滅菌工藝與滅菌柜風(fēng)險評估培訓(xùn)課件

滅菌工藝與滅菌柜風(fēng)險評估林祥喜2013年3月28日滅菌工藝與滅菌柜風(fēng)險評估林祥喜12/30/20222目錄

滅菌工藝

滅菌柜滅菌柜驗證案例324目錄1滅菌柜改造前后風(fēng)險評估案例12/29/20222滅菌工藝滅菌柜滅菌12/30/2022312/30/2022滅菌工藝3目錄目錄滅菌工藝滅菌柜滅菌柜改造前后風(fēng)險評估案例滅菌柜驗證案例12/29/2022312/29/2022滅菌工藝3目錄目12/30/20224滅菌工藝4濕熱滅菌工藝設(shè)計應(yīng)考慮的因素滅菌工藝滅菌工藝概念、問題的理解常見方法過熱水滅菌12/29/20224滅菌工藝4濕熱滅菌工藝設(shè)計應(yīng)考慮的因素12/30/2022512/30/2022滅菌工藝5

幾個基本概念和問題的通俗理解滅菌工藝明確幾個基本概念和問題，以消除對滅菌知識的理解障礙，增強(qiáng)對滅菌知識的理解力和親和力。幾個基本概念和問題的通俗理解●

變量：溫度、時間、微生物抗性術(shù)語：F值、D值、Z值便于直觀判斷和評價。12/29/2022512/29/2022滅菌工藝512/30/2022612/30/202212/30/2022滅菌工藝6

幾個基本概念和問題的通俗理解滅菌工藝●

D值和Z值D值：以時間（min）為單位，使微生物降低90%或一個對數(shù)值所需要的時間。制藥環(huán)境發(fā)現(xiàn)的微生物絕大多數(shù)是不耐熱的，D值121度時小于0.5min（很少發(fā)現(xiàn)0.5min），通常取1min。Z值：使D值變化10倍所需的溫度，濕熱時一般為10度，干熱時一般為20度。12/29/2022612/29/202212/29/20212/30/2022712/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝7

幾個基本概念和問題的通俗理解滅菌工藝

●F值和F0值，F(xiàn)0≥8，F(xiàn)0≥12●F值：以時間為（min）為單位，在一定溫度下，作用于容器或產(chǎn)品單元的與之等量的時間。對濕熱滅菌，以T=121.1度，Z=10度作參比，即F0●F0：指蒸汽滅菌時，與在121.1度滅菌效果等效的時間（對于干熱，以FH計，與170度等效）?！駷楹芜x121度：經(jīng)濟(jì)、易得、省時。●為何選121度15分鐘：產(chǎn)品銷往國際市場的條件（如歐盟最終滅菌制劑法規(guī)中，將過度殺滅定義為濕熱121度15分鐘）。12/29/2022712/29/202212/29/20212/30/2022812/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝8

幾個基本概念和問題的通俗理解滅菌工藝●

F0≥8

●無菌保值（SAL）：10-6——106個滅菌產(chǎn)品中存在活菌的產(chǎn)品不超過1個（每一批）產(chǎn)品中一百萬活的微生物中有少于一個微生物存活的機(jī)會（每一個）。

●按GMP生產(chǎn)，實際微生物初始數(shù)量為每個容器1-100個菌（見附表）（1）要達(dá)到無菌保證值，必須：F0′=D121℃×（lgN0-lgNF）=1.0×（lg106-lg100）=6（min）（2）要將容器中100個菌殺滅，必須：F0″=D121℃×（lg102-0）=2（min）（3）將100cfu/容器的污染達(dá)到無菌保證值必須：F0=F0′+F0″=6+2=8（min）12/29/2022812/29/202212/29/20212/30/2022912/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝9

幾個基本概念和問題的通俗理解滅菌工藝●F0≥12F0=12被認(rèn)為是最小過度殺死周期；習(xí)慣被大多數(shù)企業(yè)作為進(jìn)一步的無菌保證，即滅菌工藝擴(kuò)大一倍：●綜上所述：F0=6，無菌保證值；F0=8，確保在GMP生產(chǎn)環(huán)境的產(chǎn)品無菌。F0=12，最小過度殺滅周期，負(fù)荷和耐熱性遠(yuǎn)高于實際（6+6,D=1)；滅菌工藝擴(kuò)大一倍。F0=15，國際市場條件12/29/2022912/29/202212/29/20212/30/20221012/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝10

幾個基本概念和問題的通俗理解滅菌工藝●芽孢：微生物在惡劣環(huán)境下非正常分裂的產(chǎn)物，有較強(qiáng)的抗熱性?！裆镉惺緞阂环N微生物制品（通常為孢子），對滅菌工藝有明確和穩(wěn)定的抗性?！駷楹我M(jìn)行微生物前負(fù)荷檢測？F0′=D121℃×（lgN0-lgNF）=D121℃×（lg102-lg10-6)=8,耐熱的設(shè)定值稍高，故污染水平增加或耐熱性增加都會造成滅菌程序目標(biāo)的失敗。類型有：孢子懸液的載體；孢子懸浮液；自含式生物指示劑。電離輻射——短小芽胞桿菌環(huán)氧乙烷——萎縮芽胞桿菌干熱滅菌——萎縮芽胞桿菌低于121.1℃濕熱——枯草芽胞桿菌低溫蒸汽和甲醛消毒——嗜熱脂肪芽胞桿菌12/29/20221012/29/202212/29/2012/30/20221112/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝11

滅菌工藝

滅菌常見方法簡介

滅菌常見方法簡介

12/29/20221112/29/202212/29/2012/30/20221212/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝12過熱水滅菌滅菌工藝●

