并對常用抗生素和抗結(jié)核藥物耐藥課件

第十三章分枝桿菌屬

是一類細長略帶彎曲的桿菌，含有分枝菌酸，有分枝生長的趨勢而得名。具有抗酸性，一般不易著色，經(jīng)加溫或延長時間才能著色，著色后能抵抗鹽酸酒精的脫色作用，故又稱抗酸桿菌，歸屬于放線菌科，已鑒定的有70余種。第十三章分枝桿菌屬是一類細長略帶彎曲的桿菌，含有分枝菌1第一節(jié)結(jié)核分枝桿菌包括人結(jié)核分枝桿菌、牛分枝桿菌、非洲分枝桿菌和田鼠分枝桿菌等，其中前三者對人類致病。人型結(jié)核分枝桿菌感染的發(fā)病率最高。由于AIDS發(fā)病率呈上升趨勢，而AIDS極易患結(jié)核病，因此更使得結(jié)核病成為危脅人類健康的一個嚴重的全球性公共衛(wèi)生問題。

第一節(jié)結(jié)核分枝桿菌包括人結(jié)核分枝桿菌、牛分枝桿菌、非洲分2一、臨床意義(一)致病物質(zhì)是莢膜、脂質(zhì)和蛋白質(zhì)。1．莢膜有助于粘附，能防止有害物質(zhì)進入結(jié)核分枝桿菌，還可抑制吞噬體與溶酶體融合。2.蛋白質(zhì)有抗原性，和蠟質(zhì)D結(jié)合后能使機體發(fā)生超敏反應(yīng)，并在形成結(jié)核結(jié)節(jié)中發(fā)揮作用。一、臨床意義(一)致病物質(zhì)是莢膜、脂質(zhì)和蛋白質(zhì)。33．脂質(zhì)毒力與所含的脂質(zhì)，尤其是糖脂更為重要。①索狀因子是分枝菌酸和海藻糖結(jié)合的一種糖脂，能損傷細胞線粒體和抑制氧化磷酸化過程，抑制粒細胞的游走，引起慢性肉芽腫。②磷脂能促進單核細胞增生，使巨噬細胞轉(zhuǎn)變?yōu)轭惿掀ぜ毎?，從而形成結(jié)節(jié)。3．脂質(zhì)毒力與所含的脂質(zhì)，尤其是糖脂更為重要。4③硫酸腦甘酯是有毒株細胞壁的成分，能抑制溶酶體同吞噬體的結(jié)合，使細菌在細胞內(nèi)長期存活。④蠟質(zhì)D：有佐劑作用，激發(fā)機體產(chǎn)生遲發(fā)型超敏反應(yīng)。③硫酸腦甘酯是有毒株細胞壁的成分，能抑制溶酶體同吞噬體的結(jié)合5(二)所致疾病

