sop-zl5005v7.6低分子量肝素鈣檢驗(yàn)操作

責(zé)任：QCQC4.1Xa4.2IIaXaIIa3.0。2試藥與試液：pH4.01pH6.86pH9.180.10g10ml，溶解后混勻，按《pH定，平定兩份樣品，取平均值，pH值應(yīng)為5.0～7.5。操作：取本品適量，加水10ml制成每1ml中約含5000IU的溶液，按《澄清度檢查法標(biāo)準(zhǔn)操260nm0.20；280nm加對(duì)氨基苯磺酸-α1～2，3040％氫氧化鈉溶液、凱爾特消化片Cu1.5（每片相當(dāng)于1.5g硫酸鉀和0.15g五水硫酸銅、吸收液[100g硼酸溶于10L水配制成1%硼酸溶添加100ml溴甲酚（100mg溴甲酚綠溶于100ml95%乙醇）70ml（100mg100ml95%乙醇）]。（420℃（酸霧恰好被吸入滌氣罩。繼續(xù)消化直至全部樣品變?yōu)橥该鞯乃{(lán)綠色澄清液體，消化時(shí)間大60作，完成初始的開(kāi)機(jī)程序后，用戶(hù)可以登錄。選擇一個(gè)分析程序（50ml30ml分析程序啟動(dòng)后，下列步驟會(huì)自動(dòng)進(jìn)行操作：稀釋、試劑添加、蒸餾、滴定、廢液處理。供試品平定兩份，空白測(cè)定兩份，空白極差不得大于0.05ml。 W鈣含量：儀器與用具：天平、250ml錐形瓶、100ml量筒、25ml量筒、25ml酸式滴定管、鐵架臺(tái)（含試藥與試液：乙二胺四乙酸二鈉滴定液(0.05mol/L)配制見(jiàn)《乙二胺四乙酸二鈉滴定液配制操作：取本品0.4g，精密稱(chēng)定，置250ml錐形瓶中加水100ml使溶解，加氫氧化鈉試液15ml與鈣紫紅素指示劑約0.1g，用乙二胺四乙酸二鈉滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液由紫紅色轉(zhuǎn)變?yōu)榧兯{(lán)色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。平定三次。每1ml乙二胺四乙酸二鈉滴定液(0.05mol/L)相當(dāng)于2.004mg的鈣。按干燥品計(jì)算，本品含鈣量應(yīng)為9.5%～11.5%。結(jié)果計(jì)鈣含量（