過熱水滅菌：效率高；升、降溫可控性強(qiáng)；介質(zhì)污染小。最常見，濕熱滅菌程序決策樹：過熱水滅菌12/29/20221212/29/202212/29/2012/30/20221312/30/202212/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝13

濕熱滅菌工藝設(shè)計應(yīng)考慮的因素滅菌工藝

濕熱滅菌工藝設(shè)計應(yīng)考慮的因素●GMP描述：第六十一條無菌藥品應(yīng)當(dāng)盡可能采用加熱方式進(jìn)行最終滅菌，最終滅菌產(chǎn)品中的微生物存活概率（即無菌保證水平，SAL）不得高于10-6。采用濕熱滅菌方法進(jìn)行最終滅菌的，通常標(biāo)準(zhǔn)滅菌時間F0值應(yīng)當(dāng)大于8分鐘，流通蒸汽處理不屬于最終滅菌。對熱不穩(wěn)定的產(chǎn)品，可采用無菌生產(chǎn)操作或過濾除菌的替代方法。第六十二條......每一種滅菌方式都有其特定的適用范圍，滅菌工藝必須與注冊批準(zhǔn)的要求相一致，且應(yīng)當(dāng)經(jīng)過驗證。第六十三條任何滅菌工藝在投入使用前，必須采用物理檢測手段和生物指示劑，驗證其對產(chǎn)品或物品的適用性及所有部位達(dá)到了滅菌效果。

12/29/20221312/29/202212/29/20第六十四條應(yīng)當(dāng)定期對滅菌工藝的有效性進(jìn)行再驗證（每年至少一次）。設(shè)備重大變更后，須進(jìn)行再驗證。應(yīng)當(dāng)保存再驗證記錄。第六十五條所有的待滅菌物品均須按規(guī)定的要求處理，以獲得良好的滅菌效果，滅菌工藝的設(shè)計應(yīng)當(dāng)保證符合滅菌要求。第六十六條應(yīng)當(dāng)通過驗證確認(rèn)滅菌設(shè)備腔室內(nèi)待滅菌產(chǎn)品和物品的裝載方式。第六十四條應(yīng)當(dāng)定期對滅菌工藝的有效性進(jìn)行再驗證（每年至少第七十條熱力滅菌通常有濕熱滅菌和干熱滅菌，應(yīng)當(dāng)符合以下要求：（一）在驗證和生產(chǎn)過程中，用于監(jiān)測或記錄的溫度探頭與用于控制的溫度探頭應(yīng)當(dāng)分別設(shè)置，設(shè)置的位置應(yīng)當(dāng)通過驗證確定。每次滅菌均應(yīng)記錄滅菌過程的時間-溫度曲線。采用自控和監(jiān)測系統(tǒng)的，應(yīng)當(dāng)經(jīng)過驗證，保證符合關(guān)鍵工藝的要求。自控和監(jiān)測系統(tǒng)應(yīng)當(dāng)能夠記錄系統(tǒng)以及工藝運行過程中出現(xiàn)的故障，并有操作人員監(jiān)控。應(yīng)當(dāng)定期將獨立的溫度顯示器的讀數(shù)與滅菌過程中記錄獲得的圖譜進(jìn)行對照。（二）可使用化學(xué)或生物指示劑監(jiān)控滅菌工藝，但不得替代物理測試。（三）應(yīng)當(dāng)監(jiān)測每種裝載方式所需升溫時間，且從所有被滅菌產(chǎn)品或物品達(dá)到設(shè)定的滅菌溫度后開始計算滅菌時間。（四）應(yīng)當(dāng)有措施防止已滅菌產(chǎn)品或物品在冷卻過程中被污染。除非能證明生產(chǎn)過程中可剔除任何滲漏的產(chǎn)品或物品，任何與產(chǎn)品或物品相接觸的冷卻用介質(zhì)（液體或氣體）應(yīng)當(dāng)經(jīng)過滅菌或除菌處理。第七十條熱力滅菌通常有濕熱滅菌和干熱滅菌，應(yīng)當(dāng)符合以下要第七十一條濕熱滅菌應(yīng)當(dāng)符合以下要求：（一）濕熱滅菌工藝監(jiān)測的參數(shù)應(yīng)當(dāng)包括滅菌時間、溫度或壓力。腔室底部裝有排水口的滅菌柜，必要時應(yīng)當(dāng)測定并記錄該點在滅菌全過程中的溫度數(shù)據(jù)。滅菌工藝中包括抽真空操作的，應(yīng)當(dāng)定期對腔室作檢漏測試。（二）除已密封的產(chǎn)品外，被滅菌物品應(yīng)當(dāng)用合適的材料適當(dāng)包扎，所用材料及包扎方式應(yīng)當(dāng)有利于空氣排放、蒸汽穿透并在滅菌后能防止污染。在規(guī)定的溫度和時間內(nèi)，被滅菌物品所有部位均應(yīng)與滅菌介質(zhì)充分接觸。滅菌工藝與滅菌柜風(fēng)險評估培訓(xùn)課件產(chǎn)品：滅菌前生物負(fù)荷，產(chǎn)品穩(wěn)定性

包裝/容器：密封系統(tǒng)完整性

工藝：工藝設(shè)計、設(shè)備設(shè)計●理解產(chǎn)品滅菌前的生物負(fù)荷、數(shù)量、種類（D值限度）它是滅菌周期開發(fā)的基礎(chǔ)依據(jù)。常見微生物數(shù)≤100cfu/ml；D值＜0.5min產(chǎn)品：滅菌前生物負(fù)荷，產(chǎn)品穩(wěn)定性12/30/20221812/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝18

