有機(jī)酸需修改

三、功效：

鴉膽子油酸抗癌作用地龍丁二酸止咳平喘四季青原兒茶酸抑菌成分丹參乳酸擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈巴豆巴豆酸、巴豆油酸致瀉

此外還有檸檬酸、蘋(píng)果酸、酒石酸、琥珀酸等。第四章有機(jī)酸一、定義：有機(jī)酸（不包括氨基酸）：只分子中具有羧基的一類(lèi)酸性化合物，通式為：R—COOH。二、分布：植物界的各個(gè)部位，但以游離形式存在的不多，而多數(shù)是與鋰、鈉、鈣等金屬陽(yáng)離子或生物堿結(jié)合成鹽而存在，或與醇類(lèi)、氨基酸結(jié)合成脂類(lèi)、酰胺類(lèi)成分而存在。四、結(jié)構(gòu)與分類(lèi)常見(jiàn)的有機(jī)酸可分為兩類(lèi)：1、脂肪族有機(jī)酸包括飽和與不飽和脂肪酸，一元及多元酸，如：琥珀酸（丁二酸）烏頭酸奎寧酸CH2COOHCH2COOHCH2COOHC-COOHCH-COOHCOOHOHOHOHHO(CH2)12

COOHCCOOHCH3CH3CH大風(fēng)子油酸當(dāng)歸酸2、脂肪族有機(jī)酸是桂皮酸的衍生物CHR2R3R1COOHCHCOOHR1R2R3OHOHHOHOHHOCH3OHHOHOCH3HOCH3OHOCH3

R2R3R1桂皮酸咖啡酸阿魏酸異阿魏酸芥子酸R1R2R3HHHOHOHOHOHOHHOCH3OHHOCH3OHH苯甲酸沒(méi)食子酸原兒茶酸香草酸丁香酸1、一般性質(zhì)（1）形狀含8個(gè)碳原子以下的低級(jí)脂肪酸和不飽和脂肪酸常溫下多為液體，較高級(jí)的脂肪酸、多元醇和芳香酸則為固體。（2）溶解性一般有機(jī)酸能溶解于乙醇和乙醚等有機(jī)溶劑，在水中的溶解度隨分子中極性基團(tuán)的增加而增大，如多元酸比一元酸易溶于水；含羥基數(shù)目多的水溶性大（沒(méi)食子酸），而芳香酸（大分子）則較難溶于水。（有的有機(jī)酸有揮發(fā)性就利用水蒸氣蒸餾法來(lái)提?。海?）酸性有機(jī)酸顯酸性，能與金屬堿、堿土金屬、生物堿結(jié)合成鹽，其一價(jià)金屬鹽易溶于水，不溶于極性較小的有機(jī)溶劑，二價(jià)、三價(jià)金屬鹽較難溶于水，如鉛鹽、鈣鹽常利用此性質(zhì)從中藥中提取分離有機(jī)酸。2、檢識(shí)方法（1）PH試紙實(shí)驗(yàn)呈酸性反應(yīng)（橙黃——紅）（2）溴酚蘭實(shí)驗(yàn)將有機(jī)酸提取液滴于濾紙上，再滴加0.1%溴酚蘭試劑，在蘭色背景上顯蘭色斑點(diǎn)。五、性質(zhì)與檢識(shí)六、提取與分離1、提取藥料水1%NaHCO3提取液藥渣加酸酸化，乙醚萃取酸水層有機(jī)酸鹽游離有機(jī)酸醚層水溶性雜質(zhì)揮干乙醚有機(jī)酸粗品（1）水或堿水提取法藥粉少量稀鹽酸浸潤(rùn)后的藥粉游離的有機(jī)酸乙酸乙脂，連續(xù)回流提取藥渣乙酸乙脂液稀氫氧化鈉，萃取氫氧化鈉層乙酸乙脂層鹽酸酸化，乙酸乙脂萃取酸水層乙酸乙脂層大多數(shù)游離有機(jī)酸易溶于有機(jī)溶劑而難溶于水，有機(jī)酸鹽則易溶于水而難溶于有機(jī)溶劑，而多數(shù)有機(jī)酸在植物體內(nèi)是以鹽的形式存在的。（2）、有機(jī)溶劑提取法（3）鉛鹽、鈣鹽沉淀法醇水提液1法飽和醋酸鉛2法石灰乳有機(jī)酸鉛鹽沉淀有機(jī)酸鈣鹽沉淀H2S脫鉛有機(jī)酸H2SO4脫鈣有機(jī)酸（4）離子交換法R+R+R+R+R+R+OH-OH-OH-OH-OH-OH-Na+R—COO-Na+Na+Na+R—COO-R—COO-R—COO-R—COO-Na+Na+Na+２、分離上述溶液可得總有機(jī)酸，有機(jī)酸單體的分離常用結(jié)晶法，色譜法。

