微生物實(shí)驗(yàn)室生物 安全操作規(guī)程

本文格式為Word版，下載可任意編輯——微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全操作規(guī)程微生物測(cè)驗(yàn)室生物安好操作規(guī)程之相關(guān)制度和職責(zé)，一、目的制訂本規(guī)矩,保表明驗(yàn)室工作人員的健康安好、測(cè)驗(yàn)設(shè)備安好衛(wèi)生以及防止對(duì)外界環(huán)境造成污染。二、適用范圍?適用于全體進(jìn)入微生物測(cè)驗(yàn)室人員。測(cè)驗(yàn)室工作人員必需嚴(yán)格遵守安好操作規(guī)...

一、目的

制訂本規(guī)矩,保表明驗(yàn)室工作人員的健康安好、測(cè)驗(yàn)設(shè)備安好衛(wèi)生以及防止對(duì)外界環(huán)境造成污染。

二、適用范圍

?適用于全體進(jìn)入微生物測(cè)驗(yàn)室人員。測(cè)驗(yàn)室工作人員必需嚴(yán)格遵守安好操作規(guī)程。

三、安好操作規(guī)程:

1.員工安好操作規(guī)程

1.1測(cè)驗(yàn)室入口處須貼上生物危害標(biāo)志,注明危害因子、生物安好級(jí)別、負(fù)責(zé)人姓名和電話、進(jìn)入測(cè)驗(yàn)室的特殊要求及離開測(cè)驗(yàn)室的程序。

1.2遏止非工作人員進(jìn)入測(cè)驗(yàn)室。參觀測(cè)驗(yàn)室等特殊處境須經(jīng)測(cè)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)后面可進(jìn)入,做好衛(wèi)生防護(hù),并在有關(guān)人員陪伴下方可進(jìn)入,同時(shí)留神做好環(huán)境維護(hù)及保密工作。

1.3舉行感染性測(cè)驗(yàn)時(shí),遏止他人進(jìn)入測(cè)驗(yàn)室,或務(wù)必經(jīng)測(cè)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人同意后面可進(jìn)入。免疫耐受或正在使用免疫抑制劑的工作人員務(wù)必經(jīng)測(cè)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人同意方可在測(cè)驗(yàn)室工作。

1.4接觸微生物或含有微生物的物品后,脫掉手套后和離開測(cè)驗(yàn)室前要洗手。

1.5遏止在工作區(qū)飲食、吸煙、處理隱形眼鏡、打扮及儲(chǔ)存食物。

1.6盡量以移液器吸取液體,遏止口吸。

1.7測(cè)驗(yàn)過程中,嚴(yán)格按有關(guān)操作規(guī)程操作,降低濺出和氣溶膠的產(chǎn)生。

1.8每天至少消毒一次工作臺(tái)面,活性物質(zhì)濺出后要隨時(shí)用75%乙醇或巴氏消毒液消毒。

1.9測(cè)驗(yàn)人員在配制培養(yǎng)基過程中,需盡量制止接觸性或吸入性危害,更加是配制TTB和碘液等對(duì)人體有害的培養(yǎng)基或試劑時(shí),要穿戴工作服、口罩和手套,并在通風(fēng)櫥中舉行。

1.10工作人員應(yīng)采納必要的免疫接種和檢測(cè)(如乙型肝炎疫苗、卡介苗等)。工作人員要采納有關(guān)的潛在危害學(xué)識(shí)的培訓(xùn),掌管預(yù)防暴露以及暴露后的處理程序。每年要采納一次最新的培訓(xùn)。人員暴露于感染性物質(zhì)時(shí),實(shí)時(shí)向測(cè)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人匯報(bào),并記錄事故經(jīng)過和處理方案。

1.11遏止將無(wú)關(guān)動(dòng)物帶入測(cè)驗(yàn)室。

2.無(wú)菌室安好操作規(guī)程

2.1無(wú)菌培養(yǎng)室每天都要用0.2%的新潔爾滅拖洗地面一次(拖布專用),紫外線照射消毒30min以上,超凈工作臺(tái)臺(tái)面每次測(cè)驗(yàn)前要用75%酒精擦洗。然后紫外線消毒30min。操作用具如移液器、廢液缸、污物盒、試管架等用75%酒精擦洗后置于臺(tái)內(nèi)同時(shí)紫外線消毒。

