2023學(xué)年河南省豫東豫北十所名校高三3月份第一次模擬考試生物試卷（含答案解析）

2023學(xué)年高考生物模擬試卷注意事項:1．答題前，考生先將自己的姓名、準考證號碼填寫清楚，將條形碼準確粘貼在條形碼區(qū)域內(nèi)。2．答題時請按要求用筆。3．請按照題號順序在答題卡各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試卷上答題無效。4．作圖可先使用鉛筆畫出，確定后必須用黑色字跡的簽字筆描黑。5．保持卡面清潔，不要折暴、不要弄破、弄皺，不準使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．抗維生素D佝僂病、多指、紅綠色盲以及白化病是人類的四種單基因遺傳病，下列關(guān)于這四種遺傳病的相關(guān)敘述，錯誤的是（）A．人群中抗維生素D佝僂病的發(fā)病率女性高于男性B．可在多指患者的家系中調(diào)查該病的遺傳方式C．紅綠色盲女性的一個致病基因來自母親，所以母親一定是該病患者D．白化病的患病機理可說明基因通過控制酶的合成間接控制生物性狀2．關(guān)于蛋白質(zhì)的敘述，錯誤的是A．rRNA能參與蛋白質(zhì)的生物合成B．DNA和蛋白質(zhì)是染色體的組成成分C．人體血漿中含有漿細胞分泌的蛋白質(zhì)D．核糖體上合成的蛋白質(zhì)不能在細胞核中發(fā)揮作用3．纖維素分子水解成葡萄糖需三類酶協(xié)同催化。下表信息體現(xiàn)出酶的催化特性是種類作用部位作用化學(xué)鍵葡聚糖內(nèi)切酶纖維素分子內(nèi)部β-1，4糖苷鍵葡聚糖外切酶纖維素分子非還原端β-1，4糖苷鍵β-葡萄糖苷酶纖維素二糖β-1，4糖苷鍵A．專一性 B．高效性 C．多樣性 D．作用條件溫和4．下圖為植物光合作用同化物蔗糖在不同細胞間運輸、轉(zhuǎn)化過程的示意圖。下列相關(guān)敘述正確的是A．蔗糖的水解有利于蔗糖順濃度梯度運輸B．單糖逆濃度梯度轉(zhuǎn)運至薄壁細胞C．ATP生成抑制劑會直接抑制圖中蔗糖的運輸D．蔗糖可通過單糖轉(zhuǎn)運載體轉(zhuǎn)運至薄壁細胞5．1928年，溫特（F．W．Went）用實驗證明胚芽鞘尖端有一種促進生長的物質(zhì)，它能擴散到瓊脂小方塊中，將處理過的小方塊放到切去頂端的胚芽鞘切面的一側(cè)，可以引起胚芽鞘向另一側(cè)彎曲生長。下圖為溫特的實驗示意圖，下列敘述正確的是（）A．實驗中利用瓊脂塊分離出促進生長的物質(zhì)并命名為生長素B．分別在黑暗和光照條件下進行實驗，實驗結(jié)果不相同C．需要設(shè)置空白對照組，以排除瓊脂塊對實驗結(jié)果的影響D．去尖端胚芽鞘彎曲側(cè)細胞的體積和數(shù)量均明顯大于另一側(cè)6．下圖是光合作用探索歷程中恩格爾曼和薩克斯的實驗示意圖，下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A．兩實驗均需要光的照射B．兩實驗均設(shè)置了對照C．兩實驗均可證明光合作用的產(chǎn)物有氧氣D．兩實驗“黑暗”處理的目的不同二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）白細胞介素是人體重要的淋巴因子，具有免疫調(diào)節(jié)、抑制腫瘤等多種功能。近年來科學(xué)家將藥用蛋白轉(zhuǎn)向植物生產(chǎn)，如圖是將人的白細胞介素基因?qū)腭R鈴薯中，培養(yǎng)生產(chǎn)白細胞介素的過程。（tsr為一種抗生素—硫鏈絲菌素的抗性基因）（1）提取人的白細胞介素基因適宜選用的限制酶是___________，不能使用限制酶SmaI的原因是___________。