通過呼吸道、消化道和損傷的皮膚等多途徑感染機體，引起多種臟器的結(jié)核病，其中以肺結(jié)核為多見。細菌能夠在巨噬細胞內(nèi)繁殖。為細胞內(nèi)寄生菌。(二)所致疾病通過呼吸道、消化道和損傷的皮膚等多途徑感6結(jié)核的免疫為有菌免疫或稱傳染性免疫，指機體對細菌再次入侵有免疫力。細胞免疫在抗感染免疫中起重要作用，產(chǎn)生細胞免疫的同時，也產(chǎn)生遲發(fā)型超敏反應(yīng)。結(jié)核的免疫為有菌免疫或稱傳染性免疫，指機體對細菌再次入7二、微生物特性1.為分枝狀，略帶彎曲的抗酸桿菌，加溫苯胺染料染色后不易被3％鹽酸酒精脫色，抗酸性染色法染色后結(jié)核分枝桿菌呈紅色，背景呈藍色。菌體外有莢膜。2.菌體含有脂質(zhì)、多糖和蛋白質(zhì)等成分。與致病性免疫性有關(guān)。3.細胞壁骨架、蠟質(zhì)D和核酸等均有佐劑作用。二、微生物特性1.為分枝狀，略帶彎曲的抗酸桿菌，加溫苯胺染料84.為專性需氧，3％—5％CO2能促進生長。營養(yǎng)要求較高，必須在含血清、卵黃、甘油以及含某些無機鹽類的特殊培養(yǎng)基才能生長良好。最適生長溫度為35℃，生長緩慢，14—18h分裂1次，2—5w才出現(xiàn)肉眼可見的如菜花樣粗糙型菌落。4.為專性需氧，3％—5％CO2能促進生長。營養(yǎng)要求較高，必95.抵抗力對理化因素抵抗力較強。耐干燥，在干燥的痰內(nèi)生存6～8個月，對化學(xué)消毒劑的抵抗力較強，在3％HCl或6％H2SO4中不被殺死，常用于處理有雜菌污染的檢材，對濕熱敏感，60℃30min可殺死細菌，在70％～75％乙醇中數(shù)分鐘即被殺死。5.抵抗力對理化因素抵抗力較強。耐干燥，在干燥的痰內(nèi)生存10三、微生物學(xué)檢驗1．標本：清晨第一口痰送檢。無菌抽取腦脊液、胸水、腹水及關(guān)節(jié)液等盛無菌試管送檢，腦脊液標本靜置后，表面有細薄凝塊，取凝塊作涂片或接種培養(yǎng)。采集膿液應(yīng)直接從潰瘍處取膿汁或分泌物。三、微生物學(xué)檢驗1．標本：清晨第一口痰送檢。無菌抽取腦112．直接涂片染色鏡檢：是常用的簡易快速檢查方法。痰涂片要厚，經(jīng)自然干燥和火焰固定后進行齊-尼抗酸染色，觀察至少100個視野，結(jié)核分枝桿菌抗酸染色后呈紅色，其他細菌和細胞為藍色。結(jié)果應(yīng)報告“找到或未找到抗酸性桿菌”，而不能報告“找到結(jié)核分枝桿菌”。2．直接涂片染色鏡檢：是常用的簡易快速檢查方法。痰涂片要12

