高中生物00知識講解-物質(zhì)的提取、分離和鑒定專題

高考總復(fù)習(xí)物質(zhì)的提取、分離和鑒定專題編稿：宋辰霞審稿：閆敏敏【考綱要求】.掌握細(xì)胞中一些化合物的鑒定原理及方法.簡述綠葉中色素提取和分離的實驗過程，掌握實驗注意事項.解釋DNA粗提取的方法及DNA^定原理.簡述蛋白質(zhì)的提取和分離技術(shù)5,簡述植物精油的提取過程【考點梳理】考點一、物質(zhì)的提取、分離和鑒定的一般流程和方法過注堇選送II■我所用,部反衣條件實金熄基蟀外加注注劑漆迷失水屋析絲折莘旅【高清課堂：物質(zhì)的提取分離和鑒定專題411404物質(zhì)的提取、分離和鑒定實驗流程及方法】過注堇選送II■我所用,部反衣條件實金熄基蟀外加注注劑漆迷失水屋析絲折莘旅遙梃I質(zhì)含至高一身把色干擾考點二、綠葉中色素的提取和分離.實驗原理：（1）提取原理：光合色素能溶解在有機溶劑無水乙醇中，可用無水乙醇來提取色素。（2）分離原理：用紙層析法分離,不同的色素在層析液中的溶解度不同,溶解度高的色素隨層析液在濾紙上的擴散速度快，溶解度低的色素擴散速度慢,這樣，在擴散的過程不同的色素會分離開。.實驗材料：新鮮的綠色葉片（如菠菜的綠葉）注意：一定要選取新鮮、濃綠的植物葉片,這樣的葉片光合色素含量高。3,實驗流程及結(jié)果層析前的準(zhǔn)備及層析①色素的提取一②制備濾紙條一③畫濾液細(xì)線一④紙層析法分離色素一⑤觀察并記錄結(jié)果層析前的準(zhǔn)備及層析要點詮釋：（1）色素的提取和分離一一十個“為什么”：①為什么色素提取時加丙酮或無水乙醇？（色素溶于有機溶劑）②為什么加二氧化硅?（使研磨充分）③為什么加CaCO?（防止葉綠素受到破壞）④為什么濾紙要剪去兩角？（使分離出的色素帶整齊）⑤為什么濾液細(xì)線畫的越細(xì)越齊越好？（使分離出的色素帶整齊）⑥為什么不要讓層析液沒及濾液細(xì)線？（因為含有色素的濾液溶于層析液中不能形成色素帶）⑦為什么紙層析時要用培養(yǎng)皿等蓋上燒杯？（防止層析液中的丙酮揮發(fā)）⑧為什么色素會在濾紙條上分離開？（不同色素的溶解度不同，在濾紙條上的擴散速度不同）⑨為什么濾紙條要避光保存？（色素見光分解）

⑩為什么試驗后洗手？(接觸了層析液等有毒的化學(xué)藥品)2)色素帶在濾紙上排列的先后順序巧記：胡、黃、a、b3)色素帶寬窄：葉綠素a最寬，胡蘿卜素最窄【高清課堂：物質(zhì)的提取分離和鑒定專題411404DNA粗提取和鑒定實驗】考點三、DNA勺粗提取和鑒定.實驗材料：最好選取DN哈量高、易破碎且無顏色干擾的生物組織.實驗原理：1)破碎細(xì)胞：①動物細(xì)胞的破碎動物細(xì)胞在低濃度溶液(蒸儲水)中吸水漲破，同時，攪拌的機械作用可加速動物細(xì)胞的破裂(包括細(xì)胞膜和核膜的破裂)，于是DNAt釋放出來，但它們往往與蛋白質(zhì)結(jié)合在一起。②植物細(xì)胞的破碎在切碎的植物組織中加入一定量的洗滌劑和食鹽，進(jìn)行充分的攪拌和研磨。加入洗滌劑可以瓦解細(xì)胞膜，從而釋放出DNA加入食鹽能夠使DNA§解且可使DNA與蛋白質(zhì)分離。(2)去除雜質(zhì)，初步提純：DNA^蛋白質(zhì)等在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同，0.14mol/L時，DNA的溶解度最小，可通過控制NaCL溶液的濃度來去除雜質(zhì)。禽解度愉可先向得到的濾液中加入NaCL,調(diào)整NaCL的濃度為DNA§解度較高時(2mol/L)中，溶解DNA再加入蒸儲水，將NaCl溶液調(diào)整禽解度愉可先向得到的濾液中加入NaCL,調(diào)整NaCL的濃度為DNA§解度較高時(2mol/L)中，溶解DNA再加入蒸儲水，將NaCl溶液調(diào)整NaCL的濃度為DN夠解度最低時(0.14mol/L),使DNAW出。