（2）除圖示方法外，也可從利用___________法構(gòu)建的cDNA文庫中獲取目的基因。獲得目的基因后可采用PCR技術(shù)大量擴增，需提供Taq酶和___________等。（3）將目的基因?qū)腭R鈴薯細胞常采用___________法，其原理是將目的基因?qū)隩i質(zhì)粒上的___________。（4）為篩選出含目的基因的馬鈴薯細胞，需要在培養(yǎng)基中添加___________。最終為了檢測目的基因是否在馬鈴薯中表達，可通過____________方法進行分子水平的檢測。8．（10分）二倍體生物（2n）體細胞中染色體多一條稱為三體（2n+1），染色體少一條稱為單體（2n–1）。三體在減數(shù)分裂時，三條同源染色體中的任意兩條移向一極，另一條移向另一極。單體在減數(shù)分裂時，未聯(lián)會的染色體隨機移向一極。野生煙草（2n=48）種群中普遍存在著各對染色體的相應(yīng)三體與單體植株，常用來測定基因所在的染色體。現(xiàn)有若干純合綠株（G）、黃綠株（g）的二倍體、三體和單體植株，假設(shè)各種配子育性相同，各種基因型的個體均能成活?；卮鹣铝袉栴}：（1）野生煙草中有___________種三體植株。若選用純合的三體與純合的二倍體雜交，能不能只用一代雜交實驗確定G/g基因所在的染色體?___________。（2）若選用單體與二倍體進行一代雜交實驗可以測定G/g基因所在的染色體，請簡要寫出實驗思路、預(yù)期實驗結(jié)果及結(jié)論___________。9．（10分）干擾素是一種淋巴因子，可用于治療病毒感染和癌癥?？茖W(xué)家利用大腸桿菌生產(chǎn)人體干擾素的操作過程如下，請回答：（1）大腸桿菌常被作為基因工程的受體細胞，因其具有_______特點。在人體淋巴細胞中獲得干擾素mRNA后，經(jīng)_______過程獲得干擾素cDNA。如果用人體發(fā)育某個時期的mRNA獲得多種cDNA片段，與載體連接后儲存在一個受體菌群中，這個受體菌群體叫做_______。（2）請舉出在生物體外重復(fù)②③④過程進行DNA克隆和體內(nèi)DNA復(fù)制的兩點不同之處_______、_______。（3）在利用甲、乙獲得丙的過程中，常用兩種限制酶同時切割甲和乙，避免發(fā)生_______，而獲得更多的重組質(zhì)粒。將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌之前，需用Ca2+處理，使細胞處于_______的生理狀態(tài)，稱為感受態(tài)。完成導(dǎo)入一段時間后，從大腸桿菌細胞中提取蛋白質(zhì)，采用_______技術(shù)進行檢測，若有雜交帶出現(xiàn)則表明干擾素基因成功表達。10．（10分）圖示pIJ732是一種常用質(zhì)粒，其中tsr為硫鏈絲菌素（一種抗生素）抗性基因；mel為黑色素合成基因，其表達能使白色的鏈霉菌菌落變成黑色菌落；而限制酶SacⅠ、SphⅠ，BglⅠ在pIJ732上分別只有一處識別序列?；卮鹣铝袉栴}。表1pIJ732pZHZ8BglⅡ1．7kb2．7kb表2固體培養(yǎng)基中硫鏈絲菌素濃度（μg/mL）312113不含質(zhì)粒的鏈霉菌生長狀況+++++++++--“+”表示生長；“-”表示不生長。（1）限制性內(nèi)切核酸酶可以識別雙鏈DNA中特定核苷酸序列，并使每條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間_______的斷裂，切割形成的末端有_______兩種。