3.核酸檢測用PCR法快速診斷結(jié)核分枝桿菌感染。設(shè)計特異rRNA片段進行擴增，然后用特異的DNA探針與之雜交。特異性與敏感性均大于95％。4.抗PPDIgG的檢測用ELISA法檢測患者血清中抗PPDIgG，可作為活動性結(jié)核分枝桿菌感染的快速診斷方法，陽性率為80％～90％。3.核酸檢測135.分離培養(yǎng)腦脊液、胸腹水等無雜菌污染的標本可直接或離心后取沉渣接種等有雜菌污染的標本在接種到培養(yǎng)基之前須做適當?shù)奶幚?，以消除雜菌的干擾。標本接種于選擇性固體培養(yǎng)基中，常用羅琴培養(yǎng)基，所含的孔雀綠或青霉素可抑制雜菌生長：37℃，5％—10％CO2培養(yǎng)8周，如果出現(xiàn)干燥呈顆粒狀、灰白色菌落，涂片染色為抗酸陽性，多數(shù)是結(jié)核分枝桿菌。陰性繼續(xù)培養(yǎng)至12周方可報告。5.分離培養(yǎng)腦脊液、胸腹水等無雜菌污染的標本可直接或離心146.鑒定菌種鑒定可為結(jié)核病和非典型分枝桿菌病的臨床鑒別和防治提供科學(xué)的依據(jù)。(1)PCR反向膜探針雜交EHSA法(PCR雜交梳)：該法是將PCR、分子雜交、酶聯(lián)免疫顯色技術(shù)有機結(jié)合，經(jīng)過兩次特異性雙向選擇，其特異性相互補充和加強，對提高方法的特異性，消除假陽性起決定作用。6.鑒定菌種鑒定可為結(jié)核病和非典型分枝桿菌病的臨床鑒別和15(2)DNA探針：使用對分枝桿菌rRNA序列特異的DNA探針與分枝桿菌rRNA雜交，由于每個分枝桿菌細胞內(nèi)有10，000個rRNA拷貝，故為雜交提供了放大系統(tǒng)，提高了靈敏度，將熒光素或同位素標記在探針上，可鑒定菌種。(2)DNA探針：使用對分枝桿菌rRNA序列特異的DNA探針16(3)16srRNA基因序列測定：由于不同種的分枝桿菌其16srRNA基因序列是不同的，所以可通過測定16srRNA基因序列鑒定菌種。(4)高效液相色譜(HPLC)檢測：由于不同種的分枝桿菌細胞壁中的分枝菌酸不同，所以利用HPLC檢測分枝菌酸可鑒定菌種，(3)16srRNA基因序列測定：由于不同種的分枝桿菌其1177.藥物敏感性試驗?zāi)退幹甑脑龆?，?yīng)做藥物敏感性試驗，以指導(dǎo)臨床合理用藥。將純培養(yǎng)物菌懸液，接種含各種濃度藥物的固體培養(yǎng)基上，同時做不含藥物的對照組。經(jīng)過培養(yǎng)，含有藥物的培養(yǎng)基上菌落數(shù)目是對照組的75％以上，則認為該菌對該藥物濃度為完全耐藥，如無菌落生長則為敏感。7.藥物敏感性試驗?zāi)退幹甑脑龆?，?yīng)做藥物敏感性試驗，以指18四、結(jié)核菌素試驗(1)原理：舊結(jié)核菌素(OT)，主要成分是結(jié)核分枝桿菌蛋白。將其稀釋10000倍，使每0．1ml含1u。純蛋白衍生物(PPD)，是用三氯醋酸沉淀結(jié)核菌培養(yǎng)濾液后的純化物。每O．00002mg為1U，，注入皮內(nèi)后如受試者已感染結(jié)核，則結(jié)核菌素與致敏淋巴細胞特異性結(jié)合，形成遲發(fā)型超敏反應(yīng)性炎癥。(2)方法：取5UPPD或OT0.1ml注射于前臂掌側(cè)皮下，經(jīng)48—72h。注意局部有無硬結(jié)，不能單獨以紅暈為標準。四、結(jié)核菌素試驗(1)原理：舊結(jié)核菌素(OT)，主要成分是結(jié)19(3)結(jié)果分析：①陽性注射部位硬結(jié)、紅腫直徑0.5—1.5cm之間。這表明機體曾感染過結(jié)核，出現(xiàn)超敏反應(yīng)，但不表示正患結(jié)核?。虎趶婈栃杂步Y(jié)直徑超過1.5cm以上，表明可能有活動性結(jié)核，應(yīng)進一步檢查；③陰性注射部位有針眼大的紅點或稍有紅腫，硬結(jié)直徑小于0.5cm，說明無結(jié)核感染，但應(yīng)考慮下述情況：如受試者處于原發(fā)感染的早期，或正患有其他傳染病。(3)結(jié)果分析：①陽性注射部位硬結(jié)、紅腫直徑020(4)應(yīng)用：①選擇BCG接種對象及測定接種效果，結(jié)核菌素反應(yīng)陰性者應(yīng)接種BCG；②結(jié)核菌素試驗對嬰幼兒可做診斷結(jié)核病之用；③在末接種BCG的人群中作結(jié)核分枝桿菌感染的流行病學(xué)調(diào)查；④可借用其測定腫瘤病人的細胞免疫功能。(4)應(yīng)用：21五、動物接種可用于結(jié)核分枝桿菌的分離和毒力測定：此法敏感可靠，但手續(xù)較繁瑣，不能列為常規(guī)。常用的豚鼠。在接種后3-4周出現(xiàn)局部淋巴結(jié)腫大，身體消瘦，結(jié)核菌素試驗轉(zhuǎn)為陽性。剖檢時可看到淋巴結(jié)、肝、脾、腎、肺等臟器的典型結(jié)核病變，由病變處可查到抗酸桿菌或經(jīng)培養(yǎng)有結(jié)核分枝桿菌生長。五、動物接種可用于結(jié)核分枝桿菌的分離和毒力測定：此法敏感22第三節(jié)非典型分枝桿菌

