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文檔簡介
抗壞血酸(維生素C)的測定維生素C(vitaminC)又稱為抗壞血酸,一般水果、蔬菜中維生素C的含量均較高,不同的水果、蔬菜品種,以及同一品種在不同栽培條件、不同成熟度等情況下,其維生素C的含量都有所不同。測定維生素C含量,可以作為果蔬品質(zhì)指標(biāo)之一。滴定法一、原理維生素C二氯酚靛酚2,6-二氯酚靛酚溶液滴定含有抗壞血酸的草酸溶液時,其中的抗壞血酸可以將2,6-2,6-二2,6-二氯酚靛酚溶液的量,可以計算出被測樣品中抗壞血酸的含量二、材料、設(shè)備及試劑(一)材料:水果或蔬菜(二)設(shè)備:1.蒸發(fā)皿;2.研缽一套;3.移液管;4.漏斗;5.濾紙;6.容量瓶;7.微量滴定管。(三)試劑:2%草酸。CHCH將6 4 6 2含有的熱水中,冷卻后,稀釋至250ml,裝入棕色瓶內(nèi),放在冰箱里保存(因該染料性質(zhì)不穩(wěn)定,配制后超過一周必須重新配制。3.0.1mg/ml標(biāo)準(zhǔn)抗壞血酸溶液將50mg純抗壞血酸溶于少量2%草酸溶液中,然后用2%草500ml(使用前臨時配置。三、實驗步驟(一)稱取水果和蔬菜樣品10g,放在研缽中加入2%草酸溶液約5ml研碎。通過漏斗將研100ml22%草酸定容到刻度,過濾,濾液備用。(二)空白滴定取10ml30s內(nèi)不褪色為終點,耗用的染色體積作為空白。(三)10ml30S1mlmg數(shù)(3次,取平均值。(四10ml30S內(nèi)不褪色為止,記下染料的用量(次,取平均值。四、計算V)A V樣品的維生素C含量1 0
T100W VS式中:V1—滴定樣品所用染料ml數(shù);V0—滴定空白所用染料ml數(shù);A——滴定度,1ml染料溶液相當(dāng)?shù)目箟难岬膍g數(shù);W—樣品的g數(shù);VT—樣品溶液定容后的總體積ml數(shù);VS—滴定時吸取樣品溶液的ml數(shù)。比色法常規(guī)測定抗壞血酸的方法采用2,6高,當(dāng)用酸提取時呈紅色,因而無法滴定。本實驗采用二甲苯萃取比色法原理向一定量提取液中加入過量的C性的花青素不溶于二甲苯,因而不影響測定結(jié)果。二、材料、儀器設(shè)備及試劑(一)材料新鮮包菜葉片、白蘿卜等。(二)儀器設(shè)備1.722型分光光度計2.容量瓶3缽體4不銹鋼5具塞大試管(三)試劑2.2%草酸30%硫酸鋅4.15%100mg2,682mg60ml100ml4倍,此溶液每ml0.1mg的維生素??箟难針?biāo)準(zhǔn)溶液精確稱取100mg分析純100ml抗壞血酸,溶于1%草酸,定容至100ml,再從中吸取5ml,用1%草酸再稀釋至100ml(標(biāo)準(zhǔn)溶液在使用前臨時配置)。二甲苯分析純(本法使用多的二甲苯可用20%NAOH中和后,蒸餾回收。三、實驗步驟1.標(biāo)準(zhǔn)曲線取具塞大試管62.5ml、3ml1%0mg0.05mg0.10mg、0.125mg0.15mg0.20mg。各管中加入染料溶液2ml,1cm比色杯中,在500nmmg數(shù)與相應(yīng)的吸光度值的回應(yīng)方程。樣品提取取新鮮蔬洗干凈,擦干,在玻璃上用不銹鋼刀切碎混勻。稱取2g樣品100ml1%的草酸沖洗,洗液一并倒至容量瓶中,加入1ml30%硫酸鋅,搖動容量瓶,再加入1ml15%亞鐵氰化鉀,以除去脂溶性色素,再用測定取上述提取液4ml(4ml的可用1%4ml)5ml,按照標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法測定吸光度四結(jié)果計算根據(jù)測定液的吸光度值,按回歸方程計算出抗壞血酸的mg數(shù),然后按下式計算樣品中的抗壞血酸的含量,以每克鮮樣含抗壞血酸mg數(shù)(mg/100g)表示。XV每克鮮樣的
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