,補充知識，了解即可◎:去除雜質(zhì)還可選擇其它方法：：一：直接在濾液中加入嫩肉粉，反應(yīng)10?15分鐘，嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能夠分解蛋白質(zhì)。：■二：將濾液放在60c?75c的恒溫水浴箱中保溫10?15分鐘(此溫度下蛋白質(zhì)變性析出，DNA不：,受影響)，注意嚴(yán)格控制溫度范圍。：(3)進(jìn)一步提純：DNM溶于酒精溶液，但細(xì)胞內(nèi)的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精，可向DNA§液中加入冷酒精，使DNAW出。(4)鑒定：在沸水浴的條件下,3.實驗過程，如下圖：DNAM二苯胺會被染成藍(lán)色了玉曩菩心嗚上如昭瀛*蛇L痂戰(zhàn)香蕉姜慕花項SDSe破好餐電睫磨像秀向覆受KEDTM俵妙DIVAl^TnvlZLNacLi浮解DNA濾液：含DNA了酒箱新生DNAJf裝物新牝DNAik制物12inal/LNacL聿解口痔我.■帶(1)破碎細(xì)胞，獲得含DNA勺濾液(破碎動物細(xì)胞及植物細(xì)胞的原理與方法不同)(2)去除濾液中的雜質(zhì)，進(jìn)行初步提純［在濾液中加入NaCl,使其濃度為2mol/L,過濾除去不溶的雜質(zhì)一再加入蒸儲水，調(diào)節(jié)NaCl溶液濃度為0.14mol/L,析出DNA^,過濾一再用2mol/L的NaCl溶液溶解DNM過濾］注意：析出含DNA勺黏稠物時，蒸儲水要沿?zé)瓋?nèi)壁緩緩地慢慢地加入，不能一次快速加入，否則會影響實驗結(jié)果。(3)用冷酒精使DNAW出，進(jìn)一步提純，含DNA勺絲狀物95型酒精［將處理后的溶液過濾后，加入與濾液體積相等的、冷卻的酒精溶液(體積分?jǐn)?shù)為95%),靜置后溶液中會出現(xiàn)白色絲狀物，這就是粗提取的DNA用玻璃棒沿一個方向攪拌，卷起絲狀物，并用濾紙吸去上面的水分］注意：向DN夠液中加入冷酒精后，搖動或攪拌用力不可過猛，以防DN后子斷裂?？诨趦旱摹龆ǎ墼O(shè)置對照實驗：取兩支試管，各加入等量濃度為2mol/L的NaCl溶液，將絲狀物放入其中一支試管中，用玻璃棒攪拌，使絲狀物溶解并向兩支試管中各加入一定量的二苯胺試劑。然后將兩支試管置于沸水中加熱，待試管冷卻后，比較兩支試管中溶液顏色的變化，會觀察到含DNA的試管中溶液變藍(lán)］注意：二苯胺放置時間不宜過長，最好現(xiàn)配現(xiàn)用，否則二苯胺會變成淺藍(lán)色，影響鑒定結(jié)果。要點詮釋：(1)用動物細(xì)胞做實驗時，需兩次加入蒸儲水，它們的作用不同①第一次加蒸儲水的目的是為了使外界溶液濃度低于細(xì)胞內(nèi)的濃度，使動物細(xì)胞漲破，釋放出DNA②第二次加蒸儲水的目的是調(diào)整NaCl溶液的濃度至0.14mol/L,使DNA的溶解度達(dá)到最低點，盡量析出溶液中的DNA(2)實驗中共有3次過濾第1、第3次要獲取含DNA的濾液，使用1?2層紗布；第2次要獲取DNA黏稠物，應(yīng)使用多層紗布。(3)實驗中有多次攪拌除最后鑒定DNA寸的一次攪拌外，其余的攪拌都應(yīng)朝一個方向，并且在析出DNADNA再溶解和提取過程中，攪拌都要輕緩，玻璃棒不要直插燒杯底部，防止DNA分子斷裂。(4)實驗中出現(xiàn)的絲狀物實驗中出現(xiàn)的絲狀物是DNA但它的直徑比DN冊子的直徑大許多倍。實際上絲狀物中的每一根“絲”都是由許多DNA分子聚集在一起形成的，絲狀物的直徑大小并不表示一個DNA^子直徑的大小?？键c四、血紅蛋白的提取和分離.實驗材料：血紅蛋白含量較高的哺乳動物成熟的紅細(xì)胞(從血液中獲取)

