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兒童肺炎支原體感染的臨床診斷檢測〔本科〕,臨床診斷學(xué)論文內(nèi)容摘要:目的:討論肺炎支原體〔MP〕咽拭子快速液體培養(yǎng)法、咽拭子聚合酶鏈反響〔PCR〕法和血清MP被動凝集法〔MP-Ab〕等方式方法在兒童MP感染診斷治療經(jīng)過中的敏感性方式方法?采用3MP檢測法對362例臨床擬診呼吸道〔非細菌性〕感染的患兒的咽拭子和血清標本進行配對研究,每患兒取咽拭子做快速培養(yǎng)和PCR,同時取血清做MP-Ab檢測,對3種方式方法的檢測結(jié)果與臨床診斷治療病例進行回首性分析。結(jié)果?回首臨床病例診斷MP感染患兒152例。MP快速培養(yǎng)法檢出陽性78例,陽性率為51.3%,病程為〔4.52.6〕天;PCR法檢測出陽性103例,陽性率為67.8%,病程為〔6.23.5〕天;MP-Ab法檢測出陽性127例,陽性率83.5%,病程〔8.14.5〕天。結(jié)論?3種MP檢測法的敏感性與病程有相關(guān)性,臨床醫(yī)生應(yīng)根據(jù)患兒病程選取檢測方式方法,以提高陽性檢出率和敏感性。本文關(guān)鍵詞語:肺炎支原體,快速培養(yǎng)法,咽拭子聚合酶鏈反響,血清抗體,配對研究前言肺炎支原體〔mycoplasmapneumoniae,MP〕是嬰幼兒、青少年急道感染的主要病原體之,臨床上表現(xiàn)為呼吸道感染綜合征,華而不實約3%~10%可發(fā)展為支原體肺炎。但只根據(jù)臨床異常感覺和狀態(tài)很難鑒別由MP或病毒、細菌等病原體引起的兒童呼吸道感染,給臨床治療帶來一定的困難。筆者采用3種MP檢測法對362例臨床擬診為呼吸道〔非細菌性〕感染患兒的咽拭子和血清標本進行配對研究,通過病例回首來探尋求索對支原體肺炎敏感的實驗室診斷方式方法,以協(xié)助臨床準確做出診治。第一章文獻綜述1.1肺炎支原體的定義小兒肺炎支原體肺炎多見于5~15歲兒童,嬰幼兒患病常表現(xiàn)為毛細支氣管炎。多數(shù)為亞急性起病,發(fā)熱無定型,或體溫正常,咳嗽較重,初期為刺激性干咳,常有咽痛,頭痛等異常感覺和狀態(tài)。X線改變明顯,多為單側(cè)病變,可以見雙側(cè)病變,下面葉為多見,有時病灶呈游走性,少數(shù)呈大葉性陰影;病程2~3周不等,X線陰影完全消失比異常感覺和狀態(tài)消退更延長2~3周之久,偶有延長至6周者。1.2肺炎支原體的發(fā)病機制肺炎支原體肺炎〔MycoplasmaPneumoniaePneumonia,MPP〕的發(fā)病機制仍不特別清楚,當前主要有呼吸道上皮吸附作用、MP直接侵入和免疫學(xué)發(fā)病機制等學(xué)講,華而不實免疫調(diào)節(jié)異常在MPP的發(fā)生發(fā)展中可能起重要作用1.3肺炎支原體的臨床表現(xiàn)1.多數(shù)為亞急性起病,發(fā)熱無定型,或體溫正常,咳嗽較重,初期為刺激性干咳,常有咽痛,頭痛等異常感覺和狀態(tài)。2.可出現(xiàn)多系統(tǒng)多器官的損害,皮膚粘膜表現(xiàn)為麻疹樣或猩紅熱樣皮疹;偶見非特異性肌痛和游走性關(guān)節(jié)痛;也有表現(xiàn)心血管系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)損害、血尿及溶血性貧血等。3.全身異常感覺和狀態(tài)比胸部體征明顯。體檢肺部體征不明顯,偶有呼吸音稍低及少許干濕羅音者1.4肺炎支原體的臨床診斷病原學(xué)診斷肺炎支原體快速鑒定培養(yǎng)法優(yōu)于被動凝集法,在肺炎支原體肺炎感染的早期可提供重要的根據(jù),可做為臨床診斷MP感染的優(yōu)先試驗[8];氣管肺泡灌洗液MP-DNA測定不僅能診斷MP感染,且支氣管肺泡灌洗術(shù)可促進呼吸道異常感覺和狀態(tài)的改善及體征恢復(fù),且通過纖維支氣管鏡收集支氣管肺泡灌洗液MP-DNA,痰液MP-DNA及血清MP抗體檢測陽性率沒有差異。CRP的檢測是肺炎病原體的輔助診斷方式方法,一定程度可區(qū)分細菌性肺炎和支原體肺炎。聚合酶鏈反響(PCR)技術(shù)檢測MP具有可靠、特異性高的特點,逐步成為早期特異診斷的有力武器。