纈沙坦研究方案

纈沙坦膠囊BE研究計(jì)劃與試驗(yàn)方案臨床批件號(hào)2012L00759PAGE23PAGE20/19SFDA臨床研究批件號(hào)：2012L00759注冊(cè)分類：化學(xué)藥品第6類第四部分臨床試驗(yàn)資料纈沙坦膠囊健康人體生物等效性試驗(yàn)臨床研究計(jì)劃和試驗(yàn)方案研究機(jī)構(gòu)：華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院新藥臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)研究機(jī)構(gòu)地址：武漢市解放大道1277號(hào)（郵政編碼：430022）研究機(jī)構(gòu)電話究機(jī)構(gòu)主要研究者姓名：黎維勇簽名：版本號(hào)：TJXH－VALS20120515v1申辦單位：江蘇云陽(yáng)集團(tuán)藥業(yè)有限公司聯(lián)系電話系地址：江蘇省丹陽(yáng)市經(jīng)濟(jì)開發(fā)區(qū)銀杏路8號(hào)（郵政編碼：212300）目錄TOC\o"1-2"\h\z\u目錄 1試驗(yàn)概述 4倫理學(xué) 5縮略語(yǔ) 61.引言 72.試驗(yàn)?zāi)康?83.試驗(yàn)管理 83.1管理機(jī)構(gòu)和實(shí)施GCP的情況 83.2監(jiān)查制度 83.3研究中發(fā)生的問題及其處理措施 93.4試驗(yàn)藥品的管理 93.5資料保存 94.試驗(yàn)設(shè)計(jì) 95.受試者選擇 105.1入選標(biāo)準(zhǔn) 105.2排除標(biāo)準(zhǔn) 105.3退出標(biāo)準(zhǔn) 115.4剔除標(biāo)準(zhǔn) 115.5選擇受試者的步驟 115.6受試者篩選 116.受試制劑 117.參比制劑 128.給藥途徑、劑量及確定依據(jù) 129.試驗(yàn)方法 1210.對(duì)受試者要求 1210.1受試者在治療或評(píng)價(jià)中的退出 1210.1.3伴隨用藥和治療 1310.2禁忌與限制 1311.生物標(biāo)本采集 1311.1樣本名稱 1311.2采集時(shí)間和處置方法 1312.生物樣本藥物測(cè)定方法及認(rèn)證 1412.1特異性 1412.2標(biāo)準(zhǔn)曲線與線性范圍 1412.3精密度與準(zhǔn)確度 1412.4定量下限 1512.5提取回收率 1512.6方法學(xué)質(zhì)控 1512.7樣本穩(wěn)定性考察 1512.8基質(zhì)效應(yīng) 1613.研究數(shù)據(jù) 1613.1數(shù)據(jù)處理 1613.2統(tǒng)計(jì)方法 1613.3藥動(dòng)學(xué)參數(shù) 1614.生物等效性評(píng)價(jià) 1615.AE的記錄和報(bào)告 1715.1AE的記錄 1716.聲明及簽字 1816.1申辦者聲明 1816.2研究者聲明 1917.主要參考文獻(xiàn) 19保密聲明本文所含信息均屬機(jī)密，并為江蘇云陽(yáng)集團(tuán)藥業(yè)有限公司所有。本方案提供有關(guān)信息的目的在于為江蘇云陽(yáng)集團(tuán)藥業(yè)有限公司進(jìn)行一項(xiàng)臨床試驗(yàn)，研究者可以本著同樣的目的在符合下列條件的基礎(chǔ)上將方案中的內(nèi)容透露給試驗(yàn)的參加人員或研究者機(jī)構(gòu)審查委員、倫理委員會(huì)或藥事管理委員會(huì)。本方案的內(nèi)容不能用在其他臨床試驗(yàn)中，也不能在事先未經(jīng)江蘇云陽(yáng)集團(tuán)藥業(yè)有限公司書面許可的情況下擅自將本方案內(nèi)容透露給其他任何個(gè)人或集體。盡管該條件不適用于政府法規(guī)所要求的公開，但研究者必須及時(shí)將其通知給江蘇云陽(yáng)集團(tuán)藥業(yè)有限公司。另外，對(duì)本方案進(jìn)行增補(bǔ)的任何信息也屬機(jī)密，并為江蘇云陽(yáng)集團(tuán)藥業(yè)有限公司所有，其機(jī)密原則同方案內(nèi)容。保密并僅用于經(jīng)江蘇云陽(yáng)集團(tuán)藥業(yè)有限公司授權(quán)的事項(xiàng)，未經(jīng)事先書面許可不得向任何他人公開。若事先未獲得授權(quán)而持有本方案，請(qǐng)及時(shí)與江蘇云陽(yáng)集團(tuán)藥業(yè)有限公司聯(lián)系，并將方案和其復(fù)印件交還該公司。