.實驗方法及原理：(1)實驗方法及原理：①提?。杭t細(xì)胞在蒸儲水和甲苯的作用下破裂，釋放出血紅蛋白。得到含有血紅蛋白的混合液后，對混合液進(jìn)行離心，出現(xiàn)分層情況，分離出第3層的紅色透明液體，即是血紅蛋白的水溶液。出打工由酒城②粗分離：透析法，透析袋能使小分子自由進(jìn)出，而將大分子保留在袋內(nèi)，從而去除一些相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)。③純化：凝膠色譜法用凝膠珠作為介質(zhì)，根據(jù)分子的大小分離蛋白質(zhì)混合物，如下圖：相對分子的n相對分子的n較小的擄門峭山廣擴儆作加近人糠恢銀粒內(nèi)部而被滯幅.相對分子質(zhì)量收大的最白城被推m/隧股帆粒一外麗,在耐粒之r-“IfliOO過rb*(i)蛋白質(zhì)泡合物上柱.(2)■盛開始、相對分手強減較小的蛋白質(zhì)trnm人豪版顆粒內(nèi),相對介于隨m校大的米白城則戰(zhàn)排限于朝槐之外r(3)相對分子由St較小的豳曰近被沛言.栩?qū)Ψ肿痈形栎^大的蛋白質(zhì)向下移動.(4＞榴對外廣隨醺不同的分「筑全分開?(5)HI對分「雨量蛟大的朋白順行程校短*已從第析檢中流脫出妾，府時分片燒臉較小的空r'J詼汪生箝港中b凝膠珠實際上是一些微小的多孔球體，在小球體內(nèi)部有許多貫穿的通道，蛋白質(zhì)分子在凝膠中的運動情緩沖溶液進(jìn)行洗脫。況分析如下:緩沖溶液進(jìn)行洗脫。相對分子量較大的蛋白質(zhì)分子相對分子量較小的蛋白質(zhì)分子直徑大小大于凝膠顆?？障吨睆叫∮谀z顆粒空隙直徑運動路徑不能進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部向卜移動比較容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，通過內(nèi)部通道向下移動運動路程較短較長運動速度較快較慢洗脫順序先從凝膠珠中洗脫出來后從凝膠珠中洗脫出來因相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)洗脫出來的先后順序不同，可使各種相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子得以分離。注意：由于蛋白質(zhì)活性受pH影響，用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)中過程中需加向其中加入.血紅蛋白的提取和分離過程(1)樣品處理①紅細(xì)胞的洗滌洗滌紅細(xì)胞的目的是去除雜蛋白(血漿蛋白)?？刹捎玫退俣虝r間離心法對采集的血樣進(jìn)行離心，分離出紅細(xì)胞，然后用生理鹽水洗滌。注意：應(yīng)采用低速短時間離心法，離心速度過高和時間過長會使白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞一同沉淀，達(dá)不到分離的效果；應(yīng)用生理鹽水重復(fù)洗滌三次，直至上清液中沒有黃色，洗滌次數(shù)過少，無法去除血漿蛋白；②血紅蛋白的釋放：紅細(xì)胞在蒸儲水和甲苯的作用下破裂，釋放出血紅蛋白。③分離血紅蛋白溶液：將混合液進(jìn)行離心后，會明顯看到試管中的溶液的分層情況，分離出第3層的紅色透明液體，即為血紅蛋白的水溶液。