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ICS65.020.01CCSB17團(tuán) 體 標(biāo) 準(zhǔn)T/SDNY036—2022` RapiddetectionofprocymidoneinleekColloidalgoldimmunochromatographymethod2022-09-28發(fā)布 2022-11-01實(shí)施T/SDNY036—2022T/SDNY036—2022PAGE\*ROMANPAGE\*ROMANII目 次前言 II范圍 1規(guī)范性引用文件 1術(shù)語(yǔ)和定義 1第一法檢測(cè)卡(試紙條)法 1原理 1試劑或材料 1儀器和設(shè)備 2分析步驟 2結(jié)果判定 3第二法光熱讀卡儀法 4原理 4試劑與材料 4儀器和設(shè)備 4分析步驟 4結(jié)果的表述計(jì)算 5性能指標(biāo) 5檢出限 5靈敏度 5特異性 5假陰性率 5假陽(yáng)性率 5其它 6附錄A(資料性) 腐霉利中英文名稱、CAS號(hào)及分子式信息 7附錄B(資料性) 快速檢測(cè)方法性能指標(biāo)計(jì)算方法 8前 言本文件按照GB/T1.1—20201草。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由山東省農(nóng)藥檢定所提出。本文件由山東省農(nóng)藥行業(yè)協(xié)會(huì)歸口。本文件主要起草人:張耀中、張震、于淼、吳新、周力、韓帥兵、馬騰、邢冰寒、薛雯、王海燕、宿培萌、宋朋、馬明、王方、張萍、張保建。本標(biāo)準(zhǔn)首次發(fā)布日期:2022年9月28日。T/SDNY036—2022T/SDNY036—2022PAGEPAGE9韭菜中腐霉利快速檢測(cè)膠體金免疫層析法范圍本文件規(guī)定了蔬菜中腐霉利膠體金免疫層析法。本文件適用于韭菜中腐霉利的快速測(cè)定。規(guī)范性引用文件(包括所有的修改單適用于本文件。GB2763食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法術(shù)語(yǔ)和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語(yǔ)和定義。(試紙條)法原理(T線)上抗原的結(jié)合,從而導(dǎo)致檢測(cè)線顏色深淺的變化。通過檢測(cè)線(T線)與控制線(C線)顏色深淺比較,對(duì)樣品中待測(cè)組分進(jìn)行定性判定。試劑或材料試劑4.21.1 甲醇CHOHCAS號(hào):6556-。4.2.1.2 氯化鈉(NaCl,CAS7647-14-5)。4.2.1.3 氯化鉀(KCl,CAS7447-40-7)。4.21.4 (KP,CAS號(hào):778-7-)。4.21.5 (NHP·12OCAS號(hào):1009-3-4。4.21.6 (OCAS號(hào):772-1-,GB/T662)。標(biāo)準(zhǔn)品腐霉利標(biāo)準(zhǔn)品:純度≥95%,化合物中英文名稱及CAS號(hào)等信息參照附錄A。溶液配制磷酸鹽緩沖液(20mmol/L,pH=7.4)16.0g氯化鈉、0.4g氯化鉀、0.4g磷酸二氫鉀、5.8g1000mL1000mL。甲醇磷酸鹽(1+9)10mL90mL磷酸鹽緩沖液(4.2.3.1)中,混勻。標(biāo)準(zhǔn)溶液配制標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(1000mg/L)10mg(0.1mg),用甲醇溶解,10mL,避光-18°C12個(gè)月。標(biāo)準(zhǔn)中間液(100mg/L):準(zhǔn)確吸取一定量標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液(4.2.4.1),用甲醇稀釋,定容至10mL,避光-18°C及以下條件保存,有效期為1個(gè)月。10mL,0°C~5°C2~3周。材料腐霉利膠體金免疫層析試劑盒/檢測(cè)卡(條)。儀器和設(shè)備0.01g0.01mg。組織粉碎機(jī)。渦旋混合器。100μL、200μL、1mL5mL。離心機(jī):轉(zhuǎn)速≥4000r/min。分析步驟試樣制備韭菜樣品取樣部位按GB2763的規(guī)定執(zhí)行,將適量(約200g)待測(cè)樣品切碎混勻均一化制成勻漿,-18℃及以下條件保存。試樣提取2精確至0.1g于15L3L1+4..3.,渦旋振蕩1min,4000r/min室溫離心2min,取上清液即為待測(cè)液。