W

F：F=C/0.05mol/L；C：滴定液濃度，mol/L；W：樣品的質(zhì)量，g。硫酸根與羧酸根摩爾比：儀器與用具：天平、自動(dòng)電位滴定儀、電導(dǎo)率儀、磁力攪拌器、2ml10cm×1cm)、50ml錐形瓶、25ml燒杯、20ml燒杯、25ml量筒、轉(zhuǎn)子。液體充滿(mǎn)整個(gè)樹(shù)脂柱，打開(kāi)T形夾放出液體。放液的過(guò)程中隨時(shí)補(bǔ)加7%的鹽酸溶液，保持整個(gè)樹(shù)脂柱內(nèi)充滿(mǎn)液體，待20ml溶液即將倒完時(shí)，關(guān)閉T形夾，使液面與樹(shù)脂齊平或高于樹(shù)脂，浸泡20分6手動(dòng)滴定密稱(chēng)取本品0.1g20ml水使溶解后密量取2ml通過(guò)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂10-15ml水緩緩洗入燒杯中，磁力攪拌，使用電導(dǎo)率儀進(jìn)行電導(dǎo)滴定。用氫氧化鈉滴定液（0.05mol/L）逐0.1g水緩緩洗入燒杯中，磁力攪拌，照《907定液的毫升數(shù)（V2），V2－V1是羧酸根消耗的氫氧化鈉滴定液毫升數(shù)，使用excel量肝素鈣硫酸根與羧酸根摩爾比測(cè)定結(jié)果計(jì)算表”對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行線(xiàn)性回歸得到三條直線(xiàn)方程，分別1.8。鈉溶液浸泡1小時(shí)，攪拌，去除堿液，用純化水沖洗至pH8-9為止。最后加入3-5倍的7%的鹽酸溶2pH3-4，備用。分子量與分子量分布：儀器與用具：高效液相色譜儀、TSKgel-G2000SWXL凝、量瓶、1000μl移液器、10ml刻度吸管、天平、循環(huán)水式真空泵、燒杯、1000ml試劑瓶、滴管、試管、離心管、注射器、0.22μm過(guò)濾器、0.22μm濾膜、樣品瓶(HPLC)。色譜條件：以親水性鍵合硅膠為填充劑【TSKG2000SWXL（300mm×7.8mm）或相應(yīng)的可分15000～10000035℃；紫外檢測(cè)波長(zhǎng)234nm；流動(dòng)相為2.84%0.5ml/min。供試品溶液的：取供試品（1）適量，加流動(dòng)相稀釋成每1ml約含10mg的溶液，過(guò)濾后備用；取供試品（2）1ml10mg對(duì)照品溶液的：精密稱(chēng)取歐洲藥典低分子量肝素分子量測(cè)定用對(duì)照品適量，用流1ml10mg葡萄糖醛酸溶液（5mg/ml1ml5mg5mg/ml的葡萄糖醛酸溶液25μl5葡萄糖醛酸紫外保留時(shí)間和示差檢測(cè)器保留時(shí)間的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD），RSD0.1%記錄紫外和示差色譜圖，平行進(jìn)樣兩針；取供試品（1）25μl3000～4500，800085%。色譜圖原有的自動(dòng)積分基礎(chǔ)上，以合適的時(shí)間間隔（一般約為0.4分鐘）從后向前繼續(xù)增2020GPC儀使用標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》中“3.7GPC數(shù)據(jù)分析”方法操作。20GPC液相色譜儀使用標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》中“3.7.1窄標(biāo)校正”方法操作。干燥失重：試藥與用具：天平、真空恒溫干燥箱、稱(chēng)量瓶、玻璃干燥器、五氧化二磷。進(jìn)行操作，60℃3670Pa10.0%。重金屬：（pH3.5濾紙、可調(diào)式電爐、25ml25ml25ml操作：取本品約1g，照《重金屬檢查法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》第二法操作，含重金屬不得過(guò)百萬(wàn)分之二十。細(xì)菌內(nèi)毒素：儀器與用具：天平、烘箱、凈化工作臺(tái)、水浴、旋渦混合器、試管架、不銹鋼盒、秒表、無(wú)熱源吸頭、移液器、具塞刻度離心管、試管（10×75mm、剪刀、膜、鑷子、棉球、砂1ml5000液，按《細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》操作，每1IU0.01EU（10×42m×100mmⅢ）、Xas-2765、冰醋酸、鹽酸、低分子量肝素效價(jià)測(cè)定用標(biāo)準(zhǔn)品。三羥甲基氨基甲烷-氯化鈉緩沖液(pH7.4)（簡(jiǎn)稱(chēng)BufferA）：稱(chēng)取三羥甲基氨基甲烷6.08g和氯化鈉8.77g，加水500ml使溶解，加牛白蛋白10g，用鹽酸調(diào)節(jié)pH值至7.4，加水稀釋至3.03g1.4g250mlpH8.4，500ml。