Th﹚28％～58％；CD3＋/CD8＋（Ts﹚為19％～48％；CD4CD8﹙Th/Ts﹚為0.9％～2.0％；

[參考值][臨床意義]①CD3＋降低：見于自身免疫性疾病。SLE類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎②CD3＋/CD4＋（Th﹚降低：惡性腫瘤、遺傳性免疫缺陷病、愛滋?、跜D3＋/CD8＋（Ts﹚降低見于自身免疫性疾病或變態(tài)反應(yīng)性疾病。④CD4/CD8CD8﹙Th/Ts﹚比值降低：見于愛滋?、荼O(jiān)測器官移植排斥反應(yīng)CD4/CD8﹙Th/Ts﹚比值增高⑥CD3＋CD4＋CD8＋較高且有CD1＋CD2＋CD5＋CD7＋增高則可能為T細(xì)胞型急性淋巴細(xì)胞性白血病[臨床意義]二、B細(xì)胞分化抗原檢測B細(xì)胞是在鳥類法氏囊﹙bursaofFabricius﹚或其同功器官﹙骨髓bonemarrow﹚內(nèi)發(fā)育成熟的細(xì)胞，因此稱為法氏囊或骨髓依賴的淋巴細(xì)胞，簡稱B細(xì)胞。B細(xì)胞受抗原刺激后可分化為產(chǎn)生抗體的漿細(xì)胞，B細(xì)胞是體內(nèi)唯一能產(chǎn)生抗體﹙免疫球蛋白分子﹚的細(xì)胞二、B細(xì)胞分化抗原檢測[參考值]流式細(xì)胞術(shù)：CD19+﹙11.74±3.37﹚％[臨床意義]①升高：見于急性淋巴細(xì)胞白血病﹙B細(xì)胞型，且有SmIg、HLA-D表達(dá)﹚、慢性淋巴細(xì)胞白血病等②降低：見于無丙種球蛋白血癥、使用化療或免疫抑制劑后。[參考值]流式細(xì)胞術(shù)：CD19+﹙11.74±3.37﹚％第四節(jié)腫瘤標(biāo)志物檢測

腫瘤標(biāo)志物(tumormarker)是由腫瘤細(xì)胞本身合成、釋放或者是由機(jī)體對(duì)腫瘤細(xì)胞反應(yīng)而產(chǎn)生的一類物質(zhì)。這類物質(zhì)可反映細(xì)胞惡變各個(gè)階段的表型及基因特征性。主要包括蛋白質(zhì)類。糖類物質(zhì)和酶類腫瘤標(biāo)志物。附圖第四節(jié)腫瘤標(biāo)志物檢測腫瘤標(biāo)志物(tumormarke第三節(jié)腫瘤標(biāo)志物檢測一、蛋白質(zhì)腫瘤標(biāo)志物的檢測(一)甲種胎兒球蛋白測定(二)癌胚抗原測定(三)組織多肽抗原測定(四)前列腺特異抗原測定第三節(jié)腫瘤標(biāo)志物檢測一、蛋白質(zhì)腫瘤標(biāo)志物的檢測(一)甲種胎第四節(jié)腫瘤標(biāo)志物檢測一、蛋白質(zhì)腫瘤標(biāo)志物的檢測二、糖脂腫瘤標(biāo)志物檢測本節(jié)重點(diǎn)及習(xí)題(五)鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原測定(三)糖鏈抗原19－9測定(四)癌抗原125測定第四節(jié)腫瘤標(biāo)志物檢測一、蛋白質(zhì)腫瘤標(biāo)志物的檢測本節(jié)重點(diǎn)及習(xí)

