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基礎(chǔ)微生物腸桿菌科細(xì)菌12/22/20221第一頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日——埃希菌屬——志賀菌屬——沙門菌屬——變形桿菌屬——克雷伯菌屬——摩根菌屬——枸櫞酸菌屬——腸桿菌屬——沙雷菌屬等致病菌腸道正常菌群機(jī)會(huì)致病菌腸桿菌科有44個(gè)菌屬,170多個(gè)種。12/22/20222第二頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日

痢疾桿菌傷寒桿菌大腸桿菌12/22/20223第三頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日

是一大群生物學(xué)性狀相似的革蘭氏陰性短小桿菌,常寄居于人和動(dòng)物的腸道,多為腸道內(nèi)正常菌群,有的為致病菌。腸桿菌科12/22/20224第四頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日形態(tài)結(jié)構(gòu)G—中等大小桿菌,有菌毛,多數(shù)有鞭毛(志賀菌屬除外),少數(shù)有莢膜,無(wú)芽胞,培養(yǎng)特性需氧或兼性厭氧普通培養(yǎng)基,液體中呈渾濁生長(zhǎng);菌落為灰白色中等大小S型菌落生化反應(yīng)活躍,常用于鑒別腸道桿菌

乳糖發(fā)酵試驗(yàn)初步鑒別致病與非致病的腸道桿菌。腸道桿菌共同生物學(xué)特點(diǎn):12/22/20225第五頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日大腸埃希菌沙門菌志賀菌膽鹽、煌綠:抑制大腸埃希菌及G+菌,提高腸道致病菌檢出率腸道選擇培養(yǎng)基:SS培養(yǎng)基(沙門志賀培養(yǎng)基)弱選擇培養(yǎng)基:麥康凱(常用),伊紅美藍(lán),中國(guó)藍(lán)乳糖發(fā)酵中性紅呈紅色產(chǎn)酸菌落桃紅色,乳糖發(fā)酵菌落乳糖不發(fā)酵菌落無(wú)色透明,乳糖不發(fā)酵菌落12/22/20226第六頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日12/22/20227第七頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日KIA(克氏雙糖鐵復(fù)合試驗(yàn))斜面乳糖,固體,含F(xiàn)esO,4指示劑酚紅,紅色(不分解),黃色(分解)底層葡萄糖,半固體

大腸埃希菌:分解乳糖和葡萄糖

沙門氏菌:不分解乳糖,分解葡萄糖;

銅綠假單胞菌:都不分解,非發(fā)酵菌糖發(fā)酵試驗(yàn),O/F試驗(yàn)12/22/20228第八頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日大腸桿菌、痢疾桿菌、傷寒桿菌生物學(xué)特征比較Doublesugerironslant1234未接種傷寒桿菌痢疾桿菌大腸桿菌12/22/20229第九頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日抗原結(jié)構(gòu)復(fù)雜菌體(O)抗原,LPS的核心多糖,屬特異性鞭毛(H)抗原,鞭毛蛋白,種特異性表面抗原:K抗原;Vi抗原;B抗原抵抗力:不強(qiáng),耐冷易出現(xiàn)各種變異:

S-R變異,H-O變異,抗原性變異,耐藥性變異腸道桿菌共同特點(diǎn):O抗體,IgMH抗體,IgG12/22/202210第十頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日致病性:黏附素:菌毛等毒素:內(nèi)毒素外毒素內(nèi)源性感染:腸道正常菌群(大腸桿菌)→機(jī)會(huì)致病菌,腸道外感染

外源性感染:糞-口途徑傳播,以腸道內(nèi)感染為主。(致病性大腸桿菌、傷寒桿菌、痢疾桿菌)腸道桿菌共同特點(diǎn):12/22/202211第十一頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日EMB(伊紅——美蘭培養(yǎng)基),乳糖、伊紅、美蘭選擇作用(弱選)大腸埃希菌(非致病菌)乳糖發(fā)酵產(chǎn)酸伊紅結(jié)合美蘭形成紫黑色金屬光澤化合物有色的乳糖發(fā)酵菌落傷寒沙門菌等(致病菌)乳糖不發(fā)酵伊紅美蘭不能結(jié)合無(wú)色的乳糖不發(fā)酵菌落12/22/202212第十二頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日第一節(jié)埃希菌屬埃希菌屬6個(gè)種,只有大腸埃希菌E.coli臨床常見。12/22/202213第十三頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日一、生物學(xué)特性形態(tài)染色:周毛菌,有菌毛,微莢膜培養(yǎng)特性:乳糖發(fā)酵菌落(有色)

