《臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)》課程實(shí)驗(yàn)教學(xué)大綱

《臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)》課程實(shí)驗(yàn)教學(xué)大綱課程編號(hào)：32061011a 課程名稱(chēng)：臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)適用專(zhuān)業(yè)：醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)課程類(lèi)別：必修開(kāi)課學(xué)期：第五學(xué)期實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí)：48學(xué)分：5一、開(kāi)課實(shí)驗(yàn)室醫(yī)學(xué)影像與檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室二、課程性質(zhì)與任務(wù)課程性質(zhì)：《臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)》是一門(mén)將實(shí)驗(yàn)室科學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)相結(jié)合的學(xué)科，是研究病原微生物的生物學(xué)特性、致病性、微生物檢驗(yàn)與防治原則的學(xué)科，是醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)專(zhuān)業(yè)的一門(mén)主干課和專(zhuān)業(yè)課。課程任務(wù)：通過(guò)系統(tǒng)學(xué)習(xí)研究感染性疾病的病原體特征，尋找快速、準(zhǔn)確的感染性疾病病原學(xué)診斷方法與策略，培養(yǎng)學(xué)生的臨床思維能力及熟練的動(dòng)手操作能力，使學(xué)生具有扎實(shí)的基礎(chǔ)理論和臨床實(shí)踐技能，為以后從事科研工作及臨床檢驗(yàn)工作下堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。三、教學(xué)目的和要求1.掌握常用微生物學(xué)技術(shù)和微生物學(xué)檢驗(yàn)方法的原理、操作、結(jié)果判定、質(zhì)量控制及方法學(xué)評(píng)價(jià)。2.熟悉應(yīng)用臨床思維分析能力對(duì)感染性疾病的診斷預(yù)防及治療提出專(zhuān)業(yè)的見(jiàn)解。3.提高學(xué)生的動(dòng)手能力，對(duì)微生物學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)常用的實(shí)驗(yàn)操作方法與常用儀器能熟練操作。四、考核形式要求實(shí)驗(yàn)成績(jī)100分記，實(shí)驗(yàn)考核占總成績(jī)20%。五、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目名稱(chēng)與學(xué)時(shí)分配序號(hào)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目名稱(chēng)實(shí)驗(yàn)類(lèi)型實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí)每組人數(shù)實(shí)驗(yàn)要求(必做或選做)1細(xì)菌檢驗(yàn)基本技術(shù)（一）驗(yàn)證412必做2細(xì)菌檢驗(yàn)基本技術(shù)（二）驗(yàn)證412必做3抗菌藥物敏感試驗(yàn)及細(xì)菌生化反應(yīng)接種驗(yàn)證412必做4細(xì)菌常用生化反應(yīng)驗(yàn)證412必做5血液標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)綜合412必做6尿液標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)綜合412必做7糞便標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)設(shè)計(jì)412必做8膿汁標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)綜合412必做9下呼吸道標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)綜合412必做10院內(nèi)感染的監(jiān)測(cè)綜合412必做11真菌試驗(yàn)驗(yàn)證412必做12實(shí)驗(yàn)考核綜合412必做實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的具體內(nèi)容實(shí)驗(yàn)一細(xì)菌檢驗(yàn)基本技術(shù)（一）1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵螅?）掌握高壓蒸汽滅菌技術(shù)；（2）掌握常用的液體、固體、半固體培養(yǎng)基的配制；（3）熟悉臨床微生物學(xué)與檢驗(yàn)教學(xué)實(shí)驗(yàn)室規(guī)則；（4）熟悉臨床微生物實(shí)驗(yàn)常用器材的處理,包裹及滅菌方法。