試驗(yàn)概述本研究將采用開放、隨機(jī)、交叉的試驗(yàn)設(shè)計(jì)，評(píng)估國(guó)產(chǎn)甲磺酸多沙唑嗪片空腹口服的生物等效性。20位健康志愿受試者隨機(jī)分成2組，每組10人，分別口服試驗(yàn)藥或?qū)φ账幐?0mg，1周后交叉給藥。受試者在試驗(yàn)前1天晚餐后禁食。第二天早8：00空腹分別口服試驗(yàn)藥物或參比藥物(80mg/人)，用250ml溫水送服，服藥2小時(shí)后才能自由進(jìn)水，服藥4小時(shí)后進(jìn)統(tǒng)一低脂肪餐，實(shí)驗(yàn)期間禁煙、酒和茶，并禁服任何其它藥物。在每次服藥前和給藥后24小時(shí)內(nèi)將采血13次，采靜脈血3ml于含肝素鈉的潔凈試管中，離心取血漿，以反相高效液相色譜-熒光檢測(cè)法測(cè)定血漿中藥物濃度。試驗(yàn)期間由醫(yī)生負(fù)責(zé)臨床觀察，填寫體檢表，記錄臨床癥狀，由護(hù)士采血供試驗(yàn)測(cè)定用。在篩選期受試者臨床實(shí)驗(yàn)室檢查、心電圖檢查和全面體格檢查。試驗(yàn)流程圖篩選入選和隨機(jī)分組第一次給藥受試者空腹后口服受試制劑T或參比制劑R至少間隔7天第二次給藥受試者空腹后交叉口服另一制劑受試者體檢，試驗(yàn)結(jié)束

倫理學(xué)機(jī)構(gòu)審查委員會(huì)和倫理委員會(huì)試驗(yàn)開始前，研究者需將本研究方案、知情同意書、有關(guān)當(dāng)局的批件和藥檢報(bào)告以及任何征召受試者的廣告等遞呈機(jī)構(gòu)審查委員會(huì)、倫理委員會(huì)或具有同等權(quán)力的組織審批，書面批件應(yīng)由研究者遞交江蘇云陽(yáng)集團(tuán)藥業(yè)有限公司。知情同意書知情同意書需遞交有關(guān)的倫理委員會(huì)審批，每份知情同意書必須包括所有的有關(guān)內(nèi)容，包括一項(xiàng)聲明，即江蘇云陽(yáng)集團(tuán)藥業(yè)有限公司有權(quán)根據(jù)當(dāng)局要求或政策規(guī)定查閱受試者試驗(yàn)記錄。在每位可能的受試者參加任何與該試驗(yàn)有關(guān)的活動(dòng)之前，必須將試驗(yàn)的益處和風(fēng)險(xiǎn)全部向他們解釋清楚。在解釋了有關(guān)試驗(yàn)的基本內(nèi)容，并且研究者已確信每位將參加試驗(yàn)的受試者理解試驗(yàn)的目的后，應(yīng)要求每位將參加試驗(yàn)的受試者在知情同意書上簽上姓名和日期，研究者必須向受試者提供一份知情同意書的復(fù)印件。

縮略語(yǔ)短語(yǔ)和專門術(shù)語(yǔ) 解釋ALT/SGPT 丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶/谷丙轉(zhuǎn)氨酶AST/SGOT 天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶/谷草轉(zhuǎn)氨酶AE 不良事件AUC0t從零到最后可測(cè)濃度的血藥濃度-時(shí)間曲線下面積AUC0從零到無(wú)窮大時(shí)間內(nèi)血藥濃度-時(shí)間曲線下面積CRF 病例報(bào)告表Cmax觀察到的最高血藥濃度CL/f 表觀清除率ECG 心電圖EC 倫理委員會(huì)F相對(duì)生物利用度GCP 藥物臨床試驗(yàn)質(zhì)量管理規(guī)范LLOQ 定量下限MRT 平均滯留時(shí)間QA質(zhì)量保證QC質(zhì)量控制SAE 嚴(yán)重不良事件SFDA 國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局SOP標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程Tmax觀察到的達(dá)峰濃度的時(shí)間t1/2末端消除半衰期Vd表觀分布體積1.引言纈沙坦為血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)受體拮抗劑，能選擇性地阻斷AngⅡ與AT1受體的結(jié)合（其特異性拮抗AT1受體的作用大于AT2約20,000倍），從而抑制血管收縮和醛固酮的釋放，產(chǎn)生降壓作用。