測(cè)定步驟吸取120μL上述待測(cè)液于金標(biāo)微孔中,上下抽吸5~8次至微孔的顆粒完全溶解,室溫孵育3min~5min8min質(zhì)控試驗(yàn)每批試樣應(yīng)同時(shí)進(jìn)行空白試驗(yàn)和加標(biāo)質(zhì)控試驗(yàn)。4.4.24.4.3步驟與樣品同法操作。0.01g)15mL40μL腐霉利標(biāo)準(zhǔn)工作液(4.2.4.3)0.2mg/kg30min4.4.24.4.3步驟與樣品同法操作。結(jié)果判定目視比色法方法提要通過對(duì)比控制線(C線)和檢測(cè)線(T線)的顏色深淺進(jìn)行結(jié)果判定。目視結(jié)果示意圖見圖1。無效結(jié)果控制線(C線)不顯色,無論檢測(cè)線(T線)是否顯色,均表示實(shí)驗(yàn)結(jié)果無效。陽(yáng)性結(jié)果控制線(C線)顯色,若檢測(cè)線(T線)不顯色或顏色淺于控制線(C線)表示試樣中含有腐霉利,且其含量高于方法檢出限,判定為陽(yáng)性。陰性結(jié)果控制線(C線)顯色,若檢測(cè)線(T線)顏色深于或等于控制線(C線)表示試樣中不含腐霉利,或其含量低于方法檢出限,判定為陰性。圖1 目視法判定示意圖(目視法)目視消線法方法提要通過對(duì)比控制線(C線)和檢測(cè)線(T線)的顏色有無進(jìn)行結(jié)果表示。目視結(jié)果示意圖見圖2。無效結(jié)果控制線(C線)不顯色,無論檢測(cè)線(T線)是否顯色,均表示實(shí)驗(yàn)結(jié)果無效。陽(yáng)性結(jié)果(C線(T線陰性結(jié)果(C線(T線圖2 目視判定示意圖(消線法)質(zhì)控試驗(yàn)結(jié)果原理(T線532nm(T線)與控制線(C線)的溫度變化比較,對(duì)樣品中的待測(cè)組分進(jìn)行定性判定。試劑與材料同5。儀器和設(shè)備光熱讀卡儀。4.3。分析步驟試樣制備同4.4.1。試樣提取同4.4.2。測(cè)定步驟吸取120μL上述待測(cè)液于金標(biāo)微孔中,上下抽吸5~8次至微孔的顆粒完全溶解,室溫孵育3min~5min,將試紙條插入金標(biāo)微孔中反應(yīng)8min,從微孔中取出試紙條,去掉試紙條下端樣品墊,將試紙條置入光熱讀卡儀,將檢測(cè)線(T線)與控制線(C線)置于532nm激光下照射50s,測(cè)定檢測(cè)線(T線)與控制線(C線)的溫度變化值。質(zhì)控試驗(yàn)同4.4.4。結(jié)果的表述計(jì)算結(jié)果計(jì)算見式(1)。

?=Δ??Δ? (1)式中:ΔT——T線在激光照射前后溫度的變化值;ΔC——C線在激光照射前后溫度的變化值。結(jié)果判定當(dāng)T值為小于0T值大于0質(zhì)控試驗(yàn)結(jié)果性能指標(biāo)檢出限為0.2mg/kg。靈敏度應(yīng)不小于95%。特異性應(yīng)不小于95%。假陰性率應(yīng)不大于5。假陽(yáng)性率應(yīng)不大于5。其它當(dāng)檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性時(shí),應(yīng)使用GB2763規(guī)定方法對(duì)結(jié)果進(jìn)行確認(rèn)。本方法為使用者提供快速檢測(cè)依據(jù),使用者在使用生產(chǎn)廠家提供的配套試劑、材料和分析步驟時(shí),應(yīng)對(duì)其進(jìn)行驗(yàn)證,滿足本方法規(guī)定的各項(xiàng)性能指標(biāo)。附 錄 A(資料性)腐霉利中英文名稱、CAS號(hào)及分子式信息腐霉利中英文名稱、CAS號(hào)及分子式信息見表A.1。表A.1腐霉利中英文名稱、CAS號(hào)及分子式信息農(nóng)藥中文名稱農(nóng)藥英文名稱CAS號(hào)分子式腐霉利Procymidone32809-16-8C13H11Cl2NO2附 錄 B(資料性)快速檢測(cè)方法性能指標(biāo)計(jì)算方法快速檢測(cè)方法性能指標(biāo)計(jì)算方法表B.1。表B.1快速檢測(cè)方法性能指標(biāo)計(jì)算方法樣品情況a,b檢測(cè)結(jié)果c總數(shù)陽(yáng)性陰性陽(yáng)性N11N12N1.=N11+N12陰性N21N22N2.=N21+N22總數(shù)N.1=N11+N12N.2=N21+N22N=N1.+N2.或N.1+N.2顯著性差異(2)=(-1-)/(1,自由度(df)=1靈敏度(p+,%)p+=N11/N1.特異性(p-,%)p-=N22/N2.假陰性率(pf-,%)pf-=N12/N1.=100-靈敏度假陽(yáng)性率(pf

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