是指結(jié)核和麻風(fēng)分枝桿菌以外的分枝桿菌。因具有抗酸性，故又稱非典型抗酸性菌。廣泛分布于外環(huán)境和人及動物的機體中。已發(fā)現(xiàn)17種以上能引起人類疾病，引起的肺部感染,又難以與結(jié)核分枝桿菌感染區(qū)別，并對常用抗生素和抗結(jié)核藥物耐藥，所以區(qū)分鑒別非典型分枝桿菌具有重要的意義。第三節(jié)非典型分枝桿菌是指結(jié)核和麻風(fēng)分枝桿菌以外的分23—、光產(chǎn)色分枝桿菌特點是在暗處不產(chǎn)生色素，光照1h后能在48h內(nèi)，菌落轉(zhuǎn)為黃色或橘黃色。對人有致病性的是：1．堪薩斯分枝桿菌廣泛分布于水和土壤中，能引起肺內(nèi)外結(jié)核樣的病變。2．海分枝桿菌為水中的腐生菌。通過皮膚微小創(chuàng)口侵入，引起所謂的“游泳池肉芽腫”。3．猿分枝桿菌先后從猿和人體分離出此菌?！?、光產(chǎn)色分枝桿菌特點是在暗處不產(chǎn)生色素，光照1h后能在24二、暗產(chǎn)色分枝桿菌有光或無光均能產(chǎn)生色素，呈黃色或橘黃色。對人有致病性的為：1．瘰痢分枝桿菌25℃-37℃均可生長，35℃最為適宜，45℃則不能生長。可引起人淋巴結(jié)炎或肺部感染。2．蘇爾加分枝桿菌37℃時為暗產(chǎn)色，25℃時為光產(chǎn)色。本菌引起成人肺部的慢性感染。二、暗產(chǎn)色分枝桿菌有光或無光均能產(chǎn)生色素，呈黃色或橘黃色。25三、不產(chǎn)色分枝桿菌不能產(chǎn)生色素。對人有致病性的是：1．鳥-胞內(nèi)復(fù)合分枝桿菌(MAC/MAIC)AIDS患者易感染，對抗結(jié)核藥物不敏感或產(chǎn)生耐藥。2．潰瘍分枝桿菌通過創(chuàng)傷感染，四肢伸側(cè)形成無痛性潰瘍，緩慢愈合或出現(xiàn)繼發(fā)感染。3．蟾分枝桿菌為蟾蜍肉芽腫的病原菌。多引起老年男性的慢性肺部感染。三、不產(chǎn)色分枝桿菌不能產(chǎn)生色素。對人有致病性的是：26四、迅速生長分枝桿菌在普通培養(yǎng)基上生長速度快，生長溫度為25℃-45℃，對人有致病性的是：1．偶發(fā)分枝桿菌可引起人局部或肺部感染，對現(xiàn)有的抗結(jié)核藥物均有耐藥性。2．龜分枝桿菌可引起人的軟組織病變及手術(shù)后繼發(fā)感染，亦可引起肺部感染。四、迅速生長分枝桿菌在普通培養(yǎng)基上生長速度快，生長溫度27第四節(jié)麻風(fēng)分枝桿菌

為麻風(fēng)病的病原菌，麻風(fēng)是一種慢性傳染病，主要表現(xiàn)為皮膚、粘膜和神經(jīng)末梢的損害。晚期可侵犯深部組織和器官，形成肉芽腫。隨病人鼻分泌物、痰、汗液、乳汁、精液或陰道分泌物排出，通過自接接觸或由飛沫傳播，根據(jù)臨床表現(xiàn)、免疫病理變化和細菌檢查結(jié)果等將麻風(fēng)分為瘤型、結(jié)核樣型和界限類綜合征等三種病型。

第四節(jié)麻風(fēng)分枝桿菌為麻風(fēng)病的病原菌，麻風(fēng)是一種28為抗酸桿菌，呈束狀或團狀排列，G+無鞭毛、莢膜和芽胞。用藥后細菌可斷裂為顆粒狀、鏈桿狀等，著色不均勻，叫做不完全菌。為典型的胞內(nèi)寄生菌，有麻風(fēng)分枝桿菌存在的細胞胞質(zhì)呈泡沫狀。稱為麻風(fēng)細胞。尚不能人工培養(yǎng)，微生物檢驗主要靠采集標本抗酸染色鏡檢，依形態(tài)學(xué)特征結(jié)合臨床做診斷。用砜類藥物治療。為抗酸桿菌，呈束狀或團狀排列，G+無鞭毛、莢膜和芽胞。29第十三章分枝桿菌屬