（2）以SacⅠ和SphⅠ切取的目的基因置換質(zhì)粒PIJ732上長度為3．4kb的SacⅠ/sphⅠ片段，構(gòu)建重組質(zhì)粒pZHZ8。上述兩種質(zhì)粒的限制酶酶切片段長度見表1。由此判斷目的基因的片段長度為_____kb，判定目的基因中含有一個BglⅡ切割位點的理由是____________________________。（3）導(dǎo)入目的基因時，首先用______處理鏈霉菌使其成為感受態(tài)細胞，再將重組質(zhì)粒pZHZ8溶于________中與感受態(tài)細胞混合，在一定的溫度下可以促進鏈霉菌完成______過程。（4）不含質(zhì)粒的鏈霉菌在含硫鏈絲菌素的固體培養(yǎng)基上生長狀況如表2所示。若要篩選導(dǎo)入pzHZ8的鏈霉菌細胞，所需硫鏈絲菌素濃度至少應(yīng)在______μg/mL以上，挑選成功導(dǎo)入pZHZ8的鏈霉菌的具體方法是________________________。11．（15分）近些年來，現(xiàn)代生物技術(shù)突飛猛進地發(fā)展，愈來愈受到人們的關(guān)注?；卮鹣铝袉栴}：（1）一分子的β—胡蘿卜素在人或動物的____________、____________等器官被氧化成兩分子的維生素A，因此，胡蘿卜素可以用來治療缺乏維生素A而引起的各種疾病。（2）提取薄荷油常采用萃取的方法。萃取過程常采用有機溶劑作為萃取劑，其原理是____________。在萃取過程中會用到冷凝管，其作用是________________________。（3）為確定分離獲得的是纖維素分解菌，需進行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實驗，同時還要進行纖維素酶活力的測定，測定纖維素酶活力時，一般采用的方法是________________________。（4）若要分離纖維素酶，可根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小，采用____________法；也可以根據(jù)____________和分子大小、形狀的不同采用電泳方法分離。

2023學(xué)年模擬測試卷參考答案（含詳細解析）一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、C【答案解析】【分析】傳：如人類外耳道多毛癥，其特點是：傳男不傳女。

二、調(diào)查人類遺傳病時，最好選取群體中發(fā)病率相對較高的單基因遺傳病，如色盲、白化病等；若調(diào)查的是遺傳病的發(fā)病率，則應(yīng)在群體中抽樣調(diào)查，選取的樣本要足夠的多，且要隨機取樣；若調(diào)查的是遺傳病的遺傳方式，則應(yīng)以患者家庭為單位進行調(diào)查，然后畫出系譜圖，再判斷遺傳方式?！绢}目詳解】A、抗維生素D佝僂病的遺傳方式是伴X染色體顯性遺傳，人群中女性的發(fā)病率高于男性，A正確；B、調(diào)查遺傳病的遺傳方式需分析致病基因在家系中的傳遞規(guī)律，故需在患者家系中進行調(diào)查，B正確；C、人類紅綠色盲的遺傳方式是伴X染色體隱性遺傳，一個致病基因來自母親，但母親的基因型可能是雜合子，所以母親不一定是患者，C錯誤；D、正常人體內(nèi)在酪氨酸酶的催化下，酪氨酸轉(zhuǎn)化為黑色素，白化病患者體內(nèi)控制酪氨酸酶合成的基因突變，導(dǎo)致黑色素不能合成，可說明基因通過控制酶的合成間接控制生物的性狀，D正確。故選C?！敬鸢更c睛】本題考查常見的人類遺傳病及調(diào)查人類遺傳病的相關(guān)知識，要求考生識記幾種常見人類遺傳病的類型、特點及意義；識記調(diào)查人類遺傳病的調(diào)查對象、調(diào)查內(nèi)容及范圍，能結(jié)合所學(xué)的知識準確判斷各選項。2、D【答案解析】

