膿毒癥免疫紊亂與免疫調(diào)理治療課件

膿毒癥免疫紊亂與免疫調(diào)理治療

吳玉娟

編輯課件膿毒癥免疫紊亂與免疫調(diào)理治療1內(nèi)容2免疫調(diào)理治療4膿毒癥現(xiàn)狀及經(jīng)典治療31膿毒癥免疫紊亂機制33膿毒癥本質(zhì)的認識編輯課件內(nèi)容2免疫調(diào)理治療4膿毒癥現(xiàn)狀及經(jīng)典治療31膿毒癥免疫紊亂機2Epidemiology

Accountsforabout2%ofadmissionsbut59%requireintensivecare

$16.7billiondollarsintheUSalone

Mortalityis20-63%

2ndleadingcauseofdeathinnoncoronaryICU’s10thleadingcauseofoveralldeathMorecommoninmenandinnon-whitesPatientsarenowolder(57to60)Incidencehasincreasedfrom1979(164,000cases)to2000(660,000)-Annualizedincreaseof8.7%Deathshaveincreasedfrom43,579to120,491only56%gohomevs.78%NEJM2003;346:1546-54編輯課件Epidemiology

NEJM2003;346:1543全球每年有1800萬人發(fā)生嚴重感染,每天約1400人死于嚴重感染。我國的情況我國每年僅以院內(nèi)感染發(fā)生膿毒癥的病例就超過500萬，此數(shù)據(jù)不包括以感染為原發(fā)病就醫(yī)的門診和住院病人。

1989年衛(wèi)生部的統(tǒng)計資料編輯課件全球編輯課件4PurposeforExistence?

>750,000

casesofseveresepsis/year

intheUS*Future200,000400,000600,000800,0001,000,0001,200,0001,400,0001,600,0001,800,000200120252050Year100,000200,000300,000400,000500,000600,000SevereSepsisCasesUSPopulationSepsisCasesTotalUSPopulation/1,000TodayIncidenceprojectedtoincreaseby1.5%peryearAngusDC.CritCareMed.2001;29(7):1303-1310.編輯課件PurposeforExistence?>750,05

seversepsis的特點每年1.5%的速度增長高發(fā)病率$16.7billiondollarsintheUS高費用Mortalityis20-63%高病死率編輯課件seversepsis的特點每年1.5%的高發(fā)病率$6全世界的努力ACCP/SCCM19922002guidelines2004-2008DefinitionBarcelonadeclaration編輯課件全世界的努力ACCP/SCCM19922002guidel7SSCguidelinesscVasopressorsInotropictherapyInitialresuscitation(first6hours)MechanicalventilationrhAPCSteroidsGI/DVTDiagnosisAntibiotictherapySourceidentificationandcontrol.CritCareMed,2004,32(3):858-873編輯課件SSCguidelinesscVasopressorsIn8編輯課件編輯課件9對膿毒癥的認識20世紀80年代中期，膿毒癥被認為是機體對感染產(chǎn)生

過度的炎癥反應(yīng)，并歸咎于免疫細胞大量釋放促炎細胞素所致。因此，針對若干促炎細胞素進行了大量的所謂“抗炎治療”，但臨床研究效果不彰。十年近乎亢奮的“免疫調(diào)理治療”嘗試陷于低谷。就失敗的原因人們提出許多見解，如單克隆抗體作用的局限性;抗促炎細胞素潛在的危害性;人類與實驗動物間種屬的差異性等，但最具影響力并被普遍接受的是1996年Bone提出的所謂代償性抗炎反應(yīng)綜合征(CARS)假說。編輯課件對膿毒癥的認識20世紀80年代中期，膿毒癥被認為是機體對感染10對膿毒癥的認識因此，對膿毒癥患者不加區(qū)別地實施促炎(或抗炎)細胞素治療是不恰當?shù)?。CARS假說似乎能夠解釋抗炎治療“失敗”的原因，并且在一定程度上得到了臨床研究的支持。病程中晚期抗炎機制占優(yōu)勢免疫抑制出現(xiàn)病程早期促炎機制占優(yōu)勢過度的炎癥反應(yīng)CARS假說CritCareMed,1996,24:1125-8編輯課件對膿毒癥的認識病程中晚期病程早期CARS假說編輯課11按照該假說,免疫調(diào)理治療的任務(wù)是恢復促炎與抗炎機制的平衡,邏輯上通過早期予抗炎治療,晚期予免疫刺激治療有望逆轉(zhuǎn)膿毒癥的免疫抑制狀態(tài)。然而，一項觀察報告發(fā)現(xiàn)，對免疫抑制患者進行免疫刺激治療后，其免疫狀態(tài)和預后的變化與相伴的促炎／抗炎細胞素的變化是CARS假說完全無法解釋且相悖的。編輯課件按照該假說,免疫調(diào)理治療的任務(wù)是恢復促炎與抗炎機制的平衡,邏12入選標準：2000-2001年滿足嚴重膿毒癥診斷的患者治療組：HLA-DR<30%的20例患者，予SSC+TP-5/1mgIM.Qd，治療至單核細胞HLA-DR>50%或患者死亡；HLA-DR>30%的22例患者，僅予SSC治療對照組：10例健康成人血標本為正常對照結(jié)果：HLA-DR<30%者死亡5例存活15例HLA-DR>30%者全部存活中國危重病急救醫(yī)學，2003：135-138編輯課件入選標準：2000-2001年滿足嚴重膿毒癥診斷的患者13各組治療前后促炎/抗炎細胞因子的變化（x±s）所有患者細胞因子均高于健康對照經(jīng)免疫刺激治療且存活的患者,

