人教版教學(xué)課件單克隆抗體的制備

請同學(xué)們在課本P32頁上找出：1.細(xì)胞融合的概念2.誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的方法3.意義并用筆畫出來2.2.2動物細(xì)胞融合與單克隆抗體12.動物細(xì)胞融合過程：

誘導(dǎo)

細(xì)胞膜穿通細(xì)胞膜融合細(xì)胞核融合，形成單核雜種細(xì)胞2動物細(xì)胞融合雜種細(xì)胞愈傷組織雜種植株植物細(xì)胞A植物細(xì)胞B原生質(zhì)體A原生質(zhì)體B植物體細(xì)胞雜交去壁原生質(zhì)體融合植物組織培養(yǎng)物理法化學(xué)法生物法：滅活的病毒動物細(xì)胞A動物細(xì)胞B雜種細(xì)胞常用方法34、原理膜的流動性5、最有價(jià)值的應(yīng)用制備單克隆抗體3、過程不同DNA的兩個(gè)細(xì)胞滅活的病毒PEG雜交細(xì)胞細(xì)胞融合完成的標(biāo)志:細(xì)胞核融合成一個(gè)核4主要用于制備單克隆抗體獲得雜種植株用途物理、化學(xué)方法（同左）滅活的病毒物理（離心、振蕩、電激）化學(xué)（聚乙二醇）誘導(dǎo)方法使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合細(xì)胞融合的方法膜的流動性膜的流動性、植物細(xì)胞全能性原理動物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交比較項(xiàng)目４、植物、動物細(xì)胞融合的比較5

1.能使動物細(xì)胞融合的特有的誘導(dǎo)方法是A．離心B．滅活的病毒C．電刺激D．振動B6

2.動物細(xì)胞融合的目的中最重要的是A．克服遠(yuǎn)源雜交不親和B．制備單克隆抗體C．培育新物種D．生產(chǎn)雜種細(xì)胞B7原始的方法獲得抗體，特異性差，純度低。想獲得單一抗體，必須用單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖，通過克隆形成細(xì)胞群。問題：體外培養(yǎng)的條件下，一個(gè)B淋巴細(xì)胞是不可能無限增值的，如何使單個(gè)淋巴細(xì)胞增殖呢？單克隆抗體的制備8設(shè)計(jì)方案：一個(gè)B淋巴細(xì)胞－－只分泌一種特異性抗體小鼠骨髓瘤細(xì)胞－－能無限增殖雜種細(xì)胞91、單克隆抗體制備過程

注射抗原效應(yīng)B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)篩選，繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔單克隆抗體誘導(dǎo)其融合的方法有哪些？10（1）為什么用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合？思考：

因?yàn)锽淋巴細(xì)胞具有分泌特異性抗體的能力，而骨髓瘤細(xì)胞具有在體外培養(yǎng)條件下大量增殖的本領(lǐng)，所以由某種B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合產(chǎn)生的雜交瘤細(xì)胞，能夠在體外大量繁殖，并且產(chǎn)生特定的單克隆抗體。11（2）單克隆抗體制備過程中應(yīng)用哪些細(xì)胞工程技術(shù)手段？動物細(xì)胞融合技術(shù)動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)12？

？抗原效應(yīng)B細(xì)胞篩選

篩選

AA型、BB型A型B型AB型雜交瘤細(xì)胞能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞（3）制備過程為何要經(jīng)過兩次篩選？13比較項(xiàng)目第一次篩選第二次篩選原理在選擇性培養(yǎng)基中添加某種藥物，特異性殺死骨髓瘤細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞自身融合的細(xì)胞抗原—抗體的特異性結(jié)合目標(biāo)雜交瘤細(xì)胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞14【堂堂清】1.單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是________________________________特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備2.單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高的原因是_________________________________每一種B淋巴細(xì)胞只能分泌一種特異性抗體3.產(chǎn)生抗體的細(xì)胞是_______________產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞是__________效應(yīng)B細(xì)胞（漿細(xì)胞）雜交瘤細(xì)胞154.雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn):_______________________________既能無限增殖，又能分泌特異性抗體5.首次篩選是為了獲得_____________第二次篩選時(shí)為了獲得_______________________________雜交瘤細(xì)胞既能無限增殖，又能分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞16第一步：從一只小鼠體內(nèi)提取T淋巴細(xì)胞，然后與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合。第二步：再用普通培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，在該培養(yǎng)基上，未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會死去。第三步：對上述經(jīng)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞直接在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)，這樣從細(xì)胞培養(yǎng)液中就可以提出破傷風(fēng)桿菌單克隆抗體。實(shí)驗(yàn)評價(jià)1、已注入過滅活破傷風(fēng)桿菌的小鼠2、B淋巴細(xì)胞3、選擇培養(yǎng)基4、必須經(jīng)過專一抗體陽性檢驗(yàn)下面是某同學(xué)根據(jù)單克隆抗體技術(shù)的方法，設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌抗體的實(shí)驗(yàn)方案。指出不足之處。17單克隆抗體在診斷的應(yīng)用上，具有準(zhǔn)確、高效、簡易、快速的優(yōu)點(diǎn)1、作為診斷試劑2、用于治療疾病和運(yùn)載藥物療效高、毒副作用小的新型藥物－－“生物導(dǎo)彈”應(yīng)用：<<生物導(dǎo)彈184、科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓疤細(xì)胞融合的是（）A.經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞B.沒經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞

C.經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞D.沒經(jīng)過免疫的Ｂ淋巴細(xì)胞A195、單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。在這種培養(yǎng)基上不能存活、增殖的細(xì)胞是①B淋巴細(xì)胞②小鼠骨髓瘤細(xì)胞③B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞④小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞⑤雜交瘤細(xì)胞A、①②③④B、①③⑤C、①③D、②④

A206下圖是單克隆抗體制備過程示意圖，據(jù)圖回答：（1）圖中A過程是從小鼠的脾臟中取得__________細(xì)胞，該細(xì)胞能夠產(chǎn)生___________。從小鼠體內(nèi)提取分離該細(xì)胞之前，應(yīng)給小鼠注射_____________類物質(zhì)。（2）B過程是一個(gè)____________過程，該過程的進(jìn)行需要滅活的______或_____________的誘導(dǎo)。效應(yīng)B抗體抗原細(xì)胞融合

病毒

聚乙二醇

21

7．右圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌抗體的實(shí)驗(yàn)方案。據(jù)圖回答：

（1）該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎？

。原因是

。

（2）圖中②為

過程，常用

作為誘導(dǎo)劑。該細(xì)胞繼承了

，因此不僅能分泌

，還有

本領(lǐng)。

（3）該方案的目的是

。

不能

沒有將抗原注入小鼠體內(nèi)，無法獲得產(chǎn)生單一抗體的B淋巴細(xì)胞.細(xì)胞融合

滅活病毒

雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì)

特異性抗體

在體外培養(yǎng)條件下大量增殖

制備單克隆抗體

227、下圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖。（1）_______________技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)。（2）根據(jù)培養(yǎng)基的用途分類，圖中HAT培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。（3）單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比，最大的優(yōu)越性是________________。（4）動物細(xì)胞融合除了采用植物細(xì)胞原生質(zhì)體融合常用的誘導(dǎo)劑外，還可以采用________________。（5）選出的雜交瘤細(xì)胞既具備骨髓瘤細(xì)胞的_______________特點(diǎn)，又具備淋巴細(xì)胞的