A．核糖體的組成成分rRNA和蛋白質(zhì)，而蛋白質(zhì)在核糖體上合成，A正確；B．染色體的主要組成成分是DNA和蛋白質(zhì)，B正確；C．漿細胞分泌的蛋白質(zhì)是抗體，可以進入人體血漿中，C正確；D．核糖體上合成的蛋白質(zhì)能在細胞核中發(fā)揮作用，如DNA復(fù)制時所需的DNA聚合酶，解旋酶等，D錯誤?！敬鸢更c睛】蛋白質(zhì)是細胞內(nèi)四大有機物（蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、糖類、核酸）中含量最高的一類有機化合物，其種類多種多樣，在細胞中承擔的功能也是多種多樣的，蛋白質(zhì)的功能概括地說就是生命活動的主要體現(xiàn)者，具體而言其有兩方面的功能，一是起結(jié)構(gòu)蛋白的作用，二是起功能蛋白的作用。（一）結(jié)構(gòu)蛋白：參與生物體結(jié)構(gòu)的構(gòu)建，它是構(gòu)成細胞和生物體結(jié)構(gòu)的重要物質(zhì)，例如，肌肉、頭發(fā)、羽毛、蛛絲等的成分主要就是結(jié)構(gòu)蛋白；（二）功能蛋白：列舉部分功能蛋白如下：1、運輸?shù)鞍祝簠⑴c物質(zhì)運輸?shù)墓δ?，能使物質(zhì)在細胞和生物體內(nèi)自由、準確地轉(zhuǎn)移。主要為各種載體、血紅蛋白等；2、催化蛋白：催化特定的生化反應(yīng)，降低反應(yīng)的活化能，使反應(yīng)快速高效地進行。主要為各種酶類；3、免疫蛋白：參與免疫應(yīng)答反應(yīng)，能使生物體有效地抵御有害生物或物質(zhì)的入侵，主要為各種抗體等；4、調(diào)節(jié)蛋白：參與信息傳遞過程，能夠精確地調(diào)節(jié)機體的生命活動，主要為胰島素、甲狀腺激素、生長激素、腎上腺皮質(zhì)激素等。3、A【答案解析】

酶是由紅細胞產(chǎn)生的具有催化作用的有機物，大多數(shù)酶是蛋白質(zhì)，少數(shù)每是RNA；酶的催化作用具有高效性、專一性，據(jù)此答題。【題目詳解】根據(jù)題干信息和表格信息分析，纖維素分子水解成葡萄糖需三類酶協(xié)同催化，三種酶（葡聚糖內(nèi)切酶、葡聚糖外切酶、β-葡萄糖苷酶）都作用于β-1，4糖苷鍵，但是作用的部位不同，即三種酶作用于不同部位的β-1，4糖苷鍵，說明酶的催化作用具有專一性。故選A。4、A【答案解析】

由圖可知，蔗糖通過胞間連絲順濃度梯度從伴胞進入篩管；蔗糖的水解產(chǎn)物可以順濃度梯度從篩管進入薄壁細胞?！绢}目詳解】A、進入篩管的蔗糖水解，有利于降低篩管中蔗糖的含量，有利于蔗糖順濃度梯度運輸，A正確；B、由圖可知，單糖順濃度梯度轉(zhuǎn)運至薄壁細胞，B錯誤；C、由圖可知，蔗糖順濃度梯度運輸，故不需要消耗能量，ATP生成抑制劑不會直接抑制圖中蔗糖的運輸，C錯誤；D、載體具有特異性，蔗糖（二糖）不能通過單糖轉(zhuǎn)運載體轉(zhuǎn)運至薄壁細胞，D錯誤。故選A。5、C【答案解析】