本品不作用于血管緊張素轉(zhuǎn)換酶（ACE）、腎素及其他受體；不抑制與血壓調(diào)節(jié)和鈉平衡有關(guān)的離子通道；不影響體內(nèi)緩激肽水平，因而導(dǎo)致咳嗽的副作用少于血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑。臨床上主要用于治療原發(fā)性高血壓。毒理：大鼠每日灌服纈沙坦，連續(xù)3個(gè)月，劑量分別為60、200、600mg/kg，結(jié)果大劑量組動(dòng)物水?dāng)z入量和血尿量稍增加，雄性大鼠輕度腎小球增生和嗜堿細(xì)胞增加，雌性大鼠腎小球輸入小動(dòng)脈肥大，恢復(fù)期結(jié)束后未見異常。大鼠灌服纈沙坦最高劑量達(dá)200mg/kg/日(部分動(dòng)物6個(gè)月)，連續(xù)12個(gè)月，猴口服纈沙坦最高劑量120mg/kg/日，連續(xù)12個(gè)月，均未出現(xiàn)不良反應(yīng)。試驗(yàn)表明纈沙坦無(wú)遺傳毒性且無(wú)致癌作用。生殖毒性試驗(yàn)表明本品在大劑量時(shí)可能有輕微的生殖毒性，因此妊娠與哺乳期婦女禁用。本品不良反應(yīng)發(fā)生率約為7.1%，與安慰劑相似。常見的不良反應(yīng)為頭痛和水腫，一般程度輕微且呈一過性，多數(shù)患者可以耐受。其他不良反應(yīng)包括腹瀉、偏頭痛，偶爾可導(dǎo)致轉(zhuǎn)氨酶增加、白細(xì)胞及血小板減少、高血鉀等，極少有蕁麻疹及血管神經(jīng)性水腫發(fā)生。在高血壓患者的臨床試驗(yàn)中還觀察到以下不良事件（無(wú)論是否與研究藥物有關(guān)）：關(guān)節(jié)痛、無(wú)力，背痛、腹瀉，頭暈，頭痛、失眠、性欲降低、惡心、水腫、咽炎，鼻炎，竇炎，上呼吸道感染、病毒感染。藥代動(dòng)力學(xué)：纈沙坦口服后吸收迅速，絕對(duì)生物利用度為25%，進(jìn)食后服藥吸收率降低46%，但臨床療效無(wú)明顯降低，因此飯前飯后服用均可。血漿達(dá)峰時(shí)間為2～3小時(shí)，消除半衰期為6～7小時(shí)，血漿蛋白結(jié)合率為94%～97%。每日服藥1次，三天后血藥濃度達(dá)穩(wěn)態(tài)。纈沙坦以原型藥物代謝，主要(70%)經(jīng)膽道排泄，其余通過腎臟排泄。根據(jù)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局（SFDA）“藥品注冊(cè)管理辦法”規(guī)定，若需申請(qǐng)纈沙坦膠囊《仿制藥生產(chǎn)許可證》，要考核其人體生物等效性，故特制定本研究方案以評(píng)價(jià)纈沙坦膠囊的人體生物等效性。2.試驗(yàn)?zāi)康谋驹囼?yàn)?zāi)康氖窃u(píng)價(jià)健康中國(guó)男性受試者空腹口服纈沙坦膠囊（受試制劑T）和北京諾華制藥有限公司生產(chǎn)的纈沙坦膠囊（代文，參比制劑）后的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)和生物等效性。3.試驗(yàn)管理3.1管理機(jī)構(gòu)和實(shí)施GCP的情況3.1.1申辦者和研究者均應(yīng)采用標(biāo)準(zhǔn)操作程序執(zhí)行臨床試驗(yàn)的QC和QA系統(tǒng)。3.1.2原始資料必須符合中國(guó)GCP要求。3.1.3實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果必須準(zhǔn)確可靠。3.1.4所用觀察結(jié)果和發(fā)現(xiàn)都應(yīng)加以核實(shí)，以保證數(shù)據(jù)的可靠性。3.1.5建立完整的試驗(yàn)組織機(jī)構(gòu)，明確各級(jí)人員職責(zé)。3.1.6由主要研究者負(fù)責(zé)全面質(zhì)量控制，執(zhí)行各級(jí)人員職責(zé)。3.1.7由主要研究者負(fù)責(zé)設(shè)計(jì)試驗(yàn)方案、CRF，并經(jīng)申辦者同意后使用。試驗(yàn)結(jié)束后寫出試驗(yàn)的總結(jié)報(bào)告。3.1.8由指定研究者負(fù)責(zé)制定試驗(yàn)實(shí)施細(xì)則和SOP，在試驗(yàn)中使用。