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文檔簡介
實驗一顯微鏡的結(jié)構(gòu)和使用(穩(wěn)定鏡身)(支持鏡柱以上的部件)(握鏡的部位)(使物像清晰)(使物像更清晰)(用眼觀察的鏡頭)(接近物體的鏡頭)(調(diào)節(jié)光線強弱)(放置玻片標本)(使光線經(jīng)過通光孔反射上來)()(連接目鏡和物鏡)(固定標本)電子顯微鏡與光學(xué)顯微鏡的基本區(qū)別
電子
顯微鏡
光學(xué)
顯微鏡分辨本領(lǐng)200nm
接近0.1nm可見光透鏡電子束光源玻璃透鏡電磁透鏡細胞結(jié)構(gòu)顯微
結(jié)構(gòu)亞顯微
結(jié)構(gòu)顯微鏡的使用1、步驟:取鏡、安放、對光、放置裝片、使鏡筒下降、低倍鏡觀察、將要觀察的物像移至視野中央、高倍鏡觀察。3.物鏡和目鏡的特征比較鏡頭種類有無螺紋長度放大倍數(shù)視野大小、明暗物鏡有長大小而暗短小大而亮目鏡無長小大而亮短大小而暗4.顯微鏡的放大倍數(shù)與成像規(guī)律(1)放大倍數(shù)=目鏡放大倍數(shù)×物鏡放大倍數(shù)。這里的放大倍數(shù)指的是長度或?qū)挾?,而不是面積或體積。(2)成像規(guī)律:顯微鏡下所成的像是倒立的虛像,上下左右均是顛倒的。例如若觀察的實物為“b”,則顯微鏡視野中看到的物象是“q”;若物象偏向視野的右下方,則向右下方移動裝片才能將其移至視野中央。5、污點位置判斷:
分別轉(zhuǎn)動鏡頭、移動裝片,看污點是否隨之而動6、臨時裝片的制作:取玻片擦干凈滴清水或生理鹽水取材展平(或抹均勻)蓋片染色(滴入或用吸水紙吸入)觀察(3)放置玻片標本(4)調(diào)節(jié)焦距(2)對光使用低倍顯微鏡的步驟:(1)取鏡和放置(1)取鏡和放置:顯微鏡平時存放在柜或箱中,用時從柜中取出,右手緊握鏡臂,左一手托住鏡座,將顯微鏡放在自己左肩前方的實驗臺上,鏡座后端距桌邊1-2寸為宜,便于坐著操作。
(3)放置玻片標本:取一玻片標本放在鏡臺上,一定使有蓋玻片的一面朝上,切不可放反,用推片器彈簧夾夾住,然后旋轉(zhuǎn)推片器螺旋,將所要觀察的部位調(diào)到通光孔的正中。高倍鏡的使用方法
(1)選好目標:一定要先在低倍鏡下把需進一步觀察的部位調(diào)到中心,同時把物象調(diào)節(jié)到最清晰的程度,才能進行高倍鏡的觀察。
(2)轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器,調(diào)換上高倍鏡頭,轉(zhuǎn)換高倍鏡時轉(zhuǎn)動速度要慢,并從側(cè)面進行觀察(防止高倍鏡頭碰撞玻片),如高倍鏡頭碰到玻片,說明低倍鏡的焦距沒有調(diào)好,應(yīng)重新操作。
(3)調(diào)節(jié)焦距:轉(zhuǎn)換好高倍鏡后,用左眼在目鏡上觀察,此時一般能見到一個不太清楚的物象,可將細調(diào)節(jié)器的螺旋逆時針移動約0.5-1圈,即可獲得清晰的物象(切勿用粗調(diào)節(jié)器!)
