遺傳病的中醫(yī)治療培訓課件

遺傳病的中醫(yī)治療[教學要求]1．掌握：遺傳病治療的基本方法；基因治療的基本概念、策略、途徑和方法。飲食治療、藥物治療的一般原則。2．了解：遺傳病的手術治療、藥物治療；基因治療目前存在的問題和基因治療的臨床應用。2遺傳病的中醫(yī)治療手術治療1藥物治療2飲食治療3基因治療43遺傳病的中醫(yī)治療第1節(jié)手術治療4遺傳病的中醫(yī)治療遺傳病組織器官已出現(xiàn)損傷，用外科手術對病損器官進行修復、切除或組織器官移植，可以有效改善某些癥狀。一、手術修復二、手術去除三、組織器官移植5遺傳病的中醫(yī)治療Wilson病致病機制p104銅

銅藍蛋白

P型銅轉運ATP酶

×

從膽汁排出

儲存于血漿、組織

銅肝細胞聚集

銅入血，沉積于腦、腎、角膜等組織致病

肝細胞壞死

6遺傳病的中醫(yī)治療第2節(jié)藥物治療7遺傳病的中醫(yī)治療對癥治療原則：補其所缺、去其所余1、補其所缺（補充療法）針對病因，補充其所缺乏的物質。如：補充代謝物、輔助因子、激素、酶等。8遺傳病的中醫(yī)治療甲型血友病——抗血友病球蛋白垂體性侏儒癥者——生長激素家族性甲狀腺腫——甲狀腺制劑免疫缺陷病人——免疫球蛋白先天性睪丸發(fā)育不全——睪酮先天性性腺不全患者——雌激素9遺傳病的中醫(yī)治療對癥治療原則：補其所缺、去其所余1、補其所缺（補充療法）針對病因，補充其所缺乏的物質。如：補充代謝物、輔助因子、激素、酶等。2、去其所余（排除療法）針對病因，排除其所堆積的物質。10遺傳病的中醫(yī)治療用理化方法將多余物質清除或排除：如：用青霉胺或鋅劑加速銅離子的清除來改善肝豆狀核變性的癥狀；血漿置換和血漿過濾治療家族性高膽固醇血癥。用代謝抑制劑降低代謝缺陷病的代謝率：如：別嘌呤醇可抑制黃嘌呤氧化酶，減少尿酸形成，治療原發(fā)性痛風和自毀容貌綜合征。減少對所忌物質的吸收：如：苯酮尿癥患者口服苯丙氨酸氨酶膠囊，使苯丙氨酸轉化成苯丙烯酸而減少吸收。

11遺傳病的中醫(yī)治療第3節(jié)飲食治療12遺傳病的中醫(yī)治療一、飲食控制的一般原則

禁其所忌（1）制定特殊食譜半乳糖血癥患兒（避免乳類食品的攝入）家庭性高膽固醇血癥患者（低膽固醇飲食治療）苯丙酮尿癥患兒（低苯丙氨酸奶粉及飲食）（2）減少患者對所忌物質的吸收家族性高膽固醇血癥患者（服用糠麩）13遺傳病的中醫(yī)治療二、把握時機

（一）飲食治療越早越好應盡量在損害發(fā)生前進行治療。（二）飲食治療適應病情飲食治療應隨病情的發(fā)展而有所改變以有效的控制疾病。14遺傳病的中醫(yī)治療第4節(jié)基因治療15遺傳病的中醫(yī)治療基因治療（genetherapy）：是運用DNA重組技術修復患者細胞中有缺陷的基因，使細胞恢復正常功能而達到治療遺傳病的目的。16遺傳病的中醫(yī)治療一、基因治療的策略和途徑（一）基因治療的策略2基因置換

3基因增補4基因干預1基因修正17遺傳病的中醫(yī)治療一、基因治療的策略和途徑（二）基因治療的途徑1生殖細胞基因治療

2體細胞基因治療18遺傳病的中醫(yī)治療二、基因治療的方法直接體內療法：將目的基因直接導入體內有關的組織或器官，使其進入相應的細胞并進行表達。（未廣泛運用）間接體內療法：將目的基因導入合適的靶細胞，經(jīng)過篩選并增殖，回輸給患者，使該基因在患者體內有效表達相應產物。（常用方式）19遺傳病的中醫(yī)治療間接體內療法的基本過程（一）克隆正?；?/p>

（二）靶細胞的選擇（三）目的基因的轉移

（四）基因轉染細胞的篩選（五）基因轉染細胞的鑒定（六）回輸體內

20遺傳病的中醫(yī)治療方法：人工合成、從基因組或通過RNA反轉錄等方法獲得。間接體內療法（一）克隆正?；?/p>

21遺傳病的中醫(yī)治療靶細胞（targetcell）是指接受轉移基因的體細胞。靶細胞應滿足下列條件：①易于取材；②具有增殖優(yōu)勢，生命周期長，便于體外培養(yǎng)；③便于進行遺傳技術操作，易受外源DNA轉化；④安全回輸；⑤靶向性。目前使用得較多的是造血干細胞、皮膚成纖維細胞、肝細胞、血管內皮細胞和肌細胞等。

