分子生物組PCR檢測程序性能驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)操作程序

標(biāo)題：分子生物組檢測程序性能驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件編號:HBHTCM/LH-SOP-PCR-××-標(biāo)題：分子生物組檢測程序性能驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件編號:HBHTCM/LH-SOP-PCR-××-××-××編制人：×××批準(zhǔn)人：×××修改號：0版本號：×Logo/×××××醫(yī)院檢驗(yàn)科×××laboratory/lab發(fā)行部門：PCR組審核人：×××頁碼：第PAGE4/4頁目的確立分子生物組檢測程序性能驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，使檢測程序性能驗(yàn)證操作規(guī)范化。適用范圍采用基因擴(kuò)增檢驗(yàn)方法檢測的所有項(xiàng)目。職責(zé)或責(zé)任人組長負(fù)責(zé)組織本組工作人員具體實(shí)施，并審核報告；本組工作人員負(fù)責(zé)對適用范圍內(nèi)的檢測程序進(jìn)行驗(yàn)證操作，并撰寫報告；技術(shù)主管負(fù)責(zé)監(jiān)督本規(guī)程的實(shí)施；質(zhì)量主管參與對檢驗(yàn)程序有效性的評價及指導(dǎo)；檢驗(yàn)科主任負(fù)責(zé)批準(zhǔn)檢測程序的實(shí)施。內(nèi)容量和/或可報告范圍、抗干擾能力等。定性檢測項(xiàng)目驗(yàn)證內(nèi)容至少應(yīng)包括測定下限、特異性、準(zhǔn)確度（方法學(xué)比較或與金標(biāo)準(zhǔn)比較、抗干擾能力等。正確度指該檢測程序測定的結(jié)果與真實(shí)值或參考值接近的程度。/5份，包括正常和異常水平或不同常見基因突變型；2次；的0.40.5±7.5%。特異性指在可能其它成分（如其他病原體、內(nèi)源物質(zhì)等）存在的條件下，采用的方法能正確測定待測物的特性。對于核酸檢測的特異性，主要是指核酸擴(kuò)增過程中的特異性。10次獨(dú)立的檢測。判斷標(biāo)準(zhǔn)：觀察并記錄檢測結(jié)果為陰陽性的差異。精密度指在規(guī)定的測試條件下，同一個均勻樣品，經(jīng)多次取樣測定所得結(jié)果之間的接近程度。一般以偏差、標(biāo)準(zhǔn)偏差或相對標(biāo)準(zhǔn)偏差表示。驗(yàn)證方法（批內(nèi)精密度20次獨(dú)立測定。計算其均值、標(biāo)準(zhǔn)差與變異系數(shù)。標(biāo)本可用患者血清或選用質(zhì)控品進(jìn)2SD2（可參照廠家說明書）（批間精密度2（濃度最好為醫(yī)學(xué)決定水平之內(nèi)和之外）計算均值、標(biāo)準(zhǔn)差與變異系數(shù)。重復(fù)精密度（批內(nèi)精密度）與中間精密度（批間精密度3控，應(yīng)剔除數(shù)據(jù)，并增加執(zhí)行一個分析批；正常使用每日質(zhì)控品。計算批內(nèi)和批間標(biāo)準(zhǔn)差。應(yīng)小于3/5應(yīng)小于4/5總允許誤差；如果批內(nèi)精密度、批間精密度小于允許范圍過，重新驗(yàn)證或與廠家聯(lián)系并取得幫助。檢出限須經(jīng)過分析適量的在檢出限附近的樣品或分析按檢出限條件配制的樣品的方法進(jìn)行驗(yàn)證。20次獨(dú)立測定。定量限定量分析的定量限必須經(jīng)過分析適量的在定量限附近的樣品或分析按定量限條件配制的樣品的方法進(jìn)行驗(yàn)證。20次獨(dú)立測定。SD<0.24，符合要求?？蓤蟾娣秶壕€性指在檢測范圍內(nèi)，測試結(jié)果與被測物濃度呈正比關(guān)系的程度。（高值標(biāo)本為接近線性范圍上限或略超過線性上限的標(biāo)本，低值標(biāo)本為檢測陰性的標(biāo)本。用低值標(biāo)本對高值標(biāo)本按1∶10的比例進(jìn)行倍比稀釋使檢出限上的點(diǎn)至少不得少于533X，Y，在初步判斷無離群值后，使用EXCEL判斷方法：數(shù)據(jù)擬合為直線，所有數(shù)據(jù)幾乎均落在一條直線上，相關(guān)系數(shù)≥0.95為符合要求。或可依據(jù)制造商聲明的標(biāo)準(zhǔn)。否則，應(yīng)重新進(jìn)行線性驗(yàn)證。測量/可報告范圍測量范圍指能達(dá)到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性，測試方法適用的高低限濃度或量的區(qū)間。5.6中的線性，其線性范圍即為測量范圍。PCR用更敏感的檢測方法?？垢蓴_能力血液樣本內(nèi)源產(chǎn)物血紅蛋白、膽紅素和甘油三酯會對核酸的檢測結(jié)果產(chǎn)生干擾，導(dǎo)致標(biāo)本溶血、黃疸及脂血時檢測結(jié)果不準(zhǔn)確。5粉或液體干擾物，達(dá)到制造商聲明的干擾物濃度后進(jìn)行檢測、分析。47.5%時，說明

干擾物對分析物的檢測沒有干擾作用。HBHTCM/LH-CX-24《量值溯源管理程序