濕熱滅菌工藝設(shè)計應(yīng)考慮的因素滅菌工藝·微生物來源：原輔料和賦形劑（通常不應(yīng)超過100CFU/g）生產(chǎn)環(huán)境（按A、B、C、D控制，會較低）生產(chǎn)設(shè)備、管道（包括壓縮空氣、惰性氣體等）人員（直接、間接）滅菌前微生物越少，所需滅菌時間就越短；如果污染的各種來源沒有被控制，滅菌周期也可能是不適合的。低污染水平：≤10CFU/100ml微生物污染風(fēng)險控制措施有效：95%的樣品為低污染水平·產(chǎn)品穩(wěn)定性產(chǎn)品效價、降解產(chǎn)物、PH、顏色、儲藏期穩(wěn)定性、不溶性微粒等。如：克林霉素磷酸酯、甘油果糖、鹽酸氨溴索、氨基酸等。12/29/20221812/29/202212/29/2012/30/20221912/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝19

濕熱滅菌工藝設(shè)計應(yīng)考慮的因素滅菌工藝●

容器密封系統(tǒng)可靠性、完整性1、滅菌時的污染和貨架（貯存期）污染：防破壞密封系統(tǒng)結(jié)構(gòu)導(dǎo)致滅菌介質(zhì)污染及貯存污染2、滅菌過程中，橡膠和塑料密封受到熱應(yīng)力作用；3、現(xiàn)有密封型式（密封屏障）主要為：熱融，膠塞和鋁蓋卷邊；4、當(dāng)容器內(nèi)壓大于腔室2巴時：產(chǎn)品變形，損壞密封；5、暴露在最大滅菌條件下染料滲入試驗，微生物挑戰(zhàn)試驗或物理完整性測試。12/29/20221912/29/202212/29/2012/30/20222012/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝20

濕熱滅菌工藝設(shè)計應(yīng)考慮的因素滅菌工藝●

工藝設(shè)計、設(shè)備設(shè)計1、滅菌工藝設(shè)計選擇應(yīng)基于產(chǎn)品特定處方和包裝材料考慮；2、溶液劑型產(chǎn)品滅菌選擇決策樹產(chǎn)品是否可以121度滅菌15分鐘？→121度15分鐘滅菌；產(chǎn)品是否可以濕熱滅菌F0≥8，達(dá)到（SAL）10-6？→濕熱滅菌F0≥8分鐘；是否可以過濾除菌？→過濾除菌加無菌工藝；無菌配制和灌封。12/29/20222012/29/202212/29/203、滅菌設(shè)備適用性是指滅菌設(shè)備執(zhí)行滅菌工藝的能力，即滅菌設(shè)備對滅菌工藝各參數(shù)的控制準(zhǔn)確度和精確度能否使任意位置的產(chǎn)品的實際F0值符合滅菌工藝規(guī)定的F0值范圍，滅菌工藝允許的F0范圍越窄，對滅菌設(shè)備的控制精確度、熱分布均勻的要求越高。滅菌工藝與滅菌柜風(fēng)險評估培訓(xùn)課件12/30/20222212/30/2022滅菌工藝22生物挑戰(zhàn)實驗必要性和重要性

滅菌柜滅菌柜關(guān)于水浴滅菌柜水浴滅菌柜滅菌時存在的風(fēng)險溫度對F0值的影響12/29/20222212/29/2022滅菌工藝22生物12/30/20222312/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝23

關(guān)于水浴滅菌柜滅菌柜關(guān)于水浴滅菌柜●

構(gòu)成要素：

符合法規(guī)的容器（超50%的要求壓力值）安全門及其控制過程控制系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)輔助及管路系統(tǒng)（泵、管道、換熱器、水位閥、噴頭等）貨架/內(nèi)車安全泄壓閥12/29/20222312/29/202212/29/2012/30/20222412/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝24

關(guān)于水浴滅菌柜滅菌柜●

流程12/29/20222412/29/202212/29/2012/30/20222512/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝25

水浴滅菌柜滅菌時存在的風(fēng)險滅菌柜水浴滅菌柜滅菌時存在的風(fēng)險●

冷點和溫度均一性：

●探頭精度：固定溫度探頭（3個）與活動穿刺溫度探頭（4個以上）精度一致；溫度探頭選用PT100鉑電阻（雙芯8線，一組用于控制，另一組用于記錄），精度：A級（≤±0.15℃），零漂移量（≤±0.005℃/年）。

●溫度傳感器、探頭數(shù)量及布點：FAT和SAT計劃應(yīng)注明溫度傳感器的數(shù)量和位置，并陳述理由，進(jìn)行統(tǒng)計分析，評價效果。20m3以上內(nèi)置探頭不少于6組；60m3以上不少于8組；進(jìn)水總管、排水口各一，滅菌柜頂部1—2個熱點溫度控制和監(jiān)測12/29/20222512/29/202212/29/2012/30/20222612/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝26

水浴滅菌柜滅菌時存在的風(fēng)險滅菌柜●

運行要求：所有溫度探頭數(shù)據(jù)達(dá)到滅菌溫度時開始計時。保溫段，腔室內(nèi)溫度波動范圍應(yīng)在設(shè)置值±1.0℃間波動（需精確控溫的滅菌柜應(yīng)達(dá)±0.5℃），最冷點和最熱點間溫差≤2℃。滅菌周期中，噴淋水量的變化幅度、流速。噴淋循環(huán)使用時，應(yīng)有水溫和水壓監(jiān)測以及報警裝置