3.1.9試驗(yàn)前由試驗(yàn)小組組織全體參加者學(xué)習(xí)方案，試驗(yàn)參加人員均經(jīng)過GCP培訓(xùn)并獲相應(yīng)證書。3.1.10參加試驗(yàn)的醫(yī)師、護(hù)士要嚴(yán)格遵守方案的規(guī)定，按程序進(jìn)行，不得隨意更改。3.1.11由指定統(tǒng)計(jì)人員負(fù)責(zé)數(shù)據(jù)的全面統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。3.1.12由專人負(fù)責(zé)CRF的保管，試驗(yàn)結(jié)束后統(tǒng)一上交機(jī)構(gòu)辦公室歸檔。3.2監(jiān)查制度3.2.1由申辦者派監(jiān)查員對(duì)本試驗(yàn)進(jìn)行監(jiān)督，確保試驗(yàn)按方案規(guī)定進(jìn)行，確保CRF所記錄數(shù)據(jù)與原始數(shù)據(jù)相同。3.3研究中發(fā)生的問題及其處理措施3.3.1方案的修訂：本方案經(jīng)EC會(huì)批準(zhǔn)后，若要修改，需制定“方案修改說明書”，并由主要研究者簽字，經(jīng)申辦者同意后方可修改方案。3.3.2方案修改后，需報(bào)EC審查后方可執(zhí)行。3.3.3任何參加試驗(yàn)的人員不得違背方案。若發(fā)生違背方案事件，需寫出說明并通知申辦者，后者有權(quán)決定試驗(yàn)是否繼續(xù)。3.3.4試驗(yàn)過程中發(fā)生任何AE或SAE，將按照該方案“153.4試驗(yàn)藥品的管理3.4.1申辦者需攜帶藥品合格證書復(fù)印件、主要研究者申請(qǐng)書及試驗(yàn)藥品到研究機(jī)構(gòu)辦理登記手續(xù)，藥品存放在專門地點(diǎn)。3.4.2藥品由專人管理，嚴(yán)格按照已有的SOP，并符合相應(yīng)的藥品管理規(guī)定。3.4.3試驗(yàn)藥品僅供試驗(yàn)使用，不可用于其他任何情況。3.4.4使用藥品情況均需詳細(xì)記錄在原始病歷上，發(fā)藥者簽名并注明日期和時(shí)間。3.4.5試驗(yàn)結(jié)束后，剩余藥品由申辦者清點(diǎn)后收回。3.5資料保存3.5.1試驗(yàn)記錄保存：原始記錄隨CRF在機(jī)構(gòu)保存。3.5.2CRF（1）按GCP原則進(jìn)行CRF填寫，保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。（2）由專人按原始記錄填寫CRF。（3）最后由主要研究者審核后在CRF上簽字。4.試驗(yàn)設(shè)計(jì)采用隨機(jī)交叉對(duì)照實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，將20位健康志愿受試者隨機(jī)分成2組，每組10人，分別口服試驗(yàn)藥或?qū)φ账幐?0mg，1周后交叉。受試者在試驗(yàn)前1天晚餐后禁食（約10h）。第二天早8：00空腹分別口服試驗(yàn)藥物或參比藥物(80mg/人)，統(tǒng)一用250ml溫水送下，服藥2小時(shí)后才能自由進(jìn)水，服藥4小時(shí)后進(jìn)統(tǒng)一低脂肪餐，實(shí)驗(yàn)期間禁煙、酒和茶，并禁服任何其它藥物。服藥前取空白血，服藥后0.5、1.0、1.5、2、2.5、3、3.5、4、6、8、12、24、30小時(shí)取前臂靜脈血3ml于含肝素鈉的潔凈試管中，立即離心取血漿，置－70℃冰箱中保存至測(cè)定，以液質(zhì)聯(lián)用分析方法測(cè)定血漿中藥物濃度。試驗(yàn)期間由醫(yī)生負(fù)責(zé)臨床觀察，填寫體檢表，記錄臨床癥狀，由護(hù)士采血供試驗(yàn)測(cè)定用。5.受試者選擇5.1入選標(biāo)準(zhǔn)（1）健康志愿者；（2）年齡：18～40歲，同批受試者年齡相差小于10歲；（3）性別：男性；（4）體重：不低于50kg，體重指數(shù)[＝體重kg/(身高m)2]在19～24之間；（5）體格檢查無(wú)異常發(fā)現(xiàn)者；一般體格檢查，血壓、心率、心電圖、肝腎功能、血常規(guī)、血生化、尿常規(guī)及胸透檢查無(wú)異常；（6）收縮壓≥90mmHg，舒張壓≥60mmHg者；（7）自愿參加試驗(yàn)并簽署知情同意書。