1.5肺炎支原體的實驗室檢查急性期MPP患兒血清hs-CRP、C3、CA、IgM、IgG明顯升高,IgA明顯降低;而恢復(fù)期hs-CR、IgG仍然較高,而IgM和IgA均沒有明顯變化,補體C3、C4在恢復(fù)期內(nèi)也沒有明顯變化,因而血清C-反響蛋白、免疫球蛋白和血清補體的監(jiān)測對診斷急性期或恢復(fù)期MPP有重要意義。MP-IgM和冷凝集試驗同時檢測可提高小兒支原體肺炎實驗診斷的準確率;支原體肺炎患兒外周血白細胞大多正常占80%,中性粒細胞增高占61%;65.6%患兒C-反響蛋白增高;53.6%患兒血沉增快;58.4%患兒心肌酶譜增高;24.0%患兒肝酶增高;16.8%患兒尿酸增高。5流行病學(xué)特點以及進展MP肺炎發(fā)生率約為22.3%,9~12歲感染率最低,3~6歲最高,10~12月是發(fā)病高峰月,小兒支原休肺炎發(fā)病率有所上升,發(fā)病年齡有趨小傾向,秋冬季發(fā)病率高,肺炎支原體只要通過呼吸道進行傳播,尤其發(fā)病率較高的地區(qū),局部區(qū)域每隔3-5年可發(fā)生一次肺炎支原體感染,每2-6年可發(fā)生一次大范圍的肺炎支原體感染,每次感染的時間都持續(xù)較長,有的感染可持續(xù)一年左右,因而,有關(guān)部門一定要采取相應(yīng)的預(yù)防措施,切斷呼吸道飛沫傳播途徑對控制疾病發(fā)生和流行具有重大意義。控制支原體感染的發(fā)生和流行。第二章材料和方式方法2.1樣本收集黃河中心醫(yī)院檢驗科2020年1月1日~8月6日在兒科就診住院患兒病例,有呼吸道感染異常感覺和狀態(tài),已經(jīng)初診為非細菌性感染的患兒362例作為研究對象,華而不實男175例,女187例;年齡為2個月~12歲,病程為1~90天。2.2方式方法詳細方式方法有:〔1〕用MP快速培養(yǎng)法、PCR法和MP-Ab法等3種MP檢測法對362例研究對象同時進行檢測,記錄結(jié)果?!?〕通過研究對象病歷回首統(tǒng)計MP感染的例數(shù),并按年齡、病程和3種MP檢測法結(jié)果進行統(tǒng)計學(xué)分析。2.3臨床診斷MP感染的診斷標準按文獻[1]、臨床異常感覺和狀態(tài)、體征標準,包括回首性診斷即患兒經(jīng)紅霉素治療有效,經(jīng)青霉素、頭孢菌素治療無效者等;以及實驗室檢查3種檢測法至少有一種陽性。病程計算方式方法:以病歷本記錄為準,即在患兒開場有異常感覺和狀態(tài)或體征時開場計算,到患兒來就診檢測時為止進行計算。用Spearman檢驗;各年齡組間確診病例的陽性率比擬用2檢驗;3種檢測方式方法陽性結(jié)果與病程之間的比擬用q檢驗。第三章結(jié)果3.1陽性樣本經(jīng)過回首性診斷,在配對研究組362例研究對象中有152例符合MP感染的診斷標準,即有152例確診病例,華而不實肺炎45例,支氣管炎56例,上呼吸感染49例,支氣管哮喘2例。MP快速培養(yǎng)法檢測出78例陽性,PCR法檢測出103例陽性,MP-Ab法檢測出127例陽性。3.2結(jié)果分析各確診病例的年齡分布,見表1。表1顯示兒童MP感染的年齡以3~4歲年齡段的病例最多,為46例,陽性率最高,為70.77%,與其余年齡組段比擬P0.05。3種檢測法的陽性檢測結(jié)果與年齡分布見表1,表1顯示3種檢測法與年齡之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義,以3~4歲的年齡段與其余年齡組段比擬差異無統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05。不同病程患兒3種檢測法的檢測結(jié)果,見表2,表2顯示MP快速培養(yǎng)法為陽性的患兒病程均值較短為〔4.52.6〕天,PCR法為陽性的患兒病程均值為〔6.23.5〕天,MP-Ab法為陽性的患兒病程均值較長為〔8.14.5〕天。3組之間兩兩比擬,差異有統(tǒng)計學(xué)意義〔P0.05〕。表1不同年齡組MP感染確診病例和3種檢測方式方法結(jié)果比照分析注:△□代表與年齡組3~4歲組段比擬結(jié)果表2不同病程患兒3種檢測方式方法陽性結(jié)果比照分析注:△代表三組之間的兩兩比擬。