新鮮冰凍血漿的病毒滅活方法及其應(yīng)用

新鮮冰凍血漿的病毒滅活方法及其應(yīng)用新鮮冰凍血漿(FFP)幾乎含有全部凝血因子，主要用于多種凝血因子缺乏伴有嚴(yán)重貧血的患者，也用于大量失血或凝血試驗(yàn)異常而需要施行侵入性操作的患者以預(yù)防出血。雖然對(duì)FFP供者進(jìn)行了嚴(yán)格的篩選和實(shí)驗(yàn)室病毒檢測(cè)，但經(jīng)血傳播病毒的危險(xiǎn)性仍然存在，原因在于：1)檢測(cè)方法靈敏度有限；2)“窗口期”問(wèn)題；3)新病毒的出現(xiàn)；4)目前我國(guó)檢測(cè)病毒的種類(lèi)僅為HIV1/2、HBV、HCV；因此，檢測(cè)結(jié)果陰性并不能排除病毒感染的可能。據(jù)估計(jì)，輸用血漿的危險(xiǎn)程度為10000U可發(fā)生75次不良反應(yīng)，每1000名患者有37起不良反應(yīng)發(fā)生。1項(xiàng)研究在分析了48年來(lái)應(yīng)用未經(jīng)病毒滅活血漿和經(jīng)病毒滅活血漿后發(fā)生不良反應(yīng)需要救治的花費(fèi)，發(fā)現(xiàn)應(yīng)用病毒滅活血漿至少每年為美國(guó)節(jié)約200萬(wàn)美元，如果考慮非感染性并發(fā)癥，如輸血相關(guān)性急性肺損傷(TRALI)，可以為英國(guó)每年節(jié)約5萬(wàn)英鎊［1］。目前歐洲各國(guó)都已禁止使用未經(jīng)病毒滅活的血漿，國(guó)內(nèi)應(yīng)用FFP非常廣泛，但病毒滅活尚未普遍進(jìn)行。目前國(guó)內(nèi)外幾種病毒滅活技術(shù)正在臨床應(yīng)用，血漿成分及其衍生物主要采用有機(jī)溶劑去污劑法(SD)和亞甲蘭加可見(jiàn)光法(MBR)，補(bǔ)骨脂素加光照血漿(PLT)已經(jīng)在歐洲應(yīng)用。核黃素加光照(PRT)對(duì)血漿、紅細(xì)胞和血小板3種成分中的病毒可能均有滅活作用，但仍處于研發(fā)階段；除SD法外其它滅活劑的作用都是針對(duì)病毒核酸的［2］?，F(xiàn)就血漿病毒滅活的方法和應(yīng)用作一簡(jiǎn)介。1SD法1.1滅活方法SD法由紐約血液中心發(fā)明，通常用磷酸3N丁酯(TNBP)和吐溫-80或膽酸鈉，二者協(xié)同作用可以溶解和去除病毒的脂包膜而使其滅活。SD法處理血漿是將V2500人份的同型、融化的FFP混合與1%TNBP和1%去污劑TritonX100，在37°C孵育4h，用蔬菜油浸出液萃取之后，用C18層析柱清除溶劑和去污劑。由此制備的血漿經(jīng)無(wú)菌過(guò)濾，200ml分裝，再次于-30C冰凍保存。該法約使血漿稀釋10倍，殘留的微量TNBP(1.2優(yōu)點(diǎn)SD通過(guò)破壞脂包膜病毒外膜結(jié)構(gòu)的完整性或靶細(xì)胞受體識(shí)別位點(diǎn)，使之喪失感染性，故對(duì)脂包膜病毒有較好的滅活效果。國(guó)外評(píng)價(jià)了幾種病毒滅活方法后都認(rèn)為，SD法對(duì)含脂包膜病毒的滅活效果最好，如HBV、HCV和HIV［3,4］。實(shí)驗(yàn)表明SD處理可使黑猩猩感染HBV和HCV的劑量(CID50)分別減少106和105以上，使組織培養(yǎng)感染HIV的劑量(TCID50)減少106以上。SD法能有效殺滅非典型性肺炎(SARS)冠狀病毒，但對(duì)非脂包膜病毒如HAV和B19病毒無(wú)滅活作用。研究證實(shí)經(jīng)SD處理后的血漿蛋白質(zhì)量合格，制備技術(shù)簡(jiǎn)單，有利于大規(guī)模生產(chǎn)和臨床應(yīng)用】5］，且不會(huì)導(dǎo)致紅細(xì)胞溶血，不會(huì)影響血小板的形態(tài)及功能。