5.2排除標(biāo)準(zhǔn)（1）體檢不符合上述受試者健康標(biāo)準(zhǔn)者；（2）有藥物濫用史、有明顯煙酒嗜好者；（3）3個(gè)月內(nèi)參加過其他藥物試驗(yàn)者；（4）近2周內(nèi)用過已知對(duì)某臟器有損害藥物，或目前正在應(yīng)用其他預(yù)防或治療藥物者；（5）有慢性或復(fù)發(fā)性心血管、肝、腎、消化道、內(nèi)分泌、免疫系統(tǒng)及呼吸系統(tǒng)疾病史者；（6）已知對(duì)研究藥物同類有過敏史者；（7）最近3月內(nèi)獻(xiàn)血者。5.3退出標(biāo)準(zhǔn)（1）受試者依從性差，不能按時(shí)按量用藥；（2）受試者不愿意繼續(xù)進(jìn)行臨床試驗(yàn)，向主管醫(yī)生提出退出者。5.4剔除標(biāo)準(zhǔn)（1）不符合入選標(biāo)準(zhǔn)者；（2）符合排除標(biāo)準(zhǔn)者；（3）一次藥未用者；（4）無(wú)任何記錄者。5.5選擇受試者的步驟（1）經(jīng)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，征集志愿者自愿報(bào)名；（2）在向志愿者告知本試驗(yàn)各方面情況后，志愿者簽署知情同意書；（3）經(jīng)研究者按篩選表問訊，進(jìn)行體格檢查和實(shí)驗(yàn)室檢查，符合入選標(biāo)準(zhǔn)，不屬排除標(biāo)準(zhǔn)所列任何情況者，并能按時(shí)參加試驗(yàn)者則納為正式志愿受試者。5.6受試者篩選生命體征包括血壓、心率、呼吸、脈搏檢查，體格檢查，ECG和臨床實(shí)驗(yàn)室檢查在篩選進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)室檢查項(xiàng)目如下：（1）血液學(xué)：白細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類、血紅蛋白、血球壓積、血小板計(jì)數(shù)和紅細(xì)胞計(jì)數(shù)。（2）血液生化：總膽紅素、直接膽紅素、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、尿素氮、肌酐、尿酸、葡萄糖；Na＋、K＋、Ca2＋。（3）尿液分析：pH值、蛋白、葡萄糖、酮體、比重、紅細(xì)胞、白細(xì)胞。6.受試制劑T：纈沙坦膠囊，規(guī)格：80mg，江蘇云陽(yáng)集團(tuán)藥業(yè)有限公司研制，批號(hào)：20120415，保存條件：遮光、密閉，陰涼處保存；有效期：暫定24個(gè)月。7.參比制劑R：纈沙坦膠囊，規(guī)格：80mg，北京諾華制藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：待定，保存條件：遮光，密封，在30℃以下保存；有效期：36個(gè)月。8.給藥途徑、劑量及確定依據(jù)由于受試制劑為膠囊，通過口腔口服給藥。本試驗(yàn)根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道的劑量范圍和參比制劑的臨床常用劑量，確定該試驗(yàn)的劑量為受試制劑纈沙坦膠囊1粒（80mg）或參比制劑1粒（80mg）。9.試驗(yàn)方法受試者一旦入選，采用DAS2.0軟件進(jìn)行分組。受試者禁食10小時(shí)后，次日晨空腹給予受試制劑纈沙坦膠囊1粒、或給予參比制劑北京諾華制藥有限公司生產(chǎn)的纈沙坦膠囊1粒。用250ml溫水送服。受試者服藥后2小時(shí)內(nèi)禁水，并在4小時(shí)后給予統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)午餐。在每次服藥前和給藥后24小時(shí)內(nèi)將采血13次，血樣用于測(cè)定纈沙坦的血藥濃度以評(píng)估國(guó)產(chǎn)纈沙坦膠囊與參比制劑的生物等效性，并在24小時(shí)內(nèi)以一定的間隔觀察生命體征以評(píng)估其安全性。經(jīng)過至少7天的清洗期后，受試者于第二階段服用另一種藥物。在篩選期和最后一次采血結(jié)束后，所有受試者將分別作全面體格檢查、12導(dǎo)聯(lián)心電圖和臨床實(shí)驗(yàn)室檢查。10.