沉淀濾液CaSO440%NAOH中和至PH6.5-7.0過(guò)濾濾液乙酸乙脂萃取

乙酸乙脂液回收溶劑放冷、結(jié)晶、過(guò)濾藥粉水煮提兩次（1小時(shí)一次）水提液濃縮后，用石灰乳調(diào)成強(qiáng)堿性（PH=12）過(guò)濾沉淀濾液有機(jī)酸鈣鹽

水溶性雜質(zhì)懸浮于酒精，加入50%H2SO4至PH3-4過(guò)濾脫鉛沉淀濾液40%NaOH中和至PH6.5-7.0過(guò)濾濾液正丁醇萃取正丁醇液堿水液回收溶劑放冷、結(jié)晶、過(guò)濾結(jié)晶（綠原酸加異綠原酸）實(shí)例：二氫黃酮、二氫黃酮醇類(lèi)

二氫黃酮類(lèi)可看作是黃酮類(lèi)C2和C3被氫化成單鍵的一類(lèi)化合物，此類(lèi)化合物并非黃色而是白色。如中藥甘草中的甘草苷和甘草苷元（甘草素），中藥陳皮中的橙皮苷。

二氫黃酮醇類(lèi)指3位有OH的二氫黃酮類(lèi)，也可看作是黃酮醇類(lèi)的C2和C3鍵被還原為單鍵的一類(lèi)成分。此類(lèi)成分常用相應(yīng)的黃酮醇共存。如黃柏葉中的黃柏素－7－0－葡萄糖苷。滿山紅葉中的二氫槲皮素和槲皮素共存。異黃酮、二氫異黃酮和高異黃酮類(lèi)

異黃酮類(lèi)為具有3－苯基色原酮基本骨架的化合物，葛根中的葛根素、大豆苷及大豆苷元、多種豆科植物中的染料木素（金雀異黃素）為此類(lèi)成分。具有多種作用。

二氫異黃酮類(lèi)可看作是黃酮類(lèi)C2和C3雙鍵被還原成單鍵的一類(lèi)化合物。

高異黃酮類(lèi)母核比異黃酮母核C環(huán)與B環(huán)間多一個(gè)CH2，中藥麥冬中存在一系列此類(lèi)成分［麥冬高異黃酮A］。查耳酮和二氫查耳酮類(lèi)

此類(lèi)成分可認(rèn)為是苯甲醛縮苯乙酮，也可看作是二氫黃酮類(lèi)C環(huán)開(kāi)環(huán)的產(chǎn)物。

[二氫黃酮與查耳酮的互變]。

中藥紅花中的紅花苷為查耳酮類(lèi)。紅花在開(kāi)花初期時(shí)，花中主要成分為無(wú)色的新紅花苷（二氫黃酮類(lèi)）及微量紅花苷，故花冠是淡黃色；開(kāi)花中期花中主要成分為黃色的紅花苷，故花冠為深黃色；開(kāi)花后期則變成紅色的醌式紅花苷，故花冠為紅色。

[反應(yīng)式]黃烷醇類(lèi)

此類(lèi)中又分黃烷－3－醇與黃烷－3、4－二醇衍生物，此類(lèi)成分碳4位不是C＝O，C2與C3鍵為單鍵，中藥兒茶的兒茶素為黃烷－3－醇衍生物?；ㄉ仡?lèi)

花色素類(lèi)成分的碳4位無(wú)C＝O，而C環(huán)結(jié)構(gòu)與黃烷醇類(lèi)不同，以矢車(chē)菊素及其苷等為常見(jiàn)雙黃酮類(lèi)