2～8℃冰箱保存，備用?？鼓福ˋTⅢ）BufferA1IU/mlBufferB0.0005mol/L性確認(rèn)過(guò)的濃度）的溶液,分裝于離心管中,作為貯備液，冷凍保存。每支分裝后的標(biāo)準(zhǔn)品需一標(biāo)準(zhǔn)品溶液的：領(lǐng)取分裝好的標(biāo)準(zhǔn)品貯備液一支，放至室溫后用BufferA稀釋成四個(gè)不同濃度的溶液，各劑量間的劑距比一般為1:0.6～1:0.7，該濃度應(yīng)在log劑量－反應(yīng)的線(xiàn)性范圍1ml0.025～0.2IU。按估計(jì)效價(jià)用BufferA稀釋成四個(gè)不同濃度的溶液，四個(gè)濃度應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)品溶液的四個(gè)濃度保持一18T1、T2、T3、T4及S1、S2、S3、S42順序排列在試管架中排列好，再用單道移液器分別加入4個(gè)不同濃度的供試品溶液（T）和標(biāo)準(zhǔn)品溶液（S）50μl，空白管（前、后）50μlBufferA。18（前）加抗凝血加樣完成），最后再用單道移液器向空白管（后）加抗凝血酶Ⅲ溶液50μl，晃動(dòng)試管架，使試管中的溶液混勻（不得產(chǎn)生氣泡），3714.1.4.2FXa100μl，晃動(dòng)試管架，使試管中3714管中的溶液用單道移液器吸出250μl至酶標(biāo)板上（每管3孔取平均值），以BufferA為空白，在405nm計(jì)算：2BS20004.4（P＜0.01（P＞0.05T（10×42m×100mmⅢ）s-2238、冰醋酸、鹽酸、低分子量肝素效價(jià)測(cè)定用標(biāo)準(zhǔn)品。三羥甲基氨基甲烷-氯化鈉緩沖液(pH7.4)（簡(jiǎn)稱(chēng)BufferA）：稱(chēng)取三羥甲基氨基甲烷6.08g和氯化鈉8.77g，加水500ml使溶解，加牛白蛋白10g，用鹽酸調(diào)節(jié)pH值至7.4，加水稀釋至3.03g1.4g250mlpH8.4，500ml。2～8℃冰箱保存，備用?？鼓福ˋTⅢ）BufferA0.5發(fā)色底物s-2238溶液：取發(fā)色底物s-2238適量，用水配制成0.003mol/L的貯備液，冷凍BufferB0.0005mol/L。性確認(rèn)過(guò)的濃度）的溶液,分裝于離心管中,作為貯備液，冷凍保存。每支分裝后的標(biāo)準(zhǔn)品需一log1ml0.015～0.075IU。18T1、T2、T3、T4及S1、S2、S3、S42順序排列在試管架中排列好，再用單道移液器分別加入4個(gè)不同濃度的供試品溶液（T）和標(biāo)準(zhǔn)品溶液（S）50μl，空白管（前、后）50μlBufferA。18（前）加抗凝血加樣完成），最后再用單道移液器向空白管（后）50μl，晃動(dòng)試管架，使試管中的溶液混勻（不得產(chǎn)生氣泡）37137℃14管中的溶液用單道移液器吸出250μl至酶標(biāo)板上（每管3孔取平均值），以BufferA為空白，在405nm計(jì)算：2BS20004.4（P＜0.01（P＞0.05低分子量肝素鈣效價(jià)測(cè)定時(shí)每批稱(chēng)量2個(gè)樣品，在抗Xa因子效價(jià)測(cè)定中每個(gè)樣品檢測(cè)2次、在抗IIa因子效價(jià)測(cè)定中每個(gè)樣品檢測(cè)1次，最終結(jié)果為各組數(shù)據(jù)的合并計(jì)算值；穩(wěn)定性產(chǎn)品效價(jià)測(cè)定時(shí)每批稱(chēng)量1個(gè)樣品，抗Xa因子效價(jià)和抗IIa因子效價(jià)的測(cè)定各檢測(cè)2次，最終結(jié)果為各組數(shù)據(jù)的合并計(jì)算值。若軟件計(jì)算結(jié)果顯示數(shù)據(jù)不均一，則需根據(jù)《中國(guó)藥典》20151431（兩組數(shù)據(jù)合并計(jì)算結(jié)果顯示不均一的需再測(cè)一組數(shù)據(jù)后同一批供試品重復(fù)n次測(cè)定，所得n個(gè)測(cè)定結(jié)果，可用合并計(jì)算的方法求其效價(jià)PT的均值及其FL。nBS2000ya表示特異反應(yīng)值（或其規(guī)定的函數(shù)），ym為與ya相對(duì)的另一的反應(yīng)值，y2、y3為與ya最接近的兩個(gè)反應(yīng)值，ym-1、ym-2ym最接近的兩個(gè)反應(yīng)值，mya、y2、y3ym-2、ym-1、m=3～7Jy2ymm34567J判定標(biāo)準(zhǔn)：JJya為特異反應(yīng)，可剔除；反之，ya非特異反應(yīng)，不可剔除。nS2W：WS2M'

