高三生物一輪復(fù)習(xí)課件 微生物的培養(yǎng)需要適宜條件

第35講

微生物的培養(yǎng)需要適宜條件

人們對(duì)所有形體微小、肉眼不可見(jiàn)的生物的統(tǒng)稱(chēng)。包括：細(xì)菌、病毒、真菌以及一些小型的原生生物、顯微藻類(lèi)等在內(nèi)的一大類(lèi)生物群體。微生物：提供合適的營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境條件確保其它微生物無(wú)法混入培養(yǎng)基無(wú)菌技術(shù)防止雜菌污染，獲得純凈的微生物培養(yǎng)物是研究和應(yīng)用微生物的前提，也是發(fā)酵工程的重要基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物，一方面要為人們需要的微生物提供合適的營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境條件，另一方面要確保其它微生物無(wú)法混入，并將需要的微生物分離出來(lái)。1微生物的培養(yǎng)需要適宜的條件2培養(yǎng)基人們?yōu)闈M(mǎn)足微生物生長(zhǎng)繁殖以及積累代謝產(chǎn)物的需求而配置的混合養(yǎng)料——培養(yǎng)基，用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物。2.1培養(yǎng)基的一般成分碳源：氮源：水：無(wú)機(jī)鹽：生長(zhǎng)因子：（自養(yǎng)微生物）無(wú)機(jī)碳源——CO2

、CO32-、HCO3-等提供碳元素的物質(zhì)有機(jī)碳源——葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等（異養(yǎng)微生物）提供氮元素的物質(zhì)有機(jī)氮源——牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等無(wú)機(jī)氮源——NH4＋、NO3-、NH3等某些微生物自身缺陷，需要一些特殊成分，如維生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等有機(jī)化合物。在主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿(mǎn)足微生物生長(zhǎng)的條件有：對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及O2的需求。例如：“細(xì)菌喜葷、霉菌喜素”；培養(yǎng)乳酸桿菌需添加維生素；培養(yǎng)霉菌需調(diào)至酸性；培養(yǎng)細(xì)菌需調(diào)至中性或弱堿性；培養(yǎng)厭氧微生物需提供無(wú)氧環(huán)境。思考：

微生物培養(yǎng)基是否都需要人工添加碳源或氮源？培養(yǎng)基不一定都含有碳源、氮源，如培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基中不需加入碳源，分離自生固氮菌的培養(yǎng)基中，不需加入氮源。2.2常見(jiàn)的細(xì)菌培養(yǎng)基

組分含量提供的主要營(yíng)養(yǎng)牛肉膏5g碳源、氮源、磷酸鹽和維生素等蛋白胨10g氮源、碳源和維生素等NaCl5g無(wú)機(jī)鹽H2O定容至1000mL水1000mL牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成牛肉膏和蛋白胨來(lái)源于動(dòng)物，含有糖、維生素和有機(jī)氮等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基LB培養(yǎng)基，用酵母浸膏替代牛肉膏2.3培養(yǎng)基的分類(lèi)

天然培養(yǎng)基：合成培養(yǎng)基：化學(xué)成分不十分清楚或成分不恒定的天然有機(jī)物制成的培養(yǎng)基；一般用于大規(guī)模的生物發(fā)酵工業(yè)化學(xué)成分完全清楚的培養(yǎng)基；一般用于實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行的、要求可重復(fù)性強(qiáng)的各項(xiàng)研究按化學(xué)成分液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基：不含凝固劑、呈液體狀態(tài)的培養(yǎng)基：含有凝固劑、呈固體狀態(tài)的培養(yǎng)基加入凝固劑（瓊脂）按物理性質(zhì)分選擇培養(yǎng)基：鑒別培養(yǎng)基：根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求配置加入能與目的菌的代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反應(yīng)的指示劑按作用分2無(wú)菌技術(shù)獲得純凈微生物的關(guān)鍵是防止雜菌污染（無(wú)菌技術(shù)）無(wú)菌技術(shù)主要包括消毒和滅菌2.1

消毒是指使用較為溫和的物理、化學(xué)和生物等方法殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物對(duì)操作空間、操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒常用的消毒方法有煮沸消毒、巴氏消毒、化學(xué)藥物消毒、紫外線消毒等在微生物研究、醫(yī)療操作、食品生產(chǎn)中采取的防止其他微生物污染的技術(shù)，就是無(wú)菌技術(shù)。煮沸消毒（100℃，5～6min）常用巴氏消毒

62~65℃，30min或80~90℃，

30s~1min不破壞營(yíng)養(yǎng)成分化學(xué)藥物消毒可擦拭的表面、液體紫外線消毒空間消毒消毒方法的選擇不能滅菌時(shí)才考慮消毒2.2

滅菌是指使用強(qiáng)烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子對(duì)于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌滅菌方法有濕熱滅菌、干熱滅菌和灼燒滅菌等孢子是脫離親本后能直接或間接發(fā)育成新個(gè)體的生殖細(xì)胞。有時(shí)候可直接由營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞壁加厚和積貯養(yǎng)料而形成，能抵抗不良環(huán)境條件。芽孢，又稱(chēng)內(nèi)生孢子，是細(xì)菌休眠體。芽孢含水量極低，抗逆性強(qiáng)，能經(jīng)受高溫、紫外線，電離輻射以及多種化學(xué)物質(zhì)滅殺等。惡劣環(huán)境下，一個(gè)細(xì)菌產(chǎn)生一個(gè)芽孢，條件適宜時(shí)重新成為一個(gè)細(xì)菌。濕熱滅菌（高壓蒸汽滅菌）干熱滅菌灼燒滅菌水蒸氣為介，100kPa，121℃，15~20min；112℃，30min（葡萄糖）熱空氣為介質(zhì)，160~170℃，2~3h利用充分燃燒層灼燒滅菌方法的選擇最常用耐高溫，需要保持干燥接種用具如涂布器、接種環(huán)、接種針或其它金屬用具過(guò)濾除菌不耐高溫的物質(zhì)（如維生素、尿素、酶制品等）抽濾無(wú)菌技術(shù)小結(jié)常見(jiàn)物品的消毒或滅菌方法3配制可用于培養(yǎng)酵母菌的馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基3.1制備培養(yǎng)基3.2滅菌

將配制好的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到錐形瓶中，加棉塞包上牛皮紙，并用皮筋勒緊壓力1kg/cm2、溫度為121℃的條件下，滅菌15~30min制作流程小結(jié)：稱(chēng)量→溶解→調(diào)pH→分裝→加瓊脂→滅菌→制（倒）平板3.3倒平板待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右，在酒精燈火焰附近倒平板拔出錐形瓶的棉塞將瓶口迅速通過(guò)火焰

用拇指和食指將培