雙黃酮是由二分子黃酮衍生物聚合而成的二聚物，常見(jiàn)的是由二分子芹菜素（或其甲醚衍生物）構(gòu)成。聚合方式有三種類(lèi)型：

1.3′，8"-雙芹菜素型，如銀杏葉中的銀杏素等。

2.8，8"－雙芹菜素型，如柏黃酮。

3.雙苯醚型：如扁柏黃酮。酮類(lèi)

酮類(lèi)，又稱(chēng)為苯駢色酮類(lèi)，即色原酮的2、3位駢合－苯環(huán)的衍生物，如中藥石韋中的異芒果素。呋喃色原酮類(lèi)和苯色原酮類(lèi)

呋喃色原酮類(lèi)和苯色原酮類(lèi)，此二類(lèi)較少見(jiàn)。呋喃色原酮類(lèi)是指色原酮母核6、7位駢合－呋喃環(huán)的一類(lèi)成分，如自傘形科植物中得到的凱林（Khellin）。[凱林]

苯色原酮類(lèi)為色原酮的6、7位駢合－苯環(huán)的衍生物，如中藥決明子中含有的紅鐮霉素等。［紅鐮霉素］··黃酮類(lèi)化合物的性狀★★★

·酸堿性★★★

·溶解性★★★

·顯色反應(yīng)★★★

1.還原反應(yīng)

2.與金屬鹽類(lèi)試劑的絡(luò)合反應(yīng)

3.與堿的反應(yīng)

4.與五氯化銻的反應(yīng)

5.Gibbs反應(yīng)黃酮類(lèi)化合物的理化性質(zhì)·黃酮類(lèi)化合物的性狀★★★

·形態(tài)

黃酮類(lèi)化合物多為結(jié)晶性固體，少數(shù)（如黃酮苷類(lèi)）為無(wú)定形粉末。

·顏色

一般說(shuō)來(lái)，黃酮、黃酮醇及其苷類(lèi)多呈灰黃色至黃色，查耳酮為黃至橙黃色，而二氫黃酮、二氫黃酮醇、異黃酮類(lèi)，因在分子結(jié)構(gòu)中不存在交叉共軛體系，故不呈黃色，幾乎為無(wú)色。如在黃酮、黃酮醇分子中，尤其在7-位或4′-位引入—OH及—OCH3等供電子基后，產(chǎn)生ρ-π共軛，促進(jìn)電子重排，使共軛系統(tǒng)延長(zhǎng)，化合物顏色加深。但—OH、—OCH3引入分子結(jié)構(gòu)中其他位置，則對(duì)顏色影響較小。

[黃酮、黃酮醇分子的結(jié)構(gòu)互變]如果C2、C3間的雙鍵被氫化，則交叉共軛體系和加合關(guān)系中斷，故二氫黃酮和二氫黃酮醇幾乎無(wú)色。異黃酮共軛很少，僅顯微黃色。

花色素所顯的顏色，隨pH不同而改變，一般pH<7顯紅色，pH8.5顯紫色，pH>8.5顯藍(lán)色，pH不同可能促進(jìn)結(jié)構(gòu)產(chǎn)生可逆變化。

·旋光性

二氫黃酮、二氫黃酮醇、黃烷醇、二氫異黃酮及其衍生物、紫檀素、魚(yú)藤酮由于分子內(nèi)含有不對(duì)稱(chēng)碳原子，因此具有旋光性。其余黃酮苷元，無(wú)旋光性。黃酮苷類(lèi)由于在結(jié)構(gòu)中引入了糖的分子，故均有旋光性，且多為左旋?！に釅A性★★

黃酮類(lèi)化合物因分子中具有酚羥基，故顯酸性，可溶于堿性水溶液、吡啶中。其酸性強(qiáng)弱與酚羥基數(shù)目的多少和位置有關(guān)。例如黃酮的酚羥基酸性由強(qiáng)到弱順序是：

7，4′-=OH＞7-或4′-OH＞一般酚羥基>5-OH

7-和4′-位有酚羥基者，在ρ-π共軛效應(yīng)的影響下，使酸性增強(qiáng)而溶于碳酸氫鈉水溶液。7-或4′-位上有酚羥基者，只溶于碳酸鈉水溶液，不溶于碳酸氫鈉水溶液。具有一般酚羥基者只溶于氫氧化鈉水溶液。僅有5-位酚羥基者，因可與C4=O形成分子內(nèi)氫鍵，故酸性最弱，因此，可用pH梯度法來(lái)分離黃酮類(lèi)化合物。