④粗分離一一透析：取血紅蛋白溶液裝入透析袋中，將透析袋放入磷酸緩沖液中(pH為7.0),透析12ho(2)純化一一凝膠色譜操作①凝膠色譜柱的裝填②樣品的加入和洗脫調(diào)整緩沖液面：打開色譜柱下端的流出口，調(diào)整緩沖液與凝膠面平齊滴加透析樣品：關(guān)閉下端出口，用吸管小心地將透析后的樣品加到色譜柱的頂端樣品滲入凝膠床：加樣后，打開下端出口，使樣品完全滲入凝膠床內(nèi)再調(diào)整緩沖液面：關(guān)閉出口，小心加入磷酸緩沖液到適當(dāng)高度洗脫：打開下端出口，用磷酸緩沖液洗脫收集：待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時，用試管收集流出液，每5mL收集一管，連續(xù)收集注意：①滴加樣品時，吸管管口貼著管壁環(huán)繞移動加樣，同時注意不要破壞凝膠面。②在蛋白質(zhì)分離過程中，仔細(xì)觀察紅色區(qū)帶在洗脫過程中的移動情況。如果紅色區(qū)帶均勻一致地移動，說明色譜柱制作成功。.電泳：分離純化出血紅蛋白后，可用電泳法鑒定蛋白質(zhì)的純度。/補充知識，了解即可②：由于近年來考試經(jīng)常提到電泳法，下面對電泳法做簡單介紹：(1)電泳概念：電泳是指帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程。(2)電泳技術(shù)就是在電場的作用下，利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)以及分子本身大小、形狀等性質(zhì)的差異，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而達(dá)到對樣品進(jìn)行分離、鑒定或提純的目的。(3)電泳原理：許多重要的生物大分子，如氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)、核甘酸、核酸等都具有可解離基團，它們在某個特定的pH下會帶上正電或負(fù)電；在電場的作用下，這些帶電分子會向著與其所帶電荷相反的電極方向移動。(4)常用方法:瓊脂糖凝膠電泳聚丙烯酰胺凝膠電泳由于瓊脂糖本身不帶電荷，所以各種分子在電場中的遷移速度因各種分子的帶電性質(zhì)差異、分子大小、形狀不同而不同，從而得以分離。在凝膠中加入SDS使蛋白質(zhì)解聚成單鏈，與各種蛋白質(zhì)形成蛋白質(zhì)一SDSM合物，使其遷移速度完全取決于分子的大小。

考點五、植物有效成分的提取1,植物有效成分提取的常用方法方法原理適用范圍適用于化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定、揮發(fā)性強、不溶于水、易溶于有機溶劑的植物精油,如玫瑰精油利用水蒸氣將揮發(fā)性強的植物芳香油等攜帶出來，形成油水混合物，冷卻后分離油層和水層。壓榨法機械壓榨,從原料中榨出精油等成分適用于在水中蒸儲易導(dǎo)致原料焦糊或后效成分被破壞的材料，如相橘、檸檬萃取法J將粉粹、干燥的植物原料溶解在后機溶劑中，冉系「用有機溶劑浸泡，使（出有機溶劑芳香油實例：胡蘿卜素的提取2,植物有效成分提取的實例（1）玫瑰精油的提?、倜倒寰偷挠猛荆菏侵谱鞲呒壪闼闹饕煞帧＂诿倒寰偷男再|(zhì)：化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，難溶于水，易溶于有機溶劑，能隨水蒸氣一同蒸儲。③提取方法：一般均采用水蒸氣蒸儲法提取，同時根據(jù)其化學(xué)性質(zhì)，也可采用萃取法提?