TNF-a和IL-6不但沒有增加反而下降，其中IL-6下降最顯著。免疫狀態(tài)得不到改善且死亡的患者，各種細胞因子變化不明顯.兩類患者抗炎細胞因子的變化均不明顯。編輯課件各組治療前后促炎/抗炎細胞因子的變化（x±s）所有患者細14研究發(fā)現(xiàn)膿毒癥免疫抑制發(fā)生的機制與炎性細胞因子的平衡并無直接關(guān)系。顯然，這樣的結(jié)果是無法用CARS的促炎/抗炎平衡假說解釋的。CARS假說存在嚴重缺陷。CARS假說的積極意義在于警示了膿毒癥患者存在不同的免疫狀態(tài)和逆轉(zhuǎn)免疫抑制的重要性，但導致免疫抑制的機制不清。編輯課件研究發(fā)現(xiàn)膿毒癥免疫抑制發(fā)生的機制與炎性細胞因子的平衡并無直接15對膿毒癥的認識SIRSImmunosuppressSepsis同時存在相互制衡此消彼長編輯課件對膿毒癥的認識SIRSImmunosuppressSepsi16膿毒癥免疫抑制發(fā)生的機制究竟是什么？炎性細胞因子到底發(fā)揮了什么作用？合理的免疫調(diào)理治療方向究竟在哪里呢？得益于基礎(chǔ)研究的進步，近年正在逐步闡明，膿毒癥免疫抑制是由于淋巴細胞（包括B細胞和T細胞，特別是CD4細胞）及樹突狀細胞凋亡加速的結(jié)果。編輯課件膿毒癥免疫抑制發(fā)生的機制究竟是什么？炎性細胞因子到底發(fā)揮了什17免疫基礎(chǔ)知識（1）非特異性免疫和特異性免疫的區(qū)別非特異性免疫特異性免疫理化屏障皮膚粘膜及血腦胎盤骨髓胸腺；淋巴結(jié)、脾和

細胞吞噬細胞NK淋巴細胞等分子補體、IFN-a、b及

抗體、IFN-y等細胞因子

TNF等細胞因子發(fā)生與生具有，應(yīng)答發(fā)生快后天獲得，應(yīng)答發(fā)生較慢維持時間終身維持有自限性特異性無有記憶性無有穩(wěn)定性不因免疫次數(shù)而增減隨免疫次數(shù)增加而增強編輯課件免疫基礎(chǔ)知識（1）非特異性免疫和特異性免疫的區(qū)別編輯課件18免疫基礎(chǔ)知識(2)免疫系統(tǒng)在維持機體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定中具有重要作用。免疫穩(wěn)態(tài)要求免疫系統(tǒng)能及時對抗原發(fā)生有效反應(yīng)，并在抗原清除后迅速終止反應(yīng)而恢復到原有狀態(tài)，以便機體對新的抗原刺激再次發(fā)生免疫應(yīng)答。研究證實，在維持免疫穩(wěn)態(tài)過程中，淋巴細胞凋亡發(fā)揮著關(guān)鍵作用，尤其在免疫應(yīng)答終止機制中占有重要地位，免疫應(yīng)答結(jié)束后效應(yīng)細胞的清除等都是通過凋亡來實現(xiàn)的。凋亡與壞死的主要區(qū)別在于是否發(fā)生炎癥反應(yīng)。編輯課件免疫基礎(chǔ)知識(2)免疫系統(tǒng)在維持機體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定中具有重要作用19免疫基礎(chǔ)知識（3）T細胞識別抗原的MHC限制性TCRAg-MHC分子復合物MHC-IMHC-IIAPCAgAPC包括單核吞噬細胞、樹突狀細胞（DC），皮膚朗罕氏細胞等，指能向T或B細胞遞呈抗原的細胞。編輯課件免疫基礎(chǔ)知識（3）T細胞識別抗原的MHC限制性TCRMHC-20膿毒癥發(fā)病機制物理損傷化學物質(zhì)生物學損傷MONKCD8Th1激素TNF-a顆粒酶FasLIL-1、IL-6、G-CSF非細胞膜損傷特異性細胞免疫功能抑制淋巴細胞、樹突狀細胞加速凋亡細胞膜損傷細胞壞死膿毒癥白細胞延緩凋亡非特異性炎癥反應(yīng)亢進編輯課件膿毒癥發(fā)病機制物理損傷MONKCD8Th1激素TNF-a顆粒21TNF-a、Fas配體（FasL）、顆粒酶，以及腎上腺糖皮質(zhì)激素是引發(fā)細胞凋亡加速的主要誘導物，并且通過激活細胞漿內(nèi)的一種被稱作caspase來實現(xiàn)編輯課件TNF-a、Fas配體（FasL）、顆粒酶，以及腎上腺糖皮質(zhì)22小結(jié)目前我們對膿毒癥免疫狀態(tài)的認識是：病理損害打擊下的機體反應(yīng)將通過兩條不同途徑，同時造成特異性免疫系統(tǒng)抑制和非特異性炎癥反應(yīng)亢進。這種狀態(tài)可能也就是Bone提出的所謂的混合型抗炎癥反應(yīng)綜合征（mixedanti-inflammatoryresponsesyndrome，MARS）。中國危重病急救醫(yī)學,2004,16(2)67-69編輯課件小結(jié)目前我們對膿毒癥免疫狀態(tài)的認識是：中國危重病急救醫(yī)學,223對膿毒癥的認識19921996？SIRSCARSMARS編輯課件對膿毒癥的認識19921996？SIRSCARSMARS編輯24免疫抑制機制業(yè)已明確，在動物和人類膿毒癥中，大量CD4+T淋巴細胞和B淋巴細胞發(fā)生了凋亡，且并不依賴于淋巴細胞的成熟不同淋巴細胞亞群對不同性質(zhì)凋亡誘導物的敏感性并不相同。如:脾細胞和骨髓細胞的凋亡依賴于內(nèi)毒素或TNF-aCD4+T淋巴細胞凋亡依賴于Fas和FasL共同作用CD8+T淋巴細胞凋亡則需要TNF-a和TNF受體（TNFR）的結(jié)合腎上腺糖皮質(zhì)激素也可誘導T淋巴細胞的凋亡編輯課件免疫抑制機制業(yè)已明確，在動物和人類膿毒癥中，大量CD4+T淋25免疫抑制機制