主循環(huán)管路上應(yīng)帶有噴淋水流量檢測裝置。噴淋方式。噴淋無死角。補(bǔ)充或排出空氣的量的可接受標(biāo)準(zhǔn)。能源（蒸汽、冷卻水）波動、、裝載方式。12/29/20222612/29/202212/29/2012/30/20222712/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝27

水浴滅菌柜滅菌時存在的風(fēng)險滅菌柜●

壓力波動：對溫度的影響；對包裝容器的影響；保壓實驗?！?/p>

噴淋水質(zhì)?！耜P(guān)鍵點報警：蒸汽壓力；噴淋水泵頻率；壓縮空氣壓力；噴淋水電導(dǎo)率；對滅菌柜外部公用系統(tǒng)進(jìn)行實時監(jiān)測，過高和過低都進(jìn)行報警，并且有記錄。如蒸汽、冷卻水、壓縮空氣、純化水等。12/29/20222712/29/202212/29/2012/30/20222812/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝28

水浴滅菌柜滅菌時存在的風(fēng)險滅菌柜

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控制系統(tǒng)PLC。人機(jī)交互界面。滅菌柜自帶的本地操作面板。批報告附件內(nèi)容涵蓋的信息：參數(shù)、時間、圖表、報警記錄等。打印數(shù)據(jù)程序：每10秒實時打印。獨立的數(shù)據(jù)記錄儀；安全裝置如門的控制。警告和報警：可在人機(jī)交互界面面板上顯示，由PLC產(chǎn)生；報警記錄與打印，自動決定滅菌周期繼續(xù)與被終止。12/29/20222812/29/202212/29/2012/30/20222912/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝29

水浴滅菌柜滅菌時存在的風(fēng)險滅菌柜●

安全門：墊圈介質(zhì)及性能有利于泄漏控制，以保證滅菌階段溫度穩(wěn)定；門的聲光報警?！癜惭b及外觀?！衿渌荷郎亍⒔禍貢r間差異；柜內(nèi)與袋內(nèi)偏差；噴嘴流速及壓力；滅菌車定位；驗證物與待滅物的差異；意外事件；物品大小、裝載的類型及數(shù)量。12/29/20222912/29/202212/29/2012/30/20223012/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝30

水浴滅菌柜滅菌時存在的風(fēng)險滅菌柜●

驗證需求：

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FAT（工廠現(xiàn)場測試）：柜內(nèi)溫度分布研究，每立方米不少于1個探頭，找出代表性的溫度點：如最快達(dá)到滅菌溫度、最慢到達(dá)滅菌溫度和降溫時最慢到達(dá)90℃的點，確定控制探頭的位置和數(shù)量。FAT由滅菌柜供應(yīng)商獨立完成；應(yīng)包括空載熱分布研究，給出滿載和熱穿透驗證時探頭位置?！駵缇竦拇_認(rèn)和驗證應(yīng)考察裝載數(shù)量、裝載方式、滿載熱分布和熱穿透情況及重現(xiàn)性。●

11個探頭+每個滅菌車上至少放置1個探頭?！癜惭b需求：2個壓力傳感器。12/29/20223012/29/202212/29/2012/30/202231溫度對F0值的影響（溫度均一性的重要性）12/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝31

溫度對F0值的影響（溫度均一性的重要性）滅菌柜F0=△t×10（T-121.1）/Z●

對一個121.1℃、15′滅菌周期來說F0=15×10

●

若某個溫度降為120.1℃，則沸點：F0=15×1012/29/202231溫度對F0值的影響（溫度均一性的重要12/30/20223212/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝32

濕熱滅菌工藝設(shè)計應(yīng)考慮的因素滅菌柜12/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/202232滅菌工藝32

溫度對F0值的影響（溫度均一性的重要性）滅菌柜溫度時間（min）F0值F0差異121.1℃15150120.1℃1511.85-3.15119.1℃159.45-5.15122.1℃1518.9+3.9同理，可算出某個溫度119.1℃或122.1℃的F0值，列表如下：12/29/20223212/29/202212/29/2012/30/20223312/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝33

濕熱滅菌工藝設(shè)計應(yīng)考慮的因素滅菌柜12/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/202233滅菌工藝33

溫度對F0值的影響（溫度均一性的重要性）滅菌柜即在121.1℃附近，溫度每增減1℃，F(xiàn)0值變化約3個單位，其對滅菌藥效的影響很大?！窳硗猓浑y看出，若溫度為121.1℃，則時間每減少或增加1min，F(xiàn)0值變化1個單位?！駥τ跍囟群蜁r間的變化，（1）溫度對F0值影響大；（2）溫度均一性和受影響因變復(fù)雜得多，故溫度均一性驗證及溫度均一性保證條件尤為重要。12/29/20223312/29/202212/29/2012/30/202234生物挑戰(zhàn)實驗必要性和重要性

12/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝34

濕熱滅菌工藝設(shè)計應(yīng)考慮的因素滅菌柜12/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/202234滅菌工藝34

生物挑戰(zhàn)實驗必要性和重要性

滅菌柜任何滅菌工藝在投入使用前，必須采用物理檢測手段和生物指示劑，驗證其對產(chǎn)品或物品的適用性及所有部位達(dá)到了滅菌效果。濕熱滅菌影響因素：種類、數(shù)量；PH（6-8不宜）；滅菌物性質(zhì)；蒸汽飽和度。

穿透研究僅僅能確認(rèn)溫度，而不能確認(rèn)有效的溫?zé)釡缇枰钠渌麠l件，因此需要使用生物挑戰(zhàn)試驗來證明已經(jīng)將所需要的致死力傳遞到負(fù)荷所有部分的額外保證，作內(nèi)補(bǔ)充從熱電