研究還證實(shí)SDP中凝血因子和蛋白抑制因子(PI)在凍溶后4C保存8h或常溫保存6h均較穩(wěn)定，融化后除了蛋白S(PS)外，所有凝血因子和PI的活性在融化后4C儲(chǔ)存6d至少還有05IU/ml［6］，保持了較高的質(zhì)量，應(yīng)用效能和安全性也沒(méi)有因?yàn)镻S和纖維蛋白抑制因子活性降低而受到限制。SDP混合后可通過(guò)血漿抗體和過(guò)敏原的中和作用消除TRALI，也可明顯減少過(guò)敏反應(yīng)的發(fā)生，并可移除殘余的血細(xì)胞、細(xì)胞碎片和細(xì)菌，移除血管性血友病因子(vWF)等大分子物質(zhì)。從質(zhì)量角度而言，SDP匯集易于標(biāo)準(zhǔn)化，且易于過(guò)程質(zhì)量控制，同一批中的各種凝血因子、纖維蛋白原(Fg)及總蛋白含量都是相同的，能給出準(zhǔn)確含量，易于臨床參照使用。1份研究報(bào)告顯示，2x106U的SDP和11x106U經(jīng)SD處理的血液制品輸用后，尚未見(jiàn)發(fā)現(xiàn)病毒傳播。因此認(rèn)為SDP對(duì)臨床使用有實(shí)際意義，適合大多數(shù)患者選擇應(yīng)用。1.3缺點(diǎn)SD法處理血漿后對(duì)凝血因子活性影響很大，Doyle等［7］研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)SD處理后，血漿FV、F哪和PS分別下降31%、28%和50%；而Heger等［6］研究SDP在凍溶后4C保存8h或常溫保存6h后的凝血因子活性，發(fā)現(xiàn)FIX、FX、FXI、FXH、vWF:Ag、Fg和PC(蛋白C)水平至少平均含有94%,FII、FV、F哪和抗凝血酶(AT)水平至少平均含有78%,立刻融化后FW下降到83%,PS下降到43%，與FFP相比有很大差異，且FFP中F哪活性下降晚于SDP［8］。雖然經(jīng)SD處理后血漿中各種凝血因子均有不同程度的下降，但是仍能滿(mǎn)足臨床的應(yīng)用要求。從處理工藝上講，大量混合后血漿原始成分可能發(fā)生變化，如大分子在vWFSDP及其制備的冷沉淀中缺失，在某種程度上又增加了感染病毒的危險(xiǎn)性，其后還需去除血漿中的穩(wěn)定劑或有毒的化學(xué)物質(zhì)，技術(shù)要求高，投資大，且SD法處理還不能對(duì)血漿中的未知病毒滅活。1.4臨床應(yīng)用SDP已成功地用于治療DIC和因大量輸血引起的凝血因子缺乏的患者，臨床適應(yīng)證同F(xiàn)FP，即主要用于各種凝血因子缺乏的患者和血栓性血小板減少性紫瘢的患者，不能用做血漿容量擴(kuò)充劑和蛋白支持療法。SDP可代替各種凝血因子制劑，用于心臟手術(shù)和各種創(chuàng)傷性失血、燒傷、低蛋白血癥、各種失血性休克以及血液置換治療，對(duì)于TTP的治療效果也很好。SDP副反應(yīng)非常少，臨床表現(xiàn)包括寒戰(zhàn)、腹痛、氣短等，總反應(yīng)率為06%,發(fā)生變態(tài)反應(yīng)比FFP低。有研究對(duì)比較了應(yīng)用SDP和FFP對(duì)心臟手術(shù)后患者凝血功能紊亂治療的效果，發(fā)現(xiàn)它們均使Fg、F哪、AT、PC、游離PS、al抗胰蛋白酶和纖溶酶原升高，PT和APTT下降，兩者沒(méi)有明顯不同；但應(yīng)用FFP后PS活性明顯增加，PI明顯下降，對(duì)凝血酶原片段(F1+2),D二聚體(DD)或Fg降解產(chǎn)物(FDP)沒(méi)有明顯影響；兩者臨床止血效果無(wú)明顯不同，均無(wú)不良反應(yīng)，提示2種成分對(duì)改善止血和纖溶的效果一樣，這已經(jīng)在嚴(yán)重的PS和PI缺陷的患者治療中得到證實(shí)［9］。