（二）靶細胞的選擇間接體內療法22遺傳病的中醫(yī)治療

基因轉移是指將外源基因導入靶細胞內。1、化學法應用磷酸鈣沉淀法改變細胞膜通透性，以加強細胞從培養(yǎng)液中攝取DNA的能力。轉移效率低，成功率約為1/102～103。（三）目的基因的轉移間接體內療法23遺傳病的中醫(yī)治療2、物理法（1）電穿孔法借助電流穿擊靶細胞膜使其對DNA通透性增加。有可能使細胞受到損傷。（2）顯微注射法用顯微技術向細胞核內直接注射外源基因。主要應用于轉基因動物。間接體內療法（三）目的基因的轉移

24遺傳病的中醫(yī)治療2、物理法（3）微粒子轟擊法利用亞微粒鎢或金吸附DNA，包裹形成微粒，利用基因槍技術使微粒高速進入靶細胞。間接體內療法（三）目的基因的轉移25遺傳病的中醫(yī)治療2、物理法（1）化學法（2）顯微注射法（3）微粒子轟擊法間接體內療法（三）目的基因的轉移26遺傳病的中醫(yī)治療3、載體介導基因轉移載體能將外源基因特異的轉移至靶細胞。分為：病毒載體非病毒載體間接體內療法（三）目的基因的轉移27遺傳病的中醫(yī)治療病毒載體：將RNA和DNA病毒去除致病性基因，同時具有攜帶目的基因特性的人工改造病毒。

病毒介導基因轉移(virusmediatedgenetransfer)是指以病毒為載體，將外源性目的基因通過基因重組技術，組裝到病毒載體上，并使重組病毒感染受體宿主細胞，完成基因轉移。病毒載體間接體內療法28遺傳病的中醫(yī)治療病毒載體：將RNA和DNA病毒去除致病性基因，同時具有攜帶目的基因特性的人工改造病毒。

病毒載體間接體內療法種類：（1）反轉錄病毒載體（2）腺病毒（3）腺病毒相關病毒（腺伴隨病毒）29遺傳病的中醫(yī)治療病毒載體：將RNA和DNA病毒去除致病性基因，同時具有攜帶目的基因特性的人工改造病毒。

病毒載體間接體內療法優(yōu)點：轉染效率高缺點：存在疫原性、細胞毒作用、攜帶外源基因的大小受限、病毒滴度不易提高。30遺傳病的中醫(yī)治療非病毒載體間接體內療法缺點：轉染效率較低優(yōu)點：安全、制備簡單和攜帶外源基因較大。

種類：（1）脂質體（2）真核細胞表達質粒載體（3）非生物性聚合載體（4）人工染色體31遺傳病的中醫(yī)治療間接體內療法1、克隆正?；?/p>

2、靶細胞的選擇3、目的基因的轉移

4、基因轉染細胞的篩選5、基因轉染細胞的鑒定6、回輸體內

32遺傳病的中醫(yī)治療四、基因治療的臨床運用1.腺苷脫氨酶缺乏嚴重聯(lián)合免疫缺陷?。╝denosinedeaminase-deficientseverecombinedimmunodeficiency，

ADA-SCID）33遺傳病的中醫(yī)治療重癥聯(lián)合免疫缺陷（Severecombinedimmunodeficiencydisease，簡稱SCID），患者缺乏正常人體免疫功能，其染色體上編碼腺苷脫氨酶（簡稱ADA）的基因發(fā)生突變所致。由于ADA是嘌呤代謝中的一種酶，該基因缺陷將導致患者身體細胞中脫氧腺苷的累積，達到高濃度時脫氧腺苷將對免疫系統(tǒng)細胞（如T-細胞和B-細胞）產生毒性。AshantiDiSilva,thefirstpersontobetreatedbygenetherapy.