M(SM

mS2m

mS2m

M2(M)2/n

(S2MMn

f=n- WS W WSMM W ；M

MFL=MtPT及其可信限:PT=antilg PT的FL=antilg(MtSMPT的FL%

m即效價(jià)比值的對(duì)數(shù)，合并計(jì)算中M=lgPT；W′為合并計(jì)算中各次實(shí)驗(yàn)結(jié)果的校正權(quán)重；SM為M的標(biāo)準(zhǔn)誤；FL為可信限；FL%為可信限率；f為自由度；n為實(shí)驗(yàn)結(jié)果個(gè)數(shù)；S2為合并計(jì)算中各次實(shí)驗(yàn)間mW′；t V7.020131101年月效價(jià)標(biāo)準(zhǔn)品的配制方低分子量肝V7.020131101年月效價(jià)標(biāo)準(zhǔn)品的配制方低分子量肝素標(biāo)準(zhǔn)品一支，用1ml注射用水溶BufferA10Xadorf行分裝1ml/管，—20℃冷凍保存，可在3個(gè)月瓶?jī)?nèi)，蒸水洗安瓿瓶8次，每次1ml，移Xa配制及分裝記錄”，并修改附件相關(guān)記錄。1lBuferA稀釋成2抗Iadorf1ml/20℃31ml移至10ml量瓶，水洗安瓿瓶8每次1ml，勻。分裝于離心管中,ml/管，—20℃冷凍保a年月2015年版藥年月效價(jià)標(biāo)準(zhǔn)品貯備液的配制方法進(jìn)行4.1.3.7和4.2.3.7兩項(xiàng)中標(biāo)準(zhǔn)品貯備液的配制由“取低分子量肝素標(biāo)準(zhǔn)品一支，用1ml雙蒸水溶解，移至10ml量瓶?jī)?nèi)，蒸水洗安瓿瓶8次，每次1ml，移至量瓶?jī)?nèi)，加雙蒸水20℃冷凍保存。每支分裝后的標(biāo)準(zhǔn)品抗支，配制成適宜濃度（經(jīng)穩(wěn)定性確認(rèn)過(guò)的冷凍保存。每支分裝后的標(biāo)準(zhǔn)品需使年月硫酸根與羧酸根摩爾比的滴定方式發(fā)生變更。硫酸根與羧酸根摩爾比測(cè)定中的電導(dǎo)滴定由“使用電導(dǎo)率儀人工滴加滴定液手動(dòng)記錄數(shù)據(jù)”變更為“采用自動(dòng)電位滴定儀自動(dòng)滴定并測(cè)得電導(dǎo)值”。2.增加效價(jià)測(cè)定合并計(jì)算不均一的年月抗IIa因子效價(jià)測(cè)定數(shù)據(jù)組數(shù)發(fā)mg價(jià)計(jì)算公式發(fā)生變更。在4.3項(xiàng)中“上述抗XaIa2穩(wěn)定性品每批測(cè)一每次組數(shù)，2015年版四部通則1431（定性產(chǎn)品可測(cè)一組據(jù)后進(jìn)行合并計(jì)算，若仍不均一再按上述處理2Xa2IIa1穩(wěn)性品效價(jià)定時(shí)每稱(chēng)量1aIIa2合并計(jì)算值。若軟件計(jì)算結(jié)果顯示數(shù)據(jù)不均一，則需根據(jù)《中國(guó)藥典》2015年版141兩組數(shù)據(jù)合并計(jì)算結(jié)果顯示不均一的需再測(cè)一4.5mg效價(jià)計(jì)算公式”，并修改附件相關(guān)記錄。年月參考標(biāo)準(zhǔn)增加《中國(guó)藥典分析檢測(cè)技術(shù)指硫酸根與羧酸根摩爾比的滴定方法增加手動(dòng)滴定。捷倫液相色譜儀數(shù)據(jù)結(jié)果的計(jì)算方法。更為“可信限率（FL%）10%1：分子量與分子量分布GPC件計(jì)算方法，計(jì)算方法轉(zhuǎn)移至儀器使用維護(hù)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程中。1：《t2：《低分子量肝素鈣檢驗(yàn)記錄》1123456789低分子量肝素鈣檢驗(yàn)記 規(guī)格TEC-CP-T-數(shù)量年月日備注 5% 是 否是 否 是 否是 否是 否是 否100-是 否20-是 否是 否是 否 否□符合要 %檢驗(yàn)人 復(fù)核人 規(guī)格年月日年月日年月日年月日年月日年月日是 否是 否是 否 否□符合要供試品溶液取本品g加水ml使溶解制成供試品溶（濃度為5％；天平室溫度：℃；天平室濕度：%。（1）（2） 規(guī)格 是 否是 否 是 否是 否 是 否是 否是 否pH是 否是 否25ml燒杯、電 否□符合要用pH6.86混合磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖液對(duì)儀器進(jìn)行校正校正時(shí)溫度 用pH4.01鄰苯二甲酸氫鉀標(biāo)準(zhǔn)緩沖液或pH9.18硼砂標(biāo)準(zhǔn)緩沖液核對(duì)校正示值，核對(duì)誤差不得超過(guò)是□否□是□否□是□否□斜率（是□否□供試品溶液稱(chēng)取供試品1 ml；供試品2 規(guī)格 是 否是 否 是 否是 否 是 否是 否是 否是 否是 否是 否是 否是 否 否□符合要0.5號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液的：取濁度標(biāo)準(zhǔn)原液ml，加水定容至100ml，搖勻即得黃色標(biāo)準(zhǔn)貯備液的：取比色用氯化鈷液ml，比色用重鉻酸鉀液ml，加水定100ml，搖勻即得。黃色號(hào)標(biāo)準(zhǔn)比色液的：取黃色標(biāo)準(zhǔn)貯備液ml，加水ml，混勻即得操作：取本品g10ml1ml5000IU25ml度淺于或等于0.5號(hào)級(jí)別的濁度標(biāo)準(zhǔn)液即為澄清如顯色，另取黃色2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)比色液10ml，置于結(jié)果：天平室溫度：℃，天平室濕度： 規(guī)格是 否是 否是 否是 否1ml4mg260nm于0.20；280nm0.15。 %供試品 260nm280nm 規(guī)格年月日是 否是 否是 否 否□符合要 ml使溶解；天平室溫度： %。-α1～230 規(guī)格年月日年月日年月日年月日年月日是 否是 否是 否是 否50ml燒 否□符合要 WF:校正系數(shù)；1.4011ml（0.1mol/L）1.401mgN滴定液濃度 ；校正系數(shù) 溫度 ℃濕度 含氮量 規(guī)格是 否是 否稱(chēng)量瓶、玻璃干燥器、五氧化二 否□符合要670Pa)。℃ ℃ 日~