TextTNF/TNFRCD4+T細胞\B細胞\APC減少CD4+T細胞激活障礙抗體產(chǎn)生減少抗原遞呈能力下降淋巴細胞凋亡T淋巴細胞克隆無反應(yīng),活性T細胞減少抑制性細胞因子分泌增加(IL-4.IL-10)

單核/巨噬細胞功能障礙CD4+T淋巴細胞功能性分化SteroidsFas/FasL編輯課件免疫抑制機制TextTNF/TNFR淋巴細胞凋亡26免疫抑制機制

Th1TNF-a、IL-2、IFN-rCD4+T細胞活化漂移Th2IL-4、IL-10抑制性細胞因子IL-4、IL-10進一步增加

細胞因子微環(huán)境的變化(IL-12\IL-10),決定CD4+T細胞的功能性分化編輯課件免疫抑制機制細胞因子微環(huán)境的變化(IL-12\IL-10),27樹突狀細胞、調(diào)節(jié)性T細胞與膿毒癥免疫抑制DC介導機體特異性免疫，決定T細胞的激活或抑制，成為效應(yīng)性、記憶性、無能的T細胞，或者T細胞凋亡。DC-T細胞間的相互作用以及在此過程中DC釋放的細胞因子決定效應(yīng)性T細胞向Thl或Th2分化。Tr:CD4+CD25+Tr主要由胸腺T細胞發(fā)育而來，在人和小鼠的外周血及脾臟T細胞中占5-10%。膿毒癥時機體表現(xiàn)為Tr細胞水平持續(xù)增高,而Tr具有免疫無反應(yīng)性及免疫抑制性兩大特性。主要通過細胞接觸機制及分泌抑制性細胞因子兩方面實現(xiàn),表現(xiàn)為對抗原刺激不發(fā)生反應(yīng)性增殖并且也不分泌細胞因子IL-2,抑制CD4+和CD8+T細胞的活化和增殖。編輯課件樹突狀細胞、調(diào)節(jié)性T細胞與膿毒癥免疫抑制DC介導機體特異性免28DC\Tr細胞在膿毒癥免疫功能紊亂中的相互作用Tr不僅可以直接抑制普通T細胞功能，而且可以對DC抗原呈遞功能進行抑制。受Tr作用而產(chǎn)生的凋亡細胞具有同步傳遞抑制信號功能且對排斤反應(yīng)中的DC具有免疫抑制特性，DC在捕獲這種凋亡細胞后隨即喪失分化成熟能力。DC是誘導刺激性T細胞還是Tr決定于DC的成熟程度。在炎性因子缺乏條件下，未成熟DC刺激靜息型T細胞增殖的能力很弱，這可能誘導免疫耐受。不成熟DC的這種負調(diào)節(jié)功能可通過免疫調(diào)控因子，如TGF-b、PGE2和IL-10得以加強。DC與Tr細胞在機體免疫調(diào)節(jié)中分工不同，但彼此間存在著對話和溝通，有著千絲萬縷的聯(lián)系。編輯課件DC\Tr細胞在膿毒癥免疫功能紊亂中的相互作用Tr不僅可以直29膿毒癥本質(zhì)