黃酮類(lèi)化合物分子中γ-吡喃酮環(huán)上的1-位氧原子，因有未共用電子對(duì)，故表現(xiàn)出微弱的堿性（全甲基化的多羥基黃酮類(lèi)化合物堿性較強(qiáng)），可與強(qiáng)無(wú)機(jī)酸，如濃硫酸、鹽酸等生成鹽，該鹽極不穩(wěn)定，加水后即分解。[反應(yīng)式]

黃酮類(lèi)化合物溶于濃硫酸中生成的鹽，常常表現(xiàn)出特殊的顏色，可用于鑒別被試成分所屬的類(lèi)型。[舉例說(shuō)明]·溶解性★★

黃酮類(lèi)化合物的溶解度因結(jié)構(gòu)不同而有很大差異。

1.一般黃酮苷元難溶或不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、氯仿、乙醚等有機(jī)溶劑及稀堿液中。其中黃酮、黃酮醇、查耳酮等為平面型分子，因堆砌緊密，分子間引力較大，故難溶于水。而二氫黃酮及二氫黃酮醇等，因系非平面型分子[如圖]，故排列不緊密，分子間引力降低，有利于水分子進(jìn)入，因而在水中溶解度稍大。

異黃酮類(lèi)化合物親水性比平面性分子增加。花色素類(lèi)親水性較強(qiáng)，雖然它們也屬于平面型結(jié)構(gòu)，但因以離子形式存在，具有鹽的通性，故水溶性較大。

2.黃酮類(lèi)化合物多是多羥基化合物，一般不溶于石油醚中，故可與親脂性雜質(zhì)分開(kāi)。

3.黃酮類(lèi)化合物的羥基被糖苷化后，水溶性增加，脂溶性降低，一般易溶于熱水、甲醇、乙醇、吡啶及稀堿溶液中，而難溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚等有機(jī)溶劑中。

苷分子中糖基的數(shù)目多少和結(jié)合的位置，對(duì)溶解度亦有一定的影響。一般多糖苷比單糖苷水溶性大；3-羥基苷比相應(yīng)的7-羥基苷水溶性大。[舉例說(shuō)明]·還原反應(yīng)

1.鹽酸－鎂粉反應(yīng)一般黃酮、黃酮醇、二氫黃酮、二氫黃酮醇類(lèi)成分在乙醇或甲醇溶液中可被還原成紅色至紫紅色，個(gè)別的顯藍(lán)或綠色（如7、3′、4′－三OH二氫黃酮）。而異黃酮不顯色。此反應(yīng)可用于鑒識(shí)黃酮類(lèi)化合物，也可鑒識(shí)某提取物或提取液中是否含有上述黃酮類(lèi)成分。[具體做法]

2.四氫硼鈉（鉀）反應(yīng)此反應(yīng)是二氫黃酮的專(zhuān)屬性反應(yīng)，生成紅－紫紅色，而其它類(lèi)不顯色，故可用于鑒別。也可以說(shuō)如一化合物與四氫硼鈉試劑反應(yīng)生成紅－紫紅色，則說(shuō)明該化合物極可能是二氫黃酮類(lèi)化合物。

3.鈉汞齊還原反應(yīng)向黃酮類(lèi)化合物的乙醇溶液中加入鈉汞齊，放置數(shù)分鐘至數(shù)小時(shí)或加熱，過(guò)濾，濾液用鹽酸酸化，則黃酮、二氫黃酮、異黃酮、二氫異黃酮類(lèi)顯紅色，黃酮醇類(lèi)顯黃色至淡紅色，二氫黃酮醇類(lèi)顯棕黃色?！づc金屬鹽類(lèi)試劑的絡(luò)合反應(yīng)

如黃酮類(lèi)成分是有3-OH、C4=O、或5－OH、C4＝O或鄰二酚羥基，則可與某些金屬鹽類(lèi)試劑如鋁鹽（常用三氯化鋁）、鋯鹽（二氯氧鋯）、鎂鹽（醋酸鎂）等反應(yīng)生成有色絡(luò)合物，可用于鑒別。