、軐嶒灹鞒蹋乎r玫瑰花+清水（1:4）一水蒸氣蒸儲一油水混合物（加入NaCl）一分離油層（加入無水N&SO）一除水一過濾一玫瑰油（2）橘皮精油的提取①橘皮精油的用途：是食品、化妝品和香水配料的優(yōu)質(zhì)原料②橘皮精油的成分及性質(zhì)：主要為檸檬烯，無色透明，具有誘人的橘香味③提取方法：一般采用壓榨法。④提取流程：石灰水浸泡一漂洗一壓榨一過濾一靜置一再次過濾一橘皮油注意：橘皮要在石灰水中浸透，石灰水能夠破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)、分解果膠，提高出油率，過濾時不會堵塞篩眼，還具有防止壓榨時滑脫的作用。（3）胡蘿卜素的提?、俸}卜素的用途：可治療維生素A缺乏癥（夜盲癥、干皮癥等），還可做食品添加色素②胡蘿卜素的性質(zhì)：不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醍等有機溶劑。根據(jù)雙鍵的數(shù)目分為丫三類，其中3胡蘿卜素是最主要的成分。③提取方法：有機溶劑萃取法注意：萃取胡蘿卜素的有機溶劑應(yīng)具有較高的沸點，能夠充分溶解胡蘿卜素，并不與水互溶。④提取流程：胡蘿卜一粉碎一干燥一萃取一過濾一濃縮一胡蘿卜素注意：萃取前，要將胡蘿卜進(jìn)行粉碎和干燥。一般來說，原料顆粒小，萃取溫度高，時間長，萃取效果較好。提取胡蘿卜素除可從胡蘿卜等植物中提取外，還可從大面積養(yǎng)殖的巖藻（多種褐藻的總稱）中獲得，也可利用微生物發(fā)酵工程生產(chǎn)胡蘿卜素。⑤胡蘿卜素粗品的鑒定方法：紙層析法，如下圖：步驟：做基線：在濾紙下端距底邊2cm處做一基線，在基線上取A、B、C、D四點對照點樣：AD點點標(biāo)準(zhǔn)樣品，B、C點點提取樣品干燥層析：吹干濾紙上的溶劑，放入色譜容器中層析對比觀察：對比觀察樣品色素點與標(biāo)準(zhǔn)色素點的異同注意：將點好樣的濾紙卷成圓筒狀，卷紙時注意濾紙兩邊不能相互接觸，以免溶劑沿濾紙兩邊的移動加快，溶劑前沿不齊，影響結(jié)果?？键c六、細(xì)胞中一些物質(zhì)的鑒定方法實驗名稱實驗材料試齊觀察現(xiàn)象脂肪鑒定花生子葉蘇丹出（蘇丹IV）橘黃色（橘紅色）還原性糖鑒定梨（白色或近白色含糖水果）斐林試劑或本尼迪特試劑產(chǎn)生磚紅色沉淀蛋白質(zhì)鑒定牛奶或豆?jié){等雙縮月尿試劑溶液變成紫色淀粉鑒定馬鈴薯等碘液材料交盅觀察細(xì)胞中DN麗RNA^布口腔上皮細(xì)胞甲基綠和口比羅紅混合染液細(xì)胞核染成綠色細(xì)胞質(zhì)染成紅色粗提DNA勺鑒定雞血紅細(xì)胞等一聚胺溶液艾盅細(xì)胞呼吸產(chǎn)生的CO酵母菌培養(yǎng)液澳麝香草酚藍(lán)溶（BTB）由盅艾綠冉變黃細(xì)胞無氧呼吸產(chǎn)生酒精的鑒定酵母菌培養(yǎng)液酸性重銘酸鉀溶液溶液由橙色變?yōu)榫G色注意：物質(zhì)鑒定實驗的一般應(yīng)選取含被鑒定物質(zhì)較多，本身為白色或近白色的生物組織作為實驗材料?！镜湫屠}】類型一、綠葉中色素的提取和分離例1.（2015上海高考）從新鮮的菠菜葉片提取葉綠體色素，發(fā)現(xiàn)提取液明顯偏黃綠色，最可能的原因是A.加入的石英砂太多B.沒有加入碳酸鈣C.用脫脂棉過濾不徹底D.一次加入過多無水乙醇【答案】B【解析】色素提取過程中，研磨速度慢了會影響色素的提取，加入石英砂的目的是使研磨充分，有利于色素的提取，加入碳酸鈣防止研磨過程中葉綠素被破壞，不加碳酸鈣，葉綠素被破壞，導(dǎo)致提取液顏色偏黃綠，B符合題意，脫脂棉過濾徹底出現(xiàn)渾濁現(xiàn)象，不會影響提取液的顏色，C不符合題意，一次加入乙醇過多，顏色變淺，D錯誤?！军c評】本題主要考查色素提取過程的注意事項。舉一反三：【變式1】某研究組獲得了水稻的葉黃素缺失突變體。