把燕麥胚芽鞘尖端切下，放在瓊脂薄片上，將瓊脂小塊放在去頂?shù)呐哐壳室粋?cè)，發(fā)現(xiàn)芽鞘逐漸向放置瓊脂小塊的對側(cè)彎曲生長，說明胚芽鞘頂端能產(chǎn)生影響生長的物質(zhì)，該物質(zhì)能自頂端向下運輸，促進胚芽鞘生長。但是如果放上的是沒有接觸過胚芽鞘尖端的瓊脂塊，胚芽鞘既不生長也不彎曲。溫特認為：胚芽鞘尖端能產(chǎn)生某種類似動物激素的物質(zhì)，命名為生長素。【題目詳解】A、實驗中沒有將生長素從瓊脂塊中分離出來，溫特只是發(fā)現(xiàn)接觸過尖端的瓊脂塊中有促進生長的物質(zhì)，并命名為生長素，A錯誤；B、分別在黑暗和光照條件下進行實驗，實驗結(jié)果相同，B錯誤；C、需要設(shè)置空白對照組，用空白瓊脂塊重復(fù)以上實驗，以排除瓊脂塊對實驗結(jié)果的影響，C正確；D、生長素的作用機理在于促進細胞的伸長生長，不促進細胞分裂，故去尖端胚芽鞘彎曲側(cè)細胞的體積明顯大于另一側(cè)，數(shù)量相同，D錯誤。故選C。【答案點睛】本題考查了植物激素調(diào)節(jié)的有關(guān)知識，要求學(xué)生識記植物生長素發(fā)現(xiàn)的過程，相關(guān)科學(xué)家的實驗以及實驗結(jié)論，屬于基礎(chǔ)題。6、C【答案解析】

光合作用的發(fā)現(xiàn)歷程：（1）普利斯特利通過實驗證明植物能凈化空氣；薩克斯的實驗也可證明光是光合作用的必要條件；（2）梅耶根據(jù)能量轉(zhuǎn)換與守恒定律明確指出植物進行光合作用時光能轉(zhuǎn)換為化學(xué)能；（3）薩克斯通過實驗證明光合作用的產(chǎn)物有淀粉；（4）恩格爾曼采用水綿、好氧細菌和極細光束進行對照實驗，發(fā)現(xiàn)光合作用的場所是葉綠體；（5）魯賓和卡門采用同位素標記法進行實驗證明光合作用釋放的O2來自水；（6）卡爾文采用同位素標記法探明了CO2的固定過程中碳元素的轉(zhuǎn)移途徑。【題目詳解】A、兩實驗均需要光的照射，A正確；B、兩實驗中均設(shè)置了對照實驗，薩克斯的實驗中照光部分和遮光部分形成對照，B正確；C、恩格爾曼的實驗可證明光合作用的產(chǎn)物有氧氣，薩克斯的實驗證明光合作用的產(chǎn)物有淀粉，C錯誤。D、兩實驗均需進行“黑暗”處理，但薩克斯的實驗是為了消耗細胞中原有淀粉，而恩格爾曼的實驗是為了用極微細的光束照射，D正確；故選C。二、綜合題：本大題共4小題7、PstⅠ和HindⅢ限制酶SmaⅠ酶切位點位于白細胞介素基因中部，使用它會造成目的基因斷裂反轉(zhuǎn)錄引物農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化T-DNA硫鏈絲菌素抗原—抗體雜交【答案解析】

分析題圖，圖示表示人的白細胞介素基因表達載體的構(gòu)建過程，載體和目的基因都有限制酶PstⅠ和HindⅢ的切割位點，所以切割載體和目的基因時用限制酶PstⅠ和HindⅢ，再用DNA連接酶連接目的基因和運載體形成重組載體。獲取目的基因的方法包括從基因文庫中獲取、cDNA文庫法、供體細胞的DNA中直接分離基因（鳥槍法）。農(nóng)桿菌通過侵染植物傷口進入細胞后，可將Ti質(zhì)粒的T-DNA插入到植物基因組中?！绢}目詳解】（1）載體和目的基因都有限制酶PstⅠ和HindⅢ的切割位點，使用限制酶SmaI則會破壞目的基因；（2）目的基因的獲取可以采用cDNA文庫法（即逆轉(zhuǎn)錄法），指以某生物成熟mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄而成的cDNA序列的重組DNA群體，采用PCR技術(shù)大量擴增，需提供Taq酶和引物等；（3）將目的基因?qū)胫参锛毎２捎棉r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，利用的是Ti質(zhì)粒上的T-DNA；（4）構(gòu)建好的表達載體含有硫鏈絲菌素的抗性基因，因此可以在培養(yǎng)基中添加硫鏈絲菌素進行篩選，為檢測目的基因是否順利表達，可以通過抗原-抗體雜交技術(shù)?！