但是若患者有出血危險(xiǎn)，準(zhǔn)備外科手術(shù)或侵入性操作時(shí)，只能補(bǔ)充相應(yīng)成分缺乏的血液，而不能應(yīng)用SDP［10］。SDP中的TritonX100能夠改變a2抗纖維蛋白酶活性，應(yīng)用時(shí)應(yīng)考慮可能發(fā)生纖溶的危險(xiǎn)［11］，特別是對(duì)有肝病、繼發(fā)性FV缺陷和先天性或者獲得性PS缺陷的患者應(yīng)小心使用。2MBR法2.1滅活方法MBR法病毒滅活技術(shù)自20世紀(jì)90年代初期發(fā)展起來(lái)，目前主要集中于血漿病毒滅活的研究和臨床應(yīng)用，在歐美等發(fā)達(dá)國(guó)家己開(kāi)展多年，是一項(xiàng)比較成熟的技術(shù)。MB屬于吩噻嗪類(lèi)染料，是一種光敏染料，可高效滅活含脂包膜病毒，包括逆轉(zhuǎn)錄病毒、皰疹病毒、囊膜病毒、黃熱病毒等。MBR滅活病毒的原理為：不可逆的插入病毒核酸，誘導(dǎo)斷裂缺口產(chǎn)生，導(dǎo)致病毒功能和遺傳結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)破壞，從而達(dá)到滅活病毒的效果。病毒滅活的效果與MB的濃度和接受光照的強(qiáng)度有關(guān)。實(shí)驗(yàn)證明極低濃度的MB(001|jg/ml)與鹵素?zé)艄庹战Y(jié)合可高效滅活血漿中的模型病毒。1966年，Pohi首次使用MBR血漿病毒滅活的方法，處理程序：首先凍融血漿，凍融后加入MB［(85—120)|jg/U］，光源為白色熒光燈。該方法自1993年起在德國(guó)、瑞士等國(guó)輸血中心使用，收到良好的臨床效果，目前已在歐洲多數(shù)國(guó)家正式獲準(zhǔn)用于FFP的病毒滅活處理。2.2優(yōu)點(diǎn)實(shí)驗(yàn)表明MBR法幾乎可滅活所有的含脂包膜的病毒，如經(jīng)血傳播的HBV、HCV、HIV和HTLV等均有較好的滅活效果［12］，特別適用于單袋FFP的病毒滅活，但對(duì)無(wú)包膜病毒沒(méi)有效果。經(jīng)MBR處理后的血漿(MBRP)中Fg、FW和FIX等的回收率均〉75%,能夠滿(mǎn)足臨床應(yīng)用要求。MBRP中丙種免疫球蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu)沒(méi)有明顯的改變，基本保持完整，大多數(shù)血漿蛋白活性未受影響，處理前后血漿抗體活性沒(méi)有明顯改變，vWF多聚體沒(méi)有明顯的改變，ATIII、PC和vWF:Ag沒(méi)有減少，MB移除過(guò)濾(MBRF)后沒(méi)有激活C3a、C5a、F1+2和FXHa［13］°MBR法可以避免血漿大量混合增加傳播病毒和其它病原體的危險(xiǎn)，對(duì)單人份血漿處理方法簡(jiǎn)單，效果好；而且用MBR法處理不會(huì)像SD法那樣造成明顯的vWF丟失，vWF多態(tài)性結(jié)構(gòu)沒(méi)有改變，但活性有下降。此外，MBR是治療氰化物和亞硝酸鹽中毒的解毒劑，臨床使用劑量比血漿消毒的劑量要大數(shù)百倍，在毒理學(xué)方面對(duì)人體是比較安全的。MBR法用于單袋血漿處理，處理后對(duì)MB的去除也較為簡(jiǎn)單，臨床使用效果肯定，未見(jiàn)副作用。MBR法具有高效、安全、簡(jiǎn)便、毒性低等特點(diǎn)，可大大降低因輸血造成的病毒傳播，比較適用于我國(guó)血站系統(tǒng)。2.3缺點(diǎn)研究發(fā)現(xiàn)采用高濃度MBR和延長(zhǎng)光照時(shí)間處理血漿后，大多數(shù)血漿蛋白都有復(fù)雜的改變，包括纖維蛋白Y鏈、甲狀腺激素結(jié)合蛋白和載脂蛋白AI，因此應(yīng)用MBR時(shí)濃度要嚴(yán)格限制［14］。