2.2無(wú)菌室應(yīng)保持清潔,嚴(yán)禁堆放雜物,以防污染。

2.3無(wú)菌室應(yīng)備有工作濃度的消毒液,如5%的甲酚溶液,75%的酒精,0.1%的新潔爾滅溶液,等等。

2.4無(wú)菌室應(yīng)定期用適合的消毒液滅菌清潔,以保證無(wú)菌室的清白度符合要求。

2.5需要帶入無(wú)菌室使用的器械、平皿等一切物品,均應(yīng)包扎嚴(yán)密,并應(yīng)經(jīng)過適合的方法滅菌。

2.6工作人員進(jìn)入無(wú)菌室前,務(wù)必用肥皂或消毒液洗手消毒,然后在緩沖間更換專用工作服,鞋,帽子,口罩和手套(或用75%乙醇等消毒劑再次擦拭雙手),方可進(jìn)入無(wú)菌室舉行操作。

2.7無(wú)菌室使用前務(wù)必開啟無(wú)菌室的紫外燈輻照滅菌30分鐘,滅菌后通無(wú)菌風(fēng)至少30min以上人員才能進(jìn)入。操作完畢,應(yīng)實(shí)時(shí)清理無(wú)菌室,再用紫外燈輻照滅菌30分鐘。

2.8供試品在檢查前,應(yīng)保持外包裝完整,不得開啟,以防污染。檢查前,用75%的酒精棉球消毒外外觀。

2.9每次操作過程中,均應(yīng)做陰性對(duì)照,以檢查無(wú)菌操作的穩(wěn)當(dāng)性。

2.10吸取菌液時(shí),務(wù)必用移液器吸取,切勿直接用口接觸吸管。

2.11接種針每次使用前后,務(wù)必通過火焰灼燒滅菌,待冷卻后,方可接種培養(yǎng)物。

2.12帶有菌液的吸管,試管,培養(yǎng)皿等器皿應(yīng)浸泡在盛有5%來(lái)蘇爾溶液或巴氏消毒液的消毒桶內(nèi)消毒,24小時(shí)后取出沖洗。

2.13如有菌液灑在桌上或地上,應(yīng)立刻用5%石碳酸溶液或3%的來(lái)蘇爾傾覆在被污染處至少30分鐘,再做處理。工作衣帽等受到菌液污染時(shí),應(yīng)立刻脫去,高壓蒸汽滅菌后洗滌。

2.14凡帶有活菌的物品,務(wù)必經(jīng)消毒后,才能在水龍頭下沖洗,嚴(yán)禁污染下水道。

2.15無(wú)菌室應(yīng)每月檢查菌落數(shù)。在層流無(wú)菌風(fēng)開啟的狀態(tài)下,取內(nèi)徑90mm的無(wú)菌養(yǎng)分瓊脂平板5個(gè),分別放置無(wú)菌室四周及中央位置,開蓋暴露30分鐘后,倒置于36℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時(shí),取出檢查。100級(jí)清白區(qū)平板雜菌數(shù)平均不得超過1個(gè)菌落/平皿,10000級(jí)清白室平均不得超過3個(gè)菌落/平皿。如超過限度,應(yīng)用臭氧發(fā)生器等對(duì)無(wú)菌室舉行徹底消毒,直至重復(fù)檢查符合要求為止。

3.壓力蒸汽滅菌器的安好使用操作程序:

3.1堆放:將需滅菌的物品予以合理包扎,各包之間留有空隙,依次堆放在滅菌桶的篩板上,以蒸汽穿透,提高滅菌效果。需滅菌物品外需黏上高壓指示膠帶以檢驗(yàn)滅菌溫度是否達(dá)成要求。

3.2加水:在鍋體內(nèi)注入生活用水,水位確定要超過電熱管2厘米以上(不宜過多);連續(xù)使用時(shí),每次操作前,務(wù)必補(bǔ)足上述水位,以免燒壞電熱管和意外發(fā)生。