1.鋯鹽－枸櫞酸反應(yīng)可以用來(lái)區(qū)別黃酮類(lèi)化合物分子中3－OH或5－OH的存在，加2%二氯氧鋯(ZrOCl)的甲醇溶液到樣品的甲醇溶液中，若出現(xiàn)黃色，說(shuō)明有3-OH或5-OH與鋯鹽生成絡(luò)合物，再加入2%的枸櫞酸的甲醇溶液，黃色不退，示有3-OH，如果黃色減退，加水稀釋后轉(zhuǎn)為無(wú)色，示無(wú)3-OH，但有5-OH，因?yàn)?-羥基、4-羰基與鋯鹽生成的絡(luò)合物穩(wěn)定性沒(méi)有3-羥基、4-羰基鋯絡(luò)合物穩(wěn)定，容易被弱酸分解。

鋯鹽顯色反應(yīng)也可在濾紙上進(jìn)行，得到的鋯鹽絡(luò)合物斑點(diǎn)多呈黃綠色并有熒光。

2.醋酸鎂反應(yīng)二氫黃酮、二氫黃酮醇可顯天藍(lán)色熒光，而其它黃酮?jiǎng)t顯其它色，故可用于鑒別。

3.三氯化鋁反應(yīng)具有上述結(jié)構(gòu)的黃酮與三氯化鋁或硝酸鋁生成的鉻合物多為黃色或使原來(lái)黃色加深，并有黃或黃綠色熒光，可用于鑒別與定量分析。

4.氨性氯化鍶反應(yīng)此反應(yīng)不是所有黃酮類(lèi)化合物的反應(yīng)，而是具有鄰二酚羥基黃酮的反應(yīng)，也可以說(shuō)某黃酮類(lèi)化合物與氨性氯化鍶反應(yīng)為陽(yáng)性，即生成綠至棕色乃至黑色沉淀，說(shuō)明該化合物具有鄰二酚羥基。在結(jié)構(gòu)鑒定中有意義。

5.三氯化鐵反應(yīng)當(dāng)黃酮含有氫鍵締合的羥基時(shí)可呈明顯的顏色反應(yīng)，生成黃綠等色。因很多中藥含黃酮類(lèi)或鞣質(zhì)等成分，所以不能用鐵鍋煎中藥?！づc堿的反應(yīng)

黃酮類(lèi)化合物溶于堿性溶液中生成黃色、橙色或紅色等。二氫黃酮在堿性下可開(kāi)環(huán)生成查耳酮類(lèi)而顯黃色或橙黃色。很多黃酮類(lèi)在堿性條件下不穩(wěn)定，當(dāng)放置時(shí)間較長(zhǎng)或加熱一定時(shí)間時(shí)氧化甚至發(fā)生裂解反應(yīng)。·與五氯化銻的反應(yīng)

這是查耳酮類(lèi)特有的反應(yīng)而與其它黃酮類(lèi)有別，查耳酮類(lèi)在無(wú)水四氯化碳溶液中與五氯化銻作用生成紅或紫紅色沉淀?！ibbs反應(yīng)

是5－OH對(duì)位未被取代的黃酮類(lèi)化合物的鑒別反應(yīng)。將樣品溶于吡啶中，加入Gibbs試劑即顯藍(lán)或藍(lán)綠色?！S酮類(lèi)成分的提取和分離

·提取方法★★★

1.乙醇或甲醇提取2.熱水提取法

3.堿性水或堿性稀醇提取4.系統(tǒng)溶劑提取法

·分離方法★★★

1.溶劑萃取法2.聚酰胺吸附法

3.鉛鹽法4.硼酸鉻合法

5.pH梯度萃取法6.大孔樹(shù)脂法

7.柱色譜法及液滴逆流色譜法·提取方法★★

黃酮類(lèi)化合物的提取，主要是根據(jù)被提取物的性質(zhì)及伴存的雜質(zhì)來(lái)選擇適合的提取溶劑，苷類(lèi)和極性較大的苷元，一般可用乙酸乙酯、丙酮、乙醇、甲醇、水或某些極性較大的混合溶劑[例如甲醇-水（1:1）]進(jìn)行提取。大多的苷元宜用極性較小的溶劑，如乙醚、氯仿、乙酸乙酯等來(lái)提取，多甲氧基黃酮類(lèi)苷元，甚至可用苯來(lái)提取?！ぬ崛》椒ā铩?/p>