1炎癥反應(yīng)亢進免疫功能紊亂3神經(jīng)---內(nèi)分泌---免疫網(wǎng)絡(luò)2凝血功能障礙編輯課件膿毒癥本質(zhì)1炎癥反應(yīng)亢進3神經(jīng)---內(nèi)分泌---免疫網(wǎng)絡(luò)230免疫調(diào)理治療抗炎治療免疫刺激治療病死率降低?編輯課件免疫調(diào)理治療抗炎治療免疫刺激治療病死率降低?編輯課件31藥物選擇

1烏司他?。╱linastatin）

拮抗各種細胞毒性蛋白酶的作用拮抗氧自由基直接結(jié)合細菌毒素抑制凝血系統(tǒng)活化

3y干擾素本身就是促炎介質(zhì)存在加劇全身炎癥反應(yīng)的風險不宜用于膿毒癥免疫刺激治療2a1胸腺肽(thymosina1)促進淋巴細胞分化成熟和單核細胞抗原呈遞抑制白細胞增殖，誘導白細胞凋亡激活樹突狀細胞編輯課件藥物選擇1烏司他丁3y干擾素2a1胸腺肽編輯課件32第一個臨床多中心RCT研究膿毒癥免疫調(diào)理治療臨床研究協(xié)作組完成，包括全國21家三甲醫(yī)院ICU的多中心、前瞻、隨機、對照入選標準：進入ICU內(nèi)的嚴重膿毒癥(Marshall評分5—20)患者從2003年10月至2006年5月，共完成433份病例對照組：SSC治療治療組：SSC+烏司他丁、邁普新該研究分兩個階段完成，

中華醫(yī)學雜志,2007,87(7):451-7編輯課件第一個臨床多中心RCT研究膿毒癥免疫調(diào)理治療臨床研究協(xié)作組完33研究1Phase1分析Phase2可能系治療組藥物劑量不足所致SSC治療+烏司他丁:20萬U/tid邁普新:3.2mg/bid連續(xù)7天SSC治療+烏司他丁:10萬U/tid邁普新:1.6mg/bid連續(xù)7天編輯課件研究1Phase1分析Phase2可能系治療組藥物劑量不34研究1第1階段研究兩組主要預后指標比較(x±s)

變量治療組

對照組Ｐ值

(n=44)(n=47)

入組Ｍarshal評分6.96±2.428.34±3.460.028828d死亡率(％)53.1956.820.728290d死亡率(％)84.0998.230.668528dApache下降(％)38.26±39.5830.90±43.970.530328dＭarshal下降(％)30.98±62.0336.48±43.950.9112

編輯課件研究1第1階段研究兩組主要預后指標比較(x±s)編輯課件35研究1第2階段研究病例入組時一般情況及治療中的特殊事件比較(x±s)編輯課件研究1第2階段研究病例入組時一般情況及治療中的特殊事件比較(36研究1第2階段研究兩組主要預后指標比較(x±s)編輯課件研究1第2階段研究兩組主要預后指標比較(x±s)編輯課件37研究結(jié)果證明聯(lián)合使用烏司他丁和邁普新治療嚴重膿毒癥是成功的。28d治療組死亡率明顯低于對照組，絕對存活率提高13.2％，相對存活率提高21.4％；90d絕對存活率提高15.0％，相對存活率提高31.2％。該研究顯示了治療的有效性具有明顯的劑量依賴性。編輯課件研究結(jié)果證明聯(lián)合使用烏司他丁和邁普新治療嚴重膿毒癥是成功的。38研究22004—2005年該院外科70例創(chuàng)傷、嚴重膿毒癥和MODS病人進入研究前瞻、隨機、單盲、對照研究對照組34例，經(jīng)典SSC治療治療組36例，經(jīng)典SSC治療+免疫刺激治療烏司他丁:20萬U/tid3天后10萬U/tid連續(xù)4天邁普新:1.6mg/bid3天后1.6mg/qd連續(xù)4天中國實用外科雜志2006,26(12):932~5編輯課件研究22004—2005年該院外科70例創(chuàng)傷、嚴重膿毒癥和M39研究(2)結(jié)果28天病死率比較:對照組死亡20例，治療組死亡13例，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)免疫學指標的比較:

編輯課件研究(2)結(jié)果28天病死率比較:對照組死亡20例，治療組死40治療組淋巴細胞計數(shù)在7d較對照組顯著升高,持續(xù)至28d,P<0.05編輯課件治療組淋巴細胞計數(shù)在7d較對照組顯著升高,持續(xù)至28d,P<41治療組CD14單核細胞HLA一DR水平在7d較對照組顯著升高,持續(xù)至治療后28d,P<0.05;編輯課件治療組CD14單核細胞HLA一DR水平在7d較對照組顯42對照組和治療組T淋巴細胞亞群的比較治療組CD4在7一14d較對照組明顯升高,P<0.05,治療組CD8則在14d較對照組明顯升P<0.05在治療7d內(nèi)，對照組和治療組的CD4／CD8差異沒有顯著性，P>0.05但是在停免疫調(diào)理治療后,治療組CD4／CD8會出現(xiàn)有意義的下降，P<0.05編輯課件對照組和治療組T淋巴細胞亞群的比較治療組CD4在7一14d較43存在的問題免疫狀態(tài)的監(jiān)測：量效關(guān)系的調(diào)整：目前對烏司他丁和邁普新的用藥劑量并不十分明確，更多情況下是基于治療者的經(jīng)驗。編輯課件存在的問題編輯課件44免疫檢測指標細胞因子特異性免疫非特異性免疫TNF-aIL-4IL-10NF-KB中粒吞噬功能IL-6IL-1/IL-1b/IL-1raTh1/Th2CD4+細胞計數(shù)白細胞移行抑制實驗IL-8IL-18HLA-DRCPR/PAIL-2MIFCD30補體C3/C4IL-16SOCSs細胞凋亡IkBa編輯課件免疫檢測指標細胞因子特異性免疫非特異性免疫TNF-aIL-445CD14+單核細胞HLA-DR當前檢測免疫功能的方法很多，但提出能夠定量地被作為診斷免疫抑制，而且籍此進行干預并能確切地改善預后的檢查，目前可能首推CD14+單核細胞HLA-DR。CD14+單核細胞HLA-DR是單核吞噬細胞表面的抗原表達，其功能是把經(jīng)單核吞噬細胞吞噬并處理后的抗原提呈給T輔助細胞，繼而激活包括T細胞、B細胞和吞噬細胞在內(nèi)的所有免疫細胞，所以足夠的HLA-DR表達對于特異性免疫和非特異性免疫系統(tǒng)功能都是十分重要的。編輯課件CD14+單核細胞HLA-DR當前檢測免疫功能的方法很多，但46

任重道遠嚴重膿毒癥救治編輯課件任重道遠編輯課件47ThankYou!編輯課件ThankYou!編輯課件48膿毒癥免疫紊亂與免疫調(diào)理治療

吳玉娟

編輯課件膿毒癥免疫紊亂與免疫調(diào)理治療49內(nèi)容2免疫調(diào)理治療4膿毒癥現(xiàn)狀及經(jīng)典治療31膿毒癥免疫紊亂機制33膿毒癥本質(zhì)的認識編輯課件內(nèi)容2免疫調(diào)理治療4膿毒癥現(xiàn)狀及經(jīng)典治療31膿毒癥免疫紊亂機50Epidemiology

Accountsforabout2%ofadmissionsbut59%requireintensivecare

$16.7billiondollarsintheUSalone

Mortalityis20-63%

2ndleadingcauseofdeathinnoncoronaryICU’s10thleadingcauseofoveralldeathMorecommoninmenandinnon-whitesPatientsarenowolder(57to60)Incidencehasincreasedfrom1979(164,000cases)to2000(660,000)-Annualizedincreaseof8.7%Deathshaveincreasedfrom43,579to120,491only56%gohomevs.78%NEJM2003;346:1546-54編輯課件Epidemiology

NEJM2003;346:15451全球每年有1800萬人發(fā)生嚴重感染,每天約1400人死于嚴重感染。我國的情況我國每年僅以院內(nèi)感染發(fā)生膿毒癥的病例就超過500萬，此數(shù)據(jù)不包括以感染為原發(fā)病就醫(yī)的門診和住院病人。

1989年衛(wèi)生部的統(tǒng)計資料編輯課件全球編輯課件52PurposeforExistence?

>750,000

casesofseveresepsis/year

intheUS*Future200,000400,000600,000800,0001,000,0001,200,0001,400,0001,600,0001,800,000200120252050Year100,000200,000300,000400,000500,000600,000SevereSepsisCasesUSPopulationSepsisCasesTotalUSPopulation/1,000TodayIncidenceprojectedtoincreaseby1.5%peryearAngusDC.CritCareMed.2001;29(7):1303-1310.編輯課件PurposeforExistence?>750,053

seversepsis的特點每年1.5%的速度增長高發(fā)病率$16.7billiondollarsintheUS高費用Mortalityis20-63%高病死率編輯課件seversepsis的特點每年1.5%的高發(fā)病率$54全世界的努力ACCP/SCCM19922002guidelines2004-2008DefinitionBarcelonadeclaration編輯課件全世界的努力ACCP/SCCM19922002guidel55SSCguidelinesscVasopressorsInotropictherapyInitialresuscitation(first6hours)MechanicalventilationrhAPCSteroidsGI/DVTDiagnosisAntibiotictherapySourceidentificationandcontrol.CritCareMed,2004,32(3):858-873編輯課件SSCguidelinesscVasopressorsIn56編輯課件編輯課件57對膿毒癥的認識20世紀80年代中期，膿毒癥被認為是機體對感染產(chǎn)生