獲得物理溫度測量數(shù)據(jù)。

F0′=D121℃×（lgN0-lgNF）=D121℃×（lg102-lg10-6)=8,耐熱的設(shè)定值稍高，故污染水平增加或耐熱性增加都會造成滅菌程序目標(biāo)的失敗。12/29/202234生物挑戰(zhàn)實驗必要性和重要性

12/212/30/202235滅菌柜改造前后風(fēng)險評估案例滅菌柜驗證案例12/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝35

濕熱滅菌工藝設(shè)計應(yīng)考慮的因素滅菌柜12/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/202235滅菌工藝35

12/29/202235滅菌柜改造前后風(fēng)險評估案例滅菌柜驗證36謝謝!Thanks36謝謝!Thanks踏實，奮斗，堅持，專業(yè)，努力成就未來。30-12月-2230-12月-22Friday,December30,2022弄虛作假要不得，踏實肯干第一名。***12/30/20221:03:24PM安全象只弓，不拉它就松，要想保安全，常把弓弦繃。30-12月-22**Dec-2230-Dec-22重于泰山，輕于鴻毛。***Friday,December30,2022不可麻痹大意，要防微杜漸。30-12月-2230-12月-22**30December2022加強(qiáng)自身建設(shè)，增強(qiáng)個人的休養(yǎng)。2022年12月30日*30-12月-2230-12月-22追求卓越，讓自己更好，向上而生。30十二月2022**30-12月-22嚴(yán)格把控質(zhì)量關(guān)，讓生產(chǎn)更加有保障。十二月22*30-12月-22*30December2022重規(guī)矩，嚴(yán)要求，少危險。**12/30/2022好的事情馬上就會到來，一切都是最好的安排。***30-12月-22每天都是美好的一天，新的一天開啟。30-12月-2230-12月-22***Dec-22務(wù)實，奮斗，成就，成功。*Friday,December30,2022抓住每一次機(jī)會不能輕易流失，這樣我們才能真正強(qiáng)大。30-12月-22*30-12月-22謝謝大家！踏實，奮斗，堅持，專業(yè)，努力成就未來。29-12月-2229滅菌工藝與滅菌柜風(fēng)險評估林祥喜2013年3月28日滅菌工藝與滅菌柜風(fēng)險評估林祥喜12/30/202239目錄

滅菌工藝

滅菌柜滅菌柜驗證案例324目錄1滅菌柜改造前后風(fēng)險評估案例12/29/20222滅菌工藝滅菌柜滅菌12/30/20224012/30/2022滅菌工藝40目錄目錄滅菌工藝滅菌柜滅菌柜改造前后風(fēng)險評估案例滅菌柜驗證案例12/29/2022312/29/2022滅菌工藝3目錄目12/30/202241滅菌工藝41濕熱滅菌工藝設(shè)計應(yīng)考慮的因素滅菌工藝滅菌工藝概念、問題的理解常見方法過熱水滅菌12/29/20224滅菌工藝4濕熱滅菌工藝設(shè)計應(yīng)考慮的因素12/30/20224212/30/2022滅菌工藝42

幾個基本概念和問題的通俗理解滅菌工藝明確幾個基本概念和問題，以消除對滅菌知識的理解障礙，增強(qiáng)對滅菌知識的理解力和親和力。幾個基本概念和問題的通俗理解●

變量：溫度、時間、微生物抗性術(shù)語：F值、D值、Z值便于直觀判斷和評價。12/29/2022512/29/2022滅菌工藝512/30/20224312/30/202212/30/2022滅菌工藝43

幾個基本概念和問題的通俗理解滅菌工藝●

D值和Z值D值：以時間（min）為單位，使微生物降低90%或一個對數(shù)值所需要的時間。制藥環(huán)境發(fā)現(xiàn)的微生物絕大多數(shù)是不耐熱的，D值121度時小于0.5min（很少發(fā)現(xiàn)0.5min），通常取1min。Z值：使D值變化10倍所需的溫度，濕熱時一般為10度，干熱時一般為20度。12/29/2022612/29/202212/29/20212/30/20224412/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝44

幾個基本概念和問題的通俗理解滅菌工藝

●F值和F0值，F(xiàn)0≥8，F(xiàn)0≥12●F值：以時間為（min）為單位，在一定溫度下，作用于容器或產(chǎn)品單元的與之等量的時間。對濕熱滅菌，以T=121.1度，Z=10度作參比，即F0●F0：指蒸汽滅菌時，與在121.1度滅菌效果等效的時間（對于干熱，以FH計，與170度等效）?！駷楹芜x121度：經(jīng)濟(jì)、易得、省時?！駷楹芜x121度15分鐘：產(chǎn)品銷往國際市場的條件（如歐盟最終滅菌制劑法規(guī)中，將過度殺滅定義為濕熱121度15分鐘）。12/29/2022712/29/202212/29/20212/30/20224512/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝45

幾個基本概念和問題的通俗理解滅菌工藝●

F0≥8

●無菌保值（SAL）：10-6——106個滅菌產(chǎn)品中存在活菌的產(chǎn)品不超過1個（每一批）產(chǎn)品中一百萬活的微生物中有少于一個微生物存活的機(jī)會（每一個）。

●按GMP生產(chǎn)，實際微生物初始數(shù)量為每個容器1-100個菌（見附表）（1）要達(dá)到無菌保證值，必須：F0′=D121℃×（lgN0-lgNF）=1.0×（lg106-lg100）=6（min）（2）要將容器中100個菌殺滅，必須：F0″=D121℃×（lg102-0）=2（min）（3）將100cfu/容器的污染達(dá)到無菌保證值必須：F0=F0′+F0″=6+2=8（min）12/29/2022812/29/202212/29/20212/30/20224612/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝46