敬鸢更c睛】解答本題的關(guān)鍵是分析題圖中的限制酶切割位點，明確目的基因和質(zhì)粒都有PstⅠ和HindⅢ的切割位點，從而可以用于構(gòu)建基因表達載體，其他的酶切位點則會破壞目的基因或抗性基因。8、24不能實驗思路：選用各對染色體相應(yīng)的綠株單體純合植株分別與黃綠株二倍體純合植株雜交，觀察各雜交組合的子代表現(xiàn)型及比例預(yù)期實驗結(jié)果及結(jié)論：若雜交組合的子代全為綠株時，說明G/g基因就不位于相應(yīng)染色體單體所缺少的那條染色體上；若某雜交組合所得子代的表現(xiàn)型及比例為綠株：黃綠株=1：1時，說明G/g基因就位于相應(yīng)染色體單體所缺少的那條染色體上【答案解析】

根據(jù)題意分析可知：二倍體生物（2n）體細胞中，染色體多一條稱為三體，染色體少一條稱為缺體，屬于染色體數(shù)目變異。在減數(shù)分裂過程中，等位基因隨同源染色體的分離而分離，分配到兩個子細胞中去。三體在減數(shù)分裂時，三條同源染色體中的任意兩條移向一極，另一條移向另一極。單體在減數(shù)分裂時，未聯(lián)會的染色體隨機移向一極?！绢}目詳解】（1）野生煙草中2n=48，說明有24對同源染色體，每一對同源染色體多一條都會形成一種三體，故野生煙草中有24種三體植株。無論G/g基因在不在三體上，純合的三體與純合的二倍體雜交，后代都不會發(fā)生性狀分離，所以不能只用一代雜交實驗確定G/g基因所在的染色體。（2）各對染色體相應(yīng)的綠株單體純合植株中，若G基因在單體上，則單體基因型為G0，能產(chǎn)生含G基因和不含G基因的兩種數(shù)量相等的配子，若G基因不在單體上，則單體基因型為GG，產(chǎn)生的配子都含G基因，黃綠株的二倍體基因型為gg，若為G0×gg，后代會出現(xiàn)黃綠株：綠株=1：1，而GG×gg，后代均為綠株。所以可選用各對染色體相應(yīng)的綠株單體純合植株分別與黃綠株二倍體純合植株雜交，觀察各雜交組合的子代表現(xiàn)型及比例。若雜交組合的子代全為綠株時，說明G/g基因不位于相應(yīng)染色體單體所缺少的那條染色體上；若某雜交組合所得子代的表現(xiàn)型及比例為綠株：黃綠株=1：1時，說明G/g基因就位于相應(yīng)染色體單體所缺少的那條染色體上?！敬鸢更c睛】本題考查三體和單體在育種中的應(yīng)用，意在考查考生設(shè)計實驗判斷基因位置的能力。9、單細胞、繁殖快、遺傳物質(zhì)較少逆轉(zhuǎn)錄cDNA文庫體外DNA克隆不需要解旋酶（高溫變性解旋）DNA雙鏈完全解開后再復(fù)制（不是邊解旋邊復(fù)制）質(zhì)粒和目的基因的自身連接（質(zhì)粒和質(zhì)粒之間、目的基因和目的基因之間的連接）能吸收周圍環(huán)境中的DNA分子抗原-抗體雜交【答案解析】

基因工程是在分子水平上對基因進行操作的復(fù)雜技術(shù)，是將外源基因通過體外重組后導(dǎo)入受體細胞內(nèi)，使這個基因能在受體細胞內(nèi)復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯表達的操作。