無菌檢查法標(biāo)準(zhǔn)操作程序

第8頁共8頁文件名：無菌檢查標(biāo)準(zhǔn)操作程序編號(hào)：SOP-QC-1101-A3起草人：審核人：批準(zhǔn)人：起草日期：審核日期：批準(zhǔn)日期：頒發(fā)部門：質(zhì)量管理部發(fā)布日期：實(shí)施日期：分發(fā)范圍：QC目的建立一個(gè)無菌檢查法標(biāo)準(zhǔn)操作程序，保證實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性、可靠性。范圍適用于原料、輔料及成品的無菌檢查。職責(zé)微生物檢驗(yàn)員遵照執(zhí)行。內(nèi)容無菌檢查法系用于檢查藥典要求無菌的藥品、生物制品、醫(yī)療器具、原料、輔料及其他品種是否無菌的一種方法。若供試品符合無菌檢查法的規(guī)定，僅表明了供試品在該檢驗(yàn)條件下未發(fā)現(xiàn)微生物污染。無菌檢查應(yīng)在無菌條件下進(jìn)行，試驗(yàn)環(huán)境必須達(dá)到無菌檢查的要求，檢驗(yàn)全過程應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，防止微生物污染，防止污染的措施不得影響供試品中微生物的檢出。單向流空氣區(qū)、工作臺(tái)面及環(huán)境應(yīng)定期按醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測試方法的現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行潔凈度確認(rèn)。隔離系統(tǒng)應(yīng)定期按相關(guān)的要求進(jìn)行驗(yàn)證，其內(nèi)部環(huán)境的潔凈度須符合無菌檢查的要求。日常檢驗(yàn)還需對(duì)試驗(yàn)環(huán)境進(jìn)行監(jiān)控。4.1培養(yǎng)基硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基主要用于厭氧菌的培養(yǎng)，也可用于需氧菌的培養(yǎng)；胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基用于真菌和需氧菌的培養(yǎng)。4.1.1培養(yǎng)基的制備及培養(yǎng)條件培養(yǎng)基可按以下處方制備，亦可使用按該處方生產(chǎn)的符合規(guī)定的脫水培養(yǎng)基或成品培養(yǎng)基。配制后應(yīng)采用驗(yàn)證合格的滅菌程序滅菌。制備好的培養(yǎng)基應(yīng)保存在2?25°C、避光的環(huán)境，若保存于非密閉容器中，一般在3周內(nèi)使用；若保存于密閉容器中，一般可在一年內(nèi)使用。4.1.1.1硫乙酵酸鹽流體培養(yǎng)基胰酪胨15.0g氯化鈉2.5g酵母浸出粉5.0g新配制的0.1%刃天無水葡萄糖5.0g青溶液1.0mlL-胱氨酸0.5g瓊脂0.75g硫乙醇酸鈉0.5g水1000ml(或硫乙醇酸）（0.3ml)除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成分混合，微溫溶解，調(diào)節(jié)pH為弱堿性，煮沸，濾清，加入葡萄糖和刃天青溶液，搖勻，調(diào)節(jié)pH,使滅菌后在25℃的pH值為7.1土0.2。分裝至適宜的容器中，其裝量與容器高度的比例應(yīng)符合培養(yǎng)結(jié)束后培養(yǎng)基氧化層（粉紅色)不超過培養(yǎng)基深度的1/2。滅菌。在供試品接種前，培養(yǎng)基氧化層的高度不得超過培養(yǎng)基深度的1/5，否則，須經(jīng)100°C水浴加熱至粉紅色消失（不釋過20分鐘），迅速冷卻只限加熱一次，并防止被污染。除另有規(guī)定外，硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基置30?35C培養(yǎng)。4.1.1.2胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基胰酪胨17.0g氯化鈉5.0g大豆木瓜蛋白酶水解物3.0g磷酸氫二鉀2.5g葡萄糖/無水葡萄糖2.5g/2.3g水1000ml除葡萄糖外，取上述成分，混合，微溫溶解，濾過，調(diào)節(jié)pH使滅菌后在25℃的pH值為7.3±0.2，加入葡萄糖，分裝，滅菌。胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基置20?25℃培養(yǎng)。4.1.1.3中和或滅活用培養(yǎng)基按上述硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基或胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基的處方及制法，在培養(yǎng)基滅菌或使用前加入適宜的中和劑、滅活劑或表面活性劑，其用量同方法適用性試驗(yàn)。4.1.1.40.5%葡萄糖肉湯培養(yǎng)基(用于硫酸鏈霉素等抗生素的無菌檢查）胨10.0g氯化鈉5.0g牛肉浸出粉3.0g水1000ml葡萄糖5.0g除葡萄糖外，取上述成分混合，微溫溶解，調(diào)節(jié)pH為弱堿性，煮沸，加入葡萄糖溶解后，搖勻，濾清，調(diào)節(jié)pH使滅菌后在25℃的pH值為7.2士0.2，分裝，滅菌。4.1.1.5胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基胰酪胨15.0g瓊脂15.0g大豆木瓜蛋白酶水解物5.0g水1000ml氯化鈉5.0g除瓊脂外，取上述成分，混合，微溫溶解，調(diào)節(jié)pH使滅菌后在25℃的pH值為7.3士0.2，加入瓊脂，加熱溶化后，搖勻，分裝，滅菌。4.1.1.6沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基動(dòng)物組織胃蛋白酶水解物水1000ml和胰酪胨等量混合物10.0g葡萄糖20.0g除葡萄糖外，取上述成分，混合，微溫溶解，調(diào)節(jié)pH使滅菌后在25℃的pH值為5.6士0.2，加入葡萄糖，搖勻，分裝，滅菌。4.1.1.7沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基動(dòng)物組織胃蛋白酶水解物瓊脂15.0g和胰酪胨等量混合物10.0g水1000ml葡萄糖40.0g除葡萄糖、瓊脂外，取上述成分，混合，微溫溶解，調(diào)節(jié)pH使滅菌后在25°C的pH值為5.6士0.2，加入瓊脂，加熱溶化后，再加入葡萄糖，搖勻，分裝，滅菌。4.1.2培養(yǎng)基的適用性檢查查查查查查4.1.4靈敏度檢稀釋液、沖洗液及其制備方法4.3方法適用性試驗(yàn)供試品的無菌檢4.4.5供試品處理及接種培養(yǎng)基薄膜過濾法可溶于十四烷酸異丙酯的膏劑和黏性油劑供試品取規(guī)直接接種法結(jié)果判斷表1批出廠產(chǎn)品及生物制品的原液和半成品最少檢驗(yàn)數(shù)置≤100100＜N≤500＞500＞5ml≤5m