過度的炎癥反應(yīng)，并歸咎于免疫細胞大量釋放促炎細胞素所致。因此，針對若干促炎細胞素進行了大量的所謂“抗炎治療”，但臨床研究效果不彰。十年近乎亢奮的“免疫調(diào)理治療”嘗試陷于低谷。就失敗的原因人們提出許多見解，如單克隆抗體作用的局限性;抗促炎細胞素潛在的危害性;人類與實驗動物間種屬的差異性等，但最具影響力并被普遍接受的是1996年Bone提出的所謂代償性抗炎反應(yīng)綜合征(CARS)假說。編輯課件對膿毒癥的認識20世紀80年代中期，膿毒癥被認為是機體對感染58對膿毒癥的認識因此，對膿毒癥患者不加區(qū)別地實施促炎(或抗炎)細胞素治療是不恰當?shù)?。CARS假說似乎能夠解釋抗炎治療“失敗”的原因，并且在一定程度上得到了臨床研究的支持。病程中晚期抗炎機制占優(yōu)勢免疫抑制出現(xiàn)病程早期促炎機制占優(yōu)勢過度的炎癥反應(yīng)CARS假說CritCareMed,1996,24:1125-8編輯課件對膿毒癥的認識病程中晚期病程早期CARS假說編輯課59按照該假說,免疫調(diào)理治療的任務(wù)是恢復促炎與抗炎機制的平衡,邏輯上通過早期予抗炎治療,晚期予免疫刺激治療有望逆轉(zhuǎn)膿毒癥的免疫抑制狀態(tài)。然而，一項觀察報告發(fā)現(xiàn)，對免疫抑制患者進行免疫刺激治療后，其免疫狀態(tài)和預后的變化與相伴的促炎／抗炎細胞素的變化是CARS假說完全無法解釋且相悖的。編輯課件按照該假說,免疫調(diào)理治療的任務(wù)是恢復促炎與抗炎機制的平衡,邏60入選標準：2000-2001年滿足嚴重膿毒癥診斷的患者治療組：HLA-DR<30%的20例患者，予SSC+TP-5/1mgIM.Qd，治療至單核細胞HLA-DR>50%或患者死亡；HLA-DR>30%的22例患者，僅予SSC治療對照組：10例健康成人血標本為正常對照結(jié)果：HLA-DR<30%者死亡5例存活15例HLA-DR>30%者全部存活中國危重病急救醫(yī)學，2003：135-138編輯課件入選標準：2000-2001年滿足嚴重膿毒癥診斷的患者61各組治療前后促炎/抗炎細胞因子的變化（x±s）所有患者細胞因子均高于健康對照經(jīng)免疫刺激治療且存活的患者,

TNF-a和IL-6不但沒有增加反而下降，其中IL-6下降最顯著。免疫狀態(tài)得不到改善且死亡的患者，各種細胞因子變化不明顯.兩類患者抗炎細胞因子的變化均不明顯。編輯課件各組治療前后促炎/抗炎細胞因子的變化（x±s）所有患者細62研究發(fā)現(xiàn)膿毒癥免疫抑制發(fā)生的機制與炎性細胞因子的平衡并無直接關(guān)系。顯然，這樣的結(jié)果是無法用CARS的促炎/抗炎平衡假說解釋的。CARS假說存在嚴重缺陷。CARS假說的積極意義在于警示了膿毒癥患者存在不同的免疫狀態(tài)和逆轉(zhuǎn)免疫抑制的重要性，但導致免疫抑制的機制不清。編輯課件研究發(fā)現(xiàn)膿毒癥免疫抑制發(fā)生的機制與炎性細胞因子的平衡并無直接63對膿毒癥的認識SIRSImmunosuppressSepsis同時存在相互制衡此消彼長編輯課件對膿毒癥的認識SIRSImmunosuppressSepsi64膿毒癥免疫抑制發(fā)生的機制究竟是什么？炎性細胞因子到底發(fā)揮了什么作用？合理的免疫調(diào)理治療方向究竟在哪里呢？得益于基礎(chǔ)研究的進步，近年正在逐步闡明，膿毒癥免疫抑制是由于淋巴細胞（包括B細胞和T細胞，特別是CD4細胞）及樹突狀細胞凋亡加速的結(jié)果。編輯課件膿毒癥免疫抑制發(fā)生的機制究竟是什么？炎性細胞因子到底發(fā)揮了什65免疫基礎(chǔ)知識（1）非特異性免疫和特異性免疫的區(qū)別非特異性免疫特異性免疫理化屏障皮膚粘膜及血腦胎盤骨髓胸腺；淋巴結(jié)、脾和