一、蛋白質(zhì)腫瘤標(biāo)志物的檢測(一)甲種胎兒球蛋白測定甲種胎兒球蛋白(alphafetoprotein,AFP)是在胎兒早期由肝臟合成的一種糖蛋白出生后合成受到抑制一、蛋白質(zhì)腫瘤標(biāo)志物的檢測當(dāng)干細(xì)胞或生殖腺胚胎組織發(fā)生惡性病變時(shí)，有關(guān)基因重新被激活使原來已喪失合成AFP能力的細(xì)胞重新開始合成,以致血中AFP含量明顯升高因此血中AFP濃度檢測對(duì)診斷干細(xì)胞癌及滋養(yǎng)細(xì)胞惡性腫瘤有重要的臨床價(jià)值當(dāng)干細(xì)胞或生殖腺胚胎組織發(fā)生惡性病變時(shí)，有關(guān)基因重新被激活[參考價(jià)值]RIA或ELISA法為低于25μg/L[臨床意義]1.原發(fā)性肝細(xì)胞性肝癌患者血清AFP增高，診斷閾值為超過300μg/L，增高率約為75％-80％；約有10％的原發(fā)性肝癌患者其AFP為陰性。[參考價(jià)值]2.生殖腺胚胎癌(睪丸癌、卵巢癌、畸胎瘤等)、胃癌或胰腺癌時(shí)，血中AFP含量也可升高。3.病毒性肝炎、肝硬化時(shí)AFP也有不同程度的升高(20-200μg/L)4.妊娠3-4個(gè)月、孕婦AFP開始升高；7-8個(gè)月達(dá)高峰，以后下降；但多低于300μg/L。2.生殖腺胚胎癌(睪丸癌、卵巢癌、畸胎瘤等)、胃癌或胰腺癌時(shí)(二)癌胚抗原測定癌胚抗原(carcinoembryonicantigen,CEA)是一種富含多糖的蛋白復(fù)合物胎兒早期的消化管及某些組織均有合成CEA的能力，但孕六個(gè)月以后含量逐漸減少，出生后含量極低檢測它對(duì)腫瘤的診斷、預(yù)后、復(fù)發(fā)判斷有意義(二)癌胚抗原測定[參考值]ELISA法和RIA法為＜15μg/L[臨床意義]1.CEA明顯增高見于、胰腺癌、結(jié)腸癌、乳腺癌、胃癌、肺癌等患者。[參考值]ELISA法和RIA法為＜15μg/L2.動(dòng)態(tài)觀察一般病情好轉(zhuǎn)時(shí)，CEA濃度下降，病情加重時(shí)可升高3.結(jié)腸炎、胰腺炎、肝臟疾病、肺氣腫及支氣管哮喘等也常見CEA輕度升高4.96％～97％非吸煙健康人血清CEA濃度＜2.5μg/L，大量吸煙者中有20％～40％的人CEA＞2.5μg/L，少數(shù)人大于5.0μg/L。2.動(dòng)態(tài)觀察一般病情好轉(zhuǎn)時(shí)，CEA濃度下降，病情加重時(shí)可升高(三)組織多肽抗原測定組織多肽抗原(tissuepolypeptideantigen,TPA)是存在于胎盤和大部分腫瘤組織細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)中的一種單鏈多肽。在惡性腫瘤患者血清中的檢出率高達(dá)70％以上但它的增高與腫瘤發(fā)生部位和組織類型無相關(guān)性在觀察療效上則有較高的敏感性[參考值]ELISA法為＜130U/L(三)組織多肽抗原測定[臨床意義]1.惡性腫瘤患者血清TPA水平可顯著升高。2.經(jīng)治療好轉(zhuǎn)后，TPA水平降低；若TPA再次升高，提示有腫瘤復(fù)發(fā)。3.TPA和CEA同時(shí)檢測可有利于惡性與非惡性乳腺病的鑒別診斷。4.急性肝炎、胰腺炎、肺炎、妊娠后3個(gè)月都可升高。[臨床意義]