34遺傳病的中醫(yī)治療將正常ADA基因與反轉錄病毒載體相連，構建重組病毒表達載體。從患體體內分離有免疫缺陷的T淋巴細胞。用重組病毒感染體外培養(yǎng)的T淋巴細胞，使正常ADA基因插入到T淋巴細胞基因組中。培養(yǎng)細胞并確認該基因正常表達。將含有正?；虻腡淋巴細胞回輸?shù)交颊叩墓撬杞M織中。經(jīng)5-6個月治療，患者體內T淋巴細胞的數(shù)量恢復到正常水平，體內ADA酶幾乎達到正常水平，免疫功能得到恢復。1990年，美國第一次對SCID病人作基因治療，其步驟為：35遺傳病的中醫(yī)治療四、基因治療的臨床運用2、血友病B

血漿中缺乏凝血Ⅸ因子所致我國人體基因治療第一成功的個例子。1991,薛京倫(復旦大學)攜帶人FⅨ因子cDNA

的逆轉錄病毒載體(HBSF-FⅨ)皮膚成纖維細胞FactorIX:5%36遺傳病的中醫(yī)治療細胞因子1984～1987年，淋巴激活的殺傷細胞(LAK)3、腫瘤的基因治療1986年，腫瘤浸潤淋巴細胞(TIL)結合IL-21991年，腫瘤壞死因子(TNF)治療黑色素瘤四、基因治療的臨床運用37遺傳病的中醫(yī)治療細胞因子腫瘤的基因治療四、基因治療的臨床運用1992年，單純庖疹病毒（HSV）-胸腺嘧啶激酶（TK）和GCV（Ganciclovir藥物）“自殺基因”38遺傳病的中醫(yī)治療細胞因子腫瘤的基因治療四、基因治療的臨床運用“自殺基因”腫瘤抑制基因pRB,p53,p16,p21,p2739遺傳病的中醫(yī)治療細胞因子腫瘤的基因治療四、基因治療的臨床運用“自殺基因”腫瘤抑制基因應用納米顆粒傳遞基因阻斷腫瘤新生血管生成2002年，美國Hood等人應用陽離子納米顆粒轉導目的基因，阻斷腫瘤組織新生血管生成。40遺傳病的中醫(yī)治療123存在的問題導入基因的持續(xù)表達導入基因的高效表達安全性問題41遺傳病的中醫(yī)治療小結掌握：基因治療的定義、策略和途徑基因治療的基本方法：克隆正?；蚍椒?、基因轉移方法和載體、靶細胞選擇。藥物治療和飲食治療的基本原則了解：目前基因治療存在的問題42遺傳病的中醫(yī)治療復習思考題1、傳統(tǒng)的遺傳病治療包括哪幾個方面，各有什么優(yōu)缺點？2、何謂基因治療？目的基因轉移有哪幾種方法？各有何優(yōu)缺點？3、反轉錄病毒和腺病毒作為基因治療的載體各有何優(yōu)缺點？43遺傳病的中醫(yī)治療唇裂手術前手術后45遺傳病的中醫(yī)治療多指并指合并多指

46遺傳病的中醫(yī)治療基因修正（genecorrection）：指通過特定方法，將致病基因的突變堿基序列糾正,對突變DNA進行原位修復。操作困難。47遺傳病的中醫(yī)治療基因置換：在原位定點導入外源正?；?，代替突變基因的直接療法。目的：糾正突變基因，進行精確的原位修復而不涉及基因組其他任何的改變。是理想的基因治療策略，已用于的動物實驗，但尚未應用于臨床，基因治療的遠期目標。

48遺傳病的中醫(yī)治療基因增補（基因添加）：非定點導入外源正?；?，而沒有真正去除或修復突變基因。外源正?；驅塍w內后，可代替突變基因表達具有正常功能的蛋白而發(fā)揮治療作用，屬于間接治療。增：向靶細胞中導入其原本不表達的基因；補：導入突變基因的正?；颉Ｄ壳皯米顬閺V泛和深入的一種方法，并已付諸臨床實踐。

49遺傳病的中醫(yī)治療基因干預：用特定的方式抑制某個基因的表達或破壞某個基因使之不能表達，以達到治療疾病的目的。常用方法：應用反義核苷酸、核酶或RNA干擾技術抑制體內過度表達的基因。靶基因一般都是過度表達的癌基因或是病毒基因。50遺傳病的中醫(yī)治療生殖細胞基因治療(germcellgenetherapy)將正?；蜣D移到患者的精子、卵子或受精卵校正遺傳缺陷，使其發(fā)育成正常個體。特點：能將新的正常基因傳給下一代，從而使遺傳病得到根治，有害基因不再在人群中散布。

理想，但目前尚難在人類實現(xiàn)。51遺傳病的中醫(yī)治療體細胞基因治療(somaticcellgenetherapy)將基因轉移到個體體細胞基因組上的隨機座位，使該基因有效表達其，達到治療的目的。特點：能使患者癥狀消失或緩解，但有害基因仍能傳給后代。

是目前人類基因治療的基本方案52遺傳病的中醫(yī)治療脂質體法用人工脂質體包裝外源基因，通過脂質體與靶細胞融合或直接注射到病灶區(qū)，將外源基因導入。優(yōu)點：①無毒性和免疫原性，②不在體內堆積，③大小適合，④可適應不同的細胞膜和生理要求。

缺點：轉染效率低，瞬時表達。53遺傳病的中醫(yī)治療真核細胞