是一類細長略帶彎曲的桿菌，含有分枝菌酸，有分枝生長的趨勢而得名。具有抗酸性，一般不易著色，經(jīng)加溫或延長時間才能著色，著色后能抵抗鹽酸酒精的脫色作用，故又稱抗酸桿菌，歸屬于放線菌科，已鑒定的有70余種。第十三章分枝桿菌屬是一類細長略帶彎曲的桿菌，含有分枝菌30第一節(jié)結(jié)核分枝桿菌包括人結(jié)核分枝桿菌、牛分枝桿菌、非洲分枝桿菌和田鼠分枝桿菌等，其中前三者對人類致病。人型結(jié)核分枝桿菌感染的發(fā)病率最高。由于AIDS發(fā)病率呈上升趨勢，而AIDS極易患結(jié)核病，因此更使得結(jié)核病成為危脅人類健康的一個嚴重的全球性公共衛(wèi)生問題。

第一節(jié)結(jié)核分枝桿菌包括人結(jié)核分枝桿菌、牛分枝桿菌、非洲分31一、臨床意義(一)致病物質(zhì)是莢膜、脂質(zhì)和蛋白質(zhì)。1．莢膜有助于粘附，能防止有害物質(zhì)進入結(jié)核分枝桿菌，還可抑制吞噬體與溶酶體融合。2.蛋白質(zhì)有抗原性，和蠟質(zhì)D結(jié)合后能使機體發(fā)生超敏反應(yīng)，并在形成結(jié)核結(jié)節(jié)中發(fā)揮作用。一、臨床意義(一)致病物質(zhì)是莢膜、脂質(zhì)和蛋白質(zhì)。323．脂質(zhì)毒力與所含的脂質(zhì)，尤其是糖脂更為重要。①索狀因子是分枝菌酸和海藻糖結(jié)合的一種糖脂，能損傷細胞線粒體和抑制氧化磷酸化過程，抑制粒細胞的游走，引起慢性肉芽腫。②磷脂能促進單核細胞增生，使巨噬細胞轉(zhuǎn)變?yōu)轭惿掀ぜ毎?，從而形成結(jié)節(jié)。3．脂質(zhì)毒力與所含的脂質(zhì)，尤其是糖脂更為重要。33③硫酸腦甘酯是有毒株細胞壁的成分，能抑制溶酶體同吞噬體的結(jié)合，使細菌在細胞內(nèi)長期存活。④蠟質(zhì)D：有佐劑作用，激發(fā)機體產(chǎn)生遲發(fā)型超敏反應(yīng)。③硫酸腦甘酯是有毒株細胞壁的成分，能抑制溶酶體同吞噬體的結(jié)合34(二)所致疾病

通過呼吸道、消化道和損傷的皮膚等多途徑感染機體，引起多種臟器的結(jié)核病，其中以肺結(jié)核為多見。細菌能夠在巨噬細胞內(nèi)繁殖。為細胞內(nèi)寄生菌。(二)所致疾病通過呼吸道、消化道和損傷的皮膚等多途徑感35結(jié)核的免疫為有菌免疫或稱傳染性免疫，指機體對細菌再次入侵有免疫力。細胞免疫在抗感染免疫中起重要作用，產(chǎn)生細胞免疫的同時，也產(chǎn)生遲發(fā)型超敏反應(yīng)。結(jié)核的免疫為有菌免疫或稱傳染性免疫，指機體對細菌再次入36二、微生物特性1.為分枝狀，略帶彎曲的抗酸桿菌，加溫苯胺染料染色后不易被3％鹽酸酒精脫色，抗酸性染色法染色后結(jié)核分枝桿菌呈紅色，背景呈藍色。菌體外有莢膜。2.菌體含有脂質(zhì)、多糖和蛋白質(zhì)等成分。與致病性免疫性有關(guān)。3.細胞壁骨架、蠟質(zhì)D和核酸等均有佐劑作用。二、微生物特性1.為分枝狀，略帶彎曲的抗酸桿菌，加溫苯胺染料374.為專性需氧，3％—5％CO2能促進生長。營養(yǎng)要求較高，必須在含血清、卵黃、甘油以及含某些無機鹽類的特殊培養(yǎng)基才能生長良好。最適生長溫度為35℃，生長緩慢，14—18h分裂1次，2—5w才出現(xiàn)肉眼可見的如菜花樣粗糙型菌落。4.為專性需氧，3％—5％CO2能促進生長。營養(yǎng)要求較高，必385.抵抗力對理化因素抵抗力較強。耐干燥，在干燥的痰內(nèi)生存6～8個月，對化學(xué)消毒劑的抵抗力較強，在3％HCl或6％H2SO4中不被殺死，常用于處理有雜菌污染的檢材，對濕熱敏感，60℃30min可殺死細菌，在70％～75％乙醇中數(shù)分鐘即被殺死。5.抵抗力對理化因素抵抗力較強。耐干燥，在干燥的痰內(nèi)生存39三、微生物學(xué)檢驗1．標本：清晨第一口痰送檢。無菌抽取腦脊液、胸水、腹水及關(guān)節(jié)液等盛無菌試管送檢，腦脊液標本靜置后，表面有細薄凝塊，取凝塊作涂片或接種培養(yǎng)。采集膿液應(yīng)直接從潰瘍處取膿汁或分泌物。三、微生物學(xué)檢驗1．標本：清晨第一口痰送檢。無菌抽取腦402．直接涂片染色鏡檢：是常用的簡易快速檢查方法。痰涂片要厚，經(jīng)自然干燥和火焰固定后進行齊-尼抗酸染色，觀察至少100個視野，結(jié)核分枝桿菌抗酸染色后呈紅色，其他細菌和細胞為藍色。結(jié)果應(yīng)報告“找到或未找到抗酸性桿菌”，而不能報告“找到結(jié)核分枝桿菌”。2．直接涂片染色鏡檢：是常用的簡易快速檢查方法。痰涂片要41