第四章討論1.MP感染的臨床表現(xiàn)常無特異性,臨床的實際工作中,容易與一般病毒性感冒相混淆。在臨床上患兒有以下異常感覺和狀態(tài):〔1〕發(fā)熱呈弛張熱或不規(guī)則熱。刺激性咳嗽非膿性痰,偶帶血絲?!?〕可有咽痛、頭痛、胸痛,全身異常感覺和狀態(tài)比體征明顯?!?〕肺部體征不典型而胸片炎癥顯著,可見云霧狀大片陰影?!?〕WBC正?;蛏?。〔5〕青霉素類、磺胺類抗生素治療無效,改用或一開場用大環(huán)內(nèi)酯類抗生素有效?!?〕實驗室MP檢驗有1項或1項以上陽性具備以上2個條件或以上者可初步診斷為MP感染。多時候,臨床醫(yī)生為了盡快緩解患兒的異常感覺和狀態(tài),需根據(jù)患兒的異常感覺和狀態(tài)、體征和病史做MP感染的診斷性治療,但應(yīng)與肺結(jié)核互相鑒別。2.近年來由于診斷技術(shù)的提高,MP感染報道日漸增加,一般以為MP感染以年長兒發(fā)病較多,本文表1資料顯示,2~8歲年齡段是發(fā)病的高峰期[2]。占同期呼吸免疫科住院患兒的9.3%,比有關(guān)文獻報道各年齡組支原體肺炎占肺炎發(fā)病的10%~20%低。講明MP感染的發(fā)病年齡有提早,且年齡越小,臨床表現(xiàn)愈不典型。3.臨床實驗室檢測MP的方式方法很多,過去所用的冷凝集試驗法診斷MP感染缺乏特異性,敏感性也差,易受病程的影響[3]。本文采用配對資料研究,對疑為MP感染的患兒進行3種MP檢測法,以討論MP快速培養(yǎng)法、PCR法和MP-Ab法等方式方法在兒童支原體肺炎診斷治療經(jīng)過中的敏感性。提示臨床醫(yī)生根據(jù)患兒不同的病程選取不同的檢測方式方法,以提高實驗室的陽性檢出率。4.MP快速培養(yǎng)法是利用MP生長代謝產(chǎn)物使培養(yǎng)基液體中指示劑顏色發(fā)生改變來判定MP生長;標本中的其他支原體和細菌則因培養(yǎng)基中參加了青霉素和醋酸陀均被抑制。該法陽性結(jié)果可48h檢出。結(jié)果顯示,培養(yǎng)法陽性率為51.3%〔78/152〕,低于另外兩種方式方法的陽性率??赡芘c在檢測前患兒已經(jīng)用了MP敏感藥物有關(guān)。表2結(jié)果顯示,該法陽性病例病程最短。提示病程時間較短的患兒選擇此方式方法對檢測的陽性率較高。MP培養(yǎng)是診斷MP的金標準[4]。5.咽拭子PCR法檢測質(zhì)粒核酸,該法快速、敏感和特異,通過一技術(shù)可從患兒痰中檢測MP-DNA。由于此方式方法相當敏感,易受污染,故實驗室操作時應(yīng)十分小心。統(tǒng)計結(jié)果顯示,該法的陽性率為67.76%〔103/152〕,高于快培法。此法彌補了極微量的和被藥物殺死的MP不能通過快速培養(yǎng)法檢出的病例。表2結(jié)果顯示,該法陽性病例,病程為〔6.23.5〕天。具體資料顯示,有病程在30天以上的患兒經(jīng)抗MP治療,該法仍可為陽性,講明MP的生存力相當強,要系統(tǒng)化治療。血清MP-Ab法陽性率是3種檢測方式方法中最高的,為83.55%〔127/152〕,該法是檢測患兒血清中的MP抗體,而非直截了當檢測MP本身,因此陽性結(jié)果并不能確診是MP感染。對患兒狀態(tài)的綜合評估應(yīng)包括對患者臨床異常感覺和狀態(tài)和試驗結(jié)果的嚴謹分析。極低量的抗體可能不被此試驗檢測出來。另外還有些MP感染的患者不產(chǎn)生抗體或只產(chǎn)生少量的抗體,高抗體滴度的樣品要出現(xiàn)前帶現(xiàn)象。表2結(jié)果顯示,該法陽性病例,病程最長,這是由于發(fā)病初期,機體中尚未產(chǎn)生抗體而不能被檢測出,提示發(fā)病時間較長或經(jīng)太多種藥物治療過的患兒選擇此方式方法有較高的陽性率。此檢測法結(jié)果往往受抗體出現(xiàn)的時相及患兒年齡、機體免疫系統(tǒng)狀況等多方面的影響。結(jié)論臨床應(yīng)根據(jù)患兒的不同病程、不同年齡以及用藥情況來選取實驗室的檢測方式方法,以提高MP的陽性檢測率,以更好地結(jié)合臨床異常感覺和狀態(tài)進行綜合分析,進而提高小兒MP感染診斷的準確率。以下為參考
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