有研究對(duì)MBR處理10份A型血漿后進(jìn)行評(píng)估，凝血因子的損失程度為：Fg23%,FV10%,FW26%,FIX11%和FXI13%［13］。而Aznar等［15］研究發(fā)現(xiàn)MBP凝血因子的活性平均喪失25%，其中F哪29%,Fg39%,FX11116%,vWF18%。vWF活性喪失明顯低于F哪。用MBRP和冷沉淀對(duì)血管性血友病和FXIII和Fg缺乏癥患者有一定的影響。MB和紅光處理血漿對(duì)血漿的聚合凝結(jié)有影響，形成結(jié)構(gòu)更為緊密的纖維凝塊，但對(duì)纖維蛋白形成凝塊的穩(wěn)定性或纖溶沒(méi)有影響［16］。雖然經(jīng)MB處理和過(guò)濾后血漿F哪和FX喪失15%，光照進(jìn)一步導(dǎo)致10%—15%的其它凝血因子喪失，F(xiàn)哪和vWF回收率降低，但是不影響冷沉淀的制備［17］。MBR處理后的冷沉淀喪失最多的是FW（23%），其次是Fg、FXI和瑞斯托霉素輔因子活性（vWF：RCo），分別是18%、14%和13%,vWF：Ag的喪失最小，僅3%,對(duì)凝血系統(tǒng)的抑制因子很受有影響。經(jīng)MBR處理后，F(xiàn)g濃度有輕微減少，活性卻下降31%，纖維蛋白的聚合指數(shù)僅有輕微的改變，在MBRF后也沒(méi)有明顯的改變；TT延長(zhǎng)了6s,經(jīng)MBRF后沒(méi)有進(jìn)一步的改變。這種體外的改變類(lèi)似于纖維蛋白功能失調(diào)患者的血漿改變，但通常沒(méi)有明顯的臨床癥狀［18］。MBR法對(duì)非脂包膜病毒，如HAV、B19等無(wú)效。另外，由于MBRP中各種凝血因子含量和總蛋白含量非標(biāo)準(zhǔn)化，所以臨床使用無(wú)準(zhǔn)確參考劑量。2.4臨床應(yīng)用MBRP的適應(yīng)證同F(xiàn)FP。MBRP及由其制得的冷沉淀均是臨床無(wú)病毒傳播的有效制品，可安全地治療血管性血友病，F(xiàn)XIII和Fg缺乏癥等。應(yīng)當(dāng)指出，MBRP不能用于血漿擴(kuò)充和蛋白支持療法。MB冷上清（經(jīng)MB處理后的FFP，制備冷沉淀后上清液）可以用于治療血栓性血小板減少性紫瘢，糾正全部或者部分凝血酶原復(fù)合物缺陷，特別是FV和FXI不足［19］。3S59及光化學(xué)處理法用補(bǔ)骨脂內(nèi)酯衍生物S59進(jìn)行光化學(xué)處理血漿（PCTFFP）已經(jīng)發(fā)展成為輸血應(yīng)用中滅活血漿中病原體和白細(xì)胞的重要方法。Singh等［20］用150pmol/LS59加3J/cm2的長(zhǎng)波紫外線照射含病毒模型血漿，發(fā)現(xiàn)處理后血漿病毒滅活水平有對(duì)數(shù)級(jí)減少：HIV1>68/64Log、HTLVI為45Log、HTLVII>57Log、HBV和HCV>45Log、SARS為55Log、西尼羅病毒為68Log；對(duì)部分細(xì)菌、原蟲(chóng)、螺旋體等也有很強(qiáng)的殺滅作用。Fg和F哪降低到原來(lái)水平的72%—73%,FII、FV、F刑、FIX、FX、FXI、FXIII、PC、PS、AT和a抗纖維蛋白酶基本不變，說(shuō)明PCTFFP有廣譜滅活病原微生物的作用，并且能夠保留充足的凝血因子，可以應(yīng)用于臨床。先天性凝血因子（FI、FII、FV、FW、FX、FXI、FXIII和PC）缺乏和獲得性凝血功能障礙性出血的患者用PCTFFP治療，效果與FFP一樣［21,22］。