W1W2W312失重10.0%。 規(guī)格年月日年月日年月日年月日年月日年月日年月日年月日年月日是 否是 否是 否是 否是 否是 否是 否是 否是 否瓷坩鍋、可調(diào)式電爐、 硫代乙酰胺試液：量取氫氧化鈉·甘油·水混合溶液 ml，加入硫代乙酰胺 ml，置水浴上加熱20秒鐘，冷卻，立即使用。 規(guī)格1.0g0.5～1ml0.5ml500～600℃熾2ml15ml，滴加氨試液至對(duì)酚加水稀釋成25ml，作為乙管；另取配制供試品溶液的試劑，置瓷坩鍋中蒸干后，加醋酸鹽緩沖液2ml，2下，乙管中顯示的顏色與甲管比較，不得更深。 標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液濃度：每1ml相當(dāng)于 的Pb；用量： 檢驗(yàn)人 復(fù)核人 乙二胺四乙酸二鈉滴定液 是 否是 否 是 否是 否 是 否是 否是 否是 否是 否 否□符合要操作：取本品約0.4g，精密稱(chēng)定，置錐形瓶中加水至100ml、加氫氧化鈉試液15ml與鈣紫紅素指示劑約0.1g，用0.05mol/L乙二胺四乙酸二鈉滴定液滴定，至溶液由紫紅色轉(zhuǎn)變?yōu)榧兯{(lán)色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml乙二胺四乙酸二鈉滴定液(0.05mol/L)相當(dāng)于2.004mg的鈣。平定三次。實(shí)驗(yàn)記錄及計(jì)鈣含量（

W

（ml； （mlF：校正系數(shù)F=C/0.05mol/L；C：滴定液濃度(mol/L)；W：樣品的質(zhì)量（g mol/L ；干燥失 樣品重乙二胺四乙酸二鈉滴定液消耗體積鈣含量檢驗(yàn)人 復(fù)核人 試廠(chǎng)是 0.1ml/是 ml/是 否□符合要求MVD