2、材料試劑高壓滅菌器、燒瓶、蛋白胨、牛肉膏等3、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容臨床微生物學(xué)與檢驗(yàn)教學(xué)實(shí)驗(yàn)室規(guī)則（見(jiàn)臨床微生物學(xué)與檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)）：實(shí)驗(yàn)室意外應(yīng)急處理措施（見(jiàn)臨床微生物學(xué)與檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)）：常用器材的處理：高壓蒸汽滅菌器的使用：培養(yǎng)基制備的基本過(guò)程：常用培養(yǎng)基的制備：肉膏湯配方：1000ml蒸餾水+牛肉膏3g+蛋白胨10g+NaCl5g4、教學(xué)方式老師講解、示教+學(xué)生互相操作，老師指導(dǎo)5、考核要求隨機(jī)抽查二組學(xué)生，檢查操作的準(zhǔn)確性并糾正操作中的錯(cuò)誤。6、實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求要求書(shū)寫(xiě)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?shí)驗(yàn)器材、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、檢查結(jié)果、實(shí)驗(yàn)結(jié)論。實(shí)驗(yàn)二細(xì)菌檢驗(yàn)基本技術(shù)(二)1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵螅?）掌握平板劃線(xiàn)、斜面、液體和半固體培養(yǎng)基等各種接種方法;（2）熟悉常用細(xì)菌接種用具、接種細(xì)菌的環(huán)境要求和無(wú)菌操作要領(lǐng);（3）掌握革蘭染色法原理、操作步驟及臨床意義；（4）掌握細(xì)菌涂片的制備。2、材料試劑接種環(huán)、接種針、酒精燈、固體平板、斜面、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基、革蘭染液、大腸埃希菌，葡萄球菌3、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容細(xì)菌分離培養(yǎng)與接種技術(shù)：固體平板劃線(xiàn)接種法；斜面接種法；液體接種法；半固體穿刺接種法。革蘭染色法：實(shí)驗(yàn)原理；實(shí)驗(yàn)步驟；實(shí)驗(yàn)結(jié)果。4、教學(xué)方式老師講解、示教+學(xué)生互相操作，老師指導(dǎo)5、考核要求隨機(jī)抽查二組學(xué)生，檢查操作的準(zhǔn)確性并糾正操作中的錯(cuò)誤。6、實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求要求書(shū)寫(xiě)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?shí)驗(yàn)器材、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、檢查結(jié)果、實(shí)驗(yàn)結(jié)論。實(shí)驗(yàn)三抗菌藥物敏感試驗(yàn)（K-B擴(kuò)散法）及細(xì)菌生化反應(yīng)接種1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵笳莆誎-B紙片擴(kuò)散法的原理、操作方法、結(jié)果判讀及其臨床意義2、實(shí)驗(yàn)原理將含有定量抗菌藥物的紙片（藥敏紙片）貼在已接種待測(cè)菌的瓊脂平板表面特定部位，該點(diǎn)稱(chēng)為抗菌藥源。藥物借其分子的擴(kuò)散力向周?chē)傊袛U(kuò)散，形成了隨著與藥源距離加大，瓊脂中藥物濃度逐漸減少的梯度濃度。其藥源周?chē)欢▍^(qū)域的瓊脂內(nèi)藥物濃度高于抑制該待測(cè)菌所需濃度時(shí)，則該區(qū)域內(nèi)細(xì)菌不能生長(zhǎng)，形成透明抑菌圈。抑菌圈的大小可以反映待測(cè)菌對(duì)該測(cè)定物的敏感程度，并與該藥對(duì)待測(cè)菌的最低抑菌濃度（MIC）呈負(fù)相關(guān)，即抑菌圈越大，MIC越小。3、材料試劑金黃色葡萄球菌菌液、大腸埃希菌菌液、無(wú)菌棉簽、鑷子、接種環(huán)、刻度尺、0.5麥?zhǔn)蠁挝槐葷峁?、抗菌紙片、水解酪蛋白瓊脂（MH瓊脂）4、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容涂布接種貼藥物紙片標(biāo)記培養(yǎng)5、教學(xué)方式老師講解、示教+學(xué)生互相操作，老師指導(dǎo)6、考核要求隨機(jī)抽查二組學(xué)生，檢查操作的準(zhǔn)確性并糾正操作中的錯(cuò)誤。7、實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求要求書(shū)寫(xiě)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?shí)驗(yàn)器材、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、檢查結(jié)果、實(shí)驗(yàn)結(jié)論。實(shí)驗(yàn)四細(xì)菌常用生化反應(yīng)1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵螅?）進(jìn)一步掌握細(xì)菌接種技術(shù)；（2）熟悉鑒別細(xì)菌常用的生化反應(yīng)的培養(yǎng)基、方法和意義。（3）學(xué)會(huì)觀察糖發(fā)酵、靛基質(zhì)、甲基紅、VP、枸櫞酸鹽利用、尿素分解反應(yīng)現(xiàn)象，正確作出結(jié)果判斷；（4）掌握腸桿菌在復(fù)合生化反應(yīng)培養(yǎng)基上的生化反應(yīng)及結(jié)果解釋。2、材料試劑生化培養(yǎng)基、大腸桿菌、傷寒桿菌、產(chǎn)氣桿菌、痢疾志賀菌、變形桿菌等。