IMViC試驗(yàn)(++﹣﹣)抗原O抗原(O1---O173)H抗原(H1---H56)K抗原(K1---K100)血清型表示法:O:K:H產(chǎn)生大腸菌素O175:H7腹瀉

12/22/202214第十四頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日二、大腸埃希菌醫(yī)學(xué)意義腸道的正常菌群:生理作用條件致病菌(內(nèi)源性感染)寄居部位的改變,腸道外感染致病性大腸埃希菌(外源性感染)消化道感染

12/22/202215第十五頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日條件致病菌(內(nèi)源性感染)大腸桿菌的居住部位改變,引起的腸道外感染?;撔愿腥?、泌尿道感染、敗血癥、腦膜炎等。主要致病物質(zhì):黏附素:菌毛,具有高度特異性K抗原內(nèi)毒素外毒素:溶血素A(尿路感染)菌毛疫苗12/22/202216第十六頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日致病性大腸埃希菌(外源性感染)某些帶有致病基因的血清型,主要致病物質(zhì):外毒素—耐熱腸毒素(heatstableenterotoxin,ST)—不耐熱腸毒素(heatlabileenterotoxin,LT)—志賀毒素經(jīng)腸道感染,引起胃腸炎。

12/22/202217第十七頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日不耐熱腸毒素(LT)

B亞單位:識(shí)別基團(tuán),與腸上皮細(xì)胞受體--神經(jīng)節(jié)苷脂結(jié)合A亞單位:毒素基團(tuán)→激活腺苷酸環(huán)化酶ATPcAMP↑小腸液過(guò)度分泌腸腔積液、腹瀉12/22/202218第十八頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日不耐熱腸毒素(LT)A亞單位——毒素活性成分機(jī)制B亞單位——與腸上皮細(xì)胞受體神經(jīng)節(jié)苷脂結(jié)合→激活腺苷酸環(huán)化酶耐熱腸毒素(ST)激活細(xì)胞鳥苷酸環(huán)化酶,

ATPcAMP↑小腸液過(guò)度分泌腸腔積液、腹瀉GMPcGMP↑腹瀉12/22/202219第十九頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日腸產(chǎn)毒性大腸埃希菌(ETEC):引起嬰兒,旅游者腹瀉腸侵襲性大腸埃希菌(EIEC):較大兒童,成人腹瀉,痢疾樣腸致病性大腸埃希菌(EPEC):嬰幼兒腹瀉腸集聚(黏附)性大腸埃希菌(EAEC):小兒頑固性和旅游者腹瀉腸出血性大腸埃希菌(EHEC,O157:H7):血樣便,發(fā)生于任何年齡

出血性結(jié)腸炎,溶血性尿毒綜合征致病性大腸埃希菌(見P119表)腹瀉12/22/202220第二十頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日三、微生物學(xué)檢查與防治要點(diǎn)衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢查衛(wèi)生學(xué)標(biāo)準(zhǔn):

每ml飲水中細(xì)菌總數(shù)≤100個(gè),每1000ml水中大腸菌群≤3個(gè),每100ml瓶裝飲料中大腸菌群≤5個(gè)防止醫(yī)源性感染耐藥菌株菌毛疫苗埃希菌屬腸桿菌屬枸椽酸菌屬克雷伯菌屬12/22/202221第二十一頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日第二節(jié)

志賀菌屬(Shigella)