對(duì)受試者要求10.1受試者在治療或評(píng)價(jià)中的退出10在研究者的觀察下，受試者可以在任何時(shí)間退出，退出的原因列舉如下：（1）在任何時(shí)間，受試者都有權(quán)決定撤回知情同意而退出研究并不會(huì)影響其今后的治療和觀察；（2）申辦者江蘇云陽(yáng)集團(tuán)藥業(yè)有限公司認(rèn)為由于安全原因，中止研究；（3）任何SAE的發(fā)生；（4）試驗(yàn)方案的順應(yīng)性很差；（5）不符合入選（剔除標(biāo)準(zhǔn)）而入選的試驗(yàn)對(duì)象或非正確隨機(jī)化的試驗(yàn)對(duì)象；（6）在研究期間（包括服藥期和清洗期）服用除研究藥物以外的其他藥物；（7）失隨訪；（8）違反試驗(yàn)方案，尤其是漏服試驗(yàn)用藥。10.1.2退出程序受試者可在任何時(shí)間自由退出試驗(yàn)，其以后的治療及隨訪不會(huì)因此受影響。研究者應(yīng)詢問退出的原因，是否發(fā)生任何AE。如有可能，受試者應(yīng)完成最后一次隨訪，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢查和AE記錄，并需追蹤其AE。10.1.3伴隨用藥和治療除非試驗(yàn)方案中有說明，否則在試驗(yàn)期間受試者不得服用任何其他藥物(包括中草藥制劑)。10.2禁忌與限制（1）受試者在服藥前至少禁食10小時(shí)和服藥后4小時(shí)內(nèi)禁食，2小時(shí)內(nèi)禁水；（2）受試者在試驗(yàn)前至少12小時(shí)及試驗(yàn)中不得吸煙和飲用含咖啡因或酒精的飲料；（3）受試者每次服藥都必須留在研究場(chǎng)所一天一夜；（4）受試者在整個(gè)研究過程中必須避免劇烈的體力活動(dòng)，亦不得長(zhǎng)時(shí)間臥床。11.生物標(biāo)本采集11.1樣本名稱血漿。11.2采集時(shí)間和處置方法給藥前在受試者肘靜脈處安放一留置針，每次采血前抽0.3ml棄去，分別于給藥前和給藥后0.5、1.0、1.5、2、2.5、3、3.5、4、6、8、12、24、30小時(shí)（共14點(diǎn)）抽血3.0ml，置于事先已經(jīng)貼好標(biāo)簽的試管內(nèi)，3000rpm離心10min，血漿轉(zhuǎn)移至塑料試管中置7012.生物樣本藥物測(cè)定方法及認(rèn)證按照參考文獻(xiàn)的方法并加以改進(jìn)，采用反相高效液相色譜-熒光檢測(cè)法測(cè)定血漿中纈沙坦的濃度。生物樣本的測(cè)定、藥動(dòng)學(xué)參數(shù)計(jì)算及數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理由華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院新藥臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)具體負(fù)責(zé)。12.1特異性本實(shí)驗(yàn)建立的方法用于測(cè)定血漿中纈沙坦的含量，結(jié)果應(yīng)證明無(wú)內(nèi)源性物質(zhì)或代謝物干擾本品的測(cè)定。12.2標(biāo)準(zhǔn)曲線與線性范圍使用與待測(cè)樣品相同的生物介質(zhì)，不同生物樣品應(yīng)配制標(biāo)準(zhǔn)樣品制備各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線，用于建立標(biāo)準(zhǔn)曲線的標(biāo)準(zhǔn)濃度個(gè)數(shù)取決于分析物可能的濃度范圍和分析物/響應(yīng)值關(guān)系的性質(zhì)。必須至少用6個(gè)濃度建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，對(duì)于非線性相關(guān)可能需要更多濃度點(diǎn)。定量范圍要能覆蓋全部待測(cè)的生物樣品濃度范圍，不得用定量范圍外推的方法求算未知樣品的濃度。建立標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)應(yīng)隨行空白生物樣品，但計(jì)算時(shí)不包括該點(diǎn)，僅用于評(píng)價(jià)干擾。當(dāng)線性范圍較寬的時(shí)候，推薦采用加權(quán)的方法對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行計(jì)算，以使低濃度點(diǎn)計(jì)算得比較準(zhǔn)確。