將其葉片進(jìn)行了紅光照射光吸收測定和色素層析TOC\o"1-5"\h\z條帶分析（從上至下），與正常葉片相比，實驗結(jié)果是（）A.光吸收差異顯著，色素帶缺第2條B.光吸收差異不顯著，色素帶缺第2條C.光吸收差異顯著，色素帶缺第3條D.光吸收差異不顯著，色素帶缺第3條【答案】B【解析】葉黃素為色素帶的第2條，且葉黃素幾乎不吸收紅光。類型二、DNA的粗提取和鑒定例2.（2015江蘇高考）圖1、2分別為“DNA的粗提取與鑒定冶實驗中部分操作步驟示意圖，下列敘述正確的是（）雞血細(xì)胞液DNA濃鹽溶液圖】圖2A.圖1、2中加入蒸儲水稀釋的目的相同B.圖1中完成過濾之后保留濾液C.圖2中完成過濾之后棄去濾液D.在圖1雞血細(xì)胞液中加入少許嫩肉粉有助于去除雜質(zhì)【答案】BCD【解析】圖1加蒸儲水的目的是使雞紅細(xì)胞漲破，圖2加蒸儲水是為了稀釋，A錯誤。圖1加蒸儲水后,DNA存在于濾液中，B正確。圖2加蒸儲水后，DNA析出，所以棄去濾液，C正確。嫩肉粉主要是蛋白酶，可以將雞血中蛋白質(zhì)水解，D正確?！军c評】本題考查DNA?提取和鑒定的過程，需思考并梳理實驗過程，在理解的基礎(chǔ)上識記相關(guān)過程。舉一反三：【變式1】某生物小組開展DNAffi提取的相關(guān)探究活動。具體步驟如下：材料處理：稱取新鮮的花菜、辣椒和蒜黃各2份，每份10g。剪碎后分成兩組，一組置于20C、另一組置于-20c條件下保存24h。DNA粗提?。旱谝徊剑簩⑸鲜霾牧戏謩e放入研缽中，各加入15mL研磨液，充分研磨。用兩層紗布過濾。取濾液備用。第二步：先向6個小燒杯中分別注入10mL濾液，再加入20mL體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液，然后用玻璃棒緩緩地向一個方向攪拌，使絮狀物纏繞在玻璃棒上。第三步：取6支試管，分別加入等量的2mol/LNaCl溶液溶解上述絮狀物。DNA僉測：在上述試管中各加入4mL二苯胺試劑?；旌暇鶆蚝?，置于沸水中加熱5min,待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺，結(jié)果如下表。材料保存溫度花菜辣椒蒜黃20C++++++-20C+++++++++注：“+”越多表示藍(lán)色越深分析上述實驗過程，回答下列問題：（1）該探究性實驗課題名稱是。（2）第二步中“緩緩地”攪拌，這是為了減少。（3）根據(jù)實驗結(jié)果，得出結(jié)論并分析。①結(jié)論1:與20c相比，相同實驗材料在-20C條件下保存，DNA的提取量較多。結(jié)論2:。②針對結(jié)論1請?zhí)岢龊侠淼慕忉專?。?）氯仿密度大于水，能使蛋白質(zhì)變性沉淀，與水和DNA勻不相溶，且對DNAB響極小。為了進(jìn)一步提高DNA屯度，依據(jù)氯仿的特性，在DNA粗提取第三步的基礎(chǔ)上繼續(xù)操作的步驟是：?然后用體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液使DNAW出。【答案】（1）探究不同材料、不同保存溫度對DNA提取量的影響（2）DNA分子斷裂（3）等質(zhì)量的不同實驗材料，在相同的保存溫度下，從蒜黃中提取的DNA量最多；低溫抑制了相關(guān)酶的活性，DNA被降解的速度慢（4）將第三步獲得的溶液與等量的氯仿充分混合，靜置一段時間，吸取上清液【點評】本題以DNA的粗提取實驗為背景，主要考查實驗分析能力。類型三、血紅蛋白的提取和分離例3.下列關(guān)于凝膠色譜法的原理及操作不.正確的是（）A.是利用凝膠把分子大小不同的物質(zhì)分離開的一種方法B.