1899年,日本人志賀氏首先發(fā)現(xiàn)菌痢由痢疾桿菌引起。12/22/202222第二十二頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日一、生物學(xué)特性形態(tài)染色:有菌毛,無(wú)莢膜,無(wú)鞭毛(無(wú)動(dòng)力)培養(yǎng)特性:乳糖不發(fā)酵菌落(無(wú)色透明扁平菌落)根據(jù)O抗原,分4群,40余型A群——痢疾志賀菌(10)B群——福氏志賀菌(13)(我國(guó))C群——鮑氏志賀菌(18)D群——宋氏志賀菌(1)(我國(guó))抵抗力:比其它腸桿菌弱,尤其對(duì)酸敏感與其它腸道致病菌的主要區(qū)別點(diǎn)12/22/202223第二十三頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日志賀菌屬在不同環(huán)境中生存時(shí)間在陽(yáng)光下在56℃溫度下在100℃溫度下河水自來(lái)水冰雪土壤糞便蒼蠅體內(nèi)<30分鐘<15分鐘1分鐘12-92天8-10天41-60天2月數(shù)小時(shí)2-3天2-3天環(huán)境生存時(shí)間環(huán)境生存時(shí)間衣柜內(nèi)衣服上60-90天褥單室內(nèi)垃圾水果蔬菜牛奶酸奶咸菜涼菜30-90天24天11天24天數(shù)小時(shí)5-7天6天人的皮膚上12/22/202224第二十四頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日二、致病性與免疫性致病物質(zhì)侵襲力:菌毛黏附并侵入腸黏膜上皮細(xì)胞內(nèi)毒素:毒性強(qiáng),作用于局部并可入血引起全身癥狀作用于腸壁植物神經(jīng)→痙攣外毒素—志賀毒素(與EHEC{出血性}產(chǎn)生的毒素相同)損傷上皮細(xì)胞,引起細(xì)胞壞死,水樣瀉。12/22/202225第二十五頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日細(xì)菌(菌毛)吸附腸黏膜上皮細(xì)胞穿入細(xì)胞并擴(kuò)散周圍及深入黏膜下層釋放內(nèi)毒素、外毒素腸局部黏膜炎癥(變性、壞死、脫落)出血、壞死、潰瘍膿血便/黏液血便刺激腸壁植物神經(jīng)腸蠕動(dòng)↑腸肌痙攣腺體分泌↑水分吸收↓腹痛、腹瀉刺激直腸肛門括約肌里急后重便數(shù)增加吸收入血發(fā)熱、白細(xì)胞↑高熱、休克中毒性腦病DIC死亡毒血癥中毒性菌痢12/22/202226第二十六頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日所致疾病——細(xì)菌性痢疾(bacillarydysentery,簡(jiǎn)稱菌痢)臨床類型:急性菌痢慢性菌痢中毒性菌痢免疫性:sIgA,但不牢固,易再感染。12/22/202227第二十七頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日三、微生物學(xué)檢查與防治要點(diǎn)微生物學(xué)檢查標(biāo)本:快速診斷:免疫熒光、PCR等。防治多重耐藥株菌毛疫苗的研制?1.抗生素使用前2.膿血黏液部分,不要與尿混合3.新鮮送檢,4.保存液30%甘油12/22/202228第二十八頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日第三節(jié)沙門菌屬

腸桿菌科中最復(fù)雜的菌屬,有2000種以上血清型對(duì)人類有致病性的:腸熱癥←傷寒沙門菌,甲型副傷寒沙門菌等食物中毒←鼠傷寒沙門菌、豬霍亂沙門菌、腸炎沙門菌敗血癥←豬霍亂沙門菌最常見12/22/202229第二十九頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日一、生物學(xué)特性形態(tài)染色:周毛菌,有菌毛培養(yǎng)特性:乳糖不發(fā)酵菌落(無(wú)色透明/周圍透明中間黑色菌落)傷寒沙門菌與其他沙門菌的區(qū)別(見P125表10-4)葡萄糖發(fā)酵產(chǎn)酸不產(chǎn)氣抗原結(jié)構(gòu)O抗原H抗原Vi抗原(毒力抗原)抵抗力:不強(qiáng),耐冷O抗體,IgMH抗體,IgG12/22/202230第三十頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日二、致病性與免疫性致病物質(zhì)侵襲力菌毛:吸附Vi抗原:微莢膜(抗吞噬)內(nèi)毒素:體溫升高、白細(xì)胞數(shù)下降;休克。外毒素--腸毒素:鼠傷寒沙門菌產(chǎn)生,與ETEC相似所致疾?。簜眰?---腸熱癥敗血癥胃腸炎(食物中毒)12/22/202231第三十一頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日膽囊-----腸道-------糞排菌皮膚----血栓出血--玫瑰疹腎-----尿肝脾-----腫大骨髓傷寒和副傷寒的發(fā)病過(guò)程傷寒沙門和甲型副傷寒桿菌小腸上部粘膜腸系膜淋巴結(jié)

固有層淋巴結(jié)進(jìn)入血液再次進(jìn)入血液第一次菌血癥第二次菌血癥再次進(jìn)入腸道局部壞死胞內(nèi)寄生菌12/22/202232第三十二頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日帶菌者健康帶菌者(危險(xiǎn)),恢復(fù)期帶菌者免疫性:腸熱癥以細(xì)胞免疫為主。