取供試

取

取 加

加

加 取

取 加

加

取 加

取 加

取 加 供試品陽(yáng)性對(duì)照溶液的：取 各ml于離心管中，混勻，取裝有0.1ml鱟試劑溶液的安瓿8其中2支加入0.1ml樣品作為樣品管，2支加入陽(yáng)性對(duì)0.1ml20.1ml，2加細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水0.1ml作為對(duì)照管后垂直放入37±1℃水浴中，保溫60±2分鐘。，天平室溫度：℃，天平室濕度：水浴溫度：℃；保溫時(shí)間 12“+”“－”檢驗(yàn)人 復(fù)核人 是 否是 否7% 是 否是 否是 否是 否是 否是 否是 否///50ml錐形瓶，燒杯、25ml量筒、轉(zhuǎn) 否□符合要供試品溶液的：稱(chēng)取供試 天平室溫度 %檢驗(yàn)數(shù)據(jù)及計(jì)算結(jié)果：檢驗(yàn)數(shù)據(jù)：NaOH滴定液體積0電導(dǎo)率(NaOH滴定液體積電導(dǎo)率(NaOH滴定液體積電導(dǎo)率(NaOH滴定液體積電導(dǎo)率(計(jì)算與結(jié)果：使用excely=ax+b線(xiàn)性回歸得到三條直線(xiàn)方程，第一條直線(xiàn)方程 ；第二條直線(xiàn)程 ；第三條直線(xiàn)方程 第一條直線(xiàn)與第二條直線(xiàn)和第二條直線(xiàn)與第三條直線(xiàn)的交點(diǎn)對(duì)應(yīng)的氫氧化鈉體積毫升數(shù)V1和V2， V2= 硫酸根與羧酸根的摩爾比為V1/(V2-V1)= 檢驗(yàn)人 復(fù)核人 儀器與用具：是 否量瓶是 否移液器是 否刻度吸管是 否pH是 否天平是 否天平是 否循環(huán)水式真空泵/燒杯、試劑瓶、滴管、試管、離心管、注射器、0.22μm過(guò)濾器、0.22μm濾膜、樣品瓶()。 目測(cè)：是 否 符合要試藥與試液： 是 否是 否 是 否是 否 是 否是 否 是 否是 否0.05%疊氮鈉溶液 是 否是 否色譜條件：以親水性鍵合硅膠為填充劑【TSKG2000SWXL(300mm×7.8mm)或相應(yīng)的可分離15000～1000002.84%硫酸鈉溶液，流速0.5ml/min；柱溫35℃；紫外檢測(cè)波長(zhǎng)234nm；進(jìn)樣量25μl。色譜柱（廠(chǎng)家： ，型號(hào)： ，規(guī)格： ，編號(hào) ）；流動(dòng)相流速 ml/min；柱溫 ℃；紫外檢測(cè)波長(zhǎng)：nm13.4溶液配制：13.4.1ml 13.4.2 ，對(duì)照品數(shù)均分子量為 13.4.3葡萄糖醛酸溶液（5mg/ml）：稱(chēng)取葡萄糖醛酸（廠(chǎng)家： 號(hào)： ）g，加流動(dòng)相ml溶解，制成每1ml約含5mg葡萄糖醛酸的測(cè)定：取葡萄糖醛酸溶液25μl5針；取標(biāo)準(zhǔn)品溶液25μl2針；取供試品（1）25μl注入液相色譜儀，測(cè)定并記錄示差色譜圖；取供試品（2）25μl注入液判定標(biāo)準(zhǔn)：重均分子量應(yīng)為3000～4500，重均分子量小于8000的級(jí)分不少于總量的85%計(jì)算與結(jié)果：標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)：/12345紫外保留時(shí)間/葡萄糖醛酸示差色譜圖與紫外色譜圖主峰保留時(shí)間差為 min 供試品/供試品/ 對(duì)照品 供試品/供試品/ 對(duì)照品紫外與示差色譜圖的峰總面積：對(duì)照品示差色譜圖的峰總面積（對(duì)照品紫外色譜圖的峰總面積（對(duì)照品示差與紫外色譜圖峰總面積的比值校正因子fr相乘等于數(shù)均分子量計(jì)算對(duì)照品任意點(diǎn)分子量：RIi：對(duì)照品示差色譜圖中某個(gè)時(shí)間點(diǎn)對(duì)應(yīng)的峰高；UV234i：對(duì)照品紫外色譜圖中某個(gè)時(shí)間點(diǎn)對(duì)應(yīng)的峰高。