黃酮類(lèi)化合物的提取，主要是根據(jù)被提取物的性質(zhì)及伴存的雜質(zhì)來(lái)選擇適合的提取溶劑，苷類(lèi)和極性較大的苷元，一般可用乙酸乙酯、丙酮、乙醇、甲醇、水或某些極性較大的混合溶劑[例如甲醇-水（1:1）]進(jìn)行提取。大多的苷元宜用極性較小的溶劑，如乙醚、氯仿、乙酸乙酯等來(lái)提取，多甲氧基黃酮類(lèi)苷元，甚至可用苯來(lái)提取。·熱水提取法

熱水僅限于提取苷類(lèi)，例如自槐花米中提取蘆丁。由于熱水提取出的雜質(zhì)較多，故不常使用。·堿性水或堿性稀醇提取

由于黃酮類(lèi)成分大多具有酚羥基，因此可用堿性水或堿性稀醇（如50％的乙醇）浸出，浸出液經(jīng)酸化后可析出黃酮類(lèi)化合物。稀氫氧化鈉水溶液浸出能力較大，但浸出雜質(zhì)較多，如將其浸出液酸化，迅速濾去（如在半小時(shí)內(nèi)濾去）先析出沉淀物（多半是雜質(zhì)），濾液中再析出的沉淀物可能是較純的黃酮類(lèi)化合物。[石灰水的優(yōu)點(diǎn)][石灰水的缺點(diǎn)]5％氫氧化鈉稀乙醇液浸出效果好，但浸出液酸化后，析出的黃酮類(lèi)化合物在稀醇中有一定的溶解度，降低了產(chǎn)品收得率。用堿性溶劑提取時(shí)，所用的堿濃度不宜過(guò)高，以免在強(qiáng)堿下加熱時(shí)破壞黃酮類(lèi)化合物母核。當(dāng)有鄰二酚羥基時(shí)，可加硼酸保護(hù)。系統(tǒng)溶劑提取法

用極性由小到大的溶劑依次提取。例如先用石油醚或己烷脫脂，然后用苯提取多甲氧基黃酮或含異戊烯基、甲基的黃酮。氯仿、乙醚、乙酸乙酯可以提取出大多數(shù)游離的黃酮類(lèi)化合物。丙酮、乙醇、甲醇、甲醇－水（1：1）可以提取出多羥基黃酮、雙黃酮、查耳酮、噢哢類(lèi)化合物。稀醇、沸水可以提取出苷類(lèi)，1％HCl可以提取出花色素類(lèi)等?！と軇┹腿》?/p>

此法是初步分離方法，主要將苷元、苷進(jìn)行分離。較常用的操作是乙醇提取物中加適量水后，依次用石油醚、乙醚、乙酸乙酯、水飽和正丁醇萃取，石油醚中可能無(wú)黃酮或僅有多甲氧基黃酮，乙醚中為部分游離黃酮，乙酸乙酯中可能有多羥基黃酮及黃酮單糖苷，正丁醇中有二個(gè)糖以上的黃酮苷?！ぞ埘０肺椒?/p>

黃酮類(lèi)化合物大多具有酚羥基，可被聚酰胺吸附，而與不含酚羥基的成分分離。

中藥粗粉

│

↓70％～80％乙醇提取

乙醇提取液

│

│減壓回收乙醇，放置

┌──────────┴──────────┐

↓↓

不溶物溶液

（樹(shù)脂等親脂雜質(zhì)。│通過(guò)聚酰胺柱，依次用水、

可能有游離黃酮類(lèi)化合物）│95％乙醇洗脫

┌──────┴──────┐

↓↓

95％乙醇洗脫液水洗脫液

│（糖類(lèi)等親水性雜質(zhì)）

↓減壓回收乙醇至干

總黃酮

不溶物中如含有游離黃酮類(lèi)化合物，可用下述方法處理：①利用堿溶解酸沉淀法。②以石油醚冷洗，除去親脂性雜質(zhì)，再用苯等有機(jī)溶劑溶解，通過(guò)硅膠柱除去極性大的雜質(zhì)，柱體用苯洗脫，所得苯液減壓濃縮，即得游離的黃酮類(lèi)化合物?！ゃU鹽法

此法過(guò)去曾用于研究，目前已很少采用。一般是在乙醇或甲醇溶液中依次加入適量中性醋酸鉛、堿式醋酸鉛水液，分別使具有鄰二酚羥基成分（包括黃酮）及含羥基成分，具有一般酚羥基的成分分離，再分別將鉛鹽沉淀懸浮于醇中，脫鉛后得到成分?！づ鹚徙t合法