用回歸分析方法計(jì)算的回歸方程，相關(guān)系數(shù)應(yīng)大于0.95。12.3精密度與準(zhǔn)確度精密度是指在確定的分析條件下，相同介質(zhì)中相同濃度樣品的一系列測(cè)量值的分散程度。通常用質(zhì)控樣品的批內(nèi)和批間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差(RSD)來考察方法的精密度。一般RSD應(yīng)小于15%，在LLOQ附近RSD應(yīng)小于20%。準(zhǔn)確度是指在確定的分析條件下，測(cè)得的生物樣品濃度與真實(shí)濃度的接近程度（即質(zhì)控樣品的實(shí)測(cè)濃度與真實(shí)濃度的偏差），重復(fù)測(cè)定已知濃度分析物樣品可獲得準(zhǔn)確度。一般應(yīng)在85%～115%范圍內(nèi)，在LLOQ附近應(yīng)在80%～120%范圍內(nèi)。一般要求選擇3個(gè)濃度的質(zhì)控樣品同時(shí)進(jìn)行方法的精密度和準(zhǔn)確度考察。低濃度選擇在LLOQ的3倍以內(nèi)；高濃度接近于標(biāo)準(zhǔn)曲線的上限；中間選一個(gè)濃度。每一濃度至少制備并測(cè)定5個(gè)樣品，為獲得批間精密度應(yīng)至少在不同天連續(xù)制備并測(cè)定3個(gè)合格的分析批。12.4定量下限是標(biāo)準(zhǔn)曲線上的最低濃度點(diǎn)，表示測(cè)定樣品中符合準(zhǔn)確度與精密度要求的最低藥物濃度。LLOQ應(yīng)能滿足測(cè)定3~5個(gè)半衰期時(shí)樣品中的藥物濃度或能檢測(cè)出Cmax的1/10~1/20時(shí)藥物濃度，其準(zhǔn)確度應(yīng)在真實(shí)濃度的80%～120%范圍內(nèi)，RSD應(yīng)小于20%。應(yīng)由至少5個(gè)標(biāo)準(zhǔn)樣品測(cè)試結(jié)果證明。12.5提取回收率從生物樣本基質(zhì)中回收得到分析物質(zhì)的響應(yīng)值與純標(biāo)準(zhǔn)品產(chǎn)生的響應(yīng)值的比值即為分析物的提取回收率。也可以說是將供試生物樣品中分析物提取出來供分析的比例。應(yīng)考察各種藥物的高、中、低3個(gè)濃度的提取回收率，其結(jié)果應(yīng)當(dāng)一致、精密和可重現(xiàn)。12.6方法學(xué)質(zhì)控應(yīng)在生物樣本分析方法確證完成以后開始測(cè)定未知樣品。在測(cè)定生物樣品中的藥物濃度時(shí)進(jìn)行質(zhì)量控制，以保證所建立的方法在實(shí)際應(yīng)用中的可靠性。推薦由獨(dú)立的人員配制不同濃度的質(zhì)控樣品對(duì)分析方法進(jìn)行考核。每個(gè)未知樣品一般測(cè)定一次，必要時(shí)可進(jìn)行復(fù)測(cè)。每個(gè)分析批生物樣品測(cè)定時(shí)應(yīng)建立新的標(biāo)準(zhǔn)曲線，并隨行測(cè)定各成分的高、中、低三個(gè)濃度的質(zhì)控樣品。每個(gè)濃度至少雙樣本，并應(yīng)均勻分布在未知樣品測(cè)試順序中。當(dāng)一個(gè)分析批中未知樣品數(shù)目較多時(shí)，應(yīng)增加各濃度質(zhì)控樣品數(shù)，使質(zhì)控樣品數(shù)大于未知樣品總數(shù)的5%。質(zhì)控樣品測(cè)定結(jié)果的偏差一般應(yīng)小于15%，低濃度點(diǎn)偏差一般應(yīng)小于20%，最多允許1/3不在同一濃度的質(zhì)控樣品超限。濃度高于定量上限的樣品，應(yīng)采用相應(yīng)的空白介質(zhì)稀釋后重新測(cè)定。對(duì)于定量下限的樣品，在進(jìn)行藥動(dòng)學(xué)分析時(shí)，在達(dá)到Cmax以前取樣的樣品以零值計(jì)算，在達(dá)到Cmax以后取樣的樣品以無(wú)法定量（ND）計(jì)算。12.7樣本穩(wěn)定性考察對(duì)含藥生物樣品在室溫、冰凍（－70℃）和凍融（3次）條件下以及不同存放時(shí)間進(jìn)行穩(wěn)定性考察，以確定生物樣品的存放條件和時(shí)間。