3.核酸檢測用PCR法快速診斷結(jié)核分枝桿菌感染。設(shè)計特異rRNA片段進行擴增，然后用特異的DNA探針與之雜交。特異性與敏感性均大于95％。4.抗PPDIgG的檢測用ELISA法檢測患者血清中抗PPDIgG，可作為活動性結(jié)核分枝桿菌感染的快速診斷方法，陽性率為80％～90％。3.核酸檢測425.分離培養(yǎng)腦脊液、胸腹水等無雜菌污染的標本可直接或離心后取沉渣接種等有雜菌污染的標本在接種到培養(yǎng)基之前須做適當?shù)奶幚恚韵s菌的干擾。標本接種于選擇性固體培養(yǎng)基中，常用羅琴培養(yǎng)基，所含的孔雀綠或青霉素可抑制雜菌生長：37℃，5％—10％CO2培養(yǎng)8周，如果出現(xiàn)干燥呈顆粒狀、灰白色菌落，涂片染色為抗酸陽性，多數(shù)是結(jié)核分枝桿菌。陰性繼續(xù)培養(yǎng)至12周方可報告。5.分離培養(yǎng)腦脊液、胸腹水等無雜菌污染的標本可直接或離心436.鑒定菌種鑒定可為結(jié)核病和非典型分枝桿菌病的臨床鑒別和防治提供科學(xué)的依據(jù)。(1)PCR反向膜探針雜交EHSA法(PCR雜交梳)：該法是將PCR、分子雜交、酶聯(lián)免疫顯色技術(shù)有機結(jié)合，經(jīng)過兩次特異性雙向選擇，其特異性相互補充和加強，對提高方法的特異性，消除假陽性起決定作用。6.鑒定菌種鑒定可為結(jié)核病和非典型分枝桿菌病的臨床鑒別和44(2)DNA探針：使用對分枝桿菌rRNA序列特異的DNA探針與分枝桿菌rRNA雜交，由于每個分枝桿菌細胞內(nèi)有10，000個rRNA拷貝，故為雜交提供了放大系統(tǒng)，提高了靈敏度，將熒光素或同位素標記在探針上，可鑒定菌種。(2)DNA探針：使用對分枝桿菌rRNA序列特異的DNA探針45(3)16srRNA基因序列測定：由于不同種的分枝桿菌其16srRNA基因序列是不同的，所以可通過測定16srRNA基因序列鑒定菌種。(4)高效液相色譜(HPLC)檢測：由于不同種的分枝桿菌細胞壁中的分枝菌酸不同，所以利用HPLC檢測分枝菌酸可鑒定菌種，(3)16srRNA基因序列測定：由于不同種的分枝桿菌其1467.藥物敏感性試驗?zāi)退幹甑脑龆?，?yīng)做藥物敏感性試驗，以指導(dǎo)臨床合理用藥。將純培養(yǎng)物菌懸液，接種含各種濃度藥物的固體培養(yǎng)基上，同時做不含藥物的對照組。經(jīng)過培養(yǎng)，含有藥物的培養(yǎng)基上菌落數(shù)目是對照組的75％以上，則認為該菌對該藥物濃度為完全耐藥，如無菌落生長則為敏感。7.藥物敏感性試驗?zāi)退幹甑脑龆?，?yīng)做藥物敏感性試驗，以指47四、結(jié)核菌素試驗(1)原理：舊結(jié)核菌素(OT)，主要成分是結(jié)核分枝桿菌蛋白。將其稀釋10000倍，使每0．1ml含1u。純蛋白衍生物(PPD)，是用三氯醋酸沉淀結(jié)核菌培養(yǎng)濾液后的純化物。每O．