紫外光區(qū)的特定波長(zhǎng)處或一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)的吸光度,對(duì)該物

4.1.4.1.4.1.紫外吸收光譜為物質(zhì)對(duì)紫外區(qū)輻射的能量吸收?qǐng)D。郎伯-比爾（Lambert-Beer）定律為光的吸收定律，它是紫外分光光度法定量分析的依據(jù)，其數(shù)學(xué)表達(dá)式為：A=log1/T=ECL式中A為吸光度；T為透光率E為吸收系數(shù)C為溶液濃度L為光路長(zhǎng)度4.2儀器4.4.4.4.4.4.3紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)的檢定4.4.3.1.1波長(zhǎng)準(zhǔn)確度的允差范圍紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)波長(zhǎng)準(zhǔn)確度允許誤差，紫外區(qū)為±1.0nm，500nm處4.34.3.1.2.1用低壓汞燈檢定關(guān)閉儀器光源，將汞燈（筆式汞燈最方便）直接對(duì)準(zhǔn)進(jìn)光狹縫，如為雙光束儀器，用單光束能量測(cè)定方式，采用波長(zhǎng)掃描方式，掃描速度“慢”（如15nm/min）、響應(yīng)“快”、最小狹縫寬度（如0.1nm）、量程0～100%，在200～800nm范圍內(nèi)單方向重復(fù)掃描3次，由儀器識(shí)別記錄各峰值（若儀器無(wú)“峰檢測(cè)”功能，必要時(shí)可對(duì)指定波長(zhǎng)進(jìn)行4.3.2吸光度準(zhǔn)確度精密稱取在120℃干燥至恒重的基準(zhǔn)重鉻酸鉀約60mg，置1000ml量瓶中，用0.005mol/L硫酸液溶解并稀釋至1000ml，用配對(duì)的1cm石英池，以0.005mol/L硫酸液為空白，在235，257，313，350nm分別測(cè)定吸光度，然后換算成（Eeq\o(\s\up6(1%),\s\do2(1cm分光光度法允差范圍波長(zhǎng)（nm）吸收強(qiáng)度吸收系數(shù)（Eeq\o(\s\up6(1%),\s\do2(1cm))允差范圍235最小124.5123.0~126.0257最大144.0142.8~146.2313最小48.6247.0~50.3350最大106.6105.5~108.54.4樣品測(cè)定操作方法4.4.4.4.4.34.4.34.4.3.2.1采用吸收系數(shù)法應(yīng)對(duì)儀器進(jìn)行校正后測(cè)定，如為測(cè)定新品種的吸收系數(shù)，需按后列4.44.5注意事項(xiàng)4.4.54.4.5.以空氣為空白測(cè)定溶劑在不同波長(zhǎng)處的吸光度的規(guī)定波長(zhǎng)范圍（nm）220~240241~250251~300300以上吸光度＜0.4＜0.2＜0.1＜0.05每次測(cè)定時(shí)應(yīng)采用同一廠牌子批號(hào),混合均勻的同批溶劑.4.5.4.4.5.7測(cè)定時(shí)除另有規(guī)定者外，應(yīng)在規(guī)定的吸收峰4.值對(duì)吸收有影響，則應(yīng)調(diào)溶液的PH值一致后再測(cè)定吸光度。4.6結(jié)果與計(jì)算4.C樣品=A樣品×C對(duì)照/A對(duì)照式中A為吸光度值；C為測(cè)試液濃度（以mg/ml計(jì)）。4.6.2吸收系數(shù)法中國(guó)藥典規(guī)定的吸收系數(shù)，系指（Eeq\o(\s\up6(1%),\s\do2(1cm))，即在指定波長(zhǎng)時(shí)，光路長(zhǎng)度為1cm，試樣濃度換算為1%（g/ml）時(shí)的吸光度，故應(yīng)先求被測(cè)樣品的（Eeq\o(\s\up6(1%),\s\do2(1cm))值，再與規(guī)定的（Eeq\o(\s\up6(1%),\s\do2(1cm))值比較，可計(jì)算出供試品的含量。A（Eeq\o(\s\up6(1%),\s\do2(1cm))（樣品）=────C×L式中A為供試品溶液測(cè)得的吸光度值；C為供試品溶液的進(jìn)分濃度，即100ml中所含溶質(zhì)的克數(shù)（g/ml）；L為吸收池的光路長(zhǎng)度（cm）Eeq\o(\s\up6(1%),\s\do2(1cm))（樣品）供試品的含量%=─────×100Eeq\o(\s\up6(1%),\s\do2(1cm))（標(biāo)準(zhǔn)）式中Eeq\o(\s\up6(1%),\s\do2(1cm))（樣品）為根據(jù)前式計(jì)算出的供試品吸收系數(shù)Eeq\o(\s\up6(1%),\s\do2(1cm))（標(biāo)準(zhǔn)）為藥典或藥品標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的吸收系數(shù)。4.4.6.3.1測(cè)定方法取精制樣品精密稱取一定量，使