胃腸炎以sIgA為主。

檢驗(yàn)施標(biāo)本采集:第一周取血

第二周取糞便,尿液骨髓可全程采集這樣檢出陽(yáng)性率會(huì)高一些12/22/202233第三十三頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日三、微生物學(xué)檢查與防治要點(diǎn)分離培養(yǎng)與鑒定標(biāo)本

腸熱癥:根據(jù)病程第1-2W,血、骨髓;第2-3W,糞便、尿(P126圖)血清學(xué)診斷——肥達(dá)反應(yīng)(Widal)傷寒Vi莢膜多糖疫苗耐藥12/22/202234第三十四頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日血清學(xué)診斷——肥達(dá)反應(yīng)(Widal)原理:抗原-抗體,試管凝集試驗(yàn)(定量)

已知抗原:傷寒沙門氏菌O抗原及H抗原,副傷寒的沙門氏菌H抗原待檢血清中有無(wú)相應(yīng)抗體及其效價(jià)。用途:輔助診斷傷寒,副傷寒O抗體:IgM,出現(xiàn)早,維持時(shí)間短H抗體:IgG,出現(xiàn)遲,維持時(shí)間長(zhǎng)12/22/202235第三十五頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日肥達(dá)試驗(yàn)的結(jié)果判斷正常值:O凝集效價(jià)≥1:80;H凝集效價(jià)≥1:160;副傷寒H凝集效價(jià)≥1:80動(dòng)態(tài)觀察(雙份血清):恢復(fù)期效價(jià)增加≥4倍診斷意義:O低H低O高H低O高H高O低H高排除早期或有交叉反應(yīng)的其它沙門菌感染腸熱癥可能性大預(yù)防接種或曾患過(guò)傷寒12/22/202236第三十六頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日第11章弧菌屬(Vibrio)菌體短小,彎曲成弧,G-單毛菌,運(yùn)動(dòng)極活潑,分布廣泛,多存在于水中,對(duì)人致病的主要為霍亂弧菌和副溶血弧菌霍亂弧菌電鏡照片12/22/202237第三十七頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日第一節(jié)霍亂弧菌形態(tài)與染色

G-,弧型或逗點(diǎn)狀,

單鞭毛,有菌毛,個(gè)別有莢膜,穿梭樣動(dòng)力,魚群狀排列培養(yǎng)特性兼性厭氧

耐堿不耐酸,在pH8.8--9.0的堿性培養(yǎng)基12/22/202238第三十八頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日抵抗力較弱怕干:干燥時(shí)易死亡,水環(huán)境中可存活兩周(水源性傳播爆發(fā))怕酸:正常胃酸4min怕熱:100℃,1-2min抗原分型H抗原,無(wú)特異性O(shè)抗原→155個(gè)血清群,其中O1群、O139群可引起霍亂,其余不致病或僅引起胃腸炎等。O1群→ElTor生物型古典生物型12/22/202239第三十九頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日二、致病性與免疫性致病物質(zhì)侵襲力鞭毛運(yùn)動(dòng):有利于細(xì)菌穿過(guò)黏膜表面黏液層菌毛:使細(xì)菌定植于小腸黏液素酶:液化黏液霍亂腸毒素——最強(qiáng)烈的致瀉毒素,與不耐熱腸毒素(LT)作用機(jī)制相同12/22/202240第四十頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日霍亂腸毒素A亞單位——毒素活性成分機(jī)制B亞單位——與腸上皮細(xì)胞受體神經(jīng)節(jié)苷脂結(jié)合→激活腺苷酸環(huán)化酶ATPcAMP↑小腸液過(guò)度分泌腸腔積液、腹瀉12/22/202241第四十一頁(yè),共四十九頁(yè),2022年,8月28日所致疾病傳染源:病人糞便污染的水源或食品傳染途徑:經(jīng)口霍亂(甲類法定傳染病02)劇烈腹瀉和嘔吐(米泔水樣腹瀉物),

→大量水分和電解質(zhì)喪失

→休克和腎衰竭(死亡)免疫性:SIgA起主要作用,血液中有IgG病人愈后可獲得牢固免疫發(fā)病率高流行迅速死亡率高12/22/202242第四十二頁(yè),共四十九頁(yè),202

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