幾個基本概念和問題的通俗理解滅菌工藝●F0≥12F0=12被認(rèn)為是最小過度殺死周期；習(xí)慣被大多數(shù)企業(yè)作為進(jìn)一步的無菌保證，即滅菌工藝擴(kuò)大一倍：●綜上所述：F0=6，無菌保證值；F0=8，確保在GMP生產(chǎn)環(huán)境的產(chǎn)品無菌。F0=12，最小過度殺滅周期，負(fù)荷和耐熱性遠(yuǎn)高于實際（6+6,D=1)；滅菌工藝擴(kuò)大一倍。F0=15，國際市場條件12/29/2022912/29/202212/29/20212/30/20224712/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝47

幾個基本概念和問題的通俗理解滅菌工藝●芽孢：微生物在惡劣環(huán)境下非正常分裂的產(chǎn)物，有較強(qiáng)的抗熱性?！裆镉惺緞阂环N微生物制品（通常為孢子），對滅菌工藝有明確和穩(wěn)定的抗性?！駷楹我M(jìn)行微生物前負(fù)荷檢測？F0′=D121℃×（lgN0-lgNF）=D121℃×（lg102-lg10-6)=8,耐熱的設(shè)定值稍高，故污染水平增加或耐熱性增加都會造成滅菌程序目標(biāo)的失敗。類型有：孢子懸液的載體；孢子懸浮液；自含式生物指示劑。電離輻射——短小芽胞桿菌環(huán)氧乙烷——萎縮芽胞桿菌干熱滅菌——萎縮芽胞桿菌低于121.1℃濕熱——枯草芽胞桿菌低溫蒸汽和甲醛消毒——嗜熱脂肪芽胞桿菌12/29/20221012/29/202212/29/2012/30/20224812/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝48

滅菌工藝

滅菌常見方法簡介

滅菌常見方法簡介

12/29/20221112/29/202212/29/2012/30/20224912/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝49過熱水滅菌滅菌工藝●

過熱水滅菌：效率高；升、降溫可控性強(qiáng)；介質(zhì)污染小。最常見，濕熱滅菌程序決策樹：過熱水滅菌12/29/20221212/29/202212/29/2012/30/20225012/30/202212/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝50

濕熱滅菌工藝設(shè)計應(yīng)考慮的因素滅菌工藝

濕熱滅菌工藝設(shè)計應(yīng)考慮的因素●GMP描述：第六十一條無菌藥品應(yīng)當(dāng)盡可能采用加熱方式進(jìn)行最終滅菌，最終滅菌產(chǎn)品中的微生物存活概率（即無菌保證水平，SAL）不得高于10-6。采用濕熱滅菌方法進(jìn)行最終滅菌的，通常標(biāo)準(zhǔn)滅菌時間F0值應(yīng)當(dāng)大于8分鐘，流通蒸汽處理不屬于最終滅菌。對熱不穩(wěn)定的產(chǎn)品，可采用無菌生產(chǎn)操作或過濾除菌的替代方法。第六十二條......每一種滅菌方式都有其特定的適用范圍，滅菌工藝必須與注冊批準(zhǔn)的要求相一致，且應(yīng)當(dāng)經(jīng)過驗證。第六十三條任何滅菌工藝在投入使用前，必須采用物理檢測手段和生物指示劑，驗證其對產(chǎn)品或物品的適用性及所有部位達(dá)到了滅菌效果。

12/29/20221312/29/202212/29/20第六十四條應(yīng)當(dāng)定期對滅菌工藝的有效性進(jìn)行再驗證（每年至少一次）。設(shè)備重大變更后，須進(jìn)行再驗證。應(yīng)當(dāng)保存再驗證記錄。第六十五條所有的待滅菌物品均須按規(guī)定的要求處理，以獲得良好的滅菌效果，滅菌工藝的設(shè)計應(yīng)當(dāng)保證符合滅菌要求。第六十六條應(yīng)當(dāng)通過驗證確認(rèn)滅菌設(shè)備腔室內(nèi)待滅菌產(chǎn)品和物品的裝載方式。第六十四條應(yīng)當(dāng)定期對滅菌工藝的有效性進(jìn)行再驗證（每年至少第七十條熱力滅菌通常有濕熱滅菌和干熱滅菌，應(yīng)當(dāng)符合以下要求：（一）在驗證和生產(chǎn)過程中，用于監(jiān)測或記錄的溫度探頭與用于控制的溫度探頭應(yīng)當(dāng)分別設(shè)置，設(shè)置的位置應(yīng)當(dāng)通過驗證確定。每次滅菌均應(yīng)記錄滅菌過程的時間-溫度曲線。采用自控和監(jiān)測系統(tǒng)的，應(yīng)當(dāng)經(jīng)過驗證，保證符合關(guān)鍵工藝的要求。自控和監(jiān)測系統(tǒng)應(yīng)當(dāng)能夠記錄系統(tǒng)以及工藝運行過程中出現(xiàn)的故障，并有操作人員監(jiān)控。應(yīng)當(dāng)定期將獨立的溫度顯示器的讀數(shù)與滅菌過程中記錄獲得的圖譜進(jìn)行對照。（二）可使用化學(xué)或生物指示劑監(jiān)控滅菌工藝，但不得替代物理測試。（三）應(yīng)當(dāng)監(jiān)測每種裝載方式所需升溫時間，且從所有被滅菌產(chǎn)品或物品達(dá)到設(shè)定的滅菌溫度后開始計算滅菌時間。（四）應(yīng)當(dāng)有措施防止已滅菌產(chǎn)品或物品在冷卻過程中被污染。除非能證明生產(chǎn)過程中可剔除任何滲漏的產(chǎn)品或物品，任何與產(chǎn)品或物品相接觸的冷卻用介質(zhì)（液體或氣體）應(yīng)當(dāng)經(jīng)過滅菌或除菌處理。第七十條熱力滅菌通常有濕熱滅菌和干熱滅菌，應(yīng)當(dāng)符合以下要第七十一條濕熱滅菌應(yīng)當(dāng)符合以下要求：（一）濕熱滅菌工藝監(jiān)測的參數(shù)應(yīng)當(dāng)包括滅菌時間、溫度或壓力。腔室底部裝有排水口的滅菌柜，必要時應(yīng)當(dāng)測定并記錄該點在滅菌全過程中的溫度數(shù)據(jù)。滅菌工藝中包括抽真空操作的，應(yīng)當(dāng)定期對腔室作檢漏測試。（二）除已密封的產(chǎn)品外，被滅菌物品應(yīng)當(dāng)用合適的材料適當(dāng)包扎，所用材料及包扎方式應(yīng)當(dāng)有利于空氣排放、蒸汽穿透并在滅菌后能防止污染。在規(guī)定的溫度和時間內(nèi)，被滅菌物品所有部位均應(yīng)與滅菌介質(zhì)充分接觸。滅菌工藝與滅菌柜風(fēng)險評估培訓(xùn)課件產(chǎn)品：滅菌前生物負(fù)荷，產(chǎn)品穩(wěn)定性