在洗脫過程中，大分子不能進(jìn)入凝膠內(nèi)部而最先流出，而小分子可以進(jìn)入凝膠內(nèi)部而流速緩慢，以致最后流出C.凝膠內(nèi)部有很微細(xì)的多孔狀結(jié)構(gòu)，其孔隙大小與被分離的物質(zhì)分子的大小無相應(yīng)關(guān)系D.一般情況下，凝膠對要分離的物質(zhì)沒有吸附作用，因此所有要分離的物質(zhì)都應(yīng)該被洗脫出來【答案】C【解析】凝膠色譜法是根據(jù)相對分子質(zhì)量大小分離蛋白質(zhì)的有效方法，凝膠是由多糖類化合物構(gòu)成的，其內(nèi)部有很微細(xì)的多孔狀結(jié)構(gòu)，小分子蛋白質(zhì)可以進(jìn)入凝膠內(nèi)部，路程較長，移動速度慢，而相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部，路程較短，移動速度快，因此在洗脫過程中分離。選用不同種凝膠，其狀結(jié)構(gòu)不同，孔隙大小不同，可分離的分子大小不同，二者是相關(guān)的，故C項不正確?！军c評】本題主要考查純化血紅蛋白的原理。舉一反三：【變式1】關(guān)于電泳的說法不.正確的是()A.電泳是指帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程B.帶電分子會向著與其所帶電荷相反的電極移動C.蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率取決于它所帶凈電荷的多少D.用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳，蛋白質(zhì)的電泳遷移率幾乎完全取決于分子的大小【答案】C【解析】蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率取決于它所帶凈電荷的多少以及分子的大小等因素，SDS能與各種蛋白質(zhì)形成蛋白質(zhì)一SDSM合物，SDS所帶負(fù)電荷的量大大超過了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量，因而掩蓋了不同種蛋白質(zhì)間的電荷差異，使電泳遷移率幾乎完全取決于分子的大小?！咀兪?】科學(xué)家發(fā)現(xiàn)家蠅體內(nèi)存在一種抗菌活性蛋白。這種蛋白質(zhì)具有極強的抗菌能力，受到研究者重視。(1)分離該抗菌蛋白可用電泳法，其原理是根據(jù)蛋白質(zhì)分子的、大小及形狀不同，在電場中的不同而實現(xiàn)分離。(2)可用金黃色葡萄球菌來檢驗該蛋白的體外抗菌特性。抗菌實驗所用培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白月東主要為細(xì)菌生長提供和。(3)分別在加入和未加入該抗菌蛋白的培養(yǎng)基中接種等量菌液。培養(yǎng)一定時間后，比較兩種培養(yǎng)基中菌落的,確定該蛋白質(zhì)的抗菌效果。(4)細(xì)菌培養(yǎng)常用的接種方法有和。實驗結(jié)束后，對使用過的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行處理?！敬鸢浮?1)電荷(帶電情況)；遷移速度(2)碳源；氮源(3)數(shù)量(4)平板劃線法；稀釋涂布平板法；滅菌類型四、植物有效成分的提取【高清課堂：物質(zhì)的提取分離和鑒定專題411404典型例題8]例4.請回答下列與實驗室提取芳香油有關(guān)的問題：(1)植物芳香油的提取可采用的方法有萃取法、和。(2)芳香油溶解性的特點是不溶于,易溶于,因