(四)前列腺特異抗原測定前列腺特異抗原(prostatespecificantigen,PSA)是一種由前列腺分泌的單鏈糖蛋白,它存在于前列腺管道的上皮細(xì)胞中。在前列腺癌時(shí)可見PSA血清水平明顯升高(四)前列腺特異抗原測定今年發(fā)現(xiàn)血清總PSA(T-PSA)80％以結(jié)合形式存在,稱復(fù)合PSA(c-PSA)20％的以游離PSA形式存在(F-PSA)其比值對(duì)診斷更有特異和準(zhǔn)確性今年發(fā)現(xiàn)血清總PSA(T-PSA)[參考值]RIA法和（酶聯(lián)免疫印跡技術(shù)）CLIA法：T-PSA＜4.0μg/L，F(xiàn)-PSA<0.8μg/LF/T比值＞0.25[臨床意義]1.前列腺癌時(shí)60％－90％患者血清PSA水平明顯升高；當(dāng)行外科切除術(shù)后，90％患者血清PSA水平明顯降低[參考值]RIA法和（酶聯(lián)免疫印跡技術(shù)）CLIA法：2.若見PSA水平升高，即有轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)的可能3.良性前列腺瘤、前列腺肥大或急性前列腺炎時(shí)，約有14％的患者血清PSA水平升高，此時(shí)應(yīng)注意鑒別2.若見PSA水平升高，即有轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)的可能(五)鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原測定鱗狀上皮細(xì)胞抗原(squamuscellcarcinomaantigen,SCC)是腫瘤相關(guān)抗原TA-4的亞型，是一種糖蛋白[參考值]RIA和CLIA法為≤1.5μg/L。(五)鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原測定[臨床意義]1.血清中SCC水平升高，可見于83％的宮頸癌、25％-75％的肺鱗狀細(xì)胞癌、30％Ⅰ期食管癌、89％的Ⅲ期食管癌；2.也見于卵巢癌、子宮癌和頸部鱗狀上皮細(xì)胞癌。3.臨床上用于檢測上述惡性腫瘤的治療效果、復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移或評(píng)價(jià)預(yù)后。[臨床意義]二、糖脂腫瘤標(biāo)志物檢測(三)糖鏈抗原19－9測定糖鏈抗原19－9(carbohydrateantigen19-9,CA19-9)是一種糖蛋白。胚胎期分布于胎兒的胰腺。肝膽和腸等組織；在成人的胰、膽等部位也有少量存在。[參考值]固相放射免疫分析(IRMA)法和ELISA法：健康人血清CA19-93.7萬U/L二、糖脂腫瘤標(biāo)志物檢測[臨床意義]1.胰腺癌、肝膽和胃腸道疾病時(shí)血中CA19-9的水平可明顯升高。其陽性率胰腺癌為85％－95％膽囊癌和膽管癌為85％左右胃癌、結(jié)腸癌為40％直腸癌為30％－50％但無早期診斷價(jià)值,對(duì)早期病人的敏感度僅為30％[臨床意義]2.連續(xù)檢測對(duì)病情進(jìn)展、手術(shù)療效、預(yù)后估計(jì)及復(fù)發(fā)診斷有重要價(jià)值。3.急性胰腺炎、膽汁淤積型膽管炎、膽石癥、急性肝炎、肝硬化等，血清CA19-9也可出現(xiàn)不同程度的升高。4.結(jié)合CEA檢測,對(duì)胃癌診斷符合率可達(dá)85％2.連續(xù)檢測對(duì)病情進(jìn)展、手術(shù)療效、預(yù)后估計(jì)及復(fù)發(fā)診斷有重要價(jià)

(四)癌抗原125測定癌抗原125(cancerantigen125,CA125)為一種糖蛋白性腫瘤相關(guān)抗原,存在于卵巢腫瘤的上皮細(xì)胞內(nèi)。當(dāng)患有上皮性卵巢癌和子宮內(nèi)膜癌時(shí),病人血清CA125水平可明顯升高。[參考值]＜3.5萬U/L(四)癌抗原125測定[臨床意義]1.卵巢癌病人血清CA125水平明顯升高,其陽性率高達(dá)60％-90％,故對(duì)診斷卵巢癌有較大臨床價(jià)值,尤其對(duì)觀察治療效果和判斷復(fù)發(fā)較為靈敏。[臨床意義]2.宮頸癌、乳腺癌、胰腺癌、膽道癌、肝癌、胃癌、結(jié)腸癌、肺癌等也有一定的陽性反應(yīng)。3.3％～6％的良性卵巢瘤、子宮肌瘤病人血清CA125有時(shí)也會(huì)明顯升高,但多數(shù)不超過10萬U/L。4.肝硬化失代償期血清CA125明顯升高。2.宮頸癌、乳腺癌、胰腺癌、膽道癌、肝癌、胃癌、結(jié)腸癌、肺癌第四節(jié)自身抗體檢測