包裝/容器：密封系統(tǒng)完整性

工藝：工藝設(shè)計、設(shè)備設(shè)計●理解產(chǎn)品滅菌前的生物負(fù)荷、數(shù)量、種類（D值限度）它是滅菌周期開發(fā)的基礎(chǔ)依據(jù)。常見微生物數(shù)≤100cfu/ml；D值＜0.5min產(chǎn)品：滅菌前生物負(fù)荷，產(chǎn)品穩(wěn)定性12/30/20225512/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝55

濕熱滅菌工藝設(shè)計應(yīng)考慮的因素滅菌工藝·微生物來源：原輔料和賦形劑（通常不應(yīng)超過100CFU/g）生產(chǎn)環(huán)境（按A、B、C、D控制，會較低）生產(chǎn)設(shè)備、管道（包括壓縮空氣、惰性氣體等）人員（直接、間接）滅菌前微生物越少，所需滅菌時間就越短；如果污染的各種來源沒有被控制，滅菌周期也可能是不適合的。低污染水平：≤10CFU/100ml微生物污染風(fēng)險控制措施有效：95%的樣品為低污染水平·產(chǎn)品穩(wěn)定性產(chǎn)品效價、降解產(chǎn)物、PH、顏色、儲藏期穩(wěn)定性、不溶性微粒等。如：克林霉素磷酸酯、甘油果糖、鹽酸氨溴索、氨基酸等。12/29/20221812/29/202212/29/2012/30/20225612/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝56

濕熱滅菌工藝設(shè)計應(yīng)考慮的因素滅菌工藝●

容器密封系統(tǒng)可靠性、完整性1、滅菌時的污染和貨架（貯存期）污染：防破壞密封系統(tǒng)結(jié)構(gòu)導(dǎo)致滅菌介質(zhì)污染及貯存污染2、滅菌過程中，橡膠和塑料密封受到熱應(yīng)力作用；3、現(xiàn)有密封型式（密封屏障）主要為：熱融，膠塞和鋁蓋卷邊；4、當(dāng)容器內(nèi)壓大于腔室2巴時：產(chǎn)品變形，損壞密封；5、暴露在最大滅菌條件下染料滲入試驗，微生物挑戰(zhàn)試驗或物理完整性測試。12/29/20221912/29/202212/29/2012/30/20225712/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝57

濕熱滅菌工藝設(shè)計應(yīng)考慮的因素滅菌工藝●

工藝設(shè)計、設(shè)備設(shè)計1、滅菌工藝設(shè)計選擇應(yīng)基于產(chǎn)品特定處方和包裝材料考慮；2、溶液劑型產(chǎn)品滅菌選擇決策樹產(chǎn)品是否可以121度滅菌15分鐘？→121度15分鐘滅菌；產(chǎn)品是否可以濕熱滅菌F0≥8，達(dá)到（SAL）10-6？→濕熱滅菌F0≥8分鐘；是否可以過濾除菌？→過濾除菌加無菌工藝；無菌配制和灌封。12/29/20222012/29/202212/29/203、滅菌設(shè)備適用性是指滅菌設(shè)備執(zhí)行滅菌工藝的能力，即滅菌設(shè)備對滅菌工藝各參數(shù)的控制準(zhǔn)確度和精確度能否使任意位置的產(chǎn)品的實際F0值符合滅菌工藝規(guī)定的F0值范圍，滅菌工藝允許的F0范圍越窄，對滅菌設(shè)備的控制精確度、熱分布均勻的要求越高。滅菌工藝與滅菌柜風(fēng)險評估培訓(xùn)課件12/30/20225912/30/2022滅菌工藝59生物挑戰(zhàn)實驗必要性和重要性

滅菌柜滅菌柜關(guān)于水浴滅菌柜水浴滅菌柜滅菌時存在的風(fēng)險溫度對F0值的影響12/29/20222212/29/2022滅菌工藝22生物12/30/20226012/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝60