00002mg為1U，，注入皮內(nèi)后如受試者已感染結(jié)核，則結(jié)核菌素與致敏淋巴細胞特異性結(jié)合，形成遲發(fā)型超敏反應(yīng)性炎癥。(2)方法：取5UPPD或OT0.1ml注射于前臂掌側(cè)皮下，經(jīng)48—72h。注意局部有無硬結(jié)，不能單獨以紅暈為標準。四、結(jié)核菌素試驗(1)原理：舊結(jié)核菌素(OT)，主要成分是結(jié)48(3)結(jié)果分析：①陽性注射部位硬結(jié)、紅腫直徑0.5—1.5cm之間。這表明機體曾感染過結(jié)核，出現(xiàn)超敏反應(yīng)，但不表示正患結(jié)核病；②強陽性硬結(jié)直徑超過1.5cm以上，表明可能有活動性結(jié)核，應(yīng)進一步檢查；③陰性注射部位有針眼大的紅點或稍有紅腫，硬結(jié)直徑小于0.5cm，說明無結(jié)核感染，但應(yīng)考慮下述情況：如受試者處于原發(fā)感染的早期，或正患有其他傳染病。(3)結(jié)果分析：①陽性注射部位硬結(jié)、紅腫直徑049(4)應(yīng)用：①選擇BCG接種對象及測定接種效果，結(jié)核菌素反應(yīng)陰性者應(yīng)接種BCG；②結(jié)核菌素試驗對嬰幼兒可做診斷結(jié)核病之用；③在末接種BCG的人群中作結(jié)核分枝桿菌感染的流行病學(xué)調(diào)查；④可借用其測定腫瘤病人的細胞免疫功能。(4)應(yīng)用：50五、動物接種可用于結(jié)核分枝桿菌的分離和毒力測定：此法敏感可靠，但手續(xù)較繁瑣，不能列為常規(guī)。常用的豚鼠。在接種后3-4周出現(xiàn)局部淋巴結(jié)腫大，身體消瘦，結(jié)核菌素試驗轉(zhuǎn)為陽性。剖檢時可看到淋巴結(jié)、肝、脾、腎、肺等臟器的典型結(jié)核病變，由病變處可查到抗酸桿菌或經(jīng)培養(yǎng)有結(jié)核分枝桿菌生長。五、動物接種可用于結(jié)核分枝桿菌的分離和毒力測定：此法敏感51第三節(jié)非典型分枝桿菌

是指結(jié)核和麻風(fēng)分枝桿菌以外的分枝桿菌。因具有抗酸性，故又稱非典型抗酸性菌。廣泛分布于外環(huán)境和人及動物的機體中。已發(fā)現(xiàn)17種以上能引起人類疾病，引起的肺部感染,又難以與結(jié)核分枝桿菌感染區(qū)別，并對常用抗生素和抗結(jié)核藥物耐藥，所以區(qū)分鑒別非典型分枝桿菌具有重要的意義。第三節(jié)非典型分枝桿菌是指結(jié)核和麻風(fēng)分枝桿菌以外的分52—、光產(chǎn)色分枝桿菌特點是在暗處不產(chǎn)生色素，光照1h后能在48h內(nèi)，菌落轉(zhuǎn)為黃色或橘黃色。對人有致病性的是：1．堪薩斯分枝桿菌廣泛分布于水和土壤中，能引起肺內(nèi)外結(jié)核樣的病變。2．海分枝桿菌為水中的腐生菌。通過皮膚微小創(chuàng)口侵入，引起所謂的“游泳池肉芽腫”。3．猿分枝桿菌先后從猿