3.3密封:在每次使用高壓鍋前,都務(wù)必專心檢查高壓鍋的出氣伐和安好閥,確保其狀態(tài)完好,如有故障,在故障擯棄之前不得使用高壓滅菌鍋。把堆放好物品的滅菌桶放在鍋體內(nèi),蓋上鍋蓋并鎖緊。

3.4加熱滅菌:將滅菌器接通與銘牌一致的電源,按下電源開關(guān),接通電源,指示燈亮,表示電源已正常輸入本器,按下開頭按紐電熱管開頭加熱工作;非全自動(dòng)的高壓滅菌鍋要留神排空空氣,確保滅菌時(shí)高壓鍋內(nèi)是飽和水蒸氣,高壓滅菌鍋內(nèi)滅菌期間工作人員需監(jiān)視高壓鍋指示面板上的壓力、溫度和時(shí)間等。

3.5開蓋:滅菌終止后,切勿立刻將滅菌鍋內(nèi)的蒸汽排出,否那么:由于液體物品的溫度未能下降,而壓力蒸汽突然釋放,會(huì)使液體強(qiáng)烈沸騰,造成溢出或容器爆裂。應(yīng)待壓力表指針歸零位后,方可開啟鍋蓋。

3.6滅菌后無(wú)菌工器具及培養(yǎng)基應(yīng)存放于無(wú)菌區(qū)域(如滅過菌后的無(wú)菌室或生物安好柜內(nèi)),無(wú)菌物品需有明確標(biāo)識(shí)。

3.7每年至少2次用嗜熱脂肪芽孢桿菌作為生物指示劑檢查滅菌效果并記錄,指示物需放在不一達(dá)成滅菌的部位(如堆放物品的居中位置)。

4.生物安好柜操作規(guī)程

4.1確認(rèn)玻璃窗處于關(guān)閉位置后,開啟紫外燈,對(duì)安好柜內(nèi)工作空間舉行滅菌。滅菌終止后,關(guān)閉紫外燈。安好柜使用前后均需滅菌。

4.2抬起玻璃門至正常工作位置。開啟外排風(fēng)機(jī)。開啟熒光燈及內(nèi)置風(fēng)機(jī)。檢查回風(fēng)格柵,使之不要被物品堵塞。在無(wú)任何阻礙狀態(tài)下,讓安好柜至少工作10分鐘。

4.3用消毒液徹底清洗手及手臂。穿上工作褂,戴橡膠手套并套在袖口上,如有必要的話,戴防護(hù)眼鏡和防護(hù)面罩。

4.4按測(cè)驗(yàn)程序放入測(cè)驗(yàn)材料,要將工作區(qū)域內(nèi)的污染物質(zhì)與清白物質(zhì)分開放置。

盡量將所需要的物品在正式操作前全部放入安好柜,但不要過載,不要攔住前后風(fēng)口。

4.5盡量制止使用可干擾安好柜內(nèi)氣流滾動(dòng)的裝置和程序。在操作期間,制止隨意移動(dòng)材料,制止操的手臂在前方開口處頻繁移動(dòng),盡量裁減氣流干擾。

盡量不要使用明火,接種環(huán)之類用紅外滅菌器滅菌。

4.6在操作過程中,假設(shè)有物質(zhì)溢出或液體濺出,在將物品移出安好柜前,要對(duì)其外觀舉行消毒,為防止安好柜內(nèi)有任何殘留的污染物,在安好柜工作過程中,就要將安好柜內(nèi)外觀全部消毒。全體接觸了污染材料的物體,在從安好柜中取出前,要舉行外觀消毒。全體開口容器,從安好柜中拿出前要蓋好。

4.7全部工作終止后,用70%的乙醇或適當(dāng)?shù)闹行韵緞?擦拭安好柜內(nèi)外觀,讓安好柜在無(wú)任何阻礙的處境下持續(xù)至少工作5分鐘,以除掉工作區(qū)域內(nèi)浮沉污染。

4.8關(guān)閉照明燈和安好柜風(fēng)機(jī)。關(guān)閉玻璃門,開啟UV燈消毒。滅菌終止后,關(guān)閉UV燈。

4.9定期抬起工作區(qū)域下面板,擦拭或沖洗工作面底下空間。

5.標(biāo)準(zhǔn)菌株安好操作規(guī)程

5.1標(biāo)準(zhǔn)菌株由專人保管。保管人負(fù)責(zé)建立標(biāo)準(zhǔn)菌株目次;目次至少應(yīng)包編號(hào)、菌株號(hào)、菌種名稱、來(lái)源、添置日期、添置數(shù)量、保存方法等。

5.2標(biāo)準(zhǔn)菌株應(yīng)做好標(biāo)識(shí)后,保存于專用冰箱中。

5.3標(biāo)準(zhǔn)菌株不能肆意轉(zhuǎn)借其它單位或個(gè)人,需要時(shí),須經(jīng)測(cè)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)后面可供給。

5.4務(wù)必在生物安好柜中舉行標(biāo)準(zhǔn)菌株測(cè)驗(yàn),操作過程中,不要穿戴巳經(jīng)污染的防護(hù)性手套觸摸門柄、儀器或污染區(qū)以外區(qū)域,制止擴(kuò)大污染范圍。

5.5試驗(yàn)終止后,操作過程中全體可能與生物危害物接觸或被污染的試驗(yàn)器械和物品,能夠高壓消毒的務(wù)必高壓消毒,不能舉行高壓消毒的物品,應(yīng)使用有效的消毒劑消毒處理。

5.6標(biāo)準(zhǔn)菌株傳代原那么上不超過5代。

6.微生物培養(yǎng)物廢棄物安好處理程序

6.1盡可能使用塑料器材代替玻璃器材,防止利器損傷。非一次性利器務(wù)必放入厚壁容器中并輸送到特定區(qū)域消毒,最好舉行高壓消毒。

6.2遏止用手處理破碎的玻璃器具。裝有污染針、利器及破碎玻璃的容器在丟棄之前務(wù)必應(yīng)用次氯酸消毒液或其他有效藥品舉行消毒。

6.3全體培養(yǎng)物、廢棄物在運(yùn)出測(cè)驗(yàn)室之前須經(jīng)巴氏消毒液消毒處理或高壓滅菌后,置于特意污物袋內(nèi),交由專業(yè)衛(wèi)生處理公司處置。

6.4測(cè)驗(yàn)設(shè)備在運(yùn)出修理或維護(hù)前務(wù)必舉行消毒。

7、微生物測(cè)驗(yàn)室緊急事故處理手段

7.1刺傷、切割傷或擦傷。受傷人員應(yīng)脫下防護(hù)服,清洗雙手和受傷部位,使用適當(dāng)?shù)钠つw消毒劑舉行消毒,必要時(shí)舉行醫(yī)學(xué)處理。同時(shí)記錄受傷理由和相關(guān)的微生物,并留存完整適當(dāng)?shù)尼t(yī)療記錄。

7.2潛在感染性物質(zhì)的食入。應(yīng)脫下受害人的防護(hù)服,舉行必要的醫(yī)學(xué)處理。報(bào)告食入材料的鑒定和事故發(fā)生的細(xì)節(jié),并留存完整適當(dāng)?shù)尼t(yī)療記錄。

7.3潛在危害性氣溶膠的釋放(在生物安好柜以外)。全體人員務(wù)必立刻撤離相關(guān)區(qū)域,暴露人員應(yīng)采納醫(yī)學(xué)接洽,同時(shí)立刻通知測(cè)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人和生物安好負(fù)責(zé)人。為了使氣溶膠排出和使較大的粒子沉降,在確定時(shí)間內(nèi)嚴(yán)禁人員入內(nèi),若測(cè)驗(yàn)室沒有中央通風(fēng)系統(tǒng),應(yīng)推遲進(jìn)入測(cè)驗(yàn)室的時(shí)間,同時(shí)張貼“遏止進(jìn)入”的標(biāo)志。待氣溶膠排出、較大的粒子沉降后,在生物安好負(fù)責(zé)人的指導(dǎo)下,清理人員穿戴適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)服和呼吸養(yǎng)護(hù)裝備舉行污染的除掉。

7.4容器破碎及感染性物質(zhì)的溢出。應(yīng)立刻用布或紙巾籠罩被感染性物質(zhì)污染或受感染性物質(zhì)溢灑的破碎物品,并倒上消毒劑。作用適當(dāng)時(shí)間后,將籠罩物以及破碎物品除掉,再用消毒劑擦拭污染區(qū)域。玻璃碎片應(yīng)用鑷子清理,已污染的布、紙巾和抹布等應(yīng)放在盛放污染性廢棄物的容器內(nèi)。假設(shè)用簸箕清理破碎物,應(yīng)對(duì)其舉行高壓滅菌或放在有效的消毒液內(nèi)浸泡消毒。全體操作過程中要求戴手套。

若測(cè)驗(yàn)表格或其他打印或手寫材料被污染,應(yīng)將這些信息復(fù)制后,再將原件置于盛放污染性廢棄物的容器內(nèi),按廢棄物處理的方式舉行處理。

7.5未裝可封閉離心桶的離心機(jī)內(nèi)盛有潛在感染性物質(zhì)的離心管發(fā)生破碎。假設(shè)機(jī)器正在運(yùn)行時(shí)發(fā)生破碎或質(zhì)疑發(fā)生破碎,應(yīng)關(guān)閉機(jī)器電源,讓機(jī)器密閉適當(dāng)時(shí)間(如30min),使氣溶膠沉積。假設(shè)機(jī)器中斷后察覺破碎,不開蓋或立刻將蓋子蓋上,并密閉(如30min)。同時(shí)應(yīng)通知生物安好負(fù)責(zé)人。玻璃碎片應(yīng)使用鑷子,或用鑷子夾著棉花舉行清理。全體破碎的離心管、玻璃碎片、離心桶、十字軸和轉(zhuǎn)子都應(yīng)放入無(wú)腐蝕性的、已知對(duì)相關(guān)微生物具有殺滅活性的消毒劑內(nèi)舉行消毒。未破損的帶蓋離心管應(yīng)放在另一個(gè)有消毒劑的容器中,消毒后回收。離心機(jī)內(nèi)腔應(yīng)用適當(dāng)濃度的同種消毒劑屢屢擦拭,再用水沖洗后枯燥。

清理時(shí),應(yīng)戴堅(jiān)固的手套(如厚橡膠手套),必要時(shí)在外面再戴適當(dāng)?shù)囊淮涡允痔?。所使用的全部材料都?yīng)按感染性廢棄物處理。

7.6在可封閉的離心桶(安好杯)內(nèi)離心管發(fā)生破碎。全體的密封離心桶都應(yīng)在生物安好柜內(nèi)裝卸。若質(zhì)疑在安好杯內(nèi)發(fā)生破損,應(yīng)松開安好杯蓋子并將離心桶高壓滅菌,也可采用化學(xué)消毒的方法舉行處理。

7.7生物安好柜內(nèi)生物危害溢出。等待至少5min,讓安好柜彌漫氣溶膠,清理時(shí)應(yīng)穿戴測(cè)驗(yàn)服,安好眼鏡和手套,且讓安好柜持續(xù)工作。使用浸泡消毒劑的消毒紙巾吸附溢出物,舉行消毒處理應(yīng)保證確定的接觸時(shí)間(至少20min)。并用同樣的消毒紙巾擦拭安好柜內(nèi)壁、工作臺(tái)外觀和柜內(nèi)全體設(shè)備。按照正確的生物廢棄物處理步驟處理被污染的物質(zhì),將可回收的被污染物品放入生物危害物回收袋或高壓滅菌盤并且用報(bào)紙包起來(lái),然后舉行消毒或清理。用消毒劑對(duì)無(wú)法舉行高壓滅菌的物品舉行至少20min的消毒處理后再拿出安好柜。結(jié)果脫下個(gè)人防護(hù)服并放進(jìn)污染物收集袋中舉行高壓滅菌處理。若所要清理的物品達(dá)成