3、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容生化反應(yīng)接種：復(fù)合生化反應(yīng)接種：記錄細(xì)菌常用生化反應(yīng)的結(jié)果現(xiàn)象：各實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析：4、教學(xué)方式老師講解、示教+學(xué)生互相操作，老師指導(dǎo)5、考核要求隨機(jī)抽查二組學(xué)生，檢查操作的準(zhǔn)確性并糾正操作中的錯(cuò)誤。6、實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求要求書(shū)寫(xiě)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?shí)驗(yàn)器材、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、檢查結(jié)果、實(shí)驗(yàn)結(jié)論。實(shí)驗(yàn)五血液標(biāo)本的微生物檢驗(yàn)1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵螅?）掌握血液標(biāo)本的一般細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)程序；（2）掌握金黃色葡萄球菌的鑒定方法。2、材料試劑病人血液、血瓊脂平板(BA)、普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂（NA）、無(wú)菌生理鹽水、正常人血漿、3%H2O2，0.5麥?zhǔn)媳葷峁堋⒏锾m染液、無(wú)菌棉簽、無(wú)菌試管、接種環(huán)、半自動(dòng)微生物鑒定儀等。3、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容標(biāo)本采集：檢驗(yàn)程序：檢驗(yàn)方法：增菌培養(yǎng)；分離培養(yǎng)；菌落觀察；染色鏡檢；生化鑒定、藥物敏感試驗(yàn)4、教學(xué)方式老師講解、示教+學(xué)生互相操作，老師指導(dǎo)5、考核要求隨機(jī)抽查二組學(xué)生，檢查操作的準(zhǔn)確性并糾正操作中的錯(cuò)誤。6、實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求要求書(shū)寫(xiě)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?shí)驗(yàn)器材、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、檢查結(jié)果、實(shí)驗(yàn)結(jié)論。實(shí)驗(yàn)六尿液標(biāo)本微生物檢驗(yàn)1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵螅?）掌握尿液標(biāo)本的一般微生物學(xué)檢驗(yàn)程序和細(xì)菌計(jì)數(shù)方法；（2）掌握大腸埃希菌的微生物學(xué)鑒定方法。2、材料試劑中段尿或模擬尿標(biāo)本、培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)瓊脂、血瓊脂（BA）、MAC、M-H平板、革蘭染色液、生理鹽水、氧化酶試劑、無(wú)菌吸管、無(wú)菌石蠟油、半自動(dòng)微生物鑒定儀等。3、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容標(biāo)本采集：檢驗(yàn)程序：檢驗(yàn)方法：細(xì)菌計(jì)數(shù)和直接藥敏試驗(yàn)；涂片檢查；分離培養(yǎng)；生化鑒定；藥敏試驗(yàn)4、教學(xué)方式老師講解、示教+學(xué)生互相操作，老師指導(dǎo)5、考核要求隨機(jī)抽查二組學(xué)生，檢查操作的準(zhǔn)確性并糾正操作中的錯(cuò)誤。6、實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求要求書(shū)寫(xiě)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?shí)驗(yàn)器材、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、檢查結(jié)果、實(shí)驗(yàn)結(jié)論。實(shí)驗(yàn)七糞便標(biāo)本的微生物學(xué)檢驗(yàn)1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵螅?）掌握糞便標(biāo)本微生物學(xué)檢驗(yàn)程序；（2）掌握志賀菌、沙門(mén)菌及彎曲菌的微生物學(xué)檢驗(yàn)方法。2、材料試劑糞便標(biāo)本、培養(yǎng)基MAC、SS、半自動(dòng)微生物鑒定儀等。3、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容標(biāo)本采集：檢驗(yàn)程序：檢驗(yàn)方法：分離培養(yǎng)；涂片染色；分純培養(yǎng)；生化鑒定；血清學(xué)鑒定；藥敏試驗(yàn)4、教學(xué)方式老師講解、示教+學(xué)生互相操作，老師指導(dǎo)5、考核要求隨機(jī)抽查二組學(xué)生，檢查操作的準(zhǔn)確性并糾正操作中的錯(cuò)誤。6、實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求要求書(shū)寫(xiě)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?shí)驗(yàn)器材、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、檢查結(jié)果、實(shí)驗(yàn)結(jié)論。實(shí)驗(yàn)八膿汁標(biāo)本的微生物學(xué)檢驗(yàn)1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵螅?）