。
如果視野的亮度不合適,可用集光器和光圈加以調(diào)節(jié),如果需要更換玻片標本時,必須順時針(切勿轉(zhuǎn)錯方向)轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器使鏡臺下降,方可取下玻片標本。
顯微鏡使用的注意事項(1)
1.持鏡時必須是右手握臂、左手托座的姿勢,不可單手提取,以免零件脫落或碰撞到其它地方。
2.輕拿輕放,不可把顯微鏡放置在實驗臺的邊緣,以免碰翻落地。
3.保持顯微鏡的清潔,光學(xué)和照明部分只能用擦鏡紙擦拭,切忌口吹手抹或用布擦,機械部分用布擦拭。4.水滴、酒精或其它藥品切勿接觸鏡頭和鏡臺,如果沾污應(yīng)立即擦凈。
5.放置玻片標本時要對準通光孔中央,且不能反放玻片,防止壓壞玻片或碰壞物鏡。
6.要養(yǎng)成兩眼同時睜開的習(xí)慣,以左眼觀察視野,右眼用以繪圖。
7.不要隨意取下目鏡,以防止塵土落入物鏡,也不要任意拆卸各種零件,以防損壞。
8.使用完畢后,必須復(fù)原才能放回鏡箱內(nèi),其步驟是:取下標本片,轉(zhuǎn)動旋轉(zhuǎn)器使鏡頭離開通光孔,下降鏡臺,平放反光鏡,下降集光器(但不要接觸反光鏡)、關(guān)閉光圈,推片器回位,蓋上綢布和外罩,放回實驗臺柜內(nèi)。最后填寫使用登記表。(注:反光鏡通常應(yīng)垂直放,但有時因集光器沒提至應(yīng)有高度,鏡臺下降時會碰壞光圈,所以這里改為平放)鞏固練習(xí)⑴⑵1、2、3、4、5是使用顯微鏡的幾個步驟。右圖為顯微鏡觀察中的兩個視野,其中細胞甲為主要觀察對象,由視野⑴到視野⑵時,操作過程的正確順序是()1轉(zhuǎn)動粗準焦螺旋2轉(zhuǎn)動細準焦螺旋3調(diào)節(jié)光圈4轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器5移動玻片A、1→2→3→4B、3→1→2C、5→4→3→2D、3→4→1→21目鏡的長度與其擴大的倍數(shù)有關(guān)系嗎,有何關(guān)系?
2物鏡的長度與其擴大的倍數(shù)有關(guān)系嗎,有何關(guān)系?
3請大家將鏡臂向鏡座方向移動,觀察物鏡的鏡片,問題:根據(jù)鏡片的大小,是低倍鏡還是高倍鏡的視野大,視野明亮?動手,動腦?。∧跨R的長度越長,擴大的倍數(shù)越小物鏡的長度越長,擴大的倍數(shù)越大高倍鏡的視野小,視野暗首先,在載玻片上滴加一滴清水;第二,用鑷子夾取一塊單層細胞的材料或者撕取一層薄薄的材料放在載玻片上的清水中均勻展開。最后是蓋上蓋玻片。臨時裝片的制作實驗材料:(1酵母菌溶液(2小白菜的葉表皮(3魚的紅細胞制備液一二實驗記錄細胞種類細胞壁細胞膜細胞器細胞核這些細胞與大腸桿菌細胞結(jié)構(gòu)的最主要的差別是大腸桿菌沒有明顯的細胞核,但有鞭毛。這些細胞與大腸桿菌在結(jié)構(gòu)上有什么主要區(qū)別呢?電鏡下的大腸桿菌不同細胞之間存在差異性,分析產(chǎn)生差異的可能原因??不同的細胞在形態(tài)和結(jié)構(gòu)千差萬別,造成其差異性是因為這些細胞的位置和功能不同,結(jié)構(gòu)與功能相適應(yīng),這是個體發(fā)育過程中細胞分化的結(jié)果。檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)可溶性還原糖的鑒定:制備組織樣液(提取或分離出含還原性糖的過程)↓鑒定樣液(取樣液2mL于試管中→加剛配的斐林(班氏)試劑2mL→水浴2min左右→觀察顏色變化)蛋白質(zhì)的鑒定:制備樣液(制備豆?jié){或稀釋蛋清)↓鑒定(試管中加樣液2mL→加2mL雙縮脲試劑A搖均→雙縮脲試劑B試劑3~4滴搖均→觀察顏色變化)脂肪的鑒定:制作切片(含脂肪量越高的組織越好,切片越薄越好)↓染色(滴蘇丹Ⅲ染液2~3滴切片上→2~3min后吸去染液→滴體積分數(shù)50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精)↓制作裝片(滴1~2水于材料切片上→蓋上蓋玻片)↓鏡檢鑒定(顯微鏡對光→低倍鏡觀察→高倍鏡觀察)總結(jié):三大類物質(zhì)的鑒定步驟都是:取樣→顏色反應(yīng)→觀察鑒定,但可溶性還原糖鑒定要水浴加熱,脂肪鑒定要洗去浮色后
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