細胞吞噬細胞NK淋巴細胞等分子補體、IFN-a、b及

抗體、IFN-y等細胞因子

TNF等細胞因子發(fā)生與生具有，應(yīng)答發(fā)生快后天獲得，應(yīng)答發(fā)生較慢維持時間終身維持有自限性特異性無有記憶性無有穩(wěn)定性不因免疫次數(shù)而增減隨免疫次數(shù)增加而增強編輯課件免疫基礎(chǔ)知識（1）非特異性免疫和特異性免疫的區(qū)別編輯課件66免疫基礎(chǔ)知識(2)免疫系統(tǒng)在維持機體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定中具有重要作用。免疫穩(wěn)態(tài)要求免疫系統(tǒng)能及時對抗原發(fā)生有效反應(yīng)，并在抗原清除后迅速終止反應(yīng)而恢復到原有狀態(tài)，以便機體對新的抗原刺激再次發(fā)生免疫應(yīng)答。研究證實，在維持免疫穩(wěn)態(tài)過程中，淋巴細胞凋亡發(fā)揮著關(guān)鍵作用，尤其在免疫應(yīng)答終止機制中占有重要地位，免疫應(yīng)答結(jié)束后效應(yīng)細胞的清除等都是通過凋亡來實現(xiàn)的。凋亡與壞死的主要區(qū)別在于是否發(fā)生炎癥反應(yīng)。編輯課件免疫基礎(chǔ)知識(2)免疫系統(tǒng)在維持機體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定中具有重要作用67免疫基礎(chǔ)知識（3）T細胞識別抗原的MHC限制性TCRAg-MHC分子復合物MHC-IMHC-IIAPCAgAPC包括單核吞噬細胞、樹突狀細胞（DC），皮膚朗罕氏細胞等，指能向T或B細胞遞呈抗原的細胞。編輯課件免疫基礎(chǔ)知識（3）T細胞識別抗原的MHC限制性TCRMHC-68膿毒癥發(fā)病機制物理損傷化學物質(zhì)生物學損傷MONKCD8Th1激素TNF-a顆粒酶FasLIL-1、IL-6、G-CSF非細胞膜損傷特異性細胞免疫功能抑制淋巴細胞、樹突狀細胞加速凋亡細胞膜損傷細胞壞死膿毒癥白細胞延緩凋亡非特異性炎癥反應(yīng)亢進編輯課件膿毒癥發(fā)病機制物理損傷MONKCD8Th1激素TNF-a顆粒69TNF-a、Fas配體（FasL）、顆粒酶，以及腎上腺糖皮質(zhì)激素是引發(fā)細胞凋亡加速的主要誘導物，并且通過激活細胞漿內(nèi)的一種被稱作caspase來實現(xiàn)編輯課件TNF-a、Fas配體（FasL）、顆粒酶，以及腎上腺糖皮質(zhì)70小結(jié)目前我們對膿毒癥免疫狀態(tài)的認識是：病理損害打擊下的機體反應(yīng)將通過兩條不同途徑，同時造成特異性免疫系統(tǒng)抑制和非特異性炎癥反應(yīng)亢進。這種狀態(tài)可能也就是Bone提出的所謂的混合型抗炎癥反應(yīng)綜合征（mixedanti-inflammatoryresponsesyndrome，MARS）。中國危重病急救醫(yī)學,2004,16(2)67-69編輯課件小結(jié)目前我們對膿毒癥免疫狀態(tài)的認識是：中國危重病急救醫(yī)學,271對膿毒癥的認識19921996？SIRSCARSMARS編輯課件對膿毒癥的認識19921996？SIRSCARSMARS編輯72免疫抑制機制業(yè)已明確，在動物和人類膿毒癥中，大量CD4+T淋巴細胞和B淋巴細胞發(fā)生了凋亡，且并不依賴于淋巴細胞的成熟不同淋巴細胞亞群對不同性質(zhì)凋亡誘導物的敏感性并不相同。如:脾細胞和骨髓細胞的凋亡依賴于內(nèi)毒素或TNF-aCD4+T淋巴細胞凋亡依賴于Fas和FasL共同作用CD8+T淋巴細胞凋亡則需要TNF-a和TNF受體（TNFR）的結(jié)合腎上腺糖皮質(zhì)激素也可誘導T淋巴細胞的凋亡編輯課件免疫抑制機制業(yè)已明確，在動物和人類膿毒癥中，大量CD4+T淋73免疫抑制機制

TextTNF/TNFRCD4+T細胞\B細胞\APC減少CD4+T細胞激活障礙抗體產(chǎn)生減少抗原遞呈能力下降淋巴細胞凋亡T淋巴細胞克隆無反應(yīng),活性T細胞減少抑制性細胞因子分泌增加(IL-4.IL-10)