有研究對(duì)S59加A段紫外光和MB加可見(jiàn)光兩種病毒滅活的方法，在3個(gè)時(shí)間點(diǎn)（處理后立即測(cè)定、冷凍儲(chǔ)藏30d后和4°C融化后24h）測(cè)定了凝血因子活性，結(jié)果顯示:在PCTFFP和MBRP中FII、FXH、FXIII、vWF:Ag、ADAMTS13（血管性血友病因子裂解酶）、DD和PC均相等，在PCTFFP中PT、APTT縮短，而在MBRP中TT、Fg、FXI和PS更高，在PCTFFP中FV、FW、F哪、FX、vWF和vWF：RCo相等或更高于在MBRP中，在MBRP中的纖溶酶原、AT和血纖維蛋白溶酶抑制物則高于在PCTFFP中。總體上來(lái)說(shuō)，PCTFFP的凝血因子水平和穩(wěn)定性比MBRP更好】23］。S59及光化學(xué)處理可用于血漿、血小板中病毒，細(xì)菌等病原微生物及白細(xì)胞的滅活,不利之處是不能用于紅細(xì)胞制品的滅活,經(jīng)S59處理后的血液，需用特殊儀器將其去除。該法目前在歐洲已經(jīng)開(kāi)始應(yīng)用。4巴斯德法國(guó)內(nèi)外已有研究將巴斯德液態(tài)加熱法（Pasteurization）應(yīng)用于多種血液制品的病毒滅活。對(duì)臨床輸注用血漿的病毒滅活尚在研究中。巴斯德消毒法血漿是在液體狀態(tài)下，經(jīng)60°C加熱10h,可滅活脂膜病毒（如HCV、HBV、HIV等）和非脂膜病毒（如HAV、B19等）。其優(yōu)點(diǎn)為可滅活各種病毒、安全性強(qiáng)，缺點(diǎn)為熱處理對(duì)蛋白損傷較大，特別是凝血因子活性丟失較多。但血漿中凝血因子F哪活性丟失25%,Fg丟失20%,免疫球蛋白丟失在10%以?xún)?nèi)。處理程序：冰凍血漿被混合后，在30C下融化，融化的血漿送到無(wú)菌容器中并添加穩(wěn)定劑，二者混合后60C加熱10h，加熱后對(duì)血漿進(jìn)行超濾，去除穩(wěn)定劑并對(duì)血漿進(jìn)行濃縮，除菌分裝。5核黃素光化學(xué)技術(shù)核黃素即維生素B2,是一種多環(huán)平面結(jié)構(gòu)的芳香族化合物，它以平面結(jié)構(gòu)插人核酸后，在紫外線A（UA）或可見(jiàn)光的照射下，通過(guò)電子轉(zhuǎn)移使核苷酸中鳥(niǎo)嘌吟堿基氧化并形成共價(jià)加成化和物，介導(dǎo)核酸骨架鏈的斷裂，達(dá)到滅活病毒的目的。研究表明核黃素聯(lián)合可見(jiàn)光照射滅活血漿病毒技術(shù)，具有可靠的安全性［25,26］。有學(xué)者將FFP融化后與模型病毒孵育，再加人核黃素，并用UA照射，在照射過(guò)程中不斷搖勻，將溫度控制在30C左右，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該方法可將血漿中模型病毒滅活，而且對(duì)有包膜病毒和無(wú)包膜病毒都有效。美國(guó)研究人員將其應(yīng)用于血小板、血漿和紅細(xì)胞懸液中病毒滅活研究，發(fā)現(xiàn)使用核黃素經(jīng)450nm可見(jiàn)光照射能滅活混入血液制品中的細(xì)胞內(nèi)及胞外HIV、牛腹瀉病毒（BVDV,HCV的模型病毒）、偽狂犬病毒和B19病毒等。雖然處理后的血漿凝血因子活性有所下降，但仍處于正常范圍內(nèi)，能夠滿(mǎn)足臨床應(yīng)用。目前，核黃素光化學(xué)技術(shù)主要用于血小板制品，歐洲已經(jīng)有滅活制品問(wèn)世。核黃素光化學(xué)法與其它病毒滅活方法相比，核黃素來(lái)源廣泛，價(jià)格相對(duì)便宜，安全無(wú)毒副作用，光源吸收廣，且對(duì)血液及血液制品活性成分的影響較小，具有較為廣闊的發(fā)展和應(yīng)用前景。6壓力循環(huán)技術(shù)壓力循環(huán)技術(shù)是2000年美國(guó)報(bào)道的1項(xiàng)血漿病毒滅活的最新技術(shù)［26］，處理程序?yàn)椋盒迈r血漿用干冰冷凍并放入為壓力循環(huán)技術(shù)設(shè)計(jì)的壓力室，接近0C、壓力100—200MPa,經(jīng)流體靜力壓至大氣壓，多次循環(huán)以達(dá)到病毒滅活的效果。