有鄰二酚羥基的黃酮類(lèi)化合物可與硼酸絡(luò)合，生成物易溶于水，借此可與無(wú)鄰二酚羥基的黃酮類(lèi)化合物相互分離?！H梯度萃取法

pH梯度萃取法適合于酸性強(qiáng)弱不同的游離的黃酮類(lèi)化合物的分離，將混合物溶于有機(jī)溶劑（如乙醚）中，依次用5％NaHCO3（萃取出7，4′－二羥基黃酮）、5％Na2CO3（萃取出7－或4′－羥基黃酮）、0.2％NaOH（萃取出具一般酚羥基黃酮）、4％NaOH（萃取出5－羥基黃酮）萃取而使之分離。

大孔樹(shù)脂法

此法可用于總黃酮的純化，如將水溶液通過(guò)大孔樹(shù)脂柱，先用水洗，再用不同濃度的乙醇分別洗脫，在某種濃度的乙醇洗脫液中含有黃酮類(lèi)。如將銀杏葉提取液通過(guò)一種大孔樹(shù)脂，用水洗，再用25％乙醇洗脫、70％乙醇洗脫，在70％乙醇洗脫液中有銀杏總黃酮?！ぶV法及液滴逆流色譜法

包括硅膠、聚酰胺、葡聚糖凝膠（SephadexLH-20）、C18填料、氧化鋁等。其中氧化鋁極少用。柱色譜法是分離單體的有效方法，根據(jù)填料粒度，可采用常壓色譜、低壓、中壓色譜以及高效（高壓）液相色譜法。

液滴逆流色譜法（DCCC）一般多用于苷等極性成分分離?！S酮類(lèi)化合物的色譜檢識(shí)

·紙色譜法

·薄層色譜法★★

·高效液相色譜法★

·紙色譜法

紙色譜適合分離檢識(shí)各種類(lèi)型黃酮類(lèi)化合物，包括苷和苷元。雙向紙色譜能檢識(shí)植物粗提物中黃酮類(lèi)化合物存在的最好方法之一。用雙向紙色譜分離檢識(shí)黃酮類(lèi)化合物時(shí)，第一向通常用一種“醇性”展開(kāi)劑，第二如t-BuOH─HOAc─HO(3:1:1)等；向通常用一種“水性”展開(kāi)劑，如2％～5％HOAc等。

檢識(shí)黃酮類(lèi)化合物苷元，通常用“醇性”展開(kāi)劑。檢識(shí)苷往往用“水性”展開(kāi)劑?！け由V法

薄層色譜法仍然是分離和檢出植物粗提物中黃酮類(lèi)化合物的重要方法之一。一般采用吸附薄層，吸附劑大多用硅膠和聚酰胺。

硅膠薄層主要用于分離大多數(shù)苷元，也可用于分離苷。[分離苷元常用的展開(kāi)劑]

[分離黃酮O－苷、黃酮C－苷和黃酮醇O－苷類(lèi)的溶劑系統(tǒng)]

聚酰胺薄層色譜用于分離含游離酚羥基的苷與苷元較好。由于聚酰胺對(duì)黃酮類(lèi)化合物吸附能力較強(qiáng)，因此，展開(kāi)劑需要較強(qiáng)的極性。在展開(kāi)劑中大多含有醇、酸或水，或兼有兩者。[分離苷元常用的展開(kāi)劑]

纖維素薄層色譜分離黃酮苷元的溶劑系統(tǒng)有苯－乙酸－水（125：72：3）或氯仿－乙酸－水（10：9：1）。經(jīng)典的溶劑系統(tǒng)即5％～40％乙酸、正丁醇－乙酸－水（4：1：5）等亦經(jīng)常用于分離黃酮類(lèi)化合物?！じ咝б合嗌V法

黃酮類(lèi)成分的色譜條件可分為正相色譜和反相色譜二類(lèi)，正相色譜采用硅膠為固定相，親脂性溶劑為流動(dòng)相，主要檢識(shí)親脂性較強(qiáng)的黃酮。也可采用氰基鍵合擔(dān)體為固定相。反相色譜多用C18鍵合柱為擔(dān)體，流動(dòng)相常用甲醇－水或乙腈－水，或甲醇－乙腈－水，有時(shí)以一定pH的酸水或緩沖溶液代替水加入?！せ被?/p>