掌握膿汁標(biāo)本的一般微生物學(xué)檢驗(yàn)程序;（2）掌握銅綠假單胞菌的鑒定方法。2、材料試劑膿汁標(biāo)本、普通瓊脂平板（NA）、氧化酶試劑、0.5號(hào)麥?zhǔn)媳葷峁?、革蘭染液等、無(wú)菌棉簽、無(wú)菌試管及吸管、顯微鏡、半自動(dòng)微生物鑒定儀等。3、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容標(biāo)本采集：檢驗(yàn)程序：檢驗(yàn)方法：直接涂片鏡檢；分離培養(yǎng)；生化鑒定；藥敏試驗(yàn)4、教學(xué)方式老師講解、示教+學(xué)生互相操作，老師指導(dǎo)5、考核要求隨機(jī)抽查二組學(xué)生，檢查操作的準(zhǔn)確性并糾正操作中的錯(cuò)誤。6、實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求要求書(shū)寫(xiě)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?shí)驗(yàn)器材、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、檢查結(jié)果、實(shí)驗(yàn)結(jié)論。實(shí)驗(yàn)九下呼吸道標(biāo)本的微生物學(xué)檢驗(yàn)1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵螅?）掌握痰液標(biāo)本中結(jié)核分枝桿菌的微生物學(xué)檢驗(yàn)程序；（2）掌握抗酸染色法；（3）熟悉結(jié)核分枝桿菌營(yíng)養(yǎng)要求及生長(zhǎng)特點(diǎn)。2、材料試劑模擬痰標(biāo)本、滅菌4%NaOH、1mol/LHCL、抗酸染色液、半自動(dòng)微生物鑒定儀等。3、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容標(biāo)本采集：檢驗(yàn)程序：檢驗(yàn)方法：直接涂片和厚膜涂片法；抗酸染色法；培養(yǎng)檢查；常見(jiàn)病原體的觀察4、教學(xué)方式老師講解、示教+學(xué)生互相操作，老師指導(dǎo)5、考核要求隨機(jī)抽查二組學(xué)生，檢查操作的準(zhǔn)確性并糾正操作中的錯(cuò)誤。6、實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求要求書(shū)寫(xiě)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?shí)驗(yàn)器材、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、檢查結(jié)果、實(shí)驗(yàn)結(jié)論。實(shí)驗(yàn)十真菌試驗(yàn)1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵螅?）掌握真菌培養(yǎng)物菌落形態(tài)學(xué)特征；（2）掌握白色念珠菌、新型隱球菌形態(tài)學(xué)特征；（3）熟悉美蘭染色法；（4）掌握新型隱球菌墨汁染色法；（5）熟悉皮膚絲狀菌檢查法。2、材料試劑玻片、鑷子、顯微鏡、美蘭染液、KOH溶液3、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容白色念珠菌、新型隱球菌、絲狀菌在沙保培養(yǎng)基培養(yǎng)物觀察白色念珠菌玻片標(biāo)本觀察（白帶標(biāo)本）白色念珠菌玉米培養(yǎng)基厚膜孢子觀察白色念珠菌美藍(lán)染色法新型隱球菌墨汁染色觀察莢膜皮膚絲狀菌檢查法（不染色標(biāo)本直接檢查法）4、教學(xué)方式老師講解、示教+學(xué)生互相操作，老師指導(dǎo)5、考核要求隨機(jī)抽查二組學(xué)生，檢查操作的準(zhǔn)確性并糾正操作中的錯(cuò)誤。6、實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求要求書(shū)寫(xiě)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?shí)驗(yàn)器材、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、檢查結(jié)果、實(shí)驗(yàn)結(jié)論。實(shí)驗(yàn)十一院內(nèi)感染的監(jiān)測(cè)1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵螅?）掌握院內(nèi)感染病原微生物檢測(cè)的主要方法和內(nèi)容；（2）熟悉院內(nèi)感染病原體檢測(cè)的意義。2、材料試劑小試管、吸管、平皿、棉拭子、營(yíng)養(yǎng)肉湯、普通培養(yǎng)基、無(wú)菌生理鹽水、接種環(huán)、酒精燈3、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容物體表面的監(jiān)測(cè)醫(yī)護(hù)人員手監(jiān)測(cè)空氣監(jiān)測(cè)消毒液監(jiān)測(cè)4、教學(xué)方式老師講解、示教+學(xué)生互相操作，老師指導(dǎo)5、考核要求隨機(jī)抽查二組學(xué)生，檢查操作的準(zhǔn)確性并糾正操作中的錯(cuò)誤。6、實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求要求書(shū)寫(xiě)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?shí)驗(yàn)器材、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、檢查結(jié)果、實(shí)驗(yàn)結(jié)論。