白介素11ELISA檢測試劑盒,人ELISA試劑盒使用說明書

白介素11（IL11）ELISA檢測試劑盒,人ELISA試劑盒使用說明書上海古朵生物供應(yīng)本試劑僅供研究使用標(biāo)本：血清或血漿Ourcompanyspecializesintheproductionofthesupplyofkitproductsare:doubleantisandwichELISAdetection,ELISAkit,HumanELISAkit,ELISAkit,domesticimportreagent,reagentkitfortestingELISAkit,ELISATestkit,ratELISAkit,mouseELISAkit,apoptosisrelatedfactorkit,whiteELISAkit,ELISAkitVIPandotherlaboratoryproducts,productquality,qualityassurance.使用目的：本試劑盒用于測定血清、血漿及相關(guān)液體樣本介素11（IL-11含量。試驗(yàn)原理：IL-11試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知IL-11濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將IL-11和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中IL-11的濃度呈比例關(guān)系。白介素11試劑^eEsa試劑盒說明書,ELISA試劑盒,ELISA檢測試劑盒&壓2試劑盒說明書試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份（2-8°C保存）96孔配置48孔配置配制96/48份酶標(biāo)板1塊板（96T）半塊板（48T）即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品：80ng/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進(jìn)行稀稀空白對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素標(biāo)記的抗IL-11抗體1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說明書進(jìn)行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型標(biāo)本稀釋液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自備材料蒸餾水。加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項(xiàng)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000Xg離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000Xg離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液一一-1000Xg離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿-將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000Xg離心10分鐘，取上清液5、保存如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70笆保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37°C或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍?！景捉樗?1(IL11)ELISA試劑盒】試劑的準(zhǔn)備1.標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時準(zhǔn)E備，不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行：80ng/ml(6號標(biāo)準(zhǔn)品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。

40ng/ml（5號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液20ng/ml（4號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液10ng/ml（3號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液5.0ng/ml（2號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.5ng/ml（1號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0ng/ml（空白對照）原始濃度不用稀釋直接加入50ul。洗滌緩沖液（50X）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。操作步驟使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37°C溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37C溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37C溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實(shí)驗(yàn)方案標(biāo)準(zhǔn)品濃度（ng/ml）A8080樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B4040樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C2020樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D1010樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E5.05.0樣樣樣樣樣樣樣樣樣樣品品品品品品品品品品F2.52.5樣樣樣樣樣樣樣樣樣樣品品品品品品品品品品G00樣樣樣樣樣樣樣樣樣樣品品品品品品品品品品H樣品樣品樣樣樣樣樣樣樣樣樣樣品品品品品品品品品品局限6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到精確的結(jié)果。白介素11（IL-11）ELISA試劑盒性能靈敏度：最小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的IL-11標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的IL-11含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-80ng/ml4、敏感度：0.1ng/ml上海上海古朵生物專業(yè)生產(chǎn)供應(yīng)的試劑盒類產(chǎn)品有:雙抗夾心ELISA檢測、ELISA試劑盒、ELISA試劑盒、酶聯(lián)檢測試劑盒、國產(chǎn)進(jìn)口試劑、代測elisa試劑盒、ELISA檢測試劑盒、大鼠ELISA試劑盒、小鼠ELISA試劑盒、凋亡相關(guān)因子試劑盒、白介素ELISA試劑盒、VIPELISAkit等實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品，產(chǎn)品品質(zhì)，質(zhì)量保證。Theperformanceofkit:sensitivity:minimumdetectionconcentrationislessthan1standard.LiIL-11arityofdilution.SampleliIL-11arregressionandtheexpectedconcentrationcorrelationcoefficientRvalueis0.990.2:nospecificreactionwithothercytokiIL-11s.3repeaIL-11ility:plate,platebetweenthecoefficientsofvariationwerelessthan10%.HumantypeIIIprocollagenaminoterminalpeptideELISAkitsteps:beforeuse,allreagentsandmixing.Donotallowliquidtoproducealargenumberofbubbles,soastoavoidaddingalargenumberofbubbles,resultingintheadditionoftheerror.accordingtodetermiIL-11thenumberofsamplenumberplusstandardstripnumber.Eachstandardandblankholeisrecommendedtodothehole.Eachsamplecanbemadeaccordingtoitsownquantity,andcanbeusedasaholeinthehole.dilutedafterstandard50ulinreactionhole,addedtothesample50ULinreactionholetobemeasured.ImmediatelyjoiIL-11dthe50ULantibodybiotin.CoverthemembraIL-11plate,gentlyoscillatingmixing,37degreesCelsiusfor45minutes.leftholeliquid,eachholefilledwithwashingliquid,oscillating30secondsoffthewashingliquid,patdrywithabsorbentpaper.Repeatthisoperation4times.IfthewashingmachiIL-11withwashing,washingtimesincreasedonce.perholeaddingchainaffinityenzyme-HRP100ul,gentlyoscillatingmixing,37degrees30minutesincubation.leftholeliquid,eachholefilledwithwashingliquid,oscillating30secondsoffthewashingliquid,patdrywithabsorbentpaper.Repeatthisoperation4times.IfthewashingmachiIL-11withwashing,washingtimesincreasedonce.perholeaddingsubstrateA,B50ul,gentlyoscillatingmixing,37degrees5minutesincubation.Avoidlight.removeELISAplate,quicklyadd50ulterminatedliquid,addingthestopsolutionimmediatelyafterthedeterminationresults.oddeterminationofeachholeatthewavelengthof450nm.Theresultofjudgmentandanalysis:instrumentvalue:YuBo450nmELISAodreadtheholeontheinstrumenttotheODvalueasaverticalcoordinate(y),correspondingotstandardconcentrationsasahorizontalcoordinate(x),dohavecorrespondingcurve,sampleotcontentcanbeaccordingtotheODvaluebystandardcurveconversionoutcorrespondingconcentration,multipliedbythedilutionmultiple;orwiththes