abcdRGPC，GPC(Mw)和分子量小于8000部分的百分比率 P[(RIj)/(j inm(RIi）：供試品示差色譜圖中峰總面積（除溶劑峰面積供試品供試品8000的百分比供試品供試品供試品的重均分子量為 ，小于8000級(jí)分的百分比為 ％。（圖譜附后檢驗(yàn)人 復(fù)核人 是 否是 否是 否10-是 否50-是 否100-是 否20-是 否是 否是 否是 否是 否（10×42mm（15×100mm目測(cè)：是 否□符合要Buffer 是 否是 否Buffer 是 否是 否30% 是 否是 否 是 否是 否Xa 是 否是 否 是 否是 否 ，抗Xa因子 μl用BufferA定容至 ml量瓶，溶液濃度為 μl加BufferA μl混勻，配制成0.125IU/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。BufferA濃度 （估值 μl用BufferA定容至 ml量瓶配制成1IU/ml的溶液，取該溶液 加BufferA μl混勻，配制成0.125IU/ml的供試品溶液。BufferA濃度BS2000（具體數(shù)據(jù)附 是 否是 否是 否10-是 否50-是 否100-是 否20-是 否是 否是 否是 否是 否（10×42mm（15×100mm目測(cè)：是 否□符合要Buffer 是 否是 否Buffer 是 否是 否30% 是 否是 否 是 否是 否Xa 是 否是 否 是 否是 否 ，抗Xa因子 μl用BufferA定容至 ml量瓶，溶液濃度為 μl加BufferA μl混勻，配制成0.125IU/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。BufferA濃度 （估值 μl用BufferA定容至 ml量瓶配制成1IU/ml的溶液，取該溶液 加BufferA μl混勻，配制成0.125IU/ml的供試品溶液。BufferA濃度BS2000（具體數(shù)據(jù)附 %Xa90IU/mg。特異反應(yīng)剔除：同一批供試品重復(fù)nn個(gè)測(cè)定結(jié)果，可用合并計(jì)算的方法求其效價(jià)（PT）的均值及其可信限(FL)。若合并計(jì)算結(jié)果出現(xiàn)不均一，且為個(gè)別實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響n(yōu)次實(shí)驗(yàn)結(jié)果的均一性，可以剔除個(gè)別結(jié)果，將其余均一的結(jié)果進(jìn)行合并計(jì)算，但剔除個(gè)別結(jié)果應(yīng)符合“特異反應(yīng)剔除”的要求。ya表示特異反應(yīng)值（或其規(guī)定的函數(shù)），ym為與ya相對(duì)的另一的反應(yīng)值，y2、y3為與ya最接近的兩個(gè)反應(yīng)值，ym1、ym-2為與ym最接近的兩個(gè)反應(yīng)值，m是反應(yīng)結(jié)果的總個(gè)數(shù)，將各數(shù)值按大小次序排列如下：ya、y2、y3………ym2、ym-1、yaym最小；如yaym最大。J值的計(jì)算：m=3～7