·黃芩

·葛根

·銀杏葉

·槐花米

槐花米簡(jiǎn)稱(chēng)槐米，所含主要成分為蘆丁，又稱(chēng)為蕓香苷，即槲皮素3-O-蕓香糖苷，槲皮素為5，7，3′，4′-四OH黃酮。[蘆丁]★★★

蘆丁溶解度在冷水中1:10000，沸水中1:200，沸乙醇中1:60，沸甲醇中1:7，可溶于乙醇、吡啶、甲酰胺、甘油、丙酮、冰乙酸、乙酸乙酯中，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚。

蘆丁分子中具有較多酚羥基，顯弱酸性，易溶于堿液中，酸化后又析出，因此可以用堿溶酸沉的方法提取蘆丁。

蘆丁分子中因含有鄰二酚羥基，性質(zhì)不太穩(wěn)定；暴露在空氣中能緩緩氧化變?yōu)榘岛稚趬A性條件下更容易被氧化分解。硼酸鹽能與鄰二酚羥基結(jié)合，達(dá)到保護(hù)的目的，故在堿性溶液中加熱提取蘆丁時(shí)，往往加入少量硼砂。有7-OH、4′-OH，酸性強(qiáng)，可用于提取。蘆丁可溶于沸水（1：200），微溶于冷水（1：10000）此性質(zhì)可用于提取與精制。

蘆丁的提取方法★★★，[如圖]此法簡(jiǎn)稱(chēng)堿提酸沉法，可用于生產(chǎn)。需注意的是堿提時(shí)，堿性一定不可太強(qiáng)（pH8～9），如pH太高，則結(jié)構(gòu)有可能降解，而使收率降低，甚至結(jié)構(gòu)完全破壞。

蘆丁的另一種提取方法★★★是沸水提取法，即取槐米粗粉加10倍熱水煮沸20～30分鐘，過(guò)濾，再加水煮1～2次，合并幾次煮提液，冷卻放置數(shù)小時(shí)后即可析出蘆丁粗品，過(guò)濾，用水重結(jié)晶一次，可得水精制品蘆丁，再用甲醇重結(jié)晶一次，可得純度更高的蘆丁?！S芩

黃芩中含多種黃酮類(lèi)成分，含量最高的為黃芩苷，苷元為黃芩素（5，6，7-三OH黃酮），黃芩苷是5，6二OH，7-O-葡萄糖醛酸黃酮苷，除有遇FeCl3顯色等反應(yīng)外，較特殊的有幾乎不溶水、酸水，難溶于MeOH等，因?yàn)槭瞧咸烟侨┧岬能?，所以很難被酸水解?？杀稽S芩酶催化水解，生成的苷元黃芩素分子中具有鄰三酚羥基，易被氧化轉(zhuǎn)為醌類(lèi)衍生物而顯綠色，這是保存或炮制不當(dāng)?shù)狞S芩能夠變綠色的原因，黃芩變綠后，有效成分受到破壞，質(zhì)量隨之降低。黃芩苷的鈉鹽、鉀鹽易溶水。[見(jiàn)圖]

[黃芩中的某些黃酮類(lèi)化合物][黃芩苷的提取流程]★★★

黃芩苷雖然幾乎不溶水，但在植物體內(nèi)是以鹽的形式存在，可溶水，所以黃芩藥材粗粉加水煮可把黃芩苷（以黃芩苷鹽的形式）提取出來(lái)，當(dāng)向溶液中加HCL調(diào)pH1～2時(shí)，黃芩苷鹽解離，生成的黃芩苷幾乎不溶于酸水，而析出沉淀。再將此沉淀懸浮于水中，滴加40％NaOH，黃芩苷又成鈉鹽，而溶解。此時(shí)應(yīng)注意NaOH不可過(guò)量，否則，再加入等量乙醇時(shí)會(huì)呈現(xiàn)膠凍狀，不易過(guò)濾。繼續(xù)往稀醇溶液中加HCl調(diào)pH1-2，黃芩苷納鹽又被解離，難溶于稀醇而析出沉淀，此沉淀經(jīng)水、50％乙醇、95％乙