某些原因削弱或破壞健康人的自身免疫耐受(autoimmunetolerance)，免疫系統(tǒng)就會(huì)對(duì)自身組織或成分產(chǎn)生免疫應(yīng)答，稱為自身免疫(autoimmunity)。由于自身免疫而產(chǎn)生的疾病稱為自身免疫病(autoimmunedisease,AID)。按自身抗原分布的范圍可分器官特異性和非器官特異性。診斷自身免疫病的重要方法是作自身抗體免疫檢測。第四節(jié)自身抗體檢測某些原因削弱或破壞健康人的自身免疫耐第四節(jié)自身抗體檢測二、抗核抗體檢測本節(jié)重點(diǎn)及習(xí)題一、類風(fēng)濕因子(一)抗核抗體檢測(二)抗DNA抗體測定第四節(jié)自身抗體檢測本節(jié)重點(diǎn)及習(xí)題一、類風(fēng)濕因子(一)抗核抗一、類風(fēng)濕因子類風(fēng)濕因子(rheumatoidfactor,RF)是變性lgG刺激機(jī)體產(chǎn)生的一種自身抗體，主要存在于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者的血清和關(guān)節(jié)液內(nèi)。它有IgM型，也有IgG、IgA、lgD和IgE型。用乳膠凝集法測出的主要是IgM型；速率法敏感但不能分類型。[參考值]乳膠凝集法、血清稀釋度低于1:10速率比值法＜30U/L。一、類風(fēng)濕因子[臨床意義]類風(fēng)濕性疾病時(shí)，RF的陽性率可高達(dá)70％－90％，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的陽性率為70％。IgG型:與患者的滑膜炎、血管炎和關(guān)節(jié)外癥狀有關(guān)IgM型與IgA型的效價(jià)與病情、骨質(zhì)破壞有關(guān)[臨床意義]其他自身免疫性疾病，如多發(fā)性肌炎、硬皮病、干燥綜合征、SLE、自身免疫性溶血、慢性活動(dòng)性肝炎等也見RF陽性。某些感染性疾病，如傳染性單核細(xì)胞增多癥、結(jié)節(jié)病、感染性心內(nèi)膜炎等也多呈現(xiàn)陽性反應(yīng)。故本試驗(yàn)的特異性不高，應(yīng)予鑒別。其他自身免疫性疾病，如多發(fā)性肌炎、硬皮病、干燥綜合征、SLE

二、抗核抗體檢測

(一)抗核抗體檢測

抗核抗體檢測(antinuclearantibody,ANA)是指抗細(xì)胞核成分［脫氧核糖核蛋白(DNP)、DNA、可提取的核抗原(ENA)和RNA等］的自身抗體的總稱

ANA的性質(zhì)主要是IgG,也有IgM、IgA。這種抗體無器官和種族的特異性二、抗核抗體檢測◎免疫熒光法以鼠肝細(xì)胞核作抗原時(shí),該抗體可與之結(jié)合,再加入熒光標(biāo)記抗人Ig后,胞核區(qū)發(fā)出黃綠色熒光而胞漿區(qū)不發(fā)熒光。根據(jù)細(xì)胞核染熒光的圖像可分析為均質(zhì)型、邊緣型、顆粒型和核仁型等四型。◎[參考值](間接熒光抗體試驗(yàn))IFA法為陰性,血清滴度＞1:40為陽性?！蛎庖邿晒夥ㄒ允蟾渭?xì)胞核作抗原時(shí),該抗體可與之結(jié)合,再加入熒[臨床意義]1.ANA陽性⑴最多見于未治療的SLE,陽性率達(dá)80％～100％;活動(dòng)期SLE幾乎100％陽性。經(jīng)皮質(zhì)激素治療后,陽性率可降低⑵藥物性狼瘡(100％)⑶混合性結(jié)締組織病(10％)⑷全身性硬皮病(85％-95％)[臨床意義]⑸多發(fā)性肌炎(3％-