Jy2ym剔除特異反應(yīng)的Jm34567J檢驗(yàn)數(shù)據(jù)及計(jì)算結(jié)果：原始數(shù)據(jù)排序后數(shù)據(jù)J判定標(biāo)準(zhǔn)：J的計(jì)算值大于J值表中規(guī)定的相應(yīng)數(shù)值時(shí)，ya為特異反應(yīng)，可剔除，反之，則ya非特異反應(yīng)，不可剔除。結(jié)論：□ya為特異反應(yīng)，可剔除?！鮵a非特異反應(yīng)，不可剔除。多次實(shí)驗(yàn)結(jié)果不均一時(shí)的校正及計(jì)算:若合并計(jì)算結(jié)果出現(xiàn)不均一，且n次實(shí)驗(yàn)結(jié)果的不均一性并非個(gè)別實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，則應(yīng)對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行校正后再計(jì)算。lgPT＝M（PT為每次實(shí)驗(yàn)所測(cè)的效價(jià)值S2W：WS2M'

M(SM

mS2m

mS2m

M2(M)2/n

(S2MMn

f=n- WS W WSMM W ；M

MFL=MtPT及其可信限:PT=antilg PT的FL=antilg(MtSMPTFL%

m差，即效價(jià)比值的對(duì)數(shù)，合并計(jì)算中M=lgPTW′為合并計(jì)算中各次實(shí)驗(yàn)結(jié)果的校正權(quán)重；SMmW′；t 信限計(jì)算用tft測(cè)得效價(jià)檢驗(yàn)人 復(fù)核人 是 否是 否是 否10-是 否50-是 否100-是 否20-是 否是 否是 否是 否是 否（10×42mm（15×100mm目測(cè)：是 否□符合要Buffer 是 否是 否Buffer 是 否是 否30% 是 否是 否 是 否是 否IIa 是 否是 否 是 否是 否 ，抗IIa因子 μl用BufferA定容至 ml量瓶，溶液濃度為 μl加BufferA μl混勻，配制成0.12IU/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。BufferA濃度供試品溶液的配制：取供試品抗Xa因子效價(jià)測(cè)定下的母液（估值： IU/mg μl用BufferA定容至 ml量瓶配制成1IU/ml的溶液，取該溶液 加BufferA μl混勻，配制成0.12IU/ml的供試品溶液。BufferA濃度BS2000（具體數(shù)據(jù)附 是 否是 否是 否10-是 否50-是 否100-是 否20-