滅活的可能機(jī)制為在低溫和循環(huán)壓力下，病毒內(nèi)多種蛋白質(zhì)亞單位及蛋白核酸復(fù)合物發(fā)生解離，造成病毒的死亡。該技術(shù)已成功用于食品消毒，對(duì)血漿病毒滅活還處于試驗(yàn)階段。通過(guò)應(yīng)用接近0C、高壓、增加循環(huán)次數(shù)的方法，使噬菌體濃度在10—20min內(nèi)降低近6LogCID50,在血漿蛋白IgG、IgM、FX分別為其初始值的104%、89%、80%的條件下，達(dá)到對(duì)病毒的滅活效果［27］。7去白細(xì)胞用過(guò)濾法去除白細(xì)胞的效率＞99%,在預(yù)防輸血反應(yīng)，如非溶血性發(fā)熱反應(yīng)、HLA同種免疫和血小板輸注耐受等方面，已取得了十分滿(mǎn)意的效果；此外，它對(duì)防止輸血相關(guān)病毒的傳染也有顯著的效果。血漿中的殘留白細(xì)胞雖濃度較低，但仍可能引起輸血反應(yīng)，更重要的是可攜帶如CMV、HTLV1、HIV等輸血相關(guān)病毒。研究發(fā)現(xiàn)，使用去白細(xì)胞濾器可有效地防止輸血前血清學(xué)陰性骨髓移植患者發(fā)生CMV感染，還可有效地去除HIV感染的白細(xì)胞［28］。雖然血漿在臨床使用前要經(jīng)過(guò)一個(gè)凍融過(guò)程，但據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道白細(xì)胞的濃度下降卻不到10Log［29］。所以單一依靠的凍融過(guò)程不能完全去除其中的白細(xì)胞和其可能攜帶的病毒,而過(guò)濾的方法則可以去除血漿中的白細(xì)胞＞2Log,去除率＞994%,因此是一種很好的病毒去除方法。有不少?lài)?guó)家的血漿制品都是經(jīng)過(guò)濾白細(xì)胞處理后再用其它的物理化學(xué)病毒滅活技術(shù)進(jìn)行病毒滅活，而國(guó)內(nèi)過(guò)濾白細(xì)胞還未普遍開(kāi)展，病毒滅活也在發(fā)展階段。8結(jié)語(yǔ)目前沒(méi)有一種病毒滅活技術(shù)可以對(duì)所有類(lèi)型的病毒進(jìn)行滅活而不影響血漿的質(zhì)量。SD法、MBR法對(duì)HIV和HCV亞型實(shí)際上沒(méi)有滅活作用，反倒減少了凝血因子和抑制因子的活性[30]。病毒滅活應(yīng)根據(jù)成分血的具體要求選用恰當(dāng)?shù)膹V譜、高效、安全的滅活方法，主張聯(lián)合使用2種以上原理不同的去除和/或滅活病毒的方法，嚴(yán)格質(zhì)量管理和滅活方法的確認(rèn)，以最大限度地提高輸血的安全性。血漿除應(yīng)用病毒滅活技術(shù)外，還由于其中存在大量的白細(xì)胞，即便經(jīng)過(guò)冷凍和輸血前的復(fù)溶，白細(xì)胞已完全崩解，但白細(xì)胞基質(zhì)仍有可能刺激受者產(chǎn)生相應(yīng)的HLA抗體，故還宜采用白細(xì)胞過(guò)濾技術(shù)；另外，血漿中還殘留有少量紅細(xì)胞基質(zhì)，其免疫原性已下降到為原來(lái)的1%,但是仍有產(chǎn)生相應(yīng)不規(guī)則抗體的可能。因此，尋求一個(gè)理想的病毒滅活方法，如能對(duì)廣譜病毒及其它病原體滅活，并最大限度保留凝血因子活性和其它血漿蛋白功能的研究尚在探索中。參考文獻(xiàn)[1]SolheimBG,SeghatchianJ.Updateonpathogenreductiontechnologyforthera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