單核/巨噬細胞功能障礙CD4+T淋巴細胞功能性分化SteroidsFas/FasL編輯課件免疫抑制機制TextTNF/TNFR淋巴細胞凋亡74免疫抑制機制

Th1TNF-a、IL-2、IFN-rCD4+T細胞活化漂移Th2IL-4、IL-10抑制性細胞因子IL-4、IL-10進一步增加

細胞因子微環(huán)境的變化(IL-12\IL-10),決定CD4+T細胞的功能性分化編輯課件免疫抑制機制細胞因子微環(huán)境的變化(IL-12\IL-10),75樹突狀細胞、調(diào)節(jié)性T細胞與膿毒癥免疫抑制DC介導機體特異性免疫，決定T細胞的激活或抑制，成為效應(yīng)性、記憶性、無能的T細胞，或者T細胞凋亡。DC-T細胞間的相互作用以及在此過程中DC釋放的細胞因子決定效應(yīng)性T細胞向Thl或Th2分化。Tr:CD4+CD25+Tr主要由胸腺T細胞發(fā)育而來，在人和小鼠的外周血及脾臟T細胞中占5-10%。膿毒癥時機體表現(xiàn)為Tr細胞水平持續(xù)增高,而Tr具有免疫無反應(yīng)性及免疫抑制性兩大特性。主要通過細胞接觸機制及分泌抑制性細胞因子兩方面實現(xiàn),表現(xiàn)為對抗原刺激不發(fā)生反應(yīng)性增殖并且也不分泌細胞因子IL-2,抑制CD4+和CD8+T細胞的活化和增殖。編輯課件樹突狀細胞、調(diào)節(jié)性T細胞與膿毒癥免疫抑制DC介導機體特異性免76DC\Tr細胞在膿毒癥免疫功能紊亂中的相互作用Tr不僅可以直接抑制普通T細胞功能，而且可以對DC抗原呈遞功能進行抑制。受Tr作用而產(chǎn)生的凋亡細胞具有同步傳遞抑制信號功能且對排斤反應(yīng)中的DC具有免疫抑制特性，DC在捕獲這種凋亡細胞后隨即喪失分化成熟能力。DC是誘導刺激性T細胞還是Tr決定于DC的成熟程度。在炎性因子缺乏條件下，未成熟DC刺激靜息型T細胞增殖的能力很弱，這可能誘導免疫耐受。不成熟DC的這種負調(diào)節(jié)功能可通過免疫調(diào)控因子，如TGF-b、PGE2和IL-10得以加強。DC與Tr細胞在機體免疫調(diào)節(jié)中分工不同，但彼此間存在著對話和溝通，有著千絲萬縷的聯(lián)系。編輯課件DC\Tr細胞在膿毒癥免疫功能紊亂中的相互作用Tr不僅可以直77膿毒癥本質(zhì)

1炎癥反應(yīng)亢進免疫功能紊亂3神經(jīng)---內(nèi)分泌---免疫網(wǎng)絡(luò)2凝血功能障礙編輯課件膿毒癥本質(zhì)1炎癥反應(yīng)亢進3神經(jīng)---內(nèi)分泌---免疫網(wǎng)絡(luò)278免疫調(diào)理治療抗炎治療免疫刺激治療病死率降低?編輯課件免疫調(diào)理治療抗炎治療免疫刺激治療病死率降低?編輯課件79藥物選擇

1烏司他?。╱linastatin）

拮抗各種細胞毒性蛋白酶的作用拮抗氧自由基直接結(jié)合細菌毒素抑制凝血系統(tǒng)活化

3y干擾素本身就是促炎介質(zhì)存在加劇全身炎癥反應(yīng)的風險不宜用于膿毒癥免疫刺激治療2a1胸腺肽(thymosina1)促進淋巴細胞分化成熟和單核細胞抗原呈遞抑制白細胞增殖，誘導白細胞凋亡激活樹突狀細胞編輯課件藥物選擇1烏司他丁3y干擾素2a1胸腺肽編輯課件80第一個臨床多中心RCT研究膿毒癥免疫調(diào)理治療臨床研究協(xié)作組完成，包括全國21家三甲醫(yī)院ICU的多中心、前瞻、隨機、對照入選標準：進入ICU內(nèi)的嚴重膿毒癥(Marshall評分5—20)患者從2003年10月至2006年5月，共完成433份病例對照組：SSC治療治療組：SSC+烏司他丁、邁普新該研究分兩個階段完成，

中華醫(yī)學雜志,2007,87(7):451-7編輯課件第一個臨床多中心RCT研究膿毒癥免疫調(diào)理治療臨床研究協(xié)作組完81研究1Phase1分析Phase2可能系治療組藥物劑量不足所致SSC治療+烏司他丁:20萬U/tid邁普新:3.2mg/bid連續(xù)7天SSC治療+烏司他丁:10萬U/tid邁普新:1.6mg/bid連續(xù)7天編輯課件研究1Phase1分析Phase2可能系治療組藥物劑量不82研究1第1階段研究兩組主要預后指標比較(x±s)

變量治療組

對照組Ｐ值

(n=44)(n=47)

入組Ｍarshal評分6.96±2.428.34±3.460.028828d死亡率(％)53.1956.820.728290d死亡率(％)84.0998.23