基因工程四步驟包括：目的基因的獲取、基因表達載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的檢測與表達；分析題圖可知，過程①表示逆轉(zhuǎn)錄；過程②表示PCR中的變性階段，使模板DNA變?yōu)閱捂湥贿^程③表示PCR中的退火和延伸階段，使引物和模板DNA結(jié)合形成新的DNA；過程④表示新合成的DNA繼續(xù)作為模板DNA參與復(fù)制擴增；【題目詳解】（1）大腸桿菌因其具有單細胞、繁殖快、遺傳物質(zhì)較少的特點被用作基因工程的受體細胞；mRNA經(jīng)過反轉(zhuǎn)錄可以獲得cDNA；如果用人體發(fā)育某個時期的mRNA獲得多種cDNA片段，與載體連接后儲存在一個受體菌群中，這個受體菌群體叫做cDNA文庫；（2）②③④表示PCR技術(shù)的DNA克隆，與體內(nèi)DNA復(fù)制相比，體外DNA克隆不需要解旋酶，而是利用高溫變性解旋；DNA克隆是將DNA雙鏈完全解開后再復(fù)制，而不是邊解旋邊復(fù)制；（3）常用兩種限制酶切割DNA片段和質(zhì)粒的目的是防止質(zhì)粒和目的基因的自身連接；用Ca2+處理大腸桿菌是為了使其能吸收周圍環(huán)境中的DNA分子的生理狀態(tài)，稱為感受態(tài)細胞；導(dǎo)入目的基因并提取蛋白質(zhì)后，采用抗原-抗體雜交技術(shù)檢測目的基因的表達。【答案點睛】本題考查基因工程的基本操作過程以及PCR體外DNA克隆技術(shù)的流程。要求學(xué)生熟練掌握課本知識，并且結(jié)合題干與題圖所示的信息分析各個操作流程，同時掌握檢驗?zāi)康幕虮磉_的各項方法和檢驗對象。10、磷酸二酯鍵黏性末端和平末端4．4pIJ732上的原有BglⅡ位點被目的基因置換得到的環(huán)狀pZH28，仍能被BglⅡ切割成一條線段Ca2+緩沖液轉(zhuǎn)化4根據(jù)導(dǎo)入pIJ732的鏈霉菌菌落呈黑色、導(dǎo)入pZHZ8的鏈霉菌菌落呈白色的特點，通過觀察菌落的顏色進行挑選【答案解析】

該題主要考察了基因工程的相關(guān)操作，基因工程的基本操作步驟為目的基因的獲取、基因表達載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)氲绞荏w細胞、目的基因的檢測與鑒定。限制性核酸內(nèi)切酶主要作用于識別序列的磷酸二酯鍵，切割完以后可能會產(chǎn)生黏性末端或者是平末端。將目的基因?qū)胧荏w細胞時，常常使用Ca2+使得受體細胞成為感受態(tài)細胞?！绢}目詳解】（4）限制性內(nèi)切核酸酶是作用于其所識別序列中剪切位點的磷酸二酯鍵，不同的限制酶可以獲得不同的末端，主要分為黏性末端和平末端；（2）由題干可知，質(zhì)粒PIJ732上具有長度為3．4kb的SacⅠ/sphⅠ片段，使用SacⅠ和SphⅠ切取質(zhì)粒會多置換下3.4kb的片段，而BglⅡ在原質(zhì)粒和重組質(zhì)粒上的切割片段相差4.3kb，介于BglⅡ的識別位點位于SacⅠ和SphⅠ之間，所以推測目的基因的片段長度應(yīng)該為4.3+3.4=4.4kb；在表格中可以反應(yīng)出重組質(zhì)粒可以被BglⅡ限制酶切割，切割后稱為一條線段，但原有質(zhì)粒上的相關(guān)片段已經(jīng)被SacⅠ和SphⅠ置換為目的基因，因此推測目的基因中也含有4個BglⅡ切割位點；（3）將目的基因?qū)氲绞荏w細胞之前，需要將受體細胞用Ca2+處理使得受體細胞成為感受態(tài)細胞；然后重組質(zhì)粒要溶解到緩沖液中與感受態(tài)細胞融合；從而促進鏈霉菌完成轉(zhuǎn)化的過程；（4）根據(jù)圖中的表格可知，要想對重組的鏈霉菌細胞進行篩選，應(yīng)該滿足不含質(zhì)粒的鏈霉菌無法生長的要求，因此所需硫鏈絲菌素濃度至少應(yīng)在4μg/mL以上；在該質(zhì)粒上存在一個mel基因，其表達的產(chǎn)物會使得白色的鏈霉菌菌落變成黑色菌落，所以導(dǎo)入pIJ732的鏈霉菌菌落呈黑色，而重組質(zhì)粒p