DNA重組技術(shù)的基本工具

專題一基因工程授課人：楊名星授課時間：2010年2月22日1專題一基因工程尼古丁——人類健康的殺手。我們能否利用它并為人類造福呢？醫(yī)用蛋白：可以利用改造的煙草生產(chǎn)。煙草——人類健康的保護神！2又叫ＤＮＡ重組技術(shù)。按照人們的愿望，進行嚴格的設(shè)計，通過體外ＤＮＡ重組和轉(zhuǎn)移等技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。在基因工程誕生的道路上，出現(xiàn)那些理論基礎(chǔ)和技術(shù)呢？基因工程？基因工程如何發(fā)展起來的？生物化學(xué)分子生物學(xué)微生物學(xué)基因工程催生31、DNA是遺傳物質(zhì)的證明。（艾弗里）科技探索之路一、理論基礎(chǔ)的突破4梅塞爾松、斯塔爾沃森、克里克2、DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)和中心法則的確立中心法則科技探索之路53、遺傳密碼的破譯遺傳密碼表科技探索之路6１、基因轉(zhuǎn)移載體的發(fā)現(xiàn)質(zhì)粒２、工具酶的發(fā)明限制性內(nèi)切酶二、技術(shù)發(fā)明科技探索之路7３、DNA合成和測序技術(shù)的發(fā)明DNA合成儀４、DNA體外重組的實驗伯格科技探索之路8６、第一例轉(zhuǎn)基因動物問世７、PCR技術(shù)的發(fā)明科技探索之路５、重組DNA表達實驗的成功91.1DNA重組技術(shù)的基本工具10一、教學(xué)目標1.簡述DNA重組技術(shù)所需三種基本工具的作用。2.認同基因工程的誕生和發(fā)展離不開理論研究和技術(shù)創(chuàng)新。二、教學(xué)重點和難點1.教學(xué)重點DNA重組技術(shù)所需的三種基本工具的作用。2.教學(xué)難點基因工程載體需要具備的條件。11抗蟲棉抗蟲棉的培育就用到DNA重組技術(shù)。要將抗病基因?qū)朊藁毎?，就需要對含有抗病基因的DNA分子進行切割、改造、修飾和拼接。12準確切割DNA的“手術(shù)刀”。將DNA片段再連接起來的“縫合針”。將體外重組好的DNA導(dǎo)入受體細胞的“運輸工具”。限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶分子運輸車要實現(xiàn)這一過程需要三種工具：13磷酸二酯鍵限制酶識別DNA特定的序列,使DNA分子鏈的固定部位分開。.１、準確切割DNA的“手術(shù)刀——限制性核酸內(nèi)切酶14限制酶：如何識別特定序列152、將DNA片段再連接起來的“縫合針”

——DNA連接酶DNA連接酶—能夠?qū)蓷lDNA連接起來的酶分類：E·coliDNA連接酶：連接黏性末端。T4連接酶：連接黏性末端和平末端。163、基因進入受體細胞的載體——“分子運輸車”“分子運輸車”——質(zhì)粒質(zhì)粒：裸露、結(jié)構(gòu)簡單、獨立于細菌染色體之外，具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。質(zhì)粒的優(yōu)點？171、其分子上至少有一個至多個限制酶切割位點，供外源DNA片段插入其中。2、攜帶外源DNA片段的質(zhì)粒進入受體細胞后，停留在細胞中進行自我復(fù)制，或整合到染色體DNA上，隨染色體DNA進行同步復(fù)制。3，質(zhì)粒DNA分子上有特殊的遺傳標記基因，如抗四環(huán)素、氨芐青霉素等標記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。質(zhì)粒的優(yōu)點：18DNA重組技術(shù)的三件工具：限制性內(nèi)切酶、DNA連接酶、質(zhì)粒?？偨Y(jié)質(zhì)粒目的基因限制性內(nèi)切酶連接酶重組質(zhì)粒19教學(xué)反思：1.設(shè)置問題情境，引導(dǎo)學(xué)生在思索中學(xué)