同時(shí)考察儲(chǔ)備液（4℃）的穩(wěn)定性以及樣品處理后溶液中分析物的穩(wěn)定性（室溫和進(jìn)樣器中放置若干小時(shí)），以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性。12.8基質(zhì)效應(yīng)從生物樣本基質(zhì)中回收得到分析物質(zhì)的響應(yīng)值與有基質(zhì)存在時(shí)分析物產(chǎn)生的響應(yīng)值的比值即為分析物的基質(zhì)效應(yīng)。應(yīng)考察各種藥物的高、中、低3個(gè)濃度的基質(zhì)效應(yīng)，其結(jié)果應(yīng)當(dāng)一致、精密和可重現(xiàn)。13.研究數(shù)據(jù)13.1數(shù)據(jù)處理分別計(jì)算纈沙坦的血藥濃度和藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。本實(shí)驗(yàn)所測(cè)得的血藥濃度數(shù)據(jù)用非房室模型進(jìn)行計(jì)算，Cmax和Tmax用實(shí)測(cè)值表示；AUC0-t用梯形法計(jì)算，AUC0-=AUC0-t+Ctn/λz，tn是最后一次可實(shí)測(cè)濃度的取樣時(shí)間；Ctn是末次可測(cè)定樣本藥物濃度；λz是系對(duì)數(shù)血藥濃度-時(shí)間曲線末端直線部分求得的末端消除速率常數(shù)，可用對(duì)數(shù)血藥濃度-時(shí)間曲線末端直線部分的斜率求得；t1/2用公式t1/2＝0.693/λz計(jì)算。并根據(jù)以下公式計(jì)算試驗(yàn)藥的相對(duì)生物利用度(F值)：F=(AUCT)/(AUCR)100％AUCT：受試制劑T的藥-時(shí)曲線下面積，AUCR：參比制劑R的藥-時(shí)曲線下面積，13.2統(tǒng)計(jì)方法試驗(yàn)數(shù)據(jù)均用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（X±SD）和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差（RSD）表示，藥動(dòng)學(xué)參數(shù)用SPSS16.0軟件包進(jìn)行方差分析（ANOV），顯著差異的標(biāo)準(zhǔn)為P<0.05。13.3藥動(dòng)學(xué)參數(shù)主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)包括：AUC0-t、AUC0-、Cmax、Tmax、MRT和t1/2等，經(jīng)對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后的受試制劑的AUC0-t的90%可信限在參比制劑的80125%之間，受試制劑的Cmax在參比制劑的75133%之間，則可認(rèn)為兩種制劑等效。14.生物等效性評(píng)價(jià)將受試制劑與參比制劑的AUC0-t、和Cmax經(jīng)對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后用雙單側(cè)t檢驗(yàn)和置信區(qū)間法確定是否符合生物等效性要求，Tmax經(jīng)非參數(shù)法檢驗(yàn)應(yīng)無(wú)顯著差異，則認(rèn)為兩種制劑生物等效。15.AE的記錄和報(bào)告15.1AE的記錄AE受試者在試驗(yàn)過程中發(fā)生的任何AE必須記錄在相應(yīng)的CRF中。此外在每次檢測(cè)受試者的生命體征和采血時(shí)，參加試驗(yàn)的護(hù)士或醫(yī)師均需用間接提問的方式詢問AE的發(fā)生情況。及時(shí)和完整的AE報(bào)告可幫助申辦者確定其是否可能為藥物相關(guān)性事件，從而更多地了解藥物毒性；找出藥物的劑量相關(guān)毒性；修正研究方案；遵守法規(guī)以保護(hù)受試者、處方醫(yī)師和申辦者?！把芯克幬铩倍x為所研究的制劑及用于研究的參比制劑。本試驗(yàn)的研究藥物為江蘇云陽(yáng)集團(tuán)藥業(yè)有限公司研制生產(chǎn)的纈沙坦膠囊和北京諾華制藥有限公司的參比制劑纈沙坦膠囊（代文）?！芭R床AE”是指在研究過程中出現(xiàn)的或惡化的疾病、體征或癥狀。通過研究者對(duì)受試者的詢問和體檢，所有的臨床AE，不管其是否被研究者