關(guān)于水浴滅菌柜滅菌柜關(guān)于水浴滅菌柜●

構(gòu)成要素：

符合法規(guī)的容器（超50%的要求壓力值）安全門及其控制過程控制系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)輔助及管路系統(tǒng)（泵、管道、換熱器、水位閥、噴頭等）貨架/內(nèi)車安全泄壓閥12/29/20222312/29/202212/29/2012/30/20226112/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝61

關(guān)于水浴滅菌柜滅菌柜●

流程12/29/20222412/29/202212/29/2012/30/20226212/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝62

水浴滅菌柜滅菌時存在的風(fēng)險滅菌柜水浴滅菌柜滅菌時存在的風(fēng)險●

冷點和溫度均一性：

●探頭精度：固定溫度探頭（3個）與活動穿刺溫度探頭（4個以上）精度一致；溫度探頭選用PT100鉑電阻（雙芯8線，一組用于控制，另一組用于記錄），精度：A級（≤±0.15℃），零漂移量（≤±0.005℃/年）。

●溫度傳感器、探頭數(shù)量及布點：FAT和SAT計劃應(yīng)注明溫度傳感器的數(shù)量和位置，并陳述理由，進(jìn)行統(tǒng)計分析，評價效果。20m3以上內(nèi)置探頭不少于6組；60m3以上不少于8組；進(jìn)水總管、排水口各一，滅菌柜頂部1—2個熱點溫度控制和監(jiān)測12/29/20222512/29/202212/29/2012/30/20226312/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝63

水浴滅菌柜滅菌時存在的風(fēng)險滅菌柜●

運行要求：所有溫度探頭數(shù)據(jù)達(dá)到滅菌溫度時開始計時。保溫段，腔室內(nèi)溫度波動范圍應(yīng)在設(shè)置值±1.0℃間波動（需精確控溫的滅菌柜應(yīng)達(dá)±0.5℃），最冷點和最熱點間溫差≤2℃。滅菌周期中，噴淋水量的變化幅度、流速。噴淋循環(huán)使用時，應(yīng)有水溫和水壓監(jiān)測以及報警裝置

主循環(huán)管路上應(yīng)帶有噴淋水流量檢測裝置。噴淋方式。噴淋無死角。補(bǔ)充或排出空氣的量的可接受標(biāo)準(zhǔn)。能源（蒸汽、冷卻水）波動、、裝載方式。12/29/20222612/29/202212/29/2012/30/20226412/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝64

水浴滅菌柜滅菌時存在的風(fēng)險滅菌柜●

壓力波動：對溫度的影響；對包裝容器的影響；保壓實驗?！?/p>

噴淋水質(zhì)?！耜P(guān)鍵點報警：蒸汽壓力；噴淋水泵頻率；壓縮空氣壓力；噴淋水電導(dǎo)率；對滅菌柜外部公用系統(tǒng)進(jìn)行實時監(jiān)測，過高和過低都進(jìn)行報警，并且有記錄。如蒸汽、冷卻水、壓縮空氣、純化水等。12/29/20222712/29/202212/29/2012/30/20226512/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝65

水浴滅菌柜滅菌時存在的風(fēng)險滅菌柜

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控制系統(tǒng)PLC。人機(jī)交互界面。滅菌柜自帶的本地操作面板。批報告附件內(nèi)容涵蓋的信息：參數(shù)、時間、圖表、報警記錄等。打印數(shù)據(jù)程序：每10秒實時打印。獨立的數(shù)據(jù)記錄儀；安全裝置如門的控制。警告和報警：可在人機(jī)交互界面面板上顯示，由PLC產(chǎn)生；報警記錄與打印，自動決定滅菌周期繼續(xù)與被終止。12/29/20222812/29/202212/29/2012/30/20226612/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝66

水浴滅菌柜滅菌時存在的風(fēng)險滅菌柜●

安全門：墊圈介質(zhì)及性能有利于泄漏控制，以保證滅菌階段溫度穩(wěn)定；門的聲光報警?！癜惭b及外觀?！衿渌荷郎?、降溫時間差異；柜內(nèi)與袋內(nèi)偏差；噴嘴流速及壓力；滅菌車定位；驗證物與待滅物的差異；意外事件；物品大小、裝載的類型及數(shù)量。12/29/20222912/29/202212/29/2012/30/20226712/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝67

水浴滅菌柜滅菌時存在的風(fēng)險滅菌柜●

驗證需求：

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FAT（工廠現(xiàn)場測試）：柜內(nèi)溫度分布研究，每立方米不少于1個探頭，找出代表性的溫度點：如最快達(dá)到滅菌溫度、最慢到達(dá)滅菌溫度和降溫時最慢到達(dá)90℃的點，確定控制探頭的位置和數(shù)量。FAT由滅菌柜供應(yīng)商獨立完成；應(yīng)包括空載熱分布研究，給出滿載和熱穿透驗證時探頭位置?！駵缇竦拇_認(rèn)和驗證應(yīng)考察裝載數(shù)量、裝載方式、滿載熱分布和熱穿透情況及重現(xiàn)性?！?/p>

11個探頭+每個滅菌車上至少放置1個探頭?！癜惭b需求：2個壓力傳感器。12/29/20223012/29/202212/29/2012/30/202268溫度對F0值的影響（溫度均一性的重要性）12/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝68

溫度對F0值的影響（溫度均一性的重要性）滅菌柜F0=△t×10（T-121.1）/Z●

對一個121.1℃、15′滅菌周期來說F0=15×10

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若某個溫度降為120.1℃，則沸點：F0=15×1012/29/202231溫度對F0值的影響（溫度均一性的重要12/30/20226912/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/2022滅菌工藝69

濕熱滅菌工藝設(shè)計應(yīng